Introducción
El licopeno es un pigmento natural de tomate y un fuerte antioxidante, que la actividad tuvo un efecto sinérgico con la vitamina E. El beta-caroteno es una de las provitaminas Carote-noid A. La ambas sustancias tienen los efectos contra el cáncer, que han sido aprobados en muchos estudios realizados por investigadores y científicos. Este artículo se centra principalmente en la medición de licopeno y beta-caroteno mediante cromatografía líquida de alta resolución.
Preparación de la muestra
Materiales
N-hexano, metanol, etanol, tolueno butilado hidroxilo, acetonitrilo y tetrahidrofurano, el grado de pureza por HPLC, BDH, licopeno estándar y beta-caroteno estándar.
Aparatos
aparato de HPLC está equipado con un detector ultravioleta, Novopack C18 y la impresora.
Las soluciones estándar de preparación
Prepare varios niveles de licopeno y beta-cartene en la fase móvil.
Procedimientos
Añadir 1000μL de etanol a 500μL de muestra de suero y se mezclan durante 20 segundos con batidora eléctrica con el fin de precipitar las proteínas. Y a continuación, añadir 1000μL de hexano a ella, mezclar durante 60 segundos. Transferir la fase superior a un vial de inyección. Realizar la etapa de extracción de nuevo. Entonces, evaportate la fase orgánica de hecane a 40ºC bajo flujo de gas de nitrógeno y añadir el precipitante obtenida a la fase móvil, que contiene éter dietílico con el fin de cambiar su volumen de 500μL. Y luego inyectar esta muestra en la columna
Prueba de Calidad
Rango de linealidad:. Curva estándar se prepararon para el licopeno con concentraciones de 6, 15, 30, 60, 120 y 150 microgramos por decilitro y de beta-caroteno deben ser con la concentración de 10, 25, 50, 100, 200 y 250 microgramos por decilitro
límite de detección:. la secuencial atenuar la concentración más baja, que se utiliza para la preparación de curva estándar, se puede determinar el límite de detección
ciento de recuperación:. añadir 20μL de licopeno estándar y beta-caroteno a 500μL de muestra de suero. Y las dos sustancias deben estar preparados similar a la muestra normal. Entonces, la inyección de 20μL de ella en la columna y calcular el porcentaje de recuperación
Precisión:. La repetición de la prueba de una muestra de suero unidad de mezclado en un día y secuenciales días se puede utilizar para determinar la repetibilidad de la prueba, intra e inter variaciones -assay.
Estos son algunos datos y procedimientos básica pero útil para detectar el licopeno y beta-caroteno de forma simultánea mediante el uso de los servicios de cromatografía líquida de alta de alta calidad. Y estos servicios se pueden utilizar en muchos aspectos.