Extracto
Antecedentes
El fosfoinosítido 3-quinasa (PI3K) /proteína quinasa B (PKB, AKT) /diana de la rapamicina en mamíferos (mTOR) vía de señalización juega un papel crítico en la angiogénesis y el crecimiento celular, la proliferación, el metabolismo, la migración, la diferenciación y apoptosis. La diversidad genética de los factores clave de esta vía puede influir en la función de proteínas y la transducción de señales, lo que contribuye a la iniciación y progresión de la enfermedad. Los estudios sugieren que
mTOR
rs1064261 y
AKT
polimorfismos rs1130233 se asocian con el riesgo y /o pronóstico de múltiples tipos de cáncer. Sin embargo, esta relación con el cáncer gástrico (GC) sigue siendo poco clara. El objetivo de este estudio fue investigar el papel de
mTOR Opiniones y
AKT
polimorfismos en el riesgo y pronóstico de la GC.
Métodos
El Sequenom MassARRAY plataforma se utilizó para determinar el genotipo de 1842 individuos de
mTOR
rs1064261 T → C y
AKT
rs1130233 G → a polimorfismos. Se utilizó ELISA para detectar
Helicobacter pylori anticuerpos en el suero
. Se utilizó el análisis inmunohistoquímico para detectar las proteínas totales y fosforilados y Akt mTOR.
Resultados
El
mTOR
rs1064261 (TC + CC) genotipo y el
AKT
rs1130233 (GA + AA) genotipo se asocia con un mayor riesgo de CG en los hombres (
P = 0,049
,
P = 0,030
). En
H
.
pylori
individuos negativos al, el
AKT
ha rs1130233 y GA (GA AA +) genotipos estaban relacionados con un mayor riesgo de gastritis atrófica (AG;
P = 0,012
,
P = 0,024
). Cabe destacar que el
AKT
rs1130233 (GA + AA) genotipo demostrado interacciones significativas con
H
.
Hoteles en pylori progresión de la enfermedad de los controles sanos (CON) para AG (
P = 0,013
) y de AG a GC (
P = 0,049
). Además, para las personas con el
AKT variante rs1130233
, aquellos en el grupo H. pylori positivo tenían niveles más altos de AKT fosforilada (p-AKT) expresión. El
AKT
ha se encontró el genotipo rs1130233 estar asociado con los parámetros clínico-patológicos incluyendo la metástasis de los ganglios linfáticos y el consumo de alcohol (
P Hotel & lt; 0,05).
Conclusión
mTOR
rs1064261and
AKT
polimorfismos rs1130233 se asociaron con mayor riesgo de CG en varones y un aumento del riesgo AG en
H
.
pylori
individuos negativos al. Una interacción significativa entre el
AKT
genotipo rs1130233 y
H
.
pylori en
CON → progresión de la enfermedad AG → GC. La expresión de la proteína p-AKT
AKT
rs1130233 genotipo influyeron en
H
.
pylori
individuos infectados
Visto:. Piao Y, Li Y, Xu Q, Liu J-w, Xing C-z, Xie X-D, et al. (2015) Asociación de
mTOR
y
AKT
polimorfismos genéticos con la susceptibilidad y la supervivencia del cáncer gástrico. PLoS ONE 10 (8): e0136447. doi: 10.1371 /journal.pone.0136447
Editor: Masaru Katoh, Centro Nacional del Cáncer, JAPÓN
Recibido: March 2, 2015; Aceptado: 3 Agosto 2015; Publicado: 28 Agosto 2015
Derechos de Autor © 2015 Piao et al. Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos de la licencia Creative Commons Attribution License, que permite el uso ilimitado, distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que el autor original y la fuente se acreditan
Disponibilidad de datos: Todos los datos relevantes están dentro del apoyo de sus archivos de información en papel y
Financiación:. Este trabajo fue apoyado por becas del Programa de Investigación básica clave Nacional de China (. 973 Programa Ref no 2010CB529304), la Fundación Nacional de Ciencias Naturales de China ( Ref No.31200968)
Conflicto de intereses:. los autores han declarado que no existen intereses en competencia
Introducción
el cáncer gástrico (CG) es uno de los cánceres más comunes. en todo el mundo y una causa principal de muerte relacionada con el cáncer [1]. La iniciación y el desarrollo de GC es un proceso de múltiples pasos influenciada por factores genéticos y ambientales. Los estudios han indicado que los factores ambientales exógenos incluyendo la infección por
Helicobacter pylori gratis (HP), hábitos de dieta, fumar, beber alcohol, y los factores económicos contribuyen a la carcinogénesis gástrica [2]. En condiciones ambientales similares, las personas con diferentes antecedentes genéticos sufren diferentes riesgos de cáncer con diversos resultados clínicos. Hasta ahora, la interacción de factores genéticos y ambientales con la carcinogénesis gástrica ha sido en gran parte desconocida.
Los polimorfismos son una clase de factores genéticos que participan en la carcinogénesis gástrica y determinar las variaciones interindividuales en riesgo de CG. Los polimorfismos genéticos pueden debilitar los mecanismos de protección intrínsecos y aumentar el daño causado por agentes carcinógenos medioambientales. Los portadores de genotipos susceptibles corren un mayor riesgo de desarrollar cáncer que aquellos con genotipos resistentes en condiciones similares. Por lo tanto, los factores genéticos juegan un papel crucial en el riesgo de CG y el resultado clínico.
El fosfoinosítido 3-quinasa (PI3K) /proteína quinasa B (PKB, AKT) /diana de la rapamicina en mamíferos (mTOR) y la vía regula diversos celular funciones, incluyendo el crecimiento, la proliferación, la migración, y la apoptosis. Tapia et al. informó de que la vía PI3K /Akt /mTOR se activa en GC y que la mayoría de las proteínas (formas fosforiladas y no fosforiladas) estudiaron hasta ahora en esta vía se sobreexpresa en los tejidos tumorales [3]. MTOR es un miembro clave de la vía PI3K /Akt /mTOR y la señalización metabólica molécula de núcleo [4, 5]. polimorfismos de nucleótido único (SNPs) pueden afectar la expresión del mTOR y la actividad transcripcional, alterando de este modo la función de proteínas. Hasta el momento, se han estudiado un total de 14 polimorfismos en este gen, de los cuales tres SNPs (rs2295080, rs1883965 y rs2536) han sido más ampliamente reportado. El polimorfismo rs2295080 en la región promotora se divulga para reducir el riesgo de carcinoma de células renales [6], GC [7], y el cáncer de próstata [8] por la regulación negativa de la expresión de proteínas endógenas. El polimorfismo rs1883965 se ha asociado con un mayor riesgo de GC [9] y el cáncer escamoso de esófago [10]. Por otra parte, el polimorfismo rs2536 está relacionado con un aumento significativo del riesgo de cáncer de próstata [8]. Además, el
mTOR
polimorfismo rs11121704 se asocia con peores parámetros clínicos (muerte, metástasis y resistencia a la quimioterapia) [11]. Hay 45 exones en el
MTOR
gen, y el polimorfismo rs1064261 se encuentra en el exón 18. La variación T → C se encuentra en el límite del exón 18 y el intrón 19, pero su relación con la enfermedad todavía no está claro .
el
AKT
gen es esencial para la supervivencia celular y codifica un importante efector aguas abajo de la vía PI3K /
AKT
/
mTOR
vía que regula clave funciones celulares incluyendo el metabolismo de la glucosa y la síntesis de proteínas.
AKT
, alternativamente conocido como
AKT1
, tiene cinco polimorfismos ampliamente estudiados (rs3803300, rs1130214, rs2494732, rs2498804, rs1130233 y); los cuatro primeros se han relacionado con el riesgo o pronóstico del carcinoma nasofaríngeo, el carcinoma oral de células escamosas y cáncer de pulmón de células no pequeñas. El polimorfismo rs1130233 se encuentra en el exón 8 y el G → Una variación se encuentra en el límite del exón 8 y el intrón 7. El
AKT
1 AA haplotipo tanto para rs1130233 y rs2494732 se informa para conferir un riesgo elevado de carcinoma nasofaríngeo [12]; el haplotipo que contiene alelos variantes de rs1130214 y rs3803300 polimorfismos aumenta significativamente la susceptibilidad al carcinoma oral de células escamosas [13]. Se encontró que los portadores del genotipo (GT + GG) de
AKT
1 rs2498804 o el genotipo CT /TT de
AKT
1 rs2494732 tener un mayor riesgo de metástasis cerebral de células no pequeñas cáncer de pulmón [14].
AKT
1 rs3803300, rs1130214, rs2494732 y tienen efectos significativos sobre la supervivencia en pacientes no pequeñas de cáncer de pulmón de células: los pacientes con el alelo G rs3803300 y rs1130214 alelo G tenían una supervivencia global (SG) y la supervivencia libre de enfermedad más corto (DFS) veces [15].
a pesar de las variaciones en
mTOR
y
AKT
desempeñar un papel importante en la carcinogénesis gástrica, ningún estudio ha investigado la relación de
AKT
polimorfismo con el riesgo de CG y el pronóstico. Además, se desconoce la relación mecánica entre el
mTOR
rs1064261 y tanto la susceptibilidad al cáncer y la supervivencia. Para dilucidar si
mTOR
y
AKT
polimorfismos pueden servir de riesgo y /o marcadores de pronóstico para GC, investigamos
mTOR
rs1064261 y
AKT
rs1130233 polimorfismos en relación con el riesgo de CG y sus interacciones con
H
.
pylori
en un estudio de casos y controles de 1842 sujetos. En 205 individuos con datos suficientes, se analizaron parámetros clínico para explorar la asociación de estos dos polimorfismos con el pronóstico GC y así identificar nuevos biomarcadores de riesgo de CG y el pronóstico.
Materiales y Métodos
Diseño del estudio y la población de estudio
el diseño de este estudio fue aprobado por el Comité de Ética Humanos de la primer hospital Afiliado de la Universidad médica de china (Shenyang, china). Cada participante proporcionado consentimiento informado por escrito durante una investigación epidemiológica. El diseño del estudio incluía dos partes (el polimorfismo y el nivel de análisis de proteínas) y se investigaron las asociaciones entre los polimorfismos y el riesgo de la enfermedad y el pronóstico. En el análisis de riesgo de CG, los pacientes eran GC desde el Primer Hospital Afiliado de la Universidad Médica de China, que obtuvo la resección operación de la cirugía o el diagnóstico gastroscopia /tratamiento entre 2004 y 2013. Los pacientes y los controles AG fueron reclutados de un programa de control sanitario de Zhuanghe, Liaoning provincia, entre 2002 y 2013. Todos los diagnósticos se basaron en gastroscopia y los exámenes histopatológicos
Además, los casos GC se clasifican en tipo intestinal y el tipo difuso basado en la clasificación de Lauren [16, 17].; clasificación y puesta en escena AG se basaron en el nuevo sistema de Sydney [18, 19]. participantes del grupo control tuvieron resultados normales del estómago o gastritis solamente. La información sobre el hábito de fumar, consumo de alcohol y los antecedentes familiares fueron adquiridos por encuesta "cara a cara". Los fumadores y las bebidas alcohólicas se definieron de la siguiente manera: si uno fumaban más de una vez por día y si esto duraron más de 1 año, a continuación, este individuo se define como los fumadores, y esta situación incluyen los fumadores actuales y ex fumadores que habían dejado de fumar durante más de 1 año. Las personas que no cumplían esta situación se definieron como nunca habían fumado. Si uno consume una botella de cerveza o una quinta libra de licor al día, y si esta situación se prolongó más de 1 año, entonces esta persona se consideró bebedores. Las personas que no se ajustan a esta norma se definieron como los no bebedores. Se obtuvo sangre venosa en ayunas de cada participante y se almacena a -20 ° C como suero y las células coaguladas.
A fin de evaluar la relación entre polimorfismos con los parámetros clínico-patológicos y supervivencia de GC, se realizó un análisis de pronóstico de los pacientes con GC para quien suficientes datos clínicos estaba disponible. los datos histológicos fueron evaluados de acuerdo a criterios de la Organización de la Salud y tumor-nódulo-metástasis (TNM) de especímenes patológicos posoperatorios se hizo de acuerdo con la 7ª edición de la de la Internacional Union Against Cancer (UICC) /Comité Conjunto sobre el Cáncer (AJCC) ( 2010) criterios. Los pacientes con metástasis a distancia antes de la cirugía, los que recibieron radioterapia o quimioterapia antes de la cirugía, y los que tienen suficiente información para el análisis de pronóstico fueron excluidos. Se realizó un análisis de sensibilidad para probar si los pacientes excluidos tuvieron efecto en el análisis de supervivencia. El seguimiento de todos los pacientes se completó en mayo de 2014.
genotipado de SNP
ADN genómico fue extraído de muestras de sangre utilizando el método de fenol-cloroformo [20] y se diluyó a la concentración de trabajo de 50 ng /l para
mTOR
rs1064261 T → C y
AKT
rs1130233 G → a genotipado. Las muestras se colocaron al azar en placas de 384 pocillos y se analizaron en una forma ciega al estado de la enfermedad. La genotipificación se realizó a través de la plataforma de Sequenom MassARRAY (Sequenom, San Diego, California, EE.UU.) según las instrucciones del fabricante. Para el control de calidad, el 5% de las muestras se sometieron repetidas veces genotipado; los resultados fueron 100% compatible.
H. pylori examen de serología
análisis de serología para detectar
H
.
pylori
la infección se realizó mediante ELISA (
H
.
pylori
-IgG kit ELISA, BIOHIT, Helsinki, Finlandia), como se describe anteriormente [21]. Una lectura de & gt; 34 unidades inmunes enzima fue considerado para indicar
H
.
pylori
positividad.
La detección de proteínas AKT mTOR y en el tejido
se utilizó
El análisis inmunohistoquímico para determinar la expresión de mTOR total y fosforilada y AKT (p-mTOR yp -AKT) proteínas en muestras de tejido 65, GC incluidos en parafina fijado en formol. Las muestras de tejido se cortaron en secciones de 4 micras de grosor y se montaron en portaobjetos de vidrio de poli-l-lisina. Después de la recuperación de antígeno ácido cítrico, el anticuerpo primario se incubó con las secciones de tejido a 4 ° C durante la noche (concentración de dilución: MTOR y p-MTOR 1: 100, AKT 1: 300, y p-AKT 01:50, todos se adquirieron de Cell Signaling Tecnología). Después de tres lavados de 5 min en solución salina tampón de fosfato, las secciones de tejido se incubaron con anticuerpo secundario biotinilado (Maixin, Fujian, China) y peroxidasa de estreptavidina-biotina durante 10 minutos cada uno a 37 ° C. Para los controles negativos, el anticuerpo primario fue reemplazado con tampón PBS.
El análisis estadístico
El análisis estadístico se realizó con el programa SPSS (versión 18.0) software estadístico (SPSS, Chicago, IL, EE.UU.). Hardy-Weinberg (HWE) se evaluó por primera vez en los controles sanos. Ajustada odds ratios y los intervalos de confianza del 95% (IC) para la relación entre ambos polimorfismos y el riesgo de la enfermedad se calcularon mediante regresión logística multivariable, con ajuste por sexo, edad y
H
.
pylori
estado de infección. . En un análisis estratificado, cuando se estratificó según la edad, el sexo y
H
pylori
estado de infección se ajustaron; . Cuando se estratificó por sexo, la edad y
H
pylori
estado de infección se ajustaron; y cuando se estratificó por
H
.
pylori
estado de infección, el sexo y la edad también han sido corregidas. Se realizó la prueba de razón de verosimilitud para evaluar los efectos de la interacción del genotipo y
H
.
pylori
sobre el riesgo de la enfermedad comparando el modelo que implica sólo los principales efectos del sexo, la edad, el
H
.
pylori
estado, y el genotipo con el modelo completo (que contiene también el término de interacción del genotipo con el
H
.
pylori
de estado). χ de Pearson se utilizó
2 test para evaluar la relación de los diferentes genotipos con los parámetros clínico de GC. método exacto de Fisher se utilizó cuando la frecuencia esperada era menos de cinco. El método de Kaplan-Meier se utiliza para visualizar OS por grupo de genotipo. Se utilizó la prueba de log-rank para investigar las diferencias en las distribuciones de supervivencia. Se realizaron modelos de riesgos proporcionales de Cox univariable y multivariable para calcular el crudo o ratios de riesgo ajustada y IC del 95% para cada genotipo para estimar el efecto sobre la supervivencia con o sin ajuste por factores de confusión. Se utilizó un análisis de regresión logística para explorar el efecto de los polimorfismos en la expresión de proteínas ajustados por sexo, edad, y
H
.
Estado pylori
. Dos colas
Los valores P de
. & Lt; 0,05 se consideraron estadísticamente significativos
Resultados
características basales de los pacientes
Las características demográficas y clínicas de la 1842 las personas que participan en el análisis de riesgos que comprende 483 pacientes, 686 pacientes GC AG y 673 controles sanos se muestran en la Tabla 1. los dos SNPs estaban presentes en HWE; la distribución de los genotipos se muestra en la Tabla 2. El resultado del análisis de sensibilidad se muestra en la Tabla S1, que verificó los pacientes excluidos no tuvieron ningún efecto para el análisis de supervivencia. Las características demográficas y clínicas de los 205 pacientes con cáncer gástrico que participan en el análisis de supervivencia, como la edad, el sexo, la clasificación Borrmann, la clasificación de Lauren, el estadio TNM, el patrón de crecimiento, la profundidad de la invasión, metástasis en los ganglios linfáticos, fumar, beber, antecedentes familiares, y
H
.
pylori
la infección se muestran en la Tabla 3.
Asociación de SNPs con GC y AG riesgo
multivariable de regresión logística se utilizó para investigar la asociación de
mTOR
rs1064261and
AKT
rs1130233 con GC y el riesgo AG. No hubo una diferencia significativa de
mTOR
rs1064261 y
AKT
rs1130233 en el riesgo de CON → AG, AG → GC, CON → GC, o CON + AG → progresión GC (Tabla 2) .
En el análisis de la estratificación de los varones (Tabla 2), portadores del genotipo del TC
mTOR
rs1064261 tenían un 1,55 veces mayor riesgo de CG en comparación con AG (
P
= 0,049; IC del 95%: 1,00 a 2,38); el alelo A de
AKT
rs1130233 conferirse 1,32 veces, 1,29 veces y 1,30 veces los aumentos de AG → GC, GC CON → y (CON + AG) → progresión GC, respectivamente, durante el G alelo (
P = 0,013
, IC 95% 1,06 a 1,64;
P = 0,038
, IC 95% 1,01-1,64; y
P = 0,008
, IC del 95% 1,07-1,58, S2 Tabla). En el
H
.
pylori
grupo -negativo, el genotipo GA
AKT
ha rs1130233 se asoció con un 1,69 veces mayor riesgo de AG en comparación con los CON (
P = 0,012
, IC del 95% 1,12 a 2,54, Tabla 2). Además, no se encontró asociación significativa entre estos dos polimorfismos y de tipo intestinal o de tipo difuso GC en los análisis generales y estratificadas (S3 y S4 tablas).
A continuación, realizó un análisis de la interacción de
mTOR
rs1064261 y
AKT
rs1130233 con
H
.
pylori
. Los resultados indicaron que el
AKT
rs1130233 (GA + AA) genotipo tuvo una interacción significativa con
H
.
pylori en
CON → AG y la progresión AG → GC (
P = 0,013
y
P = 0,049
; Tabla 4). Sin embargo, ninguna interacción significativa de
mTOR
rs1064261 con
AKT
rs1130233 se observó para Con AG → → progresión de GC en los análisis generales y estratificadas (S5 Tabla). Además, no hubo interacción significativa entre estos dos polimorfismos y
H
.
pylori en
CON → → AG progresión GC (Tabla 4).
Asociaciones de SNPs con parámetros clínico de los pacientes GC
Análisis de la relación de
mTOR
rs1064261 y
AKT
rs1130233 con parámetros clínico en pacientes con cáncer gástrico sugirieron que el
AKT
rs1130233 GA y AA + (GA) genotipos variantes son más frecuentes en pacientes con cáncer gástrico sin linfático metástasis en los ganglios que en aquellos con metástasis en los ganglios linfáticos (GA 89,1% vs. 71,1%,
P = 0,012
; GA + AA 92,2% vs. 81,1%,
P = 0,030
). El GA, AA, y (GA + AA) genotipos fueron más frecuentes en los bebedores que en los no bebedores (GA 61,0% vs. 95,8%,
P = 0,047
; AA 63,6% frente a 88,9%,
P = 0,047
; GA + AA 76,8% vs. 96,9%,
P = 0,038
; Tabla 5). Sin embargo, no se observó una asociación significativa entre el
mTOR
variantes rs1064261 y parámetros clínico en pacientes con cáncer gástrico.
No se encontró asociación entre los SNPs y la supervivencia del paciente GC
Univariable y multivariable se llevaron a cabo de riesgos proporcionales de Cox modelos para evaluar el efecto de
mTOR
rs1064261 y
AKT polimorfismos rs1130233
sobre la supervivencia GC (Tabla 6). Dado que la clasificación de Lauren, el estadio TNM, el patrón de crecimiento, profundidad de invasión y metástasis de ganglios linfáticos se asociaron significativamente con la supervivencia (
P Hotel & lt; 0,05, que se muestra en la Tabla 3), que eran considerados como covariables ajustados en la proporcionales de Cox regresión de riesgos modelo. Los resultados mostraron una asociación significativa entre los dos SNPs y el pronóstico GC (Tabla 6). Del mismo modo, un análisis estratificado no mostró ninguna asociación significativa entre el genotipo SNP y el pronóstico GC (Tabla S6).
SNP genotipo se correlaciona con la expresión de las proteínas totales y fosforilados
La expresión del total y mTOR y AKT proteínas fosforiladas se analizó en los tejidos de los diferentes grupos de participantes (Fig 1). En general, no hubo una asociación significativa entre los
mTOR
rs1064261 o
AKT
rs1130233 polimorfismo y proteínas totales o fosforilados y Akt mTOR. En el
H
.
pylori
subgrupo -positivo, la proporción de células p-AKT-positivas fue significativamente mayor en el grupo de genotipo variante que en el grupo de tipo salvaje (
P
= 0,045; Tabla 7).
A. la expresión de la proteína mTOR en la mucosa cáncer gástrico (100 ×); B. la expresión de la proteína p-mTOR en la mucosa gástrica (100 ×); C. la expresión de la proteína AKT en la mucosa cáncer gástrico (100 ×); D. la expresión de la proteína p-AKT en la mucosa gástrica (100 ×).
Discusión
En este estudio, se presenta por primera vez una asociación de la
mTOR
rs1064261 y
AKT polimorfismos rs1130233
con riesgo de CG y el pronóstico. En los hombres, el
mTOR
rs1064261 (TC + CC) genotipo y el alelo A de
AKT
rs1130233 se asociaron con un mayor riesgo de CG. En
H
.
pylori negativos al
varones, el
AKT
rs1130233 (GA + AA) genotipo se asoció con un mayor riesgo AG. Además, el
AKT
rs1130233 (GA + AA) genotipo mostraron una interacción significativa con
H
.
pylori infección en
CON → → AG progresión GC. El genotipo variante de
AKT
rs1130233 se asoció con una mayor expresión de la proteína p-AKT. El
polimorfismo rs1130233 AKT
también se asoció con metástasis en los ganglios linfáticos y el consumo de alcohol. Estos resultados proporcionan evidencia experimental para apoyar y AKT mTOR como potenciales biomarcadores de tipos específicos de GC y también proporcionar pistas sobre la interacción entre los
H
.
pylori Opiniones y mTOR /AKT señalización.
El
mTOR
gen se localiza en el cromosoma humano 1p36.2 y codifica la proteína de 289 kDa mTOR, que consta de 2549 aminoácidos . MTOR es un miembro de la familia quinasa de fosfatidilinositol (PIK) y tiene actividades /treonina quinasa de serina. Se encontró que la variante de genotipo
MTOR
gen (TC + CC) se asoció con un mayor riesgo GC en los hombres, lo que sugiere que está implicado en la carcinogénesis. MTOR existe principalmente en el citoplasma en condiciones normales y entra en el núcleo después de la activación de regular los objetivos de abajo eucariotas inicio factor de 4E (eIF-4E) proteína de unión 1 (4E-BP1) y ribosomas 40S pequeña subunidad de la proteína S6 quinasa (p70S6K) [22 -24]. Este último es un miembro esencial de la vía PI3K /AKT /mTOR y una molécula de señalización metabólica central. MTOR integra una variedad de señales celulares de factores de crecimiento y estado nutricional y la energía; Por lo tanto, tiene importantes funciones biológicas en la angiogénesis y el crecimiento celular, la proliferación, el metabolismo, la migración, la diferenciación y la apoptosis [25]. Su función está estrechamente ligada a la transformación de células normales a células cancerosas y con la proliferación de células cancerosas. Las variaciones genéticas en los genes de la vía de señalización mTOR (
PI3K
,
AKT
, y
PTEN
) puede promover la carcinogénesis [26-28].
son reportados mTOR
SNPs estar asociado con la susceptibilidad a GC [7, 9], carcinoma de células renales [6], cáncer de próstata [8], y el cáncer escamoso de esófago [10]. Estos SNP pueden afectar los niveles de expresión y la actividad transcripcional MTOR, alterando de este modo la función de la proteína. El alelo G de
mTOR
polimorfismo rs2295080 se asoció con un riesgo reducido de GC, posiblemente como resultado de la reducción de la actividad del promotor y de la expresión de ARNm [7]. Otro
mTOR
polimorfismo localizado en la región promotora, rs1883965 G → A, confiere el riesgo de CG [9] y el cáncer escamoso de esófago [10] aumentarlo. Nuestros hallazgos sugieren que la (TC + CC) genotipo se asocia con un mayor riesgo GC en los hombres, aunque no se observó efecto sobre la expresión de proteínas.
mTOR
puede promover la proliferación celular y algo características "oncogénicos". El genotipo variante podría tener aún más la actividad oncogénica. A medida que los hombres son más propensos a estar expuestos a múltiples factores de exposición al riesgo (tabaquismo, consumo de alcohol y los hábitos de vida no saludables), portadores del genotipo determinado pueden ser susceptibles a un mayor riesgo de CG.
AKT
, el v-
AKT
timoma murino homólogo de oncogén viral, mapas en el cromosoma humano 14q32.32 y codifica una proteína de 56 kDa, que consiste en 480 aminoácidos [15]. AKT es un efector importante de la señal vía PI3K /AKT /mTOR y la mutación genética o expresión de la proteína anormal puede alterar una variedad de procesos celulares incluyendo la migración, la proliferación, el crecimiento y la supervivencia. Además, la activación de AKT está implicado en la proliferación celular y la apoptosis, que se relacionan con la iniciación y progresión del cáncer [29].
son reportados AKT
SNPs estar asociado con la susceptibilidad a y /o el pronóstico de diversos tipos de cáncer incluyendo el carcinoma nasofaríngeo [12], carcinoma de células escamosas oral de [13, 30], cáncer de pulmón de células no pequeñas [14 , 15], adenocarcinoma pancreático ductal [31], y GC [32] a través de efectos sobre la expresión de la proteína y la actividad transcripcional. Wang et al. estudiado cuatro SNP rs1130233 incluidos en una población china [13], y se encontró que tres polimorfismos se asociaron con la susceptibilidad al carcinoma de células escamosas oral o DFS, pero sin ninguna relación significativa para rs1130233. Zhang et al. informaron que los haplotipos de AA
AKT
rs1130233 y rs2494732 confiere un aumento del riesgo carcinoma nasofaríngeo [12] y que algunos
AKT
haplotipos causar la expresión aumento de la proteína AKT [33, 34], lo que lleva a la alteración de celular migración y proliferación. Por lo tanto, el
AKT
rs1130233 alelo podría haber una mayor actividad proliferativa. En este estudio, encontramos que el
AKT
rs1130233 alelo A confirió un mayor riesgo de GC en los hombres. En general, los hombres tienen una mayor incidencia de GC y una tasa de mortalidad GC más alto que las mujeres adultas [35]. El alto nivel de exposición de los hombres a los factores ambientales de riesgo (fumar, beber y hábitos de vida no saludables) aumenta su susceptibilidad a cáncer gástrico [36]. A medida que el alelo A podría tener actividad proliferativa más fuerte, el efecto combinado de
AKT
polimorfismo y de género podrían explicar en parte el riesgo de CG alta observada asociada con el
AKT
rs1130233 polimorfismo en varones.
Además, se encontró que en el
H
.
pylori
subgrupo -negativo, el
AKT
rs1130233 (GA + AA) genotipo se asoció con un mayor riesgo AG. El
AKT
rs1130233 polimorfismo mostró una interacción significativa con
H
.
pylori infección en
CON → → AG progresión GC. Es ampliamente aceptado que
H
.
pylori
es una causa importante de GC.
H
.
pylori
factores virulentos pueden inducir la proliferación anormal de las células y la apoptosis a través de la regulación de las vías de señalización (incluyendo PI3K /AKT); este es un punto de acceso reciente investigación [37-39]. Tabassam et al. sugerido que la fosforilación de AKT inducida por el
H
.
pylori
factores de virulencia cagPAI y OipA regula las señales intracelulares responsables de una serie de funciones celulares implicados en la carcinogénesis gástrica. La promoción específica de AKT serina o treonina 473 308 fosforilación por cag PAI y OipA puede interrumpir las señales de proliferación y apoptosis aguas abajo. Una combinación de cag PAI y OipA es suficiente para activar la vía PI3K /AKT PDK1 y /ERK /señalización corriente abajo [39]. Nakayama et al. informaron que
H
.
pylori
factor de virulencia VacA induce la función de β-catenina mediante la activación de la vía PI3K /AKT y la inactivación de GSK33β [38], regulando así la proliferación celular, la diferenciación y la apoptosis. Estos datos sugieren que la interacción de
H
.
pylori
con AKT activado tiene una función biológica. Sin embargo, ninguno de los dos SNPs incluidos en este estudio ni
H
.
pylori
en el contexto de estos SNP mostraron una interacción significativa con GC. En general, estos datos ponen de relieve la importancia del papel de la
AKT
rs1130233 polimorfismo en la vía PI3K /Akt /mTOR. Además, en el
H
.
pylori
subgrupo -positivo, los que tienen el
AKT
genotipo variante rs1130233 había incremento en la expresión de p-AKT. A medida que este polimorfismo mostró una interacción con
H
.
pylori
, el efecto de este polimorfismo en la expresión de la proteína puede surgir solamente en presencia de
H
.
pylori
. Una mutación genética que conduce a la expresión anormal de AKT se informó de promover la migración celular y la proliferación [40, 41], lo que podría explicar por qué este polimorfismo aumenta el riesgo de AG. Futuros estudios son necesarios en gran escala para confirmar estos resultados.
También comparó la distribución de los genotipos de estos dos polimorfismos en grupos con diferentes parámetros clínico y se evaluó su relación con el pronóstico GC. Se encontró que el
AKT
rs1130233 GA, AA, y (GA + AA) genotipos fueron más frecuentes en los bebedores que en los no bebedores. Por lo tanto, suponemos que los bebedores con
AKT
rs1130233 GA, AA, y (GA + AA) genotipos son más susceptibles a la GC. Avan et al. [31] informó de que el
AKT
rs1130233 alelo A se asocia con una menor supervivencia de los pacientes con adenocarcinoma ductal pancreático, lo que podría atribuirse a la reducción de
AKT1
ARNm y la expresión de la proteína y la reducción de la eficiencia de la apoptosis [33 , 42]. El
AKT
rs1130233 alelo A es un genotipo de riesgo para el cáncer, posiblemente en asociación con el consumo de alcohol como el consumo de alcohol fue uno de los factores de riesgo crecientes de GC [43-46]. Sin embargo, ninguna asociación significativa de estos dos SNPs con la supervivencia GC fue encontrado por el análisis de regresión de Cox. Debido al tamaño de la muestra relativamente pequeña, el sesgo de memoria podría existir en el estudio de casos y controles, y el estado de los resultados puede haber causado casos para alterar su perfil de exposición. Por lo tanto, se necesitan más experimentos y estudios a gran escala para confirmar nuestros resultados.
El presente estudio tiene algunas limitaciones. En primer lugar, el tamaño de la muestra era relativamente pequeña, sobre todo para los análisis de la supervivencia y la expresión de la proteína, los cuales necesitan una confirmación adicional en grandes poblaciones. En segundo lugar, se analizó único sistema operativo en el análisis de supervivencia y también están garantizados otros parámetros de pronóstico como la supervivencia libre de progresión. En tercer lugar, el análisis de supervivencia se realizó sólo en un subconjunto de la totalidad de los pacientes GC que podrían hacer que la probabilidad de un sesgo diferencial, y un tamaño de la muestra para el estudio de pronóstico se debe realizar en un futuro próximo. En cuarto lugar, los experimentos funcionales son necesarios para dilucidar el mecanismo de la enfermedad subyacente.
Conclusión
En resumen, la relación de
mTOR
rs1064261 y
AKT
polimorfismos rs1130233 con la susceptibilidad GC y OS se ha demostrado por primera vez.
mTOR
rs1064261 y
AKT polimorfismos rs1130233
se asociaron significativamente con el riesgo de CG en los hombres. El
AKT
polimorfismo rs1130233 y
H
.