Extracto
Antecedentes
in vitro
estudios han demostrado el papel de la familia Bcl-2 de los genes en la carcinogénesis endometrial. El papel de las variantes genéticas de BCL-2 genes y sus interacciones con factores no genéticos en el desarrollo de cáncer de endometrio no se ha investigado en estudios epidemiológicos.
Pacientes y métodos
Hemos examinado la relación entre BCL-2 variantes de la familia de genes y el riesgo de cáncer de endometrio entre 1.028 pacientes y 1.922 controles de la comunidad de la misma edad de Shanghai, china. También se investigó la posible interacción entre variantes genéticas y factores de riesgo establecidos (demográficas, clínicas y de estilo de vida). Los individuos fueron genotipo para el etiquetado 86 polimorfismos de nucleótido único (SNP) en el
BCL2, BAX, BAD Opiniones y
BAK1
genes.
Resultados
Las asociaciones significativas se encontraron con el riesgo de cáncer de endometrio durante 9 SNPs en el
BCL2
gen (
P
tendencia & lt; 0,05 para todos). Por SNPs rs17759659 y rs7243091 (alelo menor de los dos:
G
), las asociaciones eran independientes. El odds ratio (IC del 95%: 1,04 a 1,53) 1,27 para las mujeres con
AG
genotipo para el SNP rs17759659 y 1,82 (IC del 95%: 1,21 a 2,73) para las mujeres con el
GG
genotipo de los SNP rs7243091. No se observó interacción entre estos dos SNPs y establecidos los factores de riesgo no genéticos de cáncer de endometrio.
Conclusión
Los polimorfismos genéticos en el
BCL2
gen puede estar asociada con el riesgo de cáncer de endometrio en mujeres chinas
Visto:. Dorjgochoo T, Xiang YB, Long J, Shi J, S Deming, Xu WH, et al. (2013) Asociación de marcadores genéticos en la familia Bcl-2 de genes relacionados con la apoptosis con cáncer endometrial riesgo en una población china. PLoS ONE 8 (4): e60915. doi: 10.1371 /journal.pone.0060915
Editor: Yan Gong, Facultad de Farmacia, Universidad de Florida, Estados Unidos de América
Recibido: 16 Julio, 2012; Aceptado: March 5, 2013; Publicado: 23 Abril 2013
Derechos de Autor © 2013 Dorjgochoo et al. Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos de la licencia Creative Commons Attribution License, que permite el uso ilimitado, distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que el autor original y la fuente se acreditan
Financiación:. Este trabajo fue apoyado por el Instituto Nacional del cáncer de los Institutos nacionales de Salud [R01 CA064277, CA092585 R01, y en P30 CA68485 parte] (http://www.nih.gov/). Los donantes no tenía papel en el diseño del estudio, la recogida y análisis de datos, decisión a publicar, o la preparación del manuscrito
Conflicto de intereses:.. Los autores han declarado que no existen intereses en competencia
Introducción
la apoptosis es un proceso selectivo para las células de la supresión, que es un proceso fisiológico esencial requerida para la regulación del tamaño del tejido y la morfogénesis [1]. En células de mamíferos, la apoptosis es inducida por dos vías de señalización distintas: receptor extrínseca o intrínseca o muerte y mitocondrial [1], [2]. Las proteínas de la familia Bcl-2 se han identificado como componentes esenciales de la vía mitocondrial. Los miembros de la familia Bcl-2 pueden promover o inhibir la apoptosis mediante la síntesis de anti-apoptóticos (es decir,
BCL2, España Bcl-XL) o pro-apoptóticos (es decir,
BAX
,
BAK,, oferta, BCL-X)
proteínas BAD [1] - [3]. Debido al patrón cíclico de
BCL2
expresión en el endometrio normal durante el ciclo menstrual [4], [5], se ha sugerido que el
BCL2
gen puede ser el más hormonas miembro dependiente de la familia Bcl-2 de los genes [4], [6].
p>
BAX, BAK
y
malos genes se cree que oponerse a la carcinogénesis celular, mientras que el
BCL2
gen puede promover el crecimiento de células cancerosas mediante el bloqueo de la apoptosis [7] , [8]. Más de expresión de la anti-apoptótica
BCL2
gen se ha observado en varios tejidos de cáncer humano, incluyendo cáncer de mama, colon, tiroides y carcinomas endometriales [7] - [10]. La relación entre la familia de Bcl-2 de los genes y el cáncer de endometrio salió a la luz principalmente a través de
in vitro
estudios de muestras de tejidos humanos [6], [11], [12]. Más de expresión de
BCL2
ralentiza el crecimiento celular y la expresión muy alta puede promover la muerte celular, mientras más baja
BCL2
expresión puede ser un signo de la inhibición de la apoptosis en los tejidos de mama humana y de carcinoma de endometrio [13 ], [14]. Los estudios también han demostrado que
BCL2
expresión difiere según el grado de agresividad del tumor y la diferenciación [13] - [15], y
BCL2
expresión se ha demostrado ser muy baja o ausente en mayor grado carcinomas en comparación con los carcinomas de grado inferior [14]. Se ha postulado que
BCL2
expresión puede ser suprimida durante la progresión del cáncer [12], [16]. Por lo tanto,
BCL2
expresión podría ser un predictor importante de la progresión del cáncer y el pronóstico [17] - [19]
Sólo unos pocos estudios de observación han investigado la relación de variantes genéticas en el BCL. familia 2-gen, en particular la
BCL2
gen, con la susceptibilidad a la leucemia mieloide, carcinoma de células escamosas de cabeza y cuello, cáncer de esófago y cáncer de próstata [20] - [23]. Los resultados sugieren que la familia Bcl-2 de los genes juegan un papel importante en el desarrollo del cáncer. Hasta la fecha, no hay estudios de asociación genética se han publicado sobre el papel de las variantes de la familia-2-gen BCL en el desarrollo de cáncer de endometrio. Hemos investigado si las variantes genéticas en los genes BCL-2-familia
BAD, BAX, España BCL2 o
BAK1
están asociados con el riesgo de cáncer de endometrio. Por otra parte, hemos examinado si las variantes en estos genes modifican el efecto de los factores de riesgo no genéticos establecidos para el cáncer de endometrio mediante el uso de los datos del Estudio de Genética del cáncer endometrial Shanghai (SECGS).
Materiales y Métodos
declaración de Ética
los protocolos de estudio fueron aprobados por las juntas de revisión institucional de los institutos participantes, es decir, la Escuela de Medicina de la Universidad de Vanderbilt, Nashville, Tennessee, Estados Unidos Universidad de Vanderbilt; y el Instituto de Cáncer de Shanghai, Shanghai, China; Shanghai, China. Todas las participantes proporcionaron, el consentimiento informado por escrito.
Población de estudio y recopilación de datos
El SECGS utiliza los recursos de dos estudios e incluye sujetos que participaron en el estudio del cáncer endometrial Shanghai (segundos) y sujetos de control que participado en el Shanghai Breast Cancer Study (SBCS, fase 1). Tanto la SECS y SBCS son los estudios basados en la población, de casos y controles llevados a cabo en Shanghai, China entre 1996 y 2003, que utilizan protocolos de estudio casi idénticos. Los detalles de los diseños de estudio para estos dos estudios se han descrito en detalle en otra parte [24], [25]. En pocas palabras, 1.208 casos de edades 30-69 años con diagnóstico reciente de cáncer de endometrio fueron identificados a través del Registro de Cáncer de Shanghai basado en la población entre enero de 1997 y diciembre de 2003. Los diagnósticos de cáncer fueron confirmados por los patólogos. Los controles fueron seleccionados al azar de la población en general mediante el Registro de Shanghai Residente y la edad emparejados a los casos de cáncer. El estudio actual incluye 1.000 controles de la SEG y 922 controles adicionales libres de cáncer de los SBCS.
Los participantes del estudio fueron entrevistados para obtener información detallada sobre las características demográficas, hábitos de vida, la ingesta diaria y el uso de suplementos, la historia menstrual y reproductiva , el uso de hormonas, la historia de la enfermedad, la historia de peso y antecedentes familiares de cualquier tipo de cáncer. Las medidas antropométricas, incluyendo el peso, la altura y la circunferencia de la cintura y las caderas, fueron tomadas por los entrevistadores. La menopausia se define como el cese de la menstruación durante al menos 12 meses antes de la fecha de referencia (fecha de diagnóstico de casos y controles para la fecha de la entrevista), con exclusión de los lapsos causados por el embarazo, la lactancia o el uso de la hormona estrógeno. índice de masa corporal (IMC, el peso en kilogramos dividido por la altura en metros al cuadrado, en kg /m
2) y la relación cintura-cadera circunferencia (RCC) se calcularon mediante el uso de medidas antropométricas como se describe anteriormente [26], [27 ]
SNP selección, identificación y genotipado
haplotipo el etiquetado SNPs (tagSNPs) en los genes BCL-2-familiares fueron seleccionados a partir de los datos chinos han del Proyecto Internacional HapMap (http:. //hapmap.ncbi.nlm.nih.gov/) utilizando el programa Tagger [28]. Se seleccionaron tagSNPs en base a los siguientes criterios: 1) los tipos de llamada genotipo ≥95%, 2) alelo menor frecuencia (MAF) ≥0.05, 3) situado dentro de una región a partir del 5 Kb aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción y termina el 5 Kb aguas abajo de el codón de terminación de cada gen y 4) el desequilibrio de ligamiento (LD) de
r
2
≥0.9. SNPs con una función conocida o potencial eran todo incluido. La genotipificación se realizó en el recurso compartido de microarrays de Vanderbilt. Como un procedimiento de control de calidad (QC), se incluyeron 39 muestras duplicadas cegados y 12 muestras de ADN HapMap en la determinación del genotipo. La tasa media consistencia para estas muestras fue de 99,6%. Los miembros del personal de laboratorio fueron cegados al estado de casos y controles y de la identidad de todas las muestras. Un total de 86 SNPs en los genes Bcl-2-familia (72 SNPs en
BCL2
, 4 SNPs en
BAD
, 5 SNPs en
BAX
, y 5 SNPs en .
BAK1
) se incluyeron en el estudio, con una tasa promedio de llamadas de 99,8%
análisis estadísticos
Se utilizó el software SAS (versión 9.2; SAS Institute, Inc. ) para los análisis estadísticos. Demográfica, estilo de vida y factores clínicos se compararon entre los casos y controles mediante el uso de la χ
2 test para las variables categóricas y un
t-test
para las variables continuas. Cálculo de las frecuencias alélicas y las pruebas de equilibrio de Hardy-Weinberg (HWE) se basaron en los datos de control. LD entre los polimorfismos en el
BCL2, BAD, BAX
, y
BAK1
genes se evaluó mediante HaploView, la versión 4.2 del software [29]. La odds ratio (OR) y los intervalos de confianza del 95% (IC) se derivaron de modelos de regresión logística multivariante para evaluar las asociaciones de la puntuación de los factores de riesgo establecidos con el riesgo de cáncer de endometrio y de asociaciones de riesgo de cáncer con genotipos [es decir, homocigotos (
AA
) para el alelo mayor, heterocigotos (
Aa
) y homocigotos (
aa
) para el alelo menor] en virtud de aditivo, modelos genéticos dominantes y recesivos. Edad (continua) y la educación (categórica) se ajustaron en todos los análisis. ajuste adicional para la menopausia, antecedentes familiares de cáncer de endometrio en familiares de primer grado y el IMC no alteró las asociaciones entre genes y enfermedades.
Estamos derivados de las puntuaciones de riesgo para los factores de riesgo establecidos para el cáncer de endometrio en base a la literatura anterior [30 ] - [34] y su importancia relativa en nuestra población (Tabla 1). El estado menopáusico fue altamente correlacionado con la edad, y la terapia de reemplazo hormonal y fumar (HRT) uso no se asociaron significativamente con el riesgo de cáncer de endometrio en esta población; Por lo tanto, estos factores no se incluyeron en el cálculo de la puntuación de riesgo para los factores de riesgo establecidos. Como se muestra en la Tabla 1, se asignó una puntuación numérica (por ejemplo, 0, 1, 2) para cada categoría de los 9 factores de riesgo que se asocian con el cáncer de endometrio en nuestra población en función de su contribución al riesgo total; éstos: edad (años, & lt; 45 = 0; 1 = 45-54, ≥55 = 2); BMI (& lt; 18,5 = 0, 18,5 a 22,9 = 1, 23,0-27,4 = 2, ≥27.5 = 3); paridad (nulíparas = 2, 1 = 1, ≥2 = 0), el período de la menstruación (años: & lt; 28,0 = 0, 28,0-31,9 = 1; 32,0-35,1 = 2; ≥35.2 = 3), uso de anticonceptivos orales ( OC, nunca = 1, siempre = 0), la actividad física regular (nunca = 1, siempre = 0), el consumo de alcohol (nunca = 1, siempre = 0), antecedentes de diabetes o hipertensión (no = 0, sí = 1) y la historia de cáncer de endometrio o cáncer colorrectal en familiares de primer grado (no = 0, sí = 1). Para el consumo de alcohol y el uso de anticonceptivos orales que cambiamos los puntajes (siempre = 0 y nunca = 1), ya que estos son los factores de protección para el riesgo de cáncer de endometrio en base a la literatura [30] - [34]. período de la menstruación se calculó en base a la diferencia entre las edades de la menopausia y la menarquia con la consideración de las variables relacionadas con el embarazo (lactancia materna y el embarazo de historia) y se clasificó en base a la distribución cuartil entre los controles. El IMC se clasifica sobre la base de la Organización Mundial de la Salud (OMS) IMC puntos de corte para las poblaciones asiáticas. Para cada participante, se calculó la suma de las puntuaciones de todos los factores de riesgo. puntuaciones de resumen varió de 0 a 14 y se utilizaron para el análisis actual. Se evaluaron las asociaciones entre el riesgo de cáncer de endometrio y anotó establecido factores de riesgo como variables continuas o categóricas (basado en tercil y distribuciones de la mediana entre los controles).
Además, se analizó el efecto de dos SNPs independientes sobre las asociaciones entre los factores de riesgo establecidos a favor y cáncer de endometrio en el análisis estratificado por el genotipo. Las pruebas de tendencia se llevaron a cabo mediante la introducción de las variables categóricas como parámetros continuos en los modelos. multiplicativos interacciones entre los factores de riesgo a favor y subgrupos de genotipos se evaluaron mediante la comparación de la diferencia de las probabilidades de registro entre los modelos con los principales efectos y modelos tanto con los efectos principales y los términos de interacción. Se utilizó la prueba de bondad de ajuste de Hosmer y Lemeshow para comprobar los modelos de regresión logística. Todas las pruebas estadísticas fueron de dos colas y un
P
valor & lt; 0,05 fue considerado estadísticamente significativo.
P-valores
presentada en este documento no fueron corregidos para múltiples pruebas. Ninguna de las asociaciones de los 86 SNPs analizados se alcanzó significación estadística (5,8 * 10
-4), si se aplica la corrección de Bonferroni.
Resultados
La Tabla 1 presenta las asociaciones de la factores de riesgo establecidos con el riesgo de cáncer de endometrio en la población estudiada. Los casos eran mayores que los controles (edad media: 54,8
vs 50,8
P Hotel & lt; 0,01.). Asociaciones para la mayoría de los factores que se presentan en la Tabla 1 estaban de acuerdo con la literatura publicada con anterioridad. La frecuencia de consumo de alcohol fue baja en nuestra población (3.1% de los casos y el 4,9% de los controles) y se asoció inversamente con el riesgo de cáncer de endometrio. No se identificó una aparente asociación entre el uso de terapia de reemplazo hormonal o el tabaquismo y el riesgo de cáncer, pero la tasa de exposición a estos factores fue muy baja.
Asociaciones de puntuaciones de riesgo no genéticos con el riesgo de cáncer de endometrio se presentan en la Tabla 2. cuando se analizó como una variable continua, el OR (IC del 95%: 1,56 a 1,75) 1,65 para cada incremento en la puntuación de riesgo. Cuando las puntuaciones de riesgo se clasificaron en terciles, las mujeres que estaban en el tercil superior tenían 8,83 veces (IC del 95%: 6,44 a 12,1) mayor riesgo de cáncer de endometrio (
P
tendencia & lt; 0,01) en comparación con las mujeres que estaban en el tercil más bajo. Las estimaciones de riesgo aumentó 3,76 veces mayor entre las mujeres con una puntuación de riesgo ≥7 (gama media) en comparación con las mujeres cuyo riesgo marcador era. & lt; 7
Nueve de los 72 SNPs en el
BCL2
gen (rs12961976, rs17759659, rs2170294, rs4941195, rs4987768, rs7230177, rs7231901, rs7243091 y rs9807663) tuvo una asociación estadísticamente significativa con el riesgo de cáncer de endometrio (
P Hotel & lt; 0,05, Tabla 3), todos los cuales son intrónica a
BCL2
. Estos 9 SNPs se encuentran en 4 bloques de haplotipos en el
BCL2
región genómica y r
2 valores fueron altos (& gt; 0,8) entre siete de estos SNP (datos no mostrados). SNP rs17759659 estaba en LD (r
2 de 0.825) con SNPs rs10460159, rs11663788 y rs6810, que están en sitios de unión predijo miARN. En general, sólo 2 SNPs, rs17759659 y rs7243091, (r
2 & lt; 0,3) se encontró que eran independientes entre sí y se asociaron con el riesgo de cáncer de endometrio, incluso después de ajustar por sí en el modelo. Los alelos menores (
G
) de ambos rs17759659 y rs7243091 se asociaron con un mayor riesgo de cáncer de endometrio (por rs17759659, o CI = 1,27, 95%: 1,04 a 1,53 para las mujeres con el
GA
genotipo; para rs7243091, OR = 1,82, IC del 95%: 1,21 a 2,73 para las mujeres con el
GG
genotipo). Ninguno de los SNPs en el
BAD, BAX
o
BAK1
genes estaban asociados con el riesgo.
Asimismo, evaluaron si los SNP rs7243091 o rs17759659 tienen un efecto modificador sobre las asociaciones entre la puntuación de los factores de riesgo establecidos y el riesgo de cáncer de endometrio (Tabla 4). No se encontraron pruebas de que estos dos SNPs modificar la asociación de factores de riesgo no genéticos con cáncer de endometrio (
P
para la interacción = 0,87 para rs7243091 y 0,62 para rs17759659).
Discusión
a lo mejor de nuestro conocimiento, este es el primer estudio para evaluar variantes genéticas en la familia BCL-2 de los genes junto con el efecto cuantificado de los factores de riesgo establecidos en el riesgo de cáncer de endometrio. variantes genéticas comunes en los genes BCL-2-familia
BCL2
,
BAD, BAX
y
BAK1
fueron evaluados exhaustivamente para las asociaciones con el riesgo de cáncer de endometrio. Nueve de los 72 SNPs analizados en el
BCL2
gen, rs12961976, rs17759659, rs2170294, rs4941195, rs4987768, rs7230177, rs7231901, rs7243091 y rs9807663, tuvieron una asociación estadísticamente significativa con el riesgo de cáncer de endometrio y dos SNPs, y rs17759659 rs7243091, (r
2 & lt; 0,3) se encontró que eran independientes entre sí y se asociaron con el riesgo de cáncer de endometrio. Las 9 SNPs asociados a la enfermedad en la región intrónica de
BCL2
no parece alterar los aminoácidos, por lo que su relación con la biología subyacente de cáncer de endometrio sigue siendo poco clara. También se encontró que una puntuación de riesgo creado en base a los factores de riesgo del cáncer de endometrio establecidos [32] - [34], incluyendo la edad, el IMC, la paridad, el período menstrual, la actividad física, uso de anticonceptivos orales, el consumo de alcohol, antecedentes de diabetes e hipertensión y la historia de los cánceres endometriales y colorrectales en familiares de primer grado, fue altamente predictivo del riesgo de cáncer de endometrio en la población estudiada. Sin embargo, las asociaciones de puntuación de riesgo con cáncer de endometrio no fueron sensiblemente modificados por SNP rs7243091 o rs17759659
.
A pesar de los datos de observación limitados sobre la relación entre los polimorfismos de la familia-2-gen BCL y el cáncer de endometrio, nuestros hallazgos sobre las asociaciones entre variantes genéticas en el
BCL2
de genes y el riesgo de cáncer de endometrio son consistentes con los hallazgos de los estudios de tejido tumoral humano anteriores, que han demostrado claramente un papel para los miembros de la familia Bcl-2 de los genes, en particular el
BCL2 Opiniones y
BAX
genes, en el carcinoma de endometrio [11], [12], [14] - [16]. La mayoría de estos estudios han encontrado poca o ninguna expresión de
BCL2
en el carcinoma de endometrio [14], [17], [18], aunque la evidencia no era del todo coherente [14]. Los estudios de laboratorio han demostrado también que
BCL2
la expresión génica está relacionada con el grado de agresividad y la diferenciación en el carcinoma endometrial [6], [14]. Por ejemplo, Vaskivuo
et al.
Bajos niveles observados de
BCL2
expresión en carcinomas de endometrio grado I y niveles muy bajos o sin
BCL2
expresión en grado II y III de endometrio carcinomas, respectivamente [14], lo que sugiere que el
BCL2
g eno es un predictor importante de la progresión de la enfermedad [15].
también se ha sugerido que
BCL2
mayo ser el miembro más dependiente de hormonas de la familia Bcl-2 de los genes y que
BCL2
patrones de expresión en el endometrio normal pueden variar dependiendo de la fase del ciclo menstrual o el entorno hormonal [4], [5]. Este patrón cíclico de
BCL2
expresión disminuido o desaparecido después de la administración de levonorgestrel, un progestágeno sintético que se usa en algunos anticonceptivos hormonales [35], y
BCL2
se expresa en más del anti-progestina tratada endometrio [36], lo que demuestra que las hormonas esteroides exógenos afectan a
BCL2
expresión en el endometrio humano. Sin embargo, en nuestro estudio, no se encontraron efectos modificable de dos SNPs independientes dentro de la
BCL2
gen de asociaciones entre los factores no genéticos, incluyendo los factores hormonales y el riesgo de cáncer de endometrio. Estos resultados pueden deberse al tamaño de la muestra no ser lo suficientemente grande para detectar dichas interacciones o los SNPs estudiados no puede ser causalmente vinculados a la función del gen BCL2. Otros estudios con un tamaño de muestra más grande, la evaluación exhaustiva de las variantes genéticas y, preferentemente, se necesita una medición directa de los niveles de estrógeno para entender el papel de los
BCL2
en la carcinogénesis endometrial.
Nuestro estudio tiene varios puntos fuertes, incluyendo el uso de una muestra basada en la población, un tamaño de muestra relativamente grande, una población genéticamente homogénea, altas tasas de respuesta al momento del reclutamiento (82,8% de los casos y el 74,4% [el SECS] y 90,3% [el SBCS] para los controles ), y el estado del caso confirmado histopatología, todos los cuales ayudan a limitar los sesgos de selección y clasificación errónea. La información detallada de los factores reproductivos y de estilo de vida, historial médico, y medidas antropométricas fueron recogidas por entrevistadores entrenados. Ningún estudio epidemiológico todavía ha evaluado simultáneamente un gran número de polimorfismos en varios genes relacionados con la apoptosis en la familia Bcl-2 con el riesgo de cáncer endometrial. Además, también evaluamos las posibles interacciones entre los factores de riesgo establecidos y marcadores genéticos. Las limitaciones de este estudio también se deben considerar al interpretar los resultados. En primer lugar, este estudio evaluó 86 SNPs, y ninguna de las asociaciones alcanzaría significación estadística (5,8 * 10
-4), si se aplica la corrección de Bonferroni, probablemente debido al tamaño pequeño de la muestra. En segundo lugar, nuestro estudio es el primer estudio sistemático de las asociaciones genéticas entre los genes BCL-2-familia y el riesgo de cáncer de endometrio, y los resultados deben ser replicados en una cohorte independiente de pacientes con cáncer de endometrio. Por último, la falta de una medición directa de los niveles de hormonas de estrógeno nos impidió investigar el posible papel de los genes BCL-2-familia en el contexto de la exposición hormonal.
En resumen, hemos encontrado que dos SNPs independientes en el
BCL2
genes estaban asociados con el riesgo de cáncer de endometrio entre las mujeres chinas. Sin embargo, hemos encontrado poca evidencia de que estos polimorfismos modificar la asociación de factores de riesgo establecidos con cáncer de endometrio. Se necesitan más estudios para confirmar nuestros hallazgos y para dilucidar el papel de las interacciones entre genes y medio ambiente en el desarrollo del cáncer de endometrio.
Reconocimientos
Los autores agradecen al Dr. Jin Fan por su contribución a la aplicación de el estudio en Shanghai, Sra. Regina Courtney y el Dr. Shawn Levy por su contribución a la determinación del genotipo, la Sra Bethanie Pisón y la señora Jacqueline Stern, para la edición y la preparación del manuscrito, el Dr. Wu Xiaoyan por su ayuda en la comprobación de la calidad de datos, y los participantes del estudio y la investigación personal de la SEG y los SBCS.