Extracto
El -652 6N del variante común en el
CASP8
promotor (rs3834129) se ha descrito como un factor de riesgo de baja penetrancia putativo para diferentes tipos de cáncer. En particular, algunos estudios sugieren que el alelo suprimido (del) se asoció inversamente con el riesgo de CCR, mientras que otros análisis no pudieron confirmar esto. Por lo tanto, para entender mejor el papel de esta variante en el riesgo de desarrollar CCR, se realizó un estudio de casos y controles multicéntrico. En el estudio, la variante -652 6N del se genotipo en un total de 6.733 casos de CCR y 7.576 controles reclutados por seis centros diferentes, situados en España, Italia, EE.UU., Inglaterra, República Checa y los Países Bajos colaborando con el consorcio internacional (COGENT colorrectal Genética del cáncer). Nuestro análisis indica que rs3834129 no se asoció con el riesgo de CCR en el conjunto de datos completo. Sin embargo, la del alelo fue insuficientemente representados en una serie de casos con antecedentes familiares de CCR (según el modelo alelo OR = 0,79, IC del 95% = 0,69 a 0,90) lo que sugiere este alelo podría ser un factor protector frente CRC familiar. Dado que este estudio de casos y controles multicéntrico se realizó en un tamaño de muestra muy grande, se aclaró robusto del efecto de rs3834129 en el riesgo de desarrollar CCR en los caucásicos
Visto:. Pardini B, Verderio P, Pizzamiglio S, Nici C, Maiorana MV, Naccarati A, et al. (2014) Asociación entre CASP8 -652 6N Del polimorfismo (rs3834129) y el riesgo de cáncer colorrectal: resultados de un estudio multicéntrico. PLoS ONE 9 (1): e85538. doi: 10.1371 /journal.pone.0085538
Editor: Qing Yi-Wei, el Instituto del Cáncer de Duke, Estados Unidos de América
Recibido: 27 de septiembre de 2013; Aceptado: 4 de diciembre de 2013; Publicado: 21 Enero 2014
Derechos de Autor © 2014 Pardini et al. Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos de la licencia Creative Commons Attribution License, que permite el uso ilimitado, distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que el autor original y la fuente se acreditan
Financiación:. Para todos cohortes: Este trabajo fue apoyado por BM1206 Acción COST. cohorte española: Los autores agradecen sinceramente a todos los pacientes que participaron en este estudio que fueron reclutados en 25 (EPICOLON 1) y 14 (2) EPICOLON hospitales españoles como parte del proyecto EPICOLON. Los autores también están en deuda con la Unidad de Genómica del Instituto de Investigaciones Biomédicas August Pi i Sunyer en busca de ayuda técnica. El trabajo se llevó a cabo (en parte) en el Centro Esther Koplowitz, Barcelona. SCB es apoyada por un contrato del Fondo de Investigación Sanitaria (CP 03-0070 a SCB). Centro de Investigación Biomédica en Red de Enfermedades Hepáticas y Digestivas y del Centro de Investigación Biomédica en Red de Enfermedades Raras son financiados por el Instituto de Salud Carlos III. Este trabajo fue apoyado por becas de la Fondo de Investigación Sanitaria /FEDER (08/0024, 08/1276, PS09 /02368, 11/00219, 11/00681), Instituto de Salud Carlos III (Acción Transversal de cáncer), Xunta de Galicia (07PXIB9101209PR), Ministerio de Ciencia e Innovación (SAF2010-19273), Asociación Española Contra el Cáncer (Fundación Científica y Junta de Barcelona), la Fundación Olga Torres (SCB y PCR), 7PM CHIBCHA Consortium (SCB y A. Carracedo). cohorte italiana: Los autores agradecen a todas las personas que aceptaron participar en el estudio. Los autores también agradecen al personal del Banco de Tejidos de la Fundación Istituto di Ricovero e Cura un Carattere Scientifico Istituto dei Tumori para la recogida de muestras y todos los patólogos por su contribución y colaboración. cohorte de América: Kentucky genética del cáncer de colon Epidemiología de estudios está apoyada por los Institutos Nacionales de Salud de subvención R01CA136726 de Ll. cohorte de Inglés: La financiación básica al Centro Wellcome Trust de Genética Humana fue proporcionada por el Wellcome Trust (090532 /Z /09 /Z). cohorte Checa: agencia de Concesión de la República Checa (GACR) [CZ: GACR: GA P304 /10/1286 y P304 /12/1585] y por Prvouk-P27 /LF1 /1 del Ministerio de Educación, Juventud y Deporte, República Checa (Primera Facultad de Medicina, Universidad Carlos, Praga, República Checa como receptor). cohorte holandesa: holandés Cancer Society, conceder KWF-UL-2010 a 4.656. Los donantes no tenía papel en el diseño del estudio, la recogida y análisis de datos, decisión a publicar, o la preparación del manuscrito
Conflicto de intereses:. PP es un editor académico en PLOS ONE, pero esto no altera los autores adhesión a todas las políticas Journal el intercambio de datos y materiales.
Introducción
la carcinogénesis se caracteriza por la alteración de los procesos normales designados para mantener la estabilidad del genoma. La apoptosis es el mecanismo más prominente de la muerte celular programada, responsable de la eliminación segura de las células dañadas antes de anomalías del genoma puede ser replicado y una mayor propagación. enzimas caspasas son esenciales en la regulación y la ejecución de la mayor parte de las vías de muerte celular apoptótica. En particular, la caspasa-8 (
CASP8
) es un jugador clave en el control de la apoptosis de los linfocitos T a través de la activación inducida de muerte celular [1] y, simultáneamente, una homeostasis fisiológica de los linfocitos T es un aspecto fundamental en el inmune a la vigilancia de las células cancerosas.
Un polimorfismo que consiste en la supresión de seis nucleótidos en la región promotora de
CASP8
, y se refirió como -652 6N del (rs3834129), ha sido descrito a ser muy común en varias poblaciones [2]. Esta supresión de seis nucleótidos se muestra para destruir un elemento de unión estimuladora proteína 1 en la región reguladora del promotor que causa una disminución de
CASP8
transcripción y, finalmente, una reducción de la apoptosis de los linfocitos T antitumorales [2]. Por lo tanto, rs3834129 se postuló para afectar a la respuesta inmune antitumoral durante la iniciación del cáncer o progresión, y por lo tanto considerado como un factor genético potencialmente asociados con el riesgo de cáncer. En este sentido, el polimorfismo se puso a prueba en un estudio de casos y controles y la del alelo se demostró que se asocia con un efecto protector en varios tipos de cáncer, incluyendo el CRC, en la población china [2]. Dos estudios posteriores investigarse más a fondo el efecto de rs3834129 en los casos y los controles de origen étnico mixto y de raza caucásica de prueba CRC, pero no pudieron confirmar la asociación [3], [4]. Un metaanálisis de estos tres estudios indicó que, en virtud de un modelo dominante, la del alelo se asoció con una reducción significativa del riesgo de CCR con odds ratio (OR) = 0,89; intervalo de confianza del 95% (IC) = 0,83-,96 [5 ]. Sin embargo, un estudio posterior no incluido en el anterior meta-análisis, una vez más no reveló una asociación entre rs3834129 y el riesgo de CCR en chino [6].
Por lo tanto, en el presente estudio se trató de una prueba más robusta, si rs3834129 puede ser un factor de riesgo de CCR en un estudio de casos y controles, basado en seis cohortes reclutadas en centros ubicados en España, Italia, EE.UU., Inglaterra, República Checa y los Países Bajos y que colaboran dentro de la COGENT (genética del cáncer colorrectal) del consorcio [7 ].
Materiales y Métodos
cohortes de casos y controles
el COGENT (genética del cáncer colorrectal) consorcio se estableció en 2007 con el objetivo principal de estudiar la susceptibilidad genética a la CRC en de manera colaborativa. El consorcio consistió en más de 20 grupos de investigación en Europa, Australia, América, China y Japón trabajando activamente en la genética de CRC y con experiencia que abarca la epidemiología genética, genética estadística, cartografía genética, la biología, la genética molecular, la patología y el diagnóstico y el manejo clínico de CRC [8]. El mantenimiento de sus principales objetivos, el consorcio ha evolucionado hasta convertirse en una iniciativa más estructurado llamado "Estudios de cooperación sobre la susceptibilidad heredada al cáncer colorrectal" (EuCOLONGENE - http://www.eucolongene.eu). En el presente estudio, rs3834129 se ensayó como factor de riesgo genético para la CRC en seis cohortes que comprenden 6.733 casos y 7.576 controles.
1. cohorte española. Los casos y controles fueron reclutados a través del Consorcio EPICOLON que se basa en un estudio prospectivo, multicéntrico y estudio de la epidemiología de base poblacional de la incidencia y características de CCR en la población española [9]. En pocas palabras, los casos fueron seleccionados como los pacientes con
de novo
histológicamente confirmado el diagnóstico de adenocarcinoma colorrectal. Los criterios de exclusión fueron las formas hereditarias de CRC, como el cáncer hereditario no asociado a poliposis colorrectal (HNPCC) y la poliposis adenomatosa familiar (PAF) y una historia personal de enfermedad inflamatoria intestinal. Los controles fueron desde el banco de ADN Nacional española y se confirmó que no tiene cáncer o antecedentes de neoplasia y sin antecedentes familiares de CCR. Todos los casos y los controles eran de etnia caucásica. 2. cohorte italiana. Los casos y controles fueron reclutados como se describe en [10]. En pocas palabras, los casos fueron personas afectadas consecutivos con CRC que se sometió a una cirugía en la Fondazione IRCCS Istituto Nazionale Tumori en Milán (INT). Los controles fueron reclutados donantes de sangre a través del Servicio de Inmunohematología y Medicina de Transfusión de la INT Associazione Volontari Italiani Sangue Comunale en Milán. Todos los casos y los controles eran de etnia caucásica. 3. cohorte americana (Kentucky, EE.UU.). Los casos y controles fueron reclutados como se ha descrito recientemente [11]. En pocas palabras, se identificaron casos incidentes de cáncer de colon a través del Registro de Cáncer de Kentucky. controles de población fueron reclutados a través de la marcación de dígitos al azar de acuerdo con los siguientes criterios: ser al menos 30 años de edad o más y sin antecedentes personales de cáncer aparte del cáncer de piel. Para ambos casos y controles, los criterios de exclusión fueron las enfermedades inflamatorias del intestino, FAP y HNPCC. La mayoría de los participantes eran caucásicos (93,7%). 4. cohorte Inglés. (CRC casos significativos o adenomas) y controles fueron reclutados a través del tumor colorrectal identificación de genes consorcio (Corgi) como se ha descrito anteriormente [12]. En pocas palabras, los casos tenían al menos un familiar de primer grado afectado por la CRC. Los controles eran cónyuges o parejas no afectadas por el cáncer y sin una historia personal y familiar de neoplasia colorrectal. Un único individuo afectado de cada familia se incluyó en este estudio. Se excluyeron las formas hereditarias tales como CRC, síndrome de HNPCC /Lynch o portadores de la mutación MUTYH bi-alélica. Todos los casos y los controles eran de etnia caucásica. 5. cohorte República Checa. Los casos y controles fueron reclutados como se describe anteriormente [13]. En pocas palabras, todos los casos habían confirmado histológicamente CRC y fueron determinadas mediante consecutivamente departamentos oncológicos. Los controles fueron voluntarios, ya sea basados en el hospital con resultados negativos colonoscopia o donantes de sangre tomadas de un centro de donación de sangre en Praga. Todos los casos y los controles eran de etnia caucásica. 6. holandesa cohorte. Los casos y controles fueron reclutados como se describe anteriormente [14]. En pocas palabras, la mayoría de los casos fueron reclutados a través del departamento de genética clínica. Todos los casos fueron diagnosticados con CRC y tuvo inicio temprano y /o antecedentes familiares de CCR. Conocidos síndromes de poliposis dominantes, fueron excluidos síndrome de HNPCC /Lynch o portadores de la mutación MUTYH bi-alélica. Un único individuo afectado de cada familia se incluyó en este estudio. Los controles fueron los donantes de sangre sanos de la región suroeste de los Países Bajos. Todos los casos y los controles eran de etnia caucásica
.
Para cada cohorte, el número de casos y controles incluidos en el estudio y sus datos de sexo y edad se muestran en la Tabla 1. Todas las personas que participaron en este estudio firmaron un consentimiento informado para el uso de sus muestras biológicas para fines de investigación. Este estudio fue aprobado por las siguientes instituciones: Ético de Investigación Clínica y Comités de Investigación del Hospital Clínico de Barcelon (cohorte española); Comité de Ética de la Fondazione IRCCS Istituto Nazionale dei Tumori, Milán, Italia (cohorte italiana); Juntas de Revisión Institucional de la Universidad de Kentucky, Lexington, Case Western Reserve University Hospitales /Universitarios de Cleveland y la Universidad del Sur de California, EE.UU. (cohorte de América); Southampton y Hampshire Comité Ético de Investigación del Sudoeste (cohorte Inglés); Comité de Ética del Instituto de Medicina Experimental y Comité de Ética del Instituto de Medicina Clínica y Experimental y el Hospital Thomayer, Praga, República Checa (República Checa cohorte); la comisión médica Ética de la Universidad de Leiden, Países Bajos (protocolo P01.019) (cohorte holandesa).
Genotipado
El ADN genómico se aisló a partir de linfocitos de sangre periférica utilizando procedimientos estándar. Las muestras de ADN de casos y controles fueron aleatoriamente alícuota en placas de 96 pocillos. Genotipado de la rs3834129 se llevó a cabo utilizando el ensayo TaqMan (Life Technologies /Applied Biosystems, USA) en el español, italiano, EE.UU. y las cohortes holandés y usando el ensayo de Kaspar (K-biociencia, Reino Unido) en las cohortes Inglés y República Checa . Se utilizaron muestras duplicadas (5%), sin controles de plantilla en cada placa, y prueba de equilibrio de Hardy-Weinberg como pruebas de control de calidad.
El análisis estadístico
Dentro de cada cohorte, un análisis de regresión logística [ ,,,0],15] se llevó a cabo con el fin de comparar la frecuencia de genotipos de
CASP8
rs3834129 en casos y controles. Se estimó la odds ratio (OR) y su intervalo de relativa 95% de confianza (IC), considerando en cada edad modelo logístico y el sexo como covariables de ajuste. Se realizaron cuatro modelos diferentes ( "tres genotipos", dominante, recesivo y por alelo) para cada cohorte separado y teniendo en cuenta todos los individuos juntos. En este caso, la variable con la indicación de la cohorte y el término de interacción entre esta variable y el genotipo se incluyeron en el modelo logístico, además de las variables genotipo, la edad y el sexo. Las desviaciones de las frecuencias genotípicas en los controles de los previstos en virtud de Hardy-Weinberg (HWE) fueron evaluadas dentro de cada cohorte, así como teniendo en cuenta todos los individuos mediante la prueba de chi-cuadrado de Pearson. Todos los análisis estadísticos se realizaron con el software SAS. (Versión 9.2; SAS Institute Inc Cary, Carolina del Norte)
Resultados y Discusión
En este estudio, hemos analizado la distribución del genotipo rs3834129 en un total de 6.733 casos y 7.576 controles de seis cohortes, todos de la etnia caucásica. Las distribuciones de genotipo en los controles fueron consistentes con HWE en todas las cohortes y a través de ellos las frecuencias de la del alelo fueron similares en los controles (rango: 0,45 a 0,52). Se realizó un análisis global para comparar la frecuencia de genotipos de
CASP8
rs3834129 en los casos de CCR y en controles sanos. Al igual que en los datos de los controles de los Países Bajos sobre el sexo y /o edad que faltaban (Tabla 1), esta cohorte se excluyó del análisis global y se considera un total de 6.148 casos y 7.217 controles. Todas las cohortes se basan en incidentes /casos consecutivos, excepto para la cohorte de Inglés que se basaba en los casos familiares. Por lo tanto, también se realizó un análisis global adicional excluyendo la cohorte Inglés y prueba de un total de 4.572 casos y 6.450 controles. Tanto en estos análisis, el término de interacción entre el genotipo y la cohorte no fue estadísticamente significativa y también las RUP derivados de los diferentes modelos genéticos implementadas no fueron estadísticamente significativas (datos no mostrados).
Además, se evaluó el efecto de rs3834129 en el riesgo de CCR dentro de cada cohorte. Las estimaciones o se ajustaron por sexo y edad, con la única excepción de la cohorte holandesa, se reportan los resultados en la Tabla 2. Las RUP de los diferentes modelos implementados (tres genotipos, dominante, recesivo y por alelo-modelo) confirmó en gran medida los resultados de la análisis general no siendo estadísticamente significativa en cada cohorte, con la única excepción de la Inglés. Las RUP en las muestras de casos y controles familiares de Inglaterra fueron estadísticamente significativas (según el modelo alelo OR = 0,79, IC del 95% = 0,69 a 0,90), indicando la del alelo podría ser un factor protector frente al cáncer familiar. Este resultado puede explicarse considerando que los casos familiares, con respecto a incidentes /casos consecutivos, pueden ser una mejor recurso para pruebas de asociación ya que se espera para ser enriquecido por factores de riesgo genéticos, o por el contrario, privados por factores con un efecto protector.
Para nuestro conocimiento, este es el análisis más grande probar la asociación entre rs3834129 y el riesgo de CCR en los caucásicos y nuestros datos proporcionan la evidencia más fuerte hasta el momento y sin ambigüedades que el rs3834129 no es un factor de riesgo de CCR en este grupo étnico. Si bien nuestro análisis está en curso, otros estudios aparecieron, mostrando resultados inconsistentes. Por un lado, se encontró falta de asociación de casos y controles en los análisis basados en poblaciones griegas y chinas [16], [17]; en el otro lado, un meta-análisis, basado en tres estudios de étnica de la mezcla, y un estudio adicional separada de China mostró un efecto moderado de protección de la del alelo [18], [19]. Nuestros resultados en los caucásicos, con respecto al efecto protector putativo detectado en China, que tiene que ser confirmados por otros estudios más grandes-podrían ser explicadas por variantes adicionales de riesgo asociado en vinculación con rs3834129 y con diferentes frecuencias en diferentes fondos genéticos étnicos. En concreto, la del alelo de rs3834129 tiene una frecuencia de 0,48 de control en nuestro estudio, mientras que derivamos una frecuencia de 0,20-0,25 en los controles chinos [2], [6], [16], [18].
conclusión, aunque se necesitan más estudios para confirmar el efecto protector del alelo del que hemos observado en los casos de CCR familiares con antecedentes familiares, nuestro estudio proporciona evidencia sólida que indica el rs3834129 no es un factor de riesgo de CCR en los caucásicos.
Agradecimientos
los miembros del Consorcio (gastrointestinal Grupo de Oncología de la Asociación Española de Gastroenterología) EPICOLON son: hospital 12 de Octubre, Madrid: Juan Diego Morillas (coordinador local), Raquel Muñoz, Marisa Manzano, Francisco Colina, José Díaz , Carolina Ibarrola, Guadalupe López, Alberto Ibáñez; Hospital Clínic de Barcelona: Antoni Castells (coordinador local), Virginia Piñol, Sergi Castellví-Bel, Francesc Balaguer, Victoria Gonzalo, Teresa Ocaña, María Dolores Giráldez, Maria Pellisé, Anna Serradesanferm, Leticia Moreira, Miriam Cuatrecasas, Josep M. Piqué; El Hospital Clínico Universitario de Zaragoza: Ángel Lanas (coordinador local), Javier Alcedo, Javier Ortego; Hospital de Cristal-Piñor, Complexo Hospitalario de Ourense: Joaquín Cubiella (coordinador local), H
a Soledad Díez, Mercedes Salgado, Eloy Sánchez, Mariano Vega; Parc de Salut Mar, Barcelona: Montserrat Andreu (coordinador local), Anna Abuli, Xavier Bessa, Mar Iglesias, Agustín Seoane, Felipe Bory, Gemma Navarro, Beatriz Bellosillo; Josep M
a Dedeu, Cristina Álvarez, Marc Puigvehí; Hospital de San Eloy, Baracaldo y el Hospital Donostia, CIBERehd, Universidad del País Vasco, San Sebastián: Luis Bujanda (coordinador local) Ángel Cosme, Inés Gil, Mikel Larzabal, Carlos Placer, María del Mar Ramírez, Elisabeth Hijona, Jose M. Enríquez- Navascués, José L. Elosegui; Hospital General Universitario de Alicante: Artemio Payá (I EPICOLON coordinador local), Rodrigo Jover (EPICOLON II coordinador local), Cristina Alenda, Laura Sempere, Nuria ACAME, Estefanía Rojas, Lucía Pérez-Carbonell; Hospital General de Granollers: Joaquim Rigau (coordinador local), Ángel Serrano, Ana Giménez; Hospital General de Vic: Joan Saló (coordinador local), Eduard Batiste Alentorn-, Josefina Autonell, Ramón Barniol; Hospital General Universitario de Guadalajara y la Fundación para la Formación e Investigación Sanitarias Murcia: Ana María García (coordinador local), Fernando Carballo, Antonio Bienvenido, Eduardo Sanz, Fernando González, Jaime Sánchez, Akiko Ono; Hospital General Universitario de Valencia: Mercedes Latorre (coordinador local), Enrique Medina, Jaime Cuquerella, Pilar Canelles, Miguel Martorell, José Ángel García, Francisco Quiles, Elisa Orti; CHUVI-Hospital de Meixoeiro, Vigo: EPICOLON I: Juan Clofent (coordinador local), Jaime Seoane, Antoni Tardío, Eugenia Sánchez. EPICOLON II H
a Luisa de Castro (coordinador local), Antoni Tardío, Juan Clofent, Vicent Hernández; Hospital Universitari Germans Trias i Pujol, Badalona y la Sección de Enfermedades Digestivas y Nutrición de la Universidad de Illinois en Chicago, IL, EE.UU.: Xavier Llor (coordinador local), Rosa M. Xicola, Marta Piñol, Mercè Rosinach, Anna Roca, Elisenda Pons, José M. Hernández, Miquel A. Gassull; Hospital Universitari Mútua de Terrassa: Fernando Fernández-Bañares (coordinador local), Josep M. Viver, Antonio Salas, Jorge Espinós, Montserrat Forné, María Esteve; Hospital Universitari Arnau de Vilanova, Lleida: Josep M. Reñé (coordinador local), Carmen Piñol, Juan Buenestado, Joan Viñas; Hospital Universitario de Canarias: Enrique Quintero (coordinador local), David Nicolás, Adolfo Parra, Antonio Martín; Hospital Universitario La Fe de Valencia: Lidia Argüello (coordinador local), Vicente Pons, Virginia Pertejo, Teresa Sala; Hospital de Sant Pau, Barcelona: Dolors González (coordinador local) Eva Román, Teresa Ramón, María Poca, M
a Mar Concepción, Marta Martín, Lourdes Pétriz; Hospital Xeral Cíes, Vigo: Daniel Martínez (coordinador local); Fundación Pública Galega de Medicina Xenomica (FPGMX), CIBERER, Medicina Genómica Grupo-Universidad de Santiago de Compostela, Santiago de Compostela, Galicia, España: Ángel Carracedo (coordinador local), Clara Ruiz-Ponte, Ceres Fernández-Rozadilla, H
a Castro Magdalena; Hospital Universitario Central de Asturias: Sabino Riestra (coordinador local), Luis Rodrigo; Hospital de Galdácano, Vizcaya: Javier Fernández (coordinador local), José Luis Cabriada; Fundación Hospital de Calahorra (La Rioja) La Rioja: Luis Carreño (coordinador local), Susana Oquiñena, Federico Bolado; El Hospital Royo Villanova, Zaragoza: Elena Peña (coordinador local), José Manuel Blas, Gloria Cena, Juan José Sebastián; El Hospital Universitario Reina Sofía, Córdoba: Antonio Naranjo (coordinador local)
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