Extracto
Antecedentes
Aunque el cáncer de pulmón no microcítico en estadio temprano (CPNM) es considerado una enfermedad potencialmente curable después de la resección completa, los pacientes tienen un amplio espectro de la supervivencia según la etapa (IB, II, IIIA). Dentro de cada etapa, los perfiles de expresión de genes pueden identificar a los pacientes con un mayor riesgo de recurrencia. La hipótesis de que la expresión del ARNm alterado en nueve genes podría ayudar a predecir el resultado de la enfermedad: reparación por escisión de complementación cruzada 1 (ERCC1), con dedos de zinc mieloide 1 (MZF1) y TWIST1 (que regulan la expresión de N-cadherina), ribonucleótido subunidad reductasa M1 (RRM1 ), tiorredoxina-1 (TRX1), tirosil-DNA de la fosfodiesterasa (Tdp1), factor nuclear de células T activadas (NFAT), BRCA1, y el homólogo humano de levadura en ciernes desinhibido por bencimidazol (BubR1).
Metodología Principales conclusiones y
Se realizó la reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa en tiempo real (RT-qPCR) en muestras de tejido de cáncer de pulmón congelado de 126 pacientes con CPNM quimioterapia previamente, que fueron sometidos a resección quirúrgica y evaluado la asociación entre los niveles de expresión de genes y la supervivencia. Para la validación, se utilizaron muestras en parafina procedentes de otros 58 pacientes con CPNM. Se observó una fuerte correlación entre los niveles de expresión de genes entre los genes de todos excepto NFAT. Un modelo de riesgos proporcionales de Cox indicó que junto con el estadio de la enfermedad, la expresión de ARNm de BRCA1 se correlacionó significativamente con la supervivencia global (hazard ratio [HR], 1,98 [95% intervalo de confianza (IC), 1,11-6]; P = 0,02). En la cohorte independiente de 58 pacientes, la expresión de ARNm de BRCA1 también se correlacionó significativamente con la supervivencia (HR, [IC del 95%, 1,01-5,92] 2,4; p = 0,04).
Conclusiones
La sobreexpresión de BRCA1 ARNm está fuertemente asociada con una mala supervivencia en pacientes con CPNM, y la validación de este hallazgo en un conjunto de datos independientes establecidas aún más reforzado esta asociación. Dado que la expresión de ARNm de BRCA1 ha sido previamente vinculado a la diferencia de sensibilidad a cisplatino y antimicrotubule drogas, BRCA1 expresión de ARNm puede proporcionar información adicional para personalizar la quimioterapia adyuvante con base antimicrotubular, especialmente en el estadio IB, donde el papel de la quimioterapia adyuvante no se ha demostrado claramente.
Visto: Rosell R, Skrzypski M, Jassem E, Taron M, R Bartolucci, Sánchez JJ, et al. (2007) BRCA1: A Novel pronóstico Factor en resecado no de células pequeñas de cáncer de pulmón. PLoS ONE 2 (11): e1129. doi: 10.1371 /journal.pone.0001129
Editor Académico: William Pao, el Memorial Sloan-Kettering Cancer Center, Estados Unidos de América
Recibido: 20 Junio, 2007; Aceptado: August 1, 2007; Publicado: 7 Noviembre 2007
Derechos de Autor © 2007 Rosell et al. Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos de la licencia Creative Commons Attribution License, que permite el uso ilimitado, distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que el autor original y la fuente se acreditan
Financiación:. La investigación informó aquí fue financiada por el Grupo de cáncer de pulmón Española y la Universidad médica de Gdansk. La investigación fue financiada en parte por el Ministerio de Sanidad español conceder FIS 05/1621. Los donantes no tenía papel en el diseño del estudio, la recogida y análisis de datos, decisión a publicar, o la preparación del manuscrito
Conflicto de intereses:.. Los autores han declarado que no existen intereses en competencia
Introducción
en el año 2006 en Europa, había un estimado de 386,300 casos de cáncer de pulmón, con una incidencia sustancialmente mayor en los hombres que en las mujeres [1]. Entre cáncer de pulmón no microcítico resecado completamente (CPNM) de los pacientes, el 40% de la etapa I, el 66% de la fase II y el 75% de los pacientes con estadio IIIA mueren dentro de los cinco años de la resección [2], y el beneficio de la quimioterapia adyuvante tiene no se ha demostrado en el estadio IB. En el ensayo aleatorizado ANITA, la supervivencia a 5 años para los pacientes con enfermedad en estadio IB fue del 62% en el grupo de quimioterapia y el 64% en el grupo control; las tasas correspondientes fueron del 52% y el 39% para los pacientes en estadio II y el 42% y el 26% para la fase III [3]. Además del estadio de la enfermedad, varios estudios han examinado los perfiles de expresión génica en el CPNM, la identificación de los subtipos moleculares asociados a la evolución del paciente [4], [5], [6], [7]. la expresión génica firmas que van de cinco a 64 genes han sido identificados [6], [7], y las comparaciones entre estudios han revelado significativo, aunque el acuerdo de los patrones de predicción de resultados incompletos, [4]. Por otra parte, la capacidad de interpretar el significado de los genes individuales en estas firmas sigue siendo un reto [8]. Las firmas de expresión génica genes identificados mayoría relacionados con la metástasis del cáncer [6], pero no describieron genes implicados en las vías de reparación del ADN.
Los estudios preclínicos han demostrado que una deficiencia en cualquiera de los más de 30 genes que participan en la la reparación por escisión de nucleótidos vía (NER) confiere una marcada hipersensibilidad a cisplatino [9]. Hacer hipótesis de que niveles elevados de genes NER podrían ser no sólo los marcadores pronósticos predictivos, sino también, que elegimos para examinar los siguientes genes, basado en los informes anteriores de su valor predictivo: reparación por escisión de complementación cruzada 1 (ERCC1) [10], BRCA1 [11 ], homólogo humano de levadura en ciernes desinhibido por bencimidazol (BubR1) [12], [13], [14], con dedos de zinc mieloide 1 (MZF1) [15], [16], [17], ribonucleótido subunidad reductasa M1 (RRM1 ) [18], [19], [20], tiorredoxina-1 (TRX1) [21], [22], la fosfodiesterasa tirosil-ADN (Tdp1) [23], [24], [25]. Además, se analizó la torcedura [26], [27] y factor nuclear de células T activadas (NFAT) [28], [29], que están involucrados en el proceso de invasión de metástasis. (Para más detalles sobre los nueve genes examinados se pueden encontrar en el texto S1.)
Ninguno de estos nueve genes han sido identificados en los perfiles de expresión de genes asociados con la evolución de los pacientes NSCLC [4], [5], [6] , [7], con la excepción de TRX1, que se identificó por análisis proteómico y asociada con un mal supervivencia [21]. Con el fin de arrojar luz sobre el valor pronóstico de estos genes, hemos examinado su expresión por PCR en tiempo real de la transcriptasa inversa cuantitativa (RT-PCR) en 126 pacientes con CPNM resecados completamente y que no recibieron quimioterapia adyuvante y se correlacionaron los resultados con la supervivencia.
Métodos
los pacientes
CPNM muestras se obtuvieron de 126 pacientes consecutivos que fueron sometidos a resección pulmonar curativa de la Universidad médica de Gdansk (Gdansk, Polonia) entre 2000 y 2004, después de obtener la aprobación de la junta de revisión institucional de la Universidad de Medicina de Gdansk y firmado el consentimiento informado de los pacientes. Los pacientes fueron 98 hombres y 28 mujeres, con edad de diagnóstico que van desde 37 a 77 años (edad media, 64 años). Setenta y un pacientes tenían enfermedad en estadio I, 33 en estadio II, y 22 en estadio IIIA. Veintisiete pacientes habían pobremente diferenciados, 74 moderadamente diferenciado, y 9 NSCLC bien diferenciado; los 16 pacientes restantes fueron no especificado. Ochenta pacientes eran fumadores, 39 ex fumadores, y los restantes siete que nunca habían fumado. Ciento veintidós pacientes fueron sometidos a lobectomía pulmonar o más formales, con la sistemática del mediastino ipsilateral disección de los ganglios linfáticos; los cuatro pacientes restantes se sometieron a segmentectomıa debido a la mala reserva pulmonar. Las etapas se determinaron después de la evaluación patológica de muestras resecadas de acuerdo con el Sistema Internacional para la estadificación del cáncer de pulmón [30] (Tabla S1). Ninguno de los pacientes recibió quimioterapia adyuvante.
Hemos validado el valor pronóstico de BRCA1 en 58 pacientes en estadio IB-IIB de NSCLC que habían sido sometidos a resección quirúrgica en la Azienda Ospedaliera Santa María (Terni, Italia) entre febrero de 1997 y diciembre de 2003 , después de obtener la aprobación de la junta de revisión institucional de Azienda Ospedaliera Santa María y el consentimiento informado firmado de los pacientes. Características de los pacientes se muestran en la Tabla S1.
se obtuvieron
La expresión génica análisis
Las muestras tumorales de los 126 pacientes durante la cirugía como bloques de 1cm3 y se congelaron en nitrógeno líquido. Los tejidos se almacenan en -80 ° C hasta que el ARN total se extrajo con kits AllPrep (Qiagen, Valencia, CA). Sólo las muestras tumorales que contienen más de 60% de tejido tumoral en una sección microscópica fueron elegibles para su posterior procesamiento. La concentración de ARN se evaluó en Nano-drop ™ y la calidad de ARN obtenido se analizó en gel de agarosa. Primera línea de cDNA fue sintetizado a partir de 1 g de ARN total usando la alta capacidad de cDNA Archivo Kit (Applied Biosystems, Foster City, CA). Los nueve genes examinados se muestran en la Tabla 1. Reacciones RT-PCR cuantitativa de cada gen se realizaron en un ABI PRISM 7900 Sequence Detection System HT (Applied Biosystems).
valores de expresión génica relativa se calcularon el método ΔΔCt utilizando el Sistema de Detección de Secuencia (SDS) de software 2.1 (Applied Biosystems). El método ΔΔCt da la cantidad de gen diana normalizada a un gen endógeno de referencia (ribosomal 18S del RNA) y con relación a un calibrador de muestra (de referencia para todas las muestras;. Disponible en el mercado normal de pulmón y el ARN de hígado humano (Stratagene, La Jolla, CA) Primers para los nueve genes se enumeran en la Tabla S2.
ERCC1, y RRM1 gen BRCA1 expresión se evaluó en muestras quirúrgicas, incluidas en parafina fijadas con formalina de los 58 pacientes en la cohorte de validación. Utilizando una técnica de captura de microdisección por láser ( palma Microlaser, Oberlensheim, Alemania) garantiza un mínimo de 80% del tejido del tumor. Después de tejido estándar desparafinación muestra usando xileno y alcoholes, las muestras se lisaron en un tampón Tris-cloruro, EDTA, dodecil sulfato de sodio (SDS) y proteinasa K tampón que contiene. a continuación, el ARN se extrajo con alcohol de fenol-cloroformo-isoamilo, seguido de precipitación con isopropanol en presencia de glucógeno y acetato de sodio. el ARN se resuspendió en agua DEPC (Ambion Inc, Austin TX, EE.UU.) y se trató con DNasa I (Ambion Inc) a evitar la contaminación de ADN. El ADNc se sintetizó usando la enzima retrotranscriptasa M-MLV. Molde de cDNA se añadió a Taqman Universal Master Mix (Applied Biosystems) en una reacción de 12,5 l con cebadores específicos y sonda de cada gen. Los conjuntos de cebador y sonda eran idénticos a los utilizados en las muestras congeladas; el gen endógeno de referencia era β-actina. La cuantificación de la expresión génica se realizó utilizando el sistema ABI Prism 7900HT de detección de secuencias (Applied Biosystems).
Los análisis estadísticos
Los valores medios y rangos fueron derivados para las variables cuantitativas y la expresión génica ARNm. Las variables cualitativas se resumieron mediante frecuencias absolutas y porcentajes. Se utilizó la prueba de Kruskal-Wallis para comprobar la normalidad. Las diferencias en la mediana de los niveles de expresión de ARNm entre los tipos histológicos se evaluaron mediante la prueba U de Mann-Whitney. coeficiente de rango de correlación de Spearman (rho) se utilizó para medir las correlaciones entre los niveles de expresión génica. Hicimos un
a priori
decisión de clasificar los niveles de mRNA de expresión genética como altas o bajas, utilizando el método de mínimo valor de p modificado por Lausen y Schumacher [31]. El método de Bonferroni se utiliza para la corrección del efecto de comparaciones múltiples, y los valores de p empíricos para cada gen se confirmó a través de 5000 pruebas de permutación. Cuando se encontró ningún punto de corte óptimo, se utilizó la mediana de la muestra para el análisis del tiempo hasta la recaída y la supervivencia. Tiempo hasta la recaída y la supervivencia se calcularon utilizando las estimaciones de Kaplan-Meier y las diferencias entre las curvas se analizaron utilizando la prueba de log-rank. Para elegir un subconjunto adecuado de los genes para la asociación con ninguna variable clínica (histología, estadio y grado), se realizó un análisis de regresión de Cox hacia adelante y hacia atrás. Para todos los cálculos, las pruebas realizadas fueron de dos caras, de significación se fijó en el 5%, y la potencia fue del 80%. Los análisis se realizaron utilizando el paquete estadístico para las Ciencias Sociales (SPSS) para Windows versión 14 (SPSS Inc, Chicago, IL) y S-Plus 6.1 para Windows.
Resultados
Los valores medios de cada gen para todo el grupo de muestras se muestran en la Tabla S3. La amplificación génica no tuvo éxito en una minoría de muestras para cada transcripción analizado. Hubo diferencias significativas en la expresión de acuerdo con la histología para todos los genes, excepto NFAT, con niveles más altos observados en los carcinomas de células escamosas que en adenocarcinomas (Tabla 2). No hubo diferencias en la expresión génica de acuerdo con la etapa (Tabla S4). Se observó una fuerte correlación entre los niveles de expresión de diferentes genes, por ejemplo, entre los niveles de TRX y RRM1 (rho = 0,52; P = 0,0003) y entre ERCC1 y BRCA1 (rho = 0,62; P = 0,0001) (Tabla 3)
Con una mediana de seguimiento de 29,7 meses (rango, 1.7-65.9 meses), libre de eventos en general y la mediana de supervivencia no se han alcanzado. Cuando se analizó libre de eventos y la mediana de supervivencia de acuerdo con los niveles de expresión de nueve genes, BRCA1 y TRX mostraron diferencias significativas. supervivencia libre de eventos para 21 pacientes con bajos niveles de TRX no se ha alcanzado, mientras que fue de 32 meses (IC del 95%,) para los 93 pacientes restantes con niveles altos (P = 0,02). Para 77 pacientes con bajos niveles de BRCA1, no se ha alcanzado la supervivencia libre de eventos, mientras que fue de 22 meses (IC del 95%, 14.9-29 meses) para los que tienen niveles altos (P = 0,04) (Tabla S5, Fig. 1 ). Las curvas de supervivencia libre de eventos de acuerdo a la expresión de los otros siete genes se muestran en la Figura S1. La mediana de supervivencia de 24 pacientes con niveles bajos TRX no se ha alcanzado, mientras que fue de 39 meses para los 101 pacientes restantes con niveles altos (P = 0,03). Para 83 pacientes con bajos niveles de BRCA1, la mediana de supervivencia no se ha alcanzado, mientras que fue de 29 meses (IC del 95%, 22.2-35.7 meses) para aquellos con niveles más altos (P = 0,04) (Tabla 4, Fig. 1). La mediana de las curvas de supervivencia según la expresión de los otros siete genes se muestran en la Figura S2. Sin embargo, cuando se examinaron solamente pacientes en estadio I, la supervivencia libre de eventos fue significativamente diferente de acuerdo a los niveles de expresión de MZF1 y BRCA1 (Tabla S6, Fig. S3), y la mediana de supervivencia fue significativamente diferente de acuerdo a los niveles de expresión de ERCC1, MZF1, Torsión y BRCA1 (Tabla S7, Fig. S4).
libre de eventos (a, B) y la mediana (C, D) la supervivencia según la expresión de TRX (a, C) y BRCA1 (B, D) .
El modelo de riesgo proporcional de Cox seleccionado IIIA estadio patológico y la expresión de BRCA1 como factores pronósticos independientes para la supervivencia. La razón de riesgo (HR) fue 7,91 (IC del 95%, 2,27-27,54; p = 0,001) en la fase III y 1,98 (IC del 95%, 1,11-6); P = 0,02) para la expresión de BRCA1 (Tabla S8).
Validación de BRCA1
La mediana de seguimiento de los 58 pacientes en la cohorte de validación fue de 40 meses. De acuerdo con el modelo de riesgos proporcionales de Cox, el HR para los pacientes con altos niveles de BRCA1 fue de 2,4 (IC 95%, 1,01 a 5,92; P = 0,04). No hubo pacientes en estadio IIIA en esta cohorte.
Discusión
Gene firmas de expresión se ha demostrado para predecir el resultado, resecado en estadio I NSCLC [5], [6], Sin embargo, el uso de microarrays es limitado debido a la necesidad de que el tejido fresco congelado. RT-qPCR que implica un pequeño número de genes ofrece una alternativa práctica, lo que permite la cuantificación exacta y reproducible de los resultados para el ARN obtenido a partir de pequeñas cantidades de muestras incluidas en parafina. Los resultados de RT-QPCR realizaron en cinco [7] y ocho [32] genes correlacionados con los resultados de NSCLC [7] y el adenocarcinoma de pulmón [32] pacientes. Hemos examinado la expresión de ERCC1, BRCA1, BubR1, MZF1, RRM1, TRX1 y Tdp1, que participan en vías de reparación del ADN, y de Twist y NFAT, relacionada con la formación de metástasis. En el modelo multivariado, sólo el BRCA1 y el estadio IIIA se identificaron como variables pronósticas independientes. En una cohorte de validación independiente de 58 pacientes en estadio IB-IIB NSCLC, BRCA1 fue confirmado como el único marcador pronóstico independiente.
Los pacientes cuyos tumores tenían una expresión de alto BRCA1 tenían una supervivencia significativamente peor y debe ser candidatos para la quimioterapia adyuvante.
in vitro
estudios han demostrado que los genes BRCA1 puede regular la sensibilidad diferencial a diferentes clases de agentes de quimioterapia [33]. La ausencia de los resultados de BRCA1 en una alta sensibilidad al cisplatino, mientras que su presencia aumenta la sensibilidad a agentes antimicrotúbulos [33]. Por lo tanto, creemos que los pacientes con los más altos niveles de expresión deben recibir antimicrotubular, la quimioterapia no basada en platino. Hemos llevado a cabo un estudio piloto de la quimioterapia adyuvante personalizada en base a los niveles de ARNm de BRCA1 en 88 etapas completamente resecado en estadio II-IIIA pacientes con CPNM, donde los que tienen los más altos niveles de expresión recibieron docetaxel adyuvante y aquellos con niveles más bajos recibido quimioterapia basada en cisplatino. El análisis intermedio muestra que la supervivencia libre de eventos es similar en ambos grupos. Estos hallazgos apoyan nuestros hallazgos previos en pacientes en estadio II-IIIA que recibieron neoadyuvante gemcitabina /cisplatino, donde aquellos con los niveles más altos de BRCA1 tuvieron una supervivencia pésimo de 12 meses [11].
No hay diferencias en los niveles de expresión de cualquier de los nueve genes se observó de acuerdo con el escenario o el tamaño del tumor (& lt; 4 vs & gt; 4 cms). Sin embargo, de todos los nueve genes examinados, sólo el BRCA1 mostró una tendencia a influir en la supervivencia de acuerdo con el tamaño del tumor. En el estadio I de NSCLC pacientes, la supervivencia ha sido inversamente correlacionado con el tamaño del tumor [34]. En el presente estudio, el análisis de supervivencia univariante mostró que, además de BRCA1, ERCC1 y MZF1 influidas significativamente la supervivencia en la etapa I (Tabla S7, Fig. S4). Estos resultados ponen de relieve el papel potencial de ERCC1 y MZF1, que son altamente correlacionado con el BRCA1, como fuertes marcadores pronósticos en la etapa I NSCLC. Como era de esperar, sin embargo, teniendo en cuenta la alta correlación entre los niveles de expresión de estos tres genes (Tabla 3), cuando se combinaron los tres genes, no se observó una mejora adicional sobre el valor pronóstico de BRCA1 solo.
Aunque el mecanismos por los cuales algunos de los nueve genes examinados afectan el pronóstico del paciente no es muy claro, la sobreexpresión de ERCC1 y RRM1 parece estar impulsado por el oncogén [35], [36], [37], [38], [39]. metilación BRCA1 y abrogación de ARNm de BRCA1 se ha encontrado en cánceres esporádicos de mama [40], pero muy raramente en NSCLC [41]. En algunos tipos de cáncer de mama esporádicos, el pobre resultado asociado con la metilación BRCA1 y bajos niveles de expresión podría explicarse por la amplificación MYC [42].
Otros estudios, utilizando el anticuerpo monoclonal 8F1 [43] han informado de que la presencia de la proteína ERCC1 es un marcador pronóstico de supervivencia en CPCNP en estadio temprano y un predictor del resultado a la quimioterapia adyuvante basada en cisplatino; Sin embargo, en un estudio previo en el cáncer gástrico [44], no estaba claro si la pobre respuesta clínica de los pacientes cuyos tumores tenían alta pretratamiento niveles de ARNm de ERCC1 resultado de la resistencia de las células tumorales a la quimioterapia basada en cisplatino o de una biología de los tumores más agresivos. Por otra parte, en los fibroblastos humanos normales ERCC1-positivas y las células de pacientes con mutaciones heredadas en ERCC1, ERCC1 no es el antígeno director reconocido por el anticuerpo 8F1 en inmunotinción [45]. Por otra parte, en otro estudio, el estado de la proteína ERCC1 no se correlacionó con la supervivencia en NSCLC en estadio IV [46], mientras que en un ensayo de cisplatino personalizada en base a la expresión de ERCC1 mRNA, la tasa de respuesta fue del 39% en el grupo control y el 50% en el personalizada brazo (P = 0,02) [47].
En resumen, nuestro estudio indica que en primer lugar, BRCA1 está estrechamente relacionado con ERCC1, RRM1 y otros genes como MZF1, pero se destaca como el marcador de pronóstico más significativo de recaída . Nuestra hipótesis es que los pacientes con niveles altos de BRCA1 se beneficiarán de la quimioterapia basada en cisplatino-basados-antimicrotubular, pero no. En segundo lugar, los altos niveles de estas transcripciones confieren un mayor riesgo de recaída, en contraste con lo que ha sido reportado por otros investigadores, que pone de relieve la necesidad de una mayor investigación en esta área para dilucidar el papel predictivo de estos genes relacionados con NER-y personalizar correctamente tratamiento (Fig. S5). A pesar de que la población de nuestro estudio fue sesgada a los hombres fumadores con carcinoma de células escamosas, nuestros resultados justifican investigaciones adicionales para confirmar su aplicabilidad a otros subgrupos histológicos de NSCLC, Con el fin de arrojar más luz sobre estas cuestiones, estamos planeando para examinar BRCA1, ERCC1 , MZF1 y RRM1 expresión en 200 muestras de tumor a partir del estudio ANITA [3] y en 620 pacientes incluidos en el ensayo español Grupo de pulmón el cáncer de NATCH de neoadyuvante vs quimioterapia adyuvante frente a la cirugía sola.
Apoyo a la Información
figura S1.
libre de eventos de supervivencia de acuerdo con la expresión de ERCC1 (A), MZF1 (B), Twist (C), RRM1 (D), Tdp1 (E), NFAT (F), y BubR1 (G)
doi: 10.1371 /journal.pone.0001129.s001 gratis (0.09 MB TIF)
figura S2.
La mediana de supervivencia de acuerdo con la expresión de ERCC1 (A), MZF1 (B), Twist (C), RRM1 (D), Tdp1 (E), NFAT (F), y BubR1 (G)
doi: 10.1371 /journal.pone.0001129.s002 gratis (0.09 MB TIF)
Figura S3.
curvas de supervivencia libre de eventos para los pacientes en estadio I de acuerdo con los niveles de expresión génica de los nueve genes examinados
doi: 10.1371 /journal.pone.0001129.s003 gratis (0.10 MB TIF)
figura S4.
curvas de supervivencia media para los pacientes en estadio I de acuerdo con los niveles de expresión génica de los nueve genes examinados
doi: 10.1371 /journal.pone.0001129.s004 gratis (0.10 MB TIF)
Figura S5.
obtención de resultados contradictorios que conduce a estrategias opuestas de la personalización de la quimioterapia adyuvante. Olaussen et al (NEJM 2006; 355: 983-991) informan que la falta de ERCC1protein implica un mayor riesgo de recaída y una mayor sensibilidad a la quimioterapia basada en cisplatino. (Sensibilidad cisplatino basado en la falta de expresión ERCC1 se ha demostrado en estudios preclínicos y clínicos.) Nuestros hallazgos indican que un mayor riesgo de recaída se relaciona con altos niveles de varias transcripciones, incluyendo ERCC1. Estos pacientes podrían ser resistentes a cisplatino y sensible a los taxanos u otras drogas antimicrotúbulos
doi: 10.1371 /journal.pone.0001129.s005 gratis (0.13 MB TIF)
Tabla S1.
Características de los pacientes de la cohorte principales (N = 126) y para la cohorte de validación (N = 58)
doi: 10.1371 /journal.pone.0001129.s006 gratis (DOC 0,04 MB)
Tabla S2.
Los cebadores y sondas para los nueve genes examinados
doi: 10.1371 /journal.pone.0001129.s007 gratis (DOC 0,03 MB)
cuadro S3.
valores de genes de expresión relativa
doi: 10.1371 /journal.pone.0001129.s008 gratis (DOC 0,03 MB)
Tabla S4.
expresión génica según la etapa de la enfermedad
doi: 10.1371 /journal.pone.0001129.s009 gratis (DOC 0,04 MB) sobre Table S5.
libre de eventos de supervivencia de acuerdo con los niveles de expresión de genes
doi: 10.1371 /journal.pone.0001129.s010 gratis (DOC 0,06 MB)
Tabla S6.
libre Evento supervivencia en pacientes en estadio I de acuerdo con los niveles de expresión de genes
doi: 10.1371 /journal.pone.0001129.s011 gratis (DOC 0,06 MB)
Tabla S7.
La mediana de supervivencia para los pacientes en estadio I de acuerdo con los niveles de expresión de genes
doi: 10.1371 /journal.pone.0001129.s012 gratis (0.06 MB DOC)
Tabla S8.
modelo multivariante de Cox para la supervivencia, que muestra un mayor riesgo de muerte en pacientes con altos niveles de BRCA1 y para aquellos con enfermedad en estadio IIIA
doi: 10.1371 /journal.pone.0001129.s013 gratis (DOC 0,03 MB )
Texto S1.
más detalles sobre los nueve genes examinados
doi: 10.1371 /journal.pone.0001129.s014 gratis (0.09 MB DOC)