Enfermedad
Extracto
Antecedentes
Las consecuencias de la recombinación homóloga defectuoso (HR) no se entiende en el cáncer de ovario esporádico, ni tienen el potencial papel de las proteínas de recursos humanos distintos de los genes BRCA1 y BRCA2 sido claramente definido. Sin embargo, es evidente que los defectos en HR y otras vías de reparación del ADN son importantes para la eficacia de las terapias actuales. Nuestra hipótesis es que un subconjunto de carcinomas de ovario esporádicos pueden albergar anomalías en las vías de recursos humanos, y que un perfil BRCAness (defectos de recursos humanos u otras vías de reparación del ADN) podría influir en la tasa de respuesta y la supervivencia después del tratamiento con fármacos de platino. disponibilidad clínica de un perfil BRCAness en los pacientes y /o tumores debería mejorar los resultados del tratamiento.
Objetivo
Para definir el perfil BRCAness del carcinoma de ovario esporádico y determinar si BRCA1, PARP, FANCD2, PTEN, H2AX, cajeros automáticos, y la proteína P53 expresión se correlaciona con la respuesta al tratamiento, la recurrencia de la enfermedad y la supervivencia libre de recidiva.
se utilizó Materiales y Métodos
El análisis de proteínas microarrays de tejido de cáncer de ovario para determinar proteínas los niveles de expresión de las proteínas de reparación del ADN definidas. La correlación con parámetros clínicos y patológicos en 186 pacientes con estadio III-IV avanzada y de grado 3 se analizó el cáncer de ovario usando Chi cuadrado, el método de Kaplan-Meier, Cox modelo de riesgo proporcional, y la función de incidencia acumulada.
Resultados
alta PARP, FANCD2 y expresiones BRCA1 se correlacionaron significativamente con los demás; Sin embargo, la expresión de p53 elevada sólo se asoció con una alta PARP y FANCD2. De todos los pacientes, se repitió el 9% en el primer año. Entre los pacientes recurrentes tempranos, 41% tenían altos niveles de PARP, FANCD2 y P53, en comparación con 19,5% de los pacientes sin recidiva temprana (p = 0,04). Las mujeres con altos niveles de PARP, FANCD2 y /o P53 tenían primer año la incidencia de cáncer acumulada de 17% en comparación con el 7% para los otros grupos (p = 0,03).
Conclusiones
Los pacientes con concomitantemente altos niveles de PARP, FANCD2 y expresión de la proteína P53 están en mayor riesgo de recurrencia temprana del cáncer de ovario y de resistencia de platino
Visto:. Wysham WZ, Mhawech-Fauceglia P, Li H, L Hays, siríaco S, Skrepnik T, et al. (2012) BRCAness Perfil de cáncer de ovario esporádico predice la recurrencia de la enfermedad. PLoS ONE 7 (1): e30042. doi: 10.1371 /journal.pone.0030042
Editor: Jun Li, Escuela de Medicina de la Universidad Sun Yat-sen, China
Recibido: May 9, 2011; Aceptado: December 8, 2011; Publicado: 11 Enero 2012
Derechos de Autor © 2012 Wysham et al. Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos de la licencia Creative Commons Attribution License, que permite el uso ilimitado, distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que el autor original y la fuente se acreditan
Financiación:. Este estudio fue apoyado por el (SHOC) Fundación Sherie Hildreth cáncer de ovario. Los donantes no tenía papel en el diseño del estudio, la recogida y análisis de datos, decisión a publicar, o la preparación del manuscrito
Conflicto de intereses:.. Los autores han declarado que no existen intereses en competencia
Introducción
el cáncer de ovario es el segundo cáncer ginecológico más frecuente y la causa más común de muerte entre las mujeres con un cáncer ginecológico. Unos 21.000 casos de cáncer de ovario se diagnostican cada año, y alrededor de 14.000 muertes por cáncer de ovario se producen cada año [1]. A pesar de las mejoras se han realizado en los últimos decenios para extender la esperanza de vida media tras el diagnóstico de cáncer de ovario, menos del 30% de los pacientes se pueden curar con citorreducción quirúrgica óptima y la quimioterapia adyuvante estándar con un agente que contiene platino, y la supervivencia a largo plazo tiene no mejorado [2].
los pacientes con mutaciones de BRCA1 o BRCA2, genes implicados en la reparación de roturas de la doble hebra de ADN por recombinación homóloga (HR), han aumentado la sensibilidad a la quimioterapia platino, mejorando así su supervivencia global resultado [3] - [5]. Además, las células con defectos preexistentes en la vía de recursos humanos (BRCA 1 o BRCA 2 mutaciones) pueden ser dirigidos por un segundo golpe en la forma de una inhibición de la reparación por escisión de base vía (BER), que conduce a la muerte celular. Este concepto de letalidad sintética - la combinación de dos alteraciones genéticas, que por sí solos no son letales, pero juntos dan como resultado un fenotipo letal - llevó a interés en los inhibidores de las vías de BER. Un tal inhibidor de la BER es el inhibidor de la poli-ADP ribosa polimerasa (PARP), que hace que las células deficientes de recursos humanos particularmente sensibles a la lesión de ADN inducida por la quimioterapia [6] - [8]. Mientras que las células normales pueden reparar el daño y sobrevivir, las células deficientes en BRCA-no pueden activar el sistema de recursos humanos y por lo tanto han de morir (6). Los inhibidores de PARP han demostrado resultados prometedores en pacientes con cáncer de ovario BRCA1 o BRCA2 positivos [9] - [11].
Mientras que sólo el 10-15% de las mujeres con cáncer de ovario tienen mutaciones BRCA1 o BRCA2 de la línea germinal, reciente los datos sugieren que los cánceres ováricos esporádicos pueden albergar adquirida defectos genéticos y epigenéticos en BRCA y en otros genes y proteínas de reparación del ADN, como PTEN, RAD51, y la anemia de Fanconi (FA) genes [7], que pueden contribuir a la "perfil BRCAness" . Dado el papel compartida que BRCA1 y BRCA2 tienen con otros genes de reparación del ADN, los defectos en estas otras proteínas de reparación del ADN por sí sola podría influir en la respuesta al tratamiento, las tasas de recidiva y la supervivencia global y aumentar la sensibilidad a los inhibidores de PARP. El reto es definir perfiles BRCAness en cáncer de ovario esporádico y correlacionar esto con el resultado clínico.
Por lo tanto, el objetivo de este estudio es definir el perfil BRCAness de cáncer de ovario esporádico. Específicamente nuestro propósito es determinar si la expresión de proteínas de reparación del ADN, incluyendo la PARP, FANCD2, BRCA1, PTEN, H2AX, cajeros automáticos, así como p53, en correlación con la respuesta al tratamiento, la tasa de recurrencia y la supervivencia en el cáncer de ovario.
Materiales y Métodos
Ética Declaración
a todos los pacientes se sometieron a la estadificación del cáncer de ovario o de la cirugía de reducción de volumen en el Instituto del cáncer Roswell Park en Buffalo, Nueva York. Todas las muestras de patología fueron recogidos y revisados en nuestra institución, y los tumores fueron clasificados de acuerdo a criterios de la OMS [12]. Las historias clínicas de los pacientes fueron revisados a posteriori en virtud de un protocolo de Roswell Park Cancer Institute Junta de Revisión Institucional aprobado requiere de autorización por escrito del paciente. La revisión incluyó resultados del tratamiento y para pacientes hospitalizados, incluyendo la cirugía y la quimioterapia. la supervivencia y el tiempo hasta la progresión se determinaron En general, cada miden desde el momento del diagnóstico (en la cirugía inicial). La progresión se definió como evidencia objetiva de recurrencia. La duración de la supervivencia global fue el intervalo entre el diagnóstico y la muerte. El tiempo de observación fue el intervalo entre el diagnóstico y el último contacto (muerte o el último seguimiento). Los datos fueron censurados en la última visita de seguimiento para los pacientes sin evidencia de recurrencia, progresión o muerte.
Los anticuerpos
Se utilizaron seis anticuerpos monoclonales primarios disponibles comercialmente, específica para ATM (Abcam, Boston, MA), BRCA1 (laboratorio Biocare, Concord, CA), FANCD2 (Epitomics, San Francisco, CA), PARP (Abcam), p53 (Novacastra, Lica Microsystems, Buffalo Grove, IL), PTEN (Millipore, Billerica, MA ), y un anticuerpo policlonal para H2AX (Bethyl Laboratories, Montgomery, TX) (Tabla 1). La detección se realizó utilizando el método del complejo avidina-biotina-peroxidasa (LASB-kit, DakoCytomation, Glostrup, Dinamarca).
Tissue microarrays de tejidos Preparación
embebidos en parafina-de 202 pacientes con cáncer de ovario se utilizaron para construir microarrays de tejidos como se describe anteriormente por Kononen et al. [13]. En pocas palabras, la elección después de una cuidadosa la región morfológicamente representante de la hematoxilina-eosina sección (HE), 0,6 núcleos mm fueron perforados de los bloques individuales incluidas en parafina (bloques donantes), y se transfieren al bloque embebido en parafina receptor (bloque receptor). Para superar la heterogeneidad del tumor, las biopsias se realizaron a partir de tres diferentes áreas de cada tumor. Una de las secciones se tiñeron con H & amp; E para confirmar la presencia del tumor mediante microscopía de luz
Las secciones fueron incubadas con anticuerpos frente a ATM, BRCA1, FANCD2, PTEN, H2AX, PARP, y p53 (Tabla 1).. El polímero marcado con enzima HRP libre de biotina del sistema de detección Plus Envision (DakoCytomation) se utilizó como un reactivo secundario. El complejo se utilizó diaminobencidina como cromógeno. Como control positivo, se utilizó adenocarcinoma endometrioide del endometrio para PTEN, carcinoma de ovario seroso para p53, carcinoma de mama para PARP, ATM y BRCA1, amígdala normal para FANCD2, y carcinoma de células escamosas de H2AX. Para los controles negativos, un suero de cabra normal se utiliza en lugar del anticuerpo primario. El grado de reactividad inmunoquímica se clasificó basándose en la intensidad de la siguiente manera: 0 (de fondo), 1+ (luz), 2+ (moderada), 3+ (fuerte). Control negativo diapositivas omitiendo el anticuerpo primario se incluyeron en todos los ensayos
Análisis estadísticos
Los análisis estadísticos se realizaron utilizando el software estadístico SAS. (versión 9.2; SAS Institute Inc, Cary, NC). Las siete proteínas de reparación del ADN (perfil BRCAness) se midieron al inicio del estudio y se agruparon como negativos (sin tinción o luz) y (tinción moderada o fuerte) positiva basada en la intensidad de la tinción. Las asociaciones entre el estado basal del cáncer (grado, estadio, tipo histológico, y la presencia de tumor residual) y el perfil BRCAness y las asociaciones entre p53, PARP, FANCD2 y BRCA1 fueron examinadas usando el Chi cuadrado y pruebas de tendencia de Cochran Armitage.
Cuando sea posible, se examinó el tiempo desde el diagnóstico hasta la progresión /recidiva dentro de los primeros 3 años. Los pacientes que murieron dentro de los 3 años fueron censurados en el momento de la muerte, y los pacientes que tuvieron recurrencia después de 3 años o que no tuvieron recurrencia también fueron censurados en 3 años. La correlación de cada intensidad de la tinción de proteínas y concurrencia de múltiples niveles altos de proteínas con la supervivencia libre de recurrencia de 3 años se evaluaron utilizando el método de Kaplan-Meier (KM). Los resultados del método de KM fueron verificadas luego por tasas de incidencia acumulada con el evento se define como la recurrencia y el riesgo competitivo se define como la muerte no recurrencia utilizando la función de incidencia acumulada [14]. La edad y el estado del cáncer razón de riesgo ajustada de recurrencia de 3 años se estimó utilizando el modelo de riesgos proporcionales de Cox. Asociación entre la concurrencia de múltiples niveles altos de proteínas y el estado de recidiva a los 6 meses y 1 año, también se investigaron. Todos los p-valores reportados son de doble cara, y un valor de p. & Lt; 0,05 fue considerado estadísticamente significativo
Resultados
Características de los pacientes al inicio del estudio se resumen en la Tabla 2. Un total de 186 de se estudiaron 202 pacientes. La edad media de la población estudiada fue de 62 años (rango 33 a 89) y la duración mediana de seguimiento de recurrencia fue de 22 meses (rango de 20 días a 3 años). Como era de esperar, la mayoría de los pacientes había pobremente diferenciado, cánceres de grado 3 (161/186, 86,6%), en estadio III o IV (174/186, 93,5%), y la histología serosa (164/186, 88,2%). En la cirugía 59 pacientes no tenían enfermedad residual, mientras que 125 pacientes tenían al menos una mínima enfermedad residual. Todos los pacientes recibieron quimioterapia de primera línea basada en platino. La supervivencia global estimada mediana para todos los pacientes fue de 40,7 meses (IC del 95%, 36.8-45.0 meses). La supervivencia entre los pacientes con ausencia de tumor residual (58,1%) y la presencia de tumor residual (59,7%) fueron similares.
La expresión de proteínas de reparación del ADN en el cáncer de ovario epitelial
La expresión de la proteína de ATM, FANCD2, PARP, PTEN, H2AX, BRCA1 y p53 en muestras de tumores epiteliales de ovario fue investigado por inmunocitoquímica y sus asociaciones con la recurrencia del cáncer de ovario en 3 años se resumen en la Tabla 3. PARP fue positivo en 111 (60%) de los casos, FANCD2 fue positivo en 68 casos (39%), H2AX fue positiva en 59% y p53 en el 55% de los casos. En contraste, la mayoría de los tumores fueron negativos para BRCA1 (87%), PTEN (en el 89%) y ATM (92%). Aunque no es estadísticamente significativa, KM estima supervivencia libre de recidiva de 3 años para los pacientes con alta PARP (56,5% vs. 67,5%) y alta FANCD2 (55,5% vs. 66,9%) tenían más de un 10% más bajos que sus contrapartes bajas de tinción. Los pacientes con altos niveles de PARP y /o FANCD2 eran más propensos a también han elevado p53, 66% tanto en positivo, el 53%, ya sea en positivo, y el 43% en los dos fueron declarados negativos tienen p53 positivo (p para la tendencia = 0,01, Figura 1). En general, se observó la expresión de cualquiera de FANCD2 o PARP en 35% de los especímenes. Co-expresión de PARP y FANCD2 se demostró en 56 de 173 (32%) muestras. Alta expresión de PARP, FANCD2 y BRCA1 se asociaron significativamente entre sí, mientras que no se encontró ninguna asociación entre los genes BRCA1 y p53 (datos no mostrados).
Asociación entre PARP, FANCD2, y P53. Los pacientes con PARP positivo o positivo FANCD2 eran más propensos a tener P53 positivo. Los pacientes positivos para ambos PARP y FANCD2 eran estadísticamente más propensos a manchar positiva para p53.
Correlación de FANCD2 y expresión de PARP con el resultado clínico
Los pacientes se dividieron en cinco mutuamente grupos exclusivos basados en su expresión de PARP, FANCD2, y p53 (Figura 2). Las muestras se tiñeron negativo para las tres proteínas en 31 pacientes (18%), positivo para p53 solo en 51 pacientes (30%), y positivo para FANCD2 y PARP sólo en 19 pacientes (11%). Más del 40% de los pacientes con PARP positivo y /o FANCD2 tenía sobreexpresión de la proteína p53, incluyendo 37 (22%) con la sobreexpresión de los 3 proteínas, y 32 (19%) con p53 y PARP o sobreexpresión FANCD2. KM estima curvas de supervivencia sin recidiva de 3 años para estos grupos mutuamente excluyentes de p53, PARP y FANCD2 se muestran en la Figura 3, y el impacto del perfil BRCAness sobre la supervivencia libre de recurrencia se muestra en la Tabla 4. Las diferencias en la supervivencia de más se observó que el 10% a los 12 meses y casi el 20% a los 24 meses entre el grupo con tinción positiva para las tres proteínas (p53, PARP y FANCD2) y el grupo con los tres tinción negativa. La supervivencia tendió hacia ser más corto en los tres grupos positivos en comparación con los otros grupos, aunque esto no fue estadísticamente significativo en este pequeño tamaño de la muestra (Figura 3A). Nosotros, los más estimados curvas de supervivencia de 3 años libre de recurrencia entre los pacientes con altos niveles de las tres proteínas (p53, PARP, FANCD2) y "otros" a los pacientes, como se muestra en la Figura 3B. Los pacientes con todos los niveles altos eran más propensos a tener recurrencia anterior dentro de los 3 años en comparación con el resto de los pacientes (p = 0,03). A los 12 meses después del diagnóstico, la supervivencia libre de recurrencia fue del 81% para todos los pacientes con niveles positivos de PARP, FANCD2 y p53, mientras que el resto de pacientes tuvieron una tasa de supervivencia libre de recurrencia del 92%. A los 18 meses, la supervivencia libre de recurrencia fue del 64% para el grupo con las tres proteínas positivas y 81% para todos los demás, y la tasa de incidencia de recurrencia acumulada fue del 16,5% para los pacientes con los altos niveles de PARP, FANCD2 y p53 en comparación con 31,8% para los demás pacientes. Los pacientes con altos niveles concomitantes de PARP, FANCD2 y p53 eran dos veces más propensos a tener recurrencia dentro de los 3 años, después del ajuste para la edad y el estado del cáncer en el momento del diagnóstico (tabla 4). El impacto potencial de tumor residual y otros factores clínicos de referencia sobre la recurrencia temprana se contabilizó usando el análisis multivariante. En particular, la presencia de tumor residual no se asoció con recurrencia de la enfermedad. Sin embargo, los pacientes con tumor residual después de la cirugía inicial tendían a tener PARP positivo, FANCD2, y la expresión de p53 en comparación con el grupo sin tumor residual (26% vs 14%, P = 0,07).
Distribución de cinco grupos mutuamente exclusivos de P53, PARP, y FANCD2. 37 pacientes (22%) fueron positivos para los tres de las proteínas.
de Kaplan-Meier estima curvas de supervivencia sin recidiva de 3 años. A: No hay diferencia en la supervivencia libre de recurrencia cuando cada uno de los 5 grupos que se excluyen mutuamente por la expresión de PARP, FANCD2, y P53 se examinaron de forma independiente. B: Los pacientes positivos para los tres PARP, FANCD2, y P53 tenían una menor supervivencia libre de recurrencia en comparación con los pacientes que no presenten los tres
En este estudio, se definió la enfermedad resistente al platino como. enfermedad recurrente dentro de los 12 meses de la finalización del tratamiento primario, al tiempo que reconoce que la definición más estándar marcaría resistencia de platino como la recurrencia después de 6 meses. Por lo tanto, la Figura 4 explora la expresión simultánea de PARP, FANCD2 y p53 en pacientes con y sin 6 meses y 12 meses de recurrencia. Entre los 4 pacientes que tuvieron recurrencia dentro de los 6 meses, 2 (50%) tuvieron los 3 positivos, mientras que 34 de 162 (21%) y sin recurrencia tenían los 3 niveles positivos. Entre los 17 pacientes que presentaron recidiva dentro del primer año del diagnóstico, aproximadamente el 41% (7/17) tenían tumores con niveles altos de los 3 proteínas, en comparación con 19% (29/149) con los 3 positivos en ningún grupo de recurrencia (P = 0,04). Por lo tanto, la recurrencia temprana, que es representativo de la enfermedad resistente al platino, parece estar caracterizada por altos niveles concomitantes de PARP, FANCD2 y p53.
Asociación entre P53 positivo, PARP, y FANCD2 en pacientes con y sin recidiva precoz . Los pacientes con recurrencia temprana tanto a los 6 y 12 meses después del diagnóstico eran mucho más propensos a tener altos niveles de los 3 proteínas (50% a los 6 meses y el 41,2% a los 12 meses).
Discusión
Recientemente, el papel de los genes de reparación del ADN y las proteínas en el cáncer de ovario, el concepto de BRCAness de los cánceres de ovario, así como el mecanismo de la letalidad sintética ha emergido como esencial para la comprensión de la patogénesis del cáncer de ovario y de las vías a nuevos tratamientos [7], [8]. Como el 20% de los carcinomas de ovario seroso de alto grado esporádicos tienen mutaciones BRCA1 y BRCA2, el papel de los recursos humanos en el cáncer de ovario ha sido bien establecida [15], [16]. Sin embargo, muchos tipos de cáncer de ovario hereditarios y esporádicos no poseen mutaciones BRCA o BRCA expresión alterada y por lo tanto que razonó que la pérdida de otras proteínas de recursos humanos puede contribuir al cáncer de ovario. De hecho, el silenciamiento epigenético de FANCF a través de la metilación del promotor [17] y niveles reducidos de FANCD2 [18] se han detectado previamente en el cáncer de ovario. Estamos motivados, además, que la sobreexpresión de proteínas diferentes de recursos humanos puede dar cuenta de platino-resistencia adquirida y por lo tanto puede ser utilizado como una pantalla potencial para (i) identificar los pacientes con un mayor riesgo de recurrencia y (ii) identificar nuevas dianas terapéuticas. Para medir la BRCAness (es decir, el HR) el perfil de los cánceres de ovario esporádicos, se utilizó inmunocitoquímica (ICH) para examinar la expresión de proteínas de las proteínas de respuesta al daño de ADN FANCD2, BRCA1, PARP, H2AX, y ATM, así como PTEN y p53, supresor de tumor genes que también tienen una función en el mantenimiento de la estabilidad genómica mediante la participación en la reparación del ADN [19] - [25]. en un panel de carcinomas de ovario esporádicos
Hasta donde sabemos, no ha habido un análisis sistemático previo de ATM y expresión H2AX en los cánceres de ovario. Aquí encontramos que las proteínas se expresaron en el 46% y el 59% de nuestras muestras, respectivamente, lo que puede indicar su expresión potencialmente compensatorio en células deficientes de recursos humanos.
Apoyar el papel de p53 y PTEN como supresores de tumores, la mayoría de los carcinomas de ovario ensayados fue positiva para p53 (55%), como el anticuerpo detecta tanto de tipo salvaje y las formas mutadas de p53, y negativo para la expresión de PTEN (89%). Estos resultados son similares a otros estudios con cánceres avanzados [21] - [22].
Curiosamente, hemos encontrado que el 86,7% de los casos tenían ICH BRCA1 negativo. La mayoría de los estudios previos sobre la deficiencia de BRCA1 en el cáncer de ovario esporádica se han centrado en el análisis mutacional, los estudios de metilación, y la expresión génica, con sólo unos pocos estudios de inmuno. Un reciente informe de Skytte et al. revelado negativo BRCA HIC en sólo el 20% de los cánceres de ovario [26]. Estas diferencias pueden ser explicadas por el uso de diferentes anticuerpos para detectar la proteína BRCA [27]. De hecho, en un estudio comparativo de 84 casos con cáncer de mama esporádico con cuatro anticuerpos anti-BRCA diferentes, Al-Mulla et al. pérdida detectado BRCA1 expresión de la proteína en el 83% de los casos utilizando el mismo anticuerpo BRCA AB-1, contra el epítopo N-terminal [28]. En el estudio NCIC que correlaciona la expresión de proteínas BRCA1 por ICH con los correspondientes datos clínicos, 251 muestras de cáncer de ovario se analizaron utilizando un anticuerpo BRCA1 monoclonal de ratón (MS110, Calbiochem, Alemania) y 65% de los tumores no mostró tinción o tinción muy leve [29 ]. El anticuerpo utilizado en nuestro estudio fue diferente de los anticuerpos utilizados en los estudios anteriores. Además, debido al tamaño pequeño de la muestra en nuestro estudio y de manera similar en el estudio NCIC, nuestra puntuación agrupó los resultados de la tinción de cuatro categorías a negativo (sin o débil) y positivo (moderada o fuerte) basado en intensidad de la tinción. Por lo tanto, sigue siendo necesario para futuros estudios para delinear claramente las directrices para la tinción de los genes BRCA1 y puntuación en los estudios de este marcador. Sin embargo, la pérdida de BRCA1 en la mayoría de los tumores en nuestro estudio, junto con el aumento de la expresión de PARP en la mayoría de los cánceres (véase más adelante) sugieren que la regulación al alza de la PARP puede ser un mecanismo compensatorio por las células cancerosas para resistir la muerte inducida por platino-terapia .
Nuestros resultados con PARP también son consistentes con estudios previos. Encontramos una alta expresión de PARP en el 60% de las muestras, de forma similar a los informes anteriores que sugieren una tinción positiva de proteína PARP en el 76% de los carcinomas de ovario [26]. Moderada tinción FANCD2 se encuentra en la mayoría etapa (85%) que los carcinomas serosos de ovario [Pejović, datos no publicados], mientras que en esta serie encontramos que el 40% de los carcinomas serosos avanzada sobreexpresan FANCD2. De este modo, la sobreexpresión de FANCD2, además de PARP puede aumentar la capacidad de las células para reparar el ADN de doble y de hebras simples contribuyen a la resistencia de platino.
La sinergia entre PARP, FANCD2 y la expresión de la proteína p53 es una de las sorprendentes Los resultados de nuestro estudio. Los tumores con elevada expresión de PARP y /o FANCD2 eran más propensos a mostrar la sobreexpresión de p53. El perfil de proteínas definida por la alta expresión de las tres proteínas PARP, FANCD2, y p53 se asocia con un alto riesgo de recurrencia. No sólo fue la tasa de recidiva a los tres años dos veces mayor en este grupo, pero es particularmente digno de mención que más de la mitad de los pacientes que se repiten dentro de los primeros 12 meses después del tratamiento primario (enfermedad resistente al platino) había elevado significativamente la expresión de estas tres proteínas. Este subgrupo de pacientes con particularmente difícil de tratar el cáncer de ovario no ha sido identificado previamente por la proteína u otro perfil molecular. Por lo tanto, estos resultados permiten tanto la identificación de las mujeres con mayor riesgo de recaída y sugieren posibles dianas terapéuticas. Recientemente, se han reportado resultados prometedores en un ensayo de fase II clínica del inhibidor de PARP BSI-201 (iniparib) en combinación con gemcitabina y carboplatino en 19 pacientes con cáncer de ovario resistente al platino [30].
Nuestro estudio tiene varias limitaciones . En primer lugar, aunque se examinaron 186 pacientes, esto sigue siendo un tamaño limitado de la muestra para todas las correlaciones clínicas auditadas. En segundo lugar, los pacientes que son portadoras de BRCA1 y BRCA2 mutación no se han identificado en este estudio. Las directrices estrictas para estudios de pronóstico utilizando inmunocitoquímica utilizando criterios estandarizados todavía se están desarrollando. También se examinaron sólo un subconjunto de proteínas de reparación del ADN, mientras que la inclusión de otras proteínas implicadas en la AR como ATR, CHK2 o RAD51, y los estudios funcionales de formación de RAD51 focos para evaluar la sensibilidad de estas células para PARP (y FANCD2) inhibición son actualmente en curso.
Finalmente, si bien creemos que los resultados más importantes de este estudio son: (i) la identificación de un perfil BRCAness que no está asociado con BRCA1 y (ii) la asociación de este tipo de cáncer de ovario triple positivo ( FANCD2 + /+ PARP /P53 +) con la recurrencia temprana de cáncer de ovario y por lo tanto la resistencia de platino. Estos pacientes pueden beneficiarse de la inhibición dual de FANCD2 y PARP y /o pequeñas moléculas diana de p53 mutado. De hecho, la inhibición de la vía /BRCA FA en los cánceres esporádicos de diferentes compuestos que incluyen circumin, se ha demostrado que sensibilizar a los cánceres a agentes de platino [31]. Por lo tanto, el tratamiento combinado de inhibidores de la vía FA /BRCA y los inhibidores de PARP que ya están en ensayos clínicos puede ser un tratamiento eficaz para los pacientes con recaída que han sido identificados para sobreexpresar FANCD2 y PARP.