Extracto
Antecedentes
La transformación del factor de crecimiento
(TGF) -β
vía de señalización, puede actuar tanto como un supresor de tumores y como promotor de tumores en el cáncer de páncreas, dependiendo del estadio del tumor y el contexto celular. vía de TGF-β ha sido objeto de investigación intensiva como una diana terapéutica potencial en el tratamiento del cáncer. La hipótesis de una correlación entre la expresión de TGF-βR2 /SMAD4 en el tumor, nivel ligando TGF-β1 en plasma, la variación genética en
TGF-B Opiniones vía y pronóstico del cáncer de páncreas.
Método
Hemos examinado TGF-βR2 expresión de proteínas y SMAD4 de biopsia o muestras quirúrgicas de 91 pacientes con adenocarcinoma ductal pancreático (PDAC) mediante inmunohistoquímica. niveles plasmáticos de TGF-β1 se midió en 644 pacientes con PDAC mediante ELISA. Veintiocho polimorfismos de nucleótido único (SNP) del
TGF-β1, TGF-β2, TGF-β3, TGF-βR1, TGF-βR2
, y
SMAD4
genes se determinaron en 1636 pacientes con PDAC utilizando el método de Sequenom. Correlación entre la expresión de la proteína en el tumor, de niveles en plasma de TGF-β1, y genotipos con la supervivencia global (SG) se evaluó con modelos de regresión proporcional de Cox.
Resultados
El nivel de expresión de TGF-βR2 y SMAD4 como marcador independiente no se asoció con el sistema operativo. Sin embargo, los pacientes con baja tanto la tinción nuclear de TGF-βR2 y alta tinción nuclear de SMAD4 pueden tener una mejor supervivencia (
P
= 0,06). La media y la mediana del nivel de TGF-β1 fue de 15,44 (DE: 10,99) y 12,61 (rango intercuartil: 8,31 a 19,04) ng /ml, respectivamente. Los pacientes con enfermedad avanzada y en el rango de cuartil superior del nivel de TGF-β1 habían reducido significativamente la supervivencia que aquellos con niveles bajos (
P
= 0,02). Una asociación significativa de
se observó SMAD4
rs113545983 SNP con la supervivencia global (
P Hotel & lt; 0,0001).
Conclusión
Nuestros datos proporciona una valiosa información de referencia con respecto a la vía de TGF-β en el cáncer de páncreas, que se puede utilizar en los ensayos clínicos de terapia dirigida. Alto nivel en plasma de TGF-β1,
SMAD4
SNP o proteína tumoral TGF-βR2 /SMAD4 expresión puede sugerir una dependencia de esta vía en pacientes con cáncer de páncreas avanzado
Visto:. Javle H, Li Y, Tan D, Dong X, Chang P, Kar S, et al. (2014) Los biomarcadores del TGF-β vía de señalización y pronóstico del cáncer de páncreas. PLoS ONE 9 (1): e85942. doi: 10.1371 /journal.pone.0085942
Editor: John Souglakos, Hospital General Universitario de Heraklion y Laboratorio de Biología de Células Tumorales, Escuela de Medicina de la Universidad de Creta, Grecia
Recibido: August 12, 2013; Aceptado: 4 de diciembre de 2013; Publicado: 20 de enero 2014
Derechos de Autor © 2014 Javle et al. Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos de la licencia Creative Commons Attribution License, que permite el uso ilimitado, distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que el autor original y la fuente se acreditan
Financiación:. Este trabajo fue apoyado por una beca de la Corporación Imclone /Eli Lilly y por los fondos de los donantes, una colección de fondos de los pacientes con cáncer de páncreas o de sus familias. Los donantes no tenía papel en el diseño del estudio, la recogida y análisis de datos, decisión a publicar, o la preparación del manuscrito
Conflicto de intereses:. Esta investigación fue financiada en parte por Imclone Inc (ahora Eli Lilly). Los autores confirman que este patrocinio financiación no altera su adhesión a todas las políticas de PLoS ONE sobre los datos y compartir materiales.
Introducción
Factor de crecimiento transformante-β (TGF-β) juega un papel vital papel en la detención del ciclo celular, la apoptosis, la homeostasis, la cicatrización de heridas y la regulación inmune. En el caso de los cánceres, la señalización de TGF-β desempeña un doble papel dependiente del contexto, tanto como un supresor de tumor en la enfermedad en estadio temprano y como un promotor de tumores en los cánceres establecidos [1]. Hay tres isoformas de TGF-beta, TGF-β1, 2 y 3. De estos, TGF-β1 es el más abundante en los seres humanos. la señalización de TGF-β se produce en varias etapas, comenzando con la activación y la liberación del TGF-β1 seguido por la unión a tres receptores de alta afinidad (TGF-βR1, 2 y 3). receptores de TGF-βR1 y TGF-βR2 dimerizan después de la unión de TGF-β en la superficie celular [2]. Estos receptores, cuando se activan secuencialmente fosforilan una familia de factores de transcripción, la Smads. Un estudio reciente secuenciación del exoma indicó que
TGF-βR2
es uno de los 16 genes más frecuentemente mutados en el cáncer de páncreas [3]. SMAD2 y SMAD3 son activados por el TGF-βR1 y se unen a la pareja común SMAD4. SMAD6 y SMAD7 son SMADs inhibidores que bloquean la fosforilación de Smad2 o SMAD3. El complejo SMAD activado sobre la translocación al núcleo regula la transcripción de varios genes TGF-ß-dependiente que puede tener un papel dependiente del contexto, tumor-supresor o progresiva. Además de esto 'canónica' vía de señalización de TGF-β, existen una variedad de vías de señalización intracelular que se activa por el TGF-β de forma independiente de la activación SMAD2 o SMAD3 [4]. la señalización de TGF-β se activa en varios cánceres humanos conocidos y por lo tanto es un área de investigación activa [5].
vía de TGF-β es una de las vías de señalización 12 centrales implicados en el cáncer de páncreas [6]. Mutación en al menos uno de los genes de la ruta de TGF-β se produce en el 100% de los tumores de páncreas. LOH en 18q donde se encuentra gen SMAD4 se produce en 90% de los cánceres de páncreas, mientras que las supresiones de genes y la pérdida de la expresión de proteínas se producen en 50% [7], [8]. La pérdida de SMAD4 (DPC4) se ha utilizado para determinar el origen pancreático en los casos de metástasis de origen primario desconocido. Se cree que la señalización de TGF-β comprometida puede dar cuenta de la progresión del tumor en lugar de su iniciación [4]. Sin embargo, el papel real de SMAD4 en cáncer de páncreas sigue siendo objeto de controversia. Por ejemplo, Biankin
et al demostraron que la expresión
SMAD4 representó un peor pronóstico en caso de enfermedad resecable quirúrgicamente; SMAD4 pacientes con sobreexpresión no se beneficiaron de la resección quirúrgica en su estudio [9]. Por otra parte, los datos de la autopsia rápidos sugieren que la pérdida SMAD4 se asocia con la enfermedad diseminada [10]. Existen datos limitados en cuanto receptor de TGF-β y la expresión SMAD4 o su importancia pronóstica en pacientes con cáncer de páncreas avanzado. Además, no hay datos con respecto a nivel de plasma de TGF-β1 en el cáncer de páncreas y su correlación con el pronóstico.
Las variaciones genéticas de los genes de la vía TGF-beta se han reportado en mama, ovario, colon, de células no pequeñas de pulmón y cánceres de colon y pueden predecir la susceptibilidad al cáncer o tienen importancia pronóstica [11] - [15]. Sin embargo, no hay datos a nuestro conocimiento en lo que respecta a la misma en el cáncer de páncreas. Nuestra hipótesis es que la vía de activación de TGF-β es común en el cáncer de páncreas y variaciones genéticas de la vía, el nivel de TGF-β1 en plasma y el tumor de TGF-βR2 o expresión SMAD4 están asociados con el resultado clínico de cáncer de páncreas. La identificación de una cohorte de los casos de cáncer de páncreas en el que se activa la vía podría potencialmente conducir a la selección de pacientes para la terapia dirigida por TGF-β.
Métodos
Población de pacientes y Bioespecímenes
todos los pacientes con adenocarcinoma ductal pancreático confirmado patológicamente (PDAC) y que firmaron un consentimiento informado para la revisión de historias clínicas y se incluyeron estudios correlativos para la investigación. La Junta Institucional del Centro del Cáncer MD Anderson de la opinión aprobó el estudio. La información clínica sobre la fecha del diagnóstico del paciente, fecha de la muerte o el último seguimiento, el estado de la resección del tumor, estadio clínico del tumor, y el nivel de antígeno carbohidrato suero 19-9 (CA 19-9) al momento del diagnóstico fue recuperado de los pacientes registros médicos. Las muestras de tejido tumoral, plasma y ADN fueron recuperados de Bancos de Tejidos MD Anderson.
La inmunohistoquímica
La inmunohistoquímica se realizó en parafina fijado en formol (FFPE) incrustado secciones. Los anticuerpos primarios contra TGF-βR2 (Novus Productos Biológicos, LLC, Littleton, CO) y SMAD4 (Proteintech Group, Inc. Chicago, IL) se usaron a 1:350 y 1:450 diluciones, respectivamente. El complejo de anticuerpo se detectó usando el kit ABC (Vector Laboratories, Burlingame, CA). tinción nuclear y el citoplasma se registró para ambos marcadores. La intensidad de la tinción se puntuó como 0 para el negativo, 1 para débil, 2 para el compuesto intermedio, y 3 para una fuerte tinción. El porcentaje de células con tinción positiva se anotó como 0 para ninguno, 1 por 1 hasta 50%, y 2 para & gt; 50%. El marcador final tinción fue el producto de las puntuaciones de intensidad y porcentaje. Cada diapositiva se evaluó por dos investigadores (Dres. Dongfeng Tostado y Yanan Li) y los datos consistentes de dos evaluadores fueron utilizados en el análisis estadístico final.
nivel plasmático de TGF β1-
Nivel plasmático TGF-β1 de se midió por el Laboratorio de Vigilancia inmune Core de MD Anderson usando el MSD® 96-Bueno MULTI-ARRAY®Human kit de ensayo de TGF-β1 (Meso Escala Descubrimiento, Rockville, MD). Todas las muestras se analizaron por duplicado y cada ensayo tenía un positivo y un control negativo. La varianza de las muestras duplicadas fue de menos de 10%. Todos los pacientes incluidos en este ensayo fueron reclutados para un estudio de casos y controles en el MD Anderson Cancer Center [16], [17]. Las muestras de sangre se recogieron antes del tratamiento del cáncer o en el momento del diagnóstico en el 95% de los casos. Las muestras de plasma se habían almacenado a -80 ° C sin descongelar antes de su uso en este ensayo.
Genotipado
Se extrajo el ADN a partir de linfocitos periféricos en la mayoría de las muestras y de FFPE en 27 muestras. Genotipado utiliza el método de Sequenom como se describe anteriormente [18]. Un total de 28 SNPs de la
TGF-β1
,
TGF-β2
,
TGF-β3
,
TGF-βR1
,
TGF-βR2
y
se seleccionaron SMAD4
genes con un enfoque en los SNP potencialmente funcionales, es decir SNPs en la región de codificación (no sinónimas o sinónimos), región sin traducir (UTR), la región promotor y los sitios de empalme, o ins /del marco de la jornada y SNPs. SNPs se identificó a partir de la base de datos NCBI SNP y base de datos del Cáncer SNP500 o por medio de revisión de la literatura y el análisis funcional usando el software F-SNP (http://compbio.cs.queensu.ca/F-SNP/). Alrededor del 10% de las muestras se analizaron por duplicado y los datos inconsistentes fueron excluidos del análisis estadístico final.
Análisis estadístico
IHC puntuación y los niveles plasmáticos de TGF-beta 1 se presentan como media ± desviación estándar . La diferencia media entre los grupos se compararon mediante la prueba t de Student. Las asociaciones de estos marcadores y OS fueron analizados mediante el gráfico de Kaplan Meier, log-rank test y riesgos proporcionales de Cox modelos con ajuste por sexo, raza, edad, estadio tumoral, y los niveles de CA19-9. Estos marcadores también se analizaron como variables categóricas utilizando la mediana o cuartiles como valores de corte.
La distribución de los genotipos fue examinado por el equilibrio de Hardy-Weinberg con la prueba de chi-cuadrado de bondad de ajuste. El genotipo y el alelo frecuencia de los SNPs se determinó por recuento de genes directa. Los genotipos homocigotos y heterocigotos se combinaron si la frecuencia de la homocigoto fue muy baja o si ambos genotipos tenían la misma tendencia de efecto [por ejemplo, la supervivencia global más corta (OS) en comparación con el grupo de referencia]. La asociación entre el genotipo y el sistema operativo se estimó mediante el gráfico de Kaplan-Meier y log-rank test. Las razones de riesgo (HR) y el intervalo de confianza del 95% (IC) se calcularon usando los modelos de riesgos proporcionales de Cox multivariado de regresión. Todas las pruebas estadísticas utilizadas software SPSS (SPSS Inc, Chicago, IL).
P valor Red de & lt; 0,05 fue considerado estadísticamente significativo. hallazgo de falsos positivos asociados con múltiples ensayos se controla mediante la corrección Bonfferoni.
Resultados
La población de estudio se identificó a partir de un estudio de casos y controles sobre el cáncer de páncreas realizado en la Universidad de Texas MD Anderson Cancer Center de 1999 a 2012 [16], [17]. Se identificaron tres grupos de pacientes: 1) 120 pacientes tenían biopsia adecuada o muestras quirúrgicas para la inmunohistoquímica; 2) 644 pacientes se les tomaron muestras de sangre recogidas para la medición plasmática de TGF-β1; y 3) 1636 pacientes se les tomaron muestras de ADN adecuados disponibles para el genotipado. Las características demográficas y clínicas de los tres poblaciones de estudio se describen en la Tabla 1. La edad, el sexo y las distribuciones raciales /étnicos de los pacientes eran representativos de la población de pacientes del MD Anderson. La edad media es de 60,6, 61,4 y 62,1 años para los pacientes incluidos en el IHC, ELISA y el estudio de genotipificación, respectivamente. Los hombres consistieron 72,5%, 61,5% y 59,0% de las tres poblaciones de estudio. Más del 85% de los sujetos del estudio eran blancos no hispanos. Casi el 74% de los pacientes del grupo IHC tenían enfermedad metastásica y, por tanto, las muestras de tejido fueron utilizados para IHC muestras de biopsia en su mayoría [Etapa II: 8 (8,8%); Etapa III: 16 (17,6%); Etapa IV: 67 (73,6%)]. La información sobre el grado del tumor estaba disponible en 60 muestras de las cuales, 20 fueron moderadamente diferenciado y 40 eran tumores poco diferenciados.
Protein Expression
Un total de 91 muestras fueron teñidas con TGF βR2 y SMAD4. La evaluación cuantitativa se logró en 88 muestras para TGF-βR2 y 81 muestras para SMAD4 (Fig. 1). Se observó tinción nuclear y el citoplasma, respectivamente, en 81 (92%) y 87 (99%) muestras para TGF-βR2 y en 47 (58%) y 72 (89%) muestras para SMAD4 (Fig. 1). La puntuación global de IHC para los marcadores de papel no se asoció con OS (datos no mostrados). Los pacientes con una puntuación más alta para la tinción nuclear TGF-βR2 tuvieron una SG relativamente más corto que los que tienen una puntuación más baja (mediana de la supervivencia [MST] 12,0 frente a 8,6 meses, Tabla 2), pero esta diferencia no fue estadísticamente significativa. tinción nuclear de SMAD4 estaba presente con mayor frecuencia (16/20, 80%) tumores mal diferenciados que en tumores moderadamente diferenciados (19/40, 47,5%) (
P = 0,016
, χ
2 de prueba ). Por otra parte, cuando el TGF-βR2 y SMAD4 expresión nuclear se analizó en combinación, hemos observado que los pacientes con baja expresión de TGF-βR2 y alta expresión de SMAD4 tuvieron una SG significativamente más tiempo que otros (Fig. 2), aunque esta diferencia no fue estadísticamente significativa después de ajustar por otros predictores clínicos (Tabla 2) guía
a:. expresión nuclear positiva del TGF-βR2 en un adenocarcinoma ductal moderadamente diferenciado del páncreas (Ampliación: 10 × 40). B: expresión nuclear positiva de SMAD4 en moderadamente diferenciado adenocarcinoma ductal de páncreas (Ampliación: 10 × 40).
tinción nuclear puntuación 0-1 se define como baja para el TGF-βR2 y una puntuación de 0 como baja para SMAD4. Línea roja: TGF-βR2 es alta y SMAD4 es baja (HL); línea de negro: tanto alta (HH); línea verde: ambos son bajos (LL); línea púrpura: TGF-βR2 es baja y SMAD4 es alta (LH). La mediana del tiempo de supervivencia son 7,8, 8,6, 11,3 y 15,6 meses para los grupos HL, HH, LL y LH, respectivamente. Log-rank test, p valores y resultados de los análisis de regresión de Cox se presentan en la Tabla 2. Por lo tanto, la relación de TGF-R2 /SMAD4 puede ser de pronóstico, con valores bajos corresponden con una mejor supervivencia.
nivel de plasma de TGF-β1
nivel plasmático de TGF-β1 se midió en 644 pacientes. La media y la mediana del nivel de TGF-β1 era 15,44 (SD 10,99) y 12,61 (intervalo intercuartil: 8,31 a 19,04) ng /ml, respectivamente. El nivel de TGF-β1 era relativamente mayor en pacientes con tumor localizado que aquellos con tumores avanzados. La media ± desviación estándar de nivel de TGF-β1 fue de 17,2 ± 14,3, 13,9 ± 8,7 y 15,5 ± 10,0 ng /ml en pacientes con tumores localizados, localmente avanzado y metastásico, respectivamente (
P
= 0,02, ANOVA). Sin embargo, el nivel de TGF-β1 no se asoció con la SG en pacientes con tumor localizado (Tabla 3) o en toda la población estudiada (MST = 12,9 y 11,1 meses para aquellos en los cuartiles más bajos en comparación con los de la gama cuartil superior,
P
= 0,78, prueba de log-rank). Sin embargo, los pacientes con enfermedad localmente avanzada o metastásica y en el rango de cuartil superior del nivel de TGF-β1 habían reducido significativamente la supervivencia que sus homólogos (Tabla 3). TGF-β1 se mantuvo como un predictor significativo en un modelo de regresión de Cox con ajuste para los datos demográficos y otros factores clínicos.
Genotipado
La genotipificación se realizó en 1636 pacientes. La menor frecuencia del alelo informado y el potencial importancia funcional de la 28 SNPs probado se describe en la Tabla 4. No se detectó alelo variante para nueve SNPs. Entre los seis SNPs comunes alelo con menor frecuencia mayor que 5%, tres siguieron el Hardy Weinberg (HWE) y tres desviado de la HWE (Tabla 2). La distribución de los genotipos y el tiempo de supervivencia global por el genotipo de los 19 SNPs informativos se presentan en la Tabla 5. Una asociación significativa de
se observó SMAD4
rs113545983 SNP con OS (Panel A, Fig. 3), y la asociación fue más fuerte en pacientes con enfermedad avanzada (Paneles C y D, Fig. 3) que aquellos con enfermedad localizada (Panel B, Fig. 3). El mutante alelo G del SNP rs113545983 se mantuvo como un predictor significativo de la muerte en el modelo de regresión de Cox después de ajustar por estadio y el estado de la resección entre todos los pacientes (HR: 1,54; IC del 95%: 1,21 a 1,96,
P Hotel & lt; 0,001). Ningún otro SNP mostraron asociación significativa con el sistema operativo. rs2248048 TGF-βR2 SNP tenían una débil asociación con el sistema operativo sin significación estadística (
P
= 0,09, test de rangos logarítmicos)
Línea azul:. genotipo AA; línea verde: AG /genotipo GG. genotipo AA se asoció con una supervivencia mejorada en toda la población de estudio. En el análisis de subgrupos, esta diferencia en la supervivencia fue más relevante para la enfermedad en estadio avanzado. Los valores de p de la prueba de log-rank son & lt; 0,0001, 0,369, 0,007, y 0,031 para los grupos A, B, C y D, respectivamente
Discusión
Nuestro objetivo en el presente estudio fue investigar los biomarcadores en la vía de TGF-β que podría tener valor pronóstico y el valor potencial predictivo para la terapia dirigida con inhibidores. Hemos interrogado el depósito biológico del tumor en el MD Anderson Cancer Center y examinamos material de archivo incluyendo ADN, plasma y muestras de tejido tumoral de SNPs, el nivel plasmático de TGF-β1 y expresión de proteínas del TGF-βR2 y SMAD4. Hemos observado que los pacientes con baja expresión de TGF-βR2 y alta expresión de SMAD4 en sus tumores, tuvieron una SG significativamente más largo que otros subgrupos de nuestro estudio. También hay que destacar que los pacientes con enfermedad avanzada y el nivel de plasma de alta TGF-β1 habían reducido significativamente la supervivencia que aquellos con un menor nivel de TGF-β1. Por último, se detectó una asociación significativa de rs113545983
SMAD4
SNP con la supervivencia del paciente. Estas observaciones proporcionan información valiosa con respecto a la línea de base de la vía de señalización de TGF-β en el cáncer de páncreas, que puede ser utilizado en el futuro dirigido ensayos clínicos de terapia. La vía de señalización de TGF-β incluye los ligandos y los receptores; y las interacciones ligando-receptor conducen a la transducción de señales a través de SMADs. Anterior análisis IHC ha demostrado la presencia de ligando TGF-β1, TGF-β2 y TGF-β3 en células de cáncer de PDAC y la presencia de TGF-β2 se asoció con el estadio del tumor avanzado [19]. TGF-βR2 mRNA se expresó en la mayoría de las células de cáncer y mejorar el nivel del TGF-βR2 se ha sugerido que tienen un papel en la regulación del crecimiento de células de cáncer pancreático humano [20].
TGF-β2R
y
SMAD4
gen fue mutado en 4% y el 50% de la PDAC humano, respectivamente [21]. La falta de expresión SMAD4 en el tumor se ha asociado con una enfermedad más agresiva [22]. Existen datos muy limitados que investigan el valor pronóstico de las proteínas de la vía TGF-β en pacientes con cáncer de páncreas avanzado. Aunque no hemos encontrado una correlación significativa entre SMAD4 y la expresión de TGF-βR2 de forma individual con el pronóstico, hemos observado que el TGF-β2R y SMAD4 expresión de la proteína se detectó en el 81% y el 47% de los tumores y los pacientes con baja expresión de TGF-βR2 y alta expresión de SMAD4 tenía un sistema operativo mucho más tiempo que otros subgrupos de nuestro estudio. Hua et al, informó de resultados similares en un estudio retrospectivo más pequeño de pacientes con cáncer de páncreas avanzado [23]. Un estudio previo de nuestra institución indicó que la pérdida SMAD4 se correlaciona con un resultado adverso en pacientes con cáncer de páncreas localmente avanzado tratados con gemcitabina, oxaliplatino y cetuximab [24]. Como se mencionó anteriormente, la pérdida SMAD4 se asoció con la diseminación de la enfermedad en los casos de cáncer de páncreas localmente avanzado y metastásico por Iacobuzio Donahue, et al en una serie de autopsias [10]. Por otro lado, una literatura basada en meta-análisis de biomarcadores en el cáncer de páncreas operada no apoyó el valor pronóstico de SMAD4 en la enfermedad resecable quirúrgicamente [25]. Estos hallazgos son consistentes con un papel de la etapa dependiente de la vía de TGF-β.
Además, se encontró que los pacientes con enfermedad avanzada y el nivel de plasma de alta TGF-β1 habían reducido significativamente la supervivencia que aquellos con un menor TGF β1 nivel. Esta asociación no se observó en los pacientes con enfermedad localizada. Un estudio previo ha demostrado que la falta de expresión de TGF-β1 en los tejidos tumorales se asoció con un aumento de la supervivencia postoperatoria [19]. La razón de la asociación entre los niveles plasmáticos de TGF-β1 alta y baja supervivencia en la etapa de la enfermedad avanzada (y no con la enfermedad en etapa temprana) no está claro. Sin embargo, estos resultados son consistentes con los datos preclínicos que sugieren que la pérdida de la respuesta inhibidora del crecimiento a la señalización de TGF-β varía directamente con la etapa maligno del tumor y de las formas más agresivas en realidad cambie a autocrina y /o paracrina del crecimiento estimulada por TGF β. Los tumores también pueden secretar TGF-β1 que conduce a alterado inmunidad anti-tumor [26], [27]. Hasta donde sabemos, no existen datos previos que investigan el papel pronóstico de los niveles plasmáticos de TGF-β1 en el cáncer de páncreas. Estudios previos en mama, próstata, esófago y cáncer de vejiga indican una correlación entre el alto nivel de TGF-β1 de plasma y mal pronóstico [28] - [31]. Coherencia con estos informes y el tamaño de la muestra relativamente grande de nuestro estudio se suma a la fuerza de nuestros hallazgos. Debido a las dificultades para acceder a los tejidos diana en pacientes con enfermedad avanzada, los biomarcadores plasmáticos de la vía TGF-β1 pueden tener un mayor valor clínico.
Las variaciones genéticas de la vía TGF-β se han relacionado con el pronóstico y la supervivencia en el cáncer de pulmón en otro estudio realizado en nuestra institución. En los pacientes que reciben quimioterapia basada en platino; BMP2: rs235756 y rs4776342: Smad3 se asociaron significativamente con la supervivencia [15]. Hay sin embargo, no hay estudios en cáncer de páncreas que correlacionan las variaciones genómicas de esta vía con el pronóstico. Se observó una asociación significativa entre el
SMAD4
rs113545983 SNP, un SNP sinónimo, con el sistema operativo en este estudio. Los pacientes portadores del alelo variante tenían OS significativamente más cortos y un mayor riesgo de muerte después de ajustar por otros predictores clínicos. Este SNP es un SNP sinónimo de que no produce las secuencias de codificación alteradas y sustitución de aminoácidos. Sin embargo, un estudio previo ha demostrado que un SNP sinónimo podría resultar en un producto de proteína con el fármaco alterada y el inhibidor de interacciones 32. Por lo tanto, la consecuencia funcional de este SNP que hay que investigar. También es posible que este SNP se encuentra en desequilibrio de ligamiento con otros SNPs funcionales de este gen o algunos genes importantes en esta ubicación cromosoma. Más investigaciones ayudarán a determinar cómo este SNP está asociado funcionalmente con el SMAD4 transducción y la supervivencia en pacientes con cáncer de páncreas señalización.
El estudio tiene varias limitaciones. Debido a la limitación de las muestras de tejido y la baja SNP MAF seleccionada en el estudio, no pudimos examinar la correlación entre los genotipos, nivel del marcador de plasma y marcadores de tejido. Nosotros sólo mide unos marcadores seleccionados de las muchas moléculas que están implicadas en esta vía de señalización compleja. Sin embargo, nuestros datos proporcionan información valiosa con respecto a la línea de base esta expresión vía en el cáncer de páncreas, que se puede utilizar en los ensayos clínicos de terapia dirigida. Con base en los resultados anteriores, se puede plantear la hipótesis de que la detección de alto nivel de TGF-β1 en plasma, rs113545983 SMAD4SNP o la relación de expresión de la proteína tumor de alto TGF-βR2 /SMAD4 puede sugerir una dependencia de esta vía en pacientes con cáncer de páncreas avanzado y este subconjunto de mayo potencialmente beneficiarse de la terapia dirigida TGF-β.