Extracto
Antecedentes
Este estudio tuvo como objetivo investigar las relaciones de
quitinasa 3-1 como
(
CHI3L1
) polimorfismos de nucleótido único (SNPs) y haplotipos con el desarrollo de cáncer de cuello uterino en las mujeres taiwanesas. Las frecuencias de haplotipos y SNP también se correlacionaron con las variables clínico-patológicas de cáncer de cuello uterino, la recurrencia del cáncer y la supervivencia del paciente.
Metodología y Principales conclusiones
Noventa y nueve pacientes con cáncer invasivo y 61 con pre lesiones cancerosa del cuello uterino se compararon con 310 sujetos de control sanos. Tres rs6691378 SNPs (-1371, G /A), rs10399805 (-247 G /A) y rs4950928 (-131, C /G) rs880633 en la región promotora, y uno de SNP (+2950, T /C) en el exón 5 se analizaron mediante reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real y genotipado. Los resultados mostraron que el genotipo homocigoto mutante de AA
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SNP rs6691378 y rs10399805 de AA, y haplotipos AACC y AACT aumentó el riesgo de desarrollar lesiones precancerosas y cáncer invasivo. Los pacientes con estos haplotipos de riesgo más altos que tenían tumores en estadio I, tumores de mayor tamaño, y la invasión vaginal. En el modelo de regresión logística, que también tendían a tener una pobre supervivencia evento [
p = 0,078
; odds ratio (OR): Intervalo de 2,99, 95% de confianza (IC): 0,89-10,08] y una mayor probabilidad de recurrencia de eventos (
p = 0,081
; OR: 3,07, IC del 95%: 0,87 a 10,81) . Se observó una asociación significativa entre los
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haplotipos de riesgo y la probabilidad de recurrencia (
p = 0,002
; razón de riesgo: 6,21 IC del 95%: 1,90 a 20,41), y una asociación marginal entre los haplotipos de riesgo y la supervivencia global (
p = 0,051
; razón de riesgo: 3,76 IC del 95%: 0,99 a 14,29). en los pacientes con SCC, el uso de riesgos proporcionales de Cox modelo
Conclusión
el
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rs6691378 SNP y rs10399805 y
CHI3L1
haplotipos todo correlacionado con el desarrollo de lesiones precancerosas de cuello uterino y cáncer invasivo. Los pacientes con cáncer de cuello uterino con haplotipos del
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AACC o AACT tenían pobres características clínico-patológicas y pobres eventos de recurrencia y supervivencia. Estos haplotipos de riesgo se asociaron con mayor recurrencia, especialmente en los pacientes con SCC
Visto:. Lin Y-S, Liu Y-M, Chou Y-E, Yang S-F, Chien M-H, Wu C-H, et al. (2014) Correlación de
La quitinasa 3-Como
1 polimorfismos de nucleótido único y haplotipos con uterina cáncer cervical en mujeres taiwanesas. PLoS ONE 9 (9): e104038. doi: 10.1371 /journal.pone.0104038
Editor: Xuefeng Liu, de la Universidad de Georgetown, Estados Unidos de América
Recibido: 5 de Marzo, 2014; Aceptado: 4 Julio 2014; Publicado: 9 de septiembre 2014
Derechos de Autor © 2014 Lin et al. Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos de la licencia Creative Commons Attribution License, que permite el uso ilimitado, distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que el autor original y la fuente se acreditan
Disponibilidad de datos:. La autores confirman que todos los datos que se basan los resultados son totalmente disponible sin restricciones. Todos los datos se incluyen dentro del papel
Financiación:. Este estudio fue apoyado por becas de investigación del Hospital Chung Shan Médico de la Universidad (CSH-2013-D-001, CSH-2014-D-003), el Nacional de Taiwán Science Council (NSC 102-2314-B-040-014-MY3) y el hospital Chung Shan Médico de la Universidad y Chi Mei-Fundación Centro Médico (CSMU-CMMC-102-02). Los proveedores de fondos no tiene función alguna en el diseño del estudio, la recogida y análisis de datos, decisión a publicar, o la preparación del manuscrito
Conflicto de intereses:.. Los autores han declarado que no existen intereses en competencia
Introducción
Chitinase3-comparables1 (CHI3L1) es una glicoproteína codificada por el
quitinasa 3-como 1 gratis (
CHI3L1
) gen localizado en el cromosoma 1q32.1 humana [1] . Esta glicoproteína se refiere a menudo como YKL-40 o cartílago humano glicoproteína-39 (HC gp-39) y se sabe que es una citoquina pro-inflamatoria de quitinasa [2], [3]. Es una proteína secretada con un peso molecular de 40 kD y se identifica por la secuenciación N-terminal para ser tirosina (abreviada como Y), lisina (K), y leucina (L) [4]. Se reconoce como un factor de crecimiento para células conectivas y un factor de migración de promoción para las células endoteliales, y es producido por una variedad de células incluyendo las células de cáncer, los macrófagos activados, y neutrófilos. También se sabe que juega un papel en la inflamación, la proliferación celular, anti-apoptosis, la estimulación de la angiogénesis, y la regulación de tejido extracelular remodelación [2], [5] - [7].
Kjaergaard et al. utilizado un estudio prospectivo basado en la población de la población general danesa para investigar las variantes genéticas de
CHI3L1 Windows que influyen en los niveles de YKL-40, y se encontró que ocho polimorfismos de nucleótido único (SNP) del
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gen están asociadas con YKL-40 niveles en plasma en la población general [8]. Estos
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SNP rs10399805 incluido (-247 G /A) y rs4950928 (-131, C /G) en la región promotora, y rs880633 (2950, T /C) en el exón 5, etc. Sin embargo , Thomsen et al., utilizando también la población danesa en los Monica (tendencias y determinantes de las enfermedades cardiovasculares monitoreo) proyecto internacionales, demostraron que 12SNPs se asociaron con suero de YKL-40 niveles [9]. Estos
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SNP rs6691378 (incluido -1371, G /A), rs4950928 y rs880633, etc.
cáncer de cérvix uterino es el quinto tipo más común de tumores malignos entre las mujeres en Taiwán, con una tasa de incidencia estandarizada por edad en 2009 de 11,86 por cada 100.000 mujeres de acuerdo a la Administración de Promoción de la Salud del Ministerio de Salud y Bienestar. Su tasa de mortalidad estandarizada por edad fue 3,72 por 100.000 mujeres en 2011, por lo que es la séptima causa principal de muerte por cáncer en las mujeres taiwanesas.
polimorfismos de nucleótido único pueden afectar a la actividad del promotor, la expresión de genes, ARN mensajero conformación (estabilidad) y la localización subcelular de los ARNm y /o proteínas, y probablemente causar enfermedades [10]. Varios estudios recientes han demostrado que las variaciones genéticas de
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SNPs tienen un impacto en YKL-40 niveles en suero entre individuos, así como la susceptibilidad a la atopia, la sarcoidosis, el asma y la función pulmonar [11] - [14] . También se han reportado niveles séricos de pre-tratamiento de YKL-40 para ser elevados en el cáncer de cuello de útero [15]. Hasta la fecha, ningún estudio ha correlacionado
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SNPs con cáncer de cuello uterino en las mujeres taiwanesas. Bajo la hipótesis de que los polimorfismos de genes o haplotipos del gen
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tienen un impacto en YKL-40 expresión en el cáncer de cuello de útero, este estudio investigó la distribución de los
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polimorfismos de genes y haplotipos entre los pacientes con cáncer de cuello uterino y lesiones pre-cancerosas y controles normales para definir su papel en la carcinogénesis cervical en mujeres taiwanesas. Las frecuencias de SNP o haplotipos de
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se asociaron más con variables clínico-patológicas de cáncer de cuello uterino, la recurrencia del cáncer y la supervivencia del paciente. Este estudio demostró una asociación significativa de
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SNPs y haplotipos con el desarrollo de lesiones precancerosas y cáncer invasivo del cuello uterino, y reveló que
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haplotipos estaban relacionados con el pronóstico de cuello de útero los pacientes con cáncer.
Materiales y Métodos
Población
cuatrocientos setenta y mujeres, incluyendo 99 pacientes con cáncer invasivo, 61 pacientes con lesiones precancerosas del cuello uterino, y 310 controles normales, fueron reclutados consecutivamente en este estudio. Los pacientes con cáncer de cuello uterino invasivo fueron clínicamente en etapas según la Federación Internacional de Ginecología y Obstetricia Clasificación 2009 y recibieron los protocolos de tratamiento de rutina en el Departamento de Obstetricia y Ginecología en el Hospital de la Universidad Médica Chung Shan, Taiwán, a partir de marzo de 1999 a octubre de 2012. Los pacientes con lesiones pre-cancerosas, que sólo comprendían alto grado de displasia cervical (lesiones intraepiteliales escamosas de alto grado) en este estudio y que se incluyen la displasia moderada y grave, así como carcinoma in situ, se sometió a biopsia por punción cervical dirigida por colposcopia, escisión con asa grande de la zona de transformación, la histerectomía abdominal total, o la histerectomía vaginal total. Los 310 controles con frotis de Papanicolaou normales se verificaron adicionalmente usando colposcopia durante los exámenes generales en la consulta externa de nuestro hospital. Las edades de las mujeres con cáncer invasivo de cuello uterino, las lesiones precancerosas, y los controles normales fueron 53,6 ± 12,0, 42,7 ± 12,7 y 44,7 ± 9,8 (media ± DE) años, respectivamente. Todos ellos eran mujeres taiwanesas que residían en el centro de Taiwan. La Junta de Revisión Institucional del Hospital de la Universidad Médica Chung Shan aprobó este estudio (IRB CSMUH: CS12218, CS12219, CS14014), y el consentimiento informado por escrito se obtuvo de cada individuo
Selección de
quitinasa 3-como 1
polimorfismos del gen
Tres rs6691378 SNPs (-1371, G /a), rs10399805 (-247 G /a) y rs4950928 (-131, C /G) en la región promotora y uno rs880633 SNP (2950, T /C) fueron seleccionados en el exón 5 basado en el HapMap chino (chinos Han en Beijing, china) y los datos de los estudios de Thomsen et al. y Kjaergaard et al. [12], [16]. Las frecuencias de alelos menores (MAF) de estos SNPs se ≥5%.
recogida de muestras de sangre y ADN genómico de extracción
En total, se recogieron 160 muestras de sangre de los pacientes con cáncer invasivo de cuello uterino y aquellos con lesiones pre-cancerosas, y 310 muestras de sangre se obtuvieron a partir de los controles. Se extrajo ADN genómico a partir de sangre venosa, anticoagulada con EDTA utilizando un mini kit de ADN de sangre QIAamp (Qiagen, Valencia, CA, EE.UU.), basado en el protocolo del fabricante. El ADN se disolvió en tampón Tris de etileno (10 mmol /L Tris y 1 mmol /L EDTA; pH 7,8) y después se cuantificó por una medición de la OD260. La preparación final se almacenó a -20 ° C y se aplica como plantillas en la reacción en cadena de la polimerasa (PCR).
polimorfismos de nucleótido individuales por tiempo real-PCR y genotipado
discriminación alélica de la rs6691378 ( -1371, G /A), rs10399805 (-247 G /A), rs4950928 (-131, C /G), y rs880633 (2950, A /C) polimorfismos T se evaluó mediante un real-Time PCR System ABI StepOne (Applied Biosystems, Foster City, CA, EE.UU.), y se analizaron por SDS software versión 3.0 (Applied Biosystems) usando el ensayo de TaqMan. El 10 l de volumen final para cada reacción contenía 5 l TaqMan de genotipificación Master Mix, 0,25 l TaqMan mezcla de sondas, y 10 ng de ADN genómico. PCR en tiempo real incluye una etapa de desnaturalización inicial a 95 ° C durante 10 minutos, seguido de 40 ciclos de 95 ° C durante 15 segundos y luego 60 ° C durante un minuto.
El análisis estadístico
Análisis de varianza (ANOVA) se utilizó para analizar la distribución por edades de los sujetos de la población de estudio y de control. Se utilizó la prueba de Scheffe para el análisis post hoc.
Hardy-Weinberg se utilizó para analizar las distribuciones de genotipo rs6691378, rs10399805, rs4950928, rs880633 y en los controles normales (grado de libertad = 2). prueba exacta de Chi-cuadrado o de Fisher se utilizaron para examinar las relaciones entre las frecuencias de
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SNPs de genes, alelos y haplotipos, y la incidencia de neoplasia cervical (incluyendo el cáncer invasivo y lesiones pre-cancerosas), así como diversos parámetros clínico, incluyendo el estadio clínico (I o ≥II), tipos histológicos, como el carcinoma de células escamosas (SCC) o adenocarcinoma, clasificación celular (bueno, o la diferenciación moderada y pobre), la profundidad de la invasión del estroma cervical (≤10 mm o & gt; 10 mm de profundidad estromal invasión), el diámetro del tumor (≤4 o & gt;. 4 cm), parametrio y la invasión vaginal y pélvica metástasis en ganglios linfáticos durante la cirugía encontrado
modelo de regresión logística multivariante de regresión logística o eran utilizado para analizar las comparaciones múltiples de genotipos SNP de los
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polimorfismos de genes antes y después de controlar por edad entre los pacientes con neoplasia cervical y los controles, o entre los pacientes con cáncer invasivo o lesiones pre-cancerosas y los controles. No distribución por edad se ajustó para las comparaciones de los alelos (el número de alelos de cada alelo en cada subgrupo igualó doble del número de genotipos homocigotos más uno veces del número de genotipos heterocigotos, por lo que no fue posible analizar la distribución de edades entre los sujetos subgrupos, por ejemplo el número de alelos G = 2 * el número de alelos GG + 1 * el número de alelos GA) o la distribución de haplotipos (reclasificación arbitraria). El tamaño de la muestra se calculó con el poder (1-β), 0,8 y α, 0,05, y las potencias se calcularon cuando las comparaciones entre los subgrupos alcanzaron significación estadística (
p Hotel & lt; 0,05) con un tamaño de muestra adecuado el uso de software WinPepi, versión 10.0.
Un modelo de regresión logística se utiliza también para correlacionar los diferentes parámetros clínico y
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polimorfismos con evento de la recurrencia del cáncer o evento supervivencia de los pacientes. Se utilizó un modelo de riesgos proporcionales de Cox para evaluar los efectos de
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haplotipos sobre la probabilidad de recurrencia o la supervivencia general después de ajustar por diversos parámetros clínico en el análisis multivariante en relación con la recurrencia o el tiempo de supervivencia. Cuando se incluyó el período de seguimiento en la supervivencia o el análisis de la recurrencia, los pacientes fueron incluidos para el análisis de supervivencia global incluyendo la tasa de supervivencia a 5 años o probabilidad de recurrencia entre la cirugía primaria y la muerte o la repetición o el final del estudio (octubre de 2013) utilizando el modelo de Kaplan-Meier y multivariados y univariados de regresión de Cox modelos. Una diferencia significativa se fijó en
p Hotel & lt; 0,05. Los análisis estadísticos incluyendo odds ratio (OR) y cociente de probabilidad ajustado (AOR; controlar por edad) y su intervalo de confianza del 95% (IC) se calcularon mediante el programa SPSS, versión 12.0 y WinPepi Software, versión 10.0
Resultados.
La distribución por edades de los sujetos de estudio fue significativamente diferente entre los pacientes con cáncer de cuello uterino y aquellos con lesiones pre-cancerosas (53,6 ± 12,0 frente a 42,7 ± 12,7 años,
p Hotel & lt; 0,001 ) y entre los que tienen cáncer cervical y los controles (53,6 ± 12,0 frente a 44,7 ± 9,8 años,
p Hotel & lt; 0,001), pero no entre aquellos con lesiones pre-cancerosas y los controles (42,7 ± 12,7 vs . 44,7 ± 9,8 años, el
p = 0,407
). Las distribuciones de genotipo rs6691378, rs10399805, rs4950928, rs880633 y se reunieron con el equilibrio de Hardy-Weinberg, que se aplicó a los controles normales.
Asociación de
quitinasa 3-1 como polimorfismos de genes con
de cuello uterino neoplasia
No hubo diferencias significativas en la distribución de rs6691378 y rs10399805 del
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de genes entre las mujeres con neoplasia cervical y los controles normales (SNP
p Hotel & lt; 0,001 y
p
& lt; 0,001, respectivamente) (Tabla 1). Sin embargo, no se observaron tales diferencias en rs4950928 y rs880633. El mutante homocigotos AA genotipo de SNP rs6691378 se distribuye de manera diferente entre las mujeres con neoplasia cervical y los controles en comparación con el genotipo homocigoto GG salvaje y genotipo heterocigoto GA (
p Hotel & lt; 0,001). Además de controlar por edad, las mujeres con el AA homocigotos mutantes llevan a un mayor riesgo de desarrollar neoplasia cervical en comparación con aquellos con el genotipo GG salvaje (AOR: CI 3,53, 95%: 1,71 a 7,35) o GG /GA (AOR: 3,40, IC del 95%: 1,69 a 6,85) (Tabla 1). El mutante homocigotos AA genotipo de SNP rs10399805 también se distribuyó de forma diferente entre las personas con neoplasia cervical y los controles en comparación con el GG salvaje y heterocigotos GA (
p Hotel & lt; 0,001). Después de controlar por edad, las mujeres con el AA homocigotos mutantes tenían un mayor riesgo de desarrollar neoplasia cervical en comparación con aquellos con el genotipo GG salvaje (AOR: CI 3,68, 95%: 1,71 a 7,87) o GG /GA (AOR: 3,60, IC del 95%:. 1,82-7,52) guía empresas
Cuando el grupo de las neoplasias cervicales se subdivide a su vez en subgrupos de cáncer invasivo y lesiones pre-cancerosas, existían diferencias significativas en la distribución de rs6691378 y rs10399805 del SNP
CHI3L1
de genes entre las mujeres con cáncer invasivo de cuello uterino y las lesiones pre-cancerosas y las mujeres normales (
p = 0,002
y
p = 0,003
, respectivamente; Tabla2). Sin embargo, no se observaron tales diferencias en rs4950928 y rs880633. Los genotipos homocigotos mutantes de ambos SNPs mostraron diferentes distribuciones entre los pacientes con cáncer invasivo de cuello uterino y las lesiones precancerosas, y los controles en comparación con los genotipos homocigotos y heterocigotos silvestres (
p Hotel & lt; 0,001 y
p
& lt; 0,001, respectivamente; Tabla 2). Después de ajustar por edad, el AA homocigotos mutantes en ambos rs6691378 y rs10399805 SNP no sólo aumenta el riesgo de desarrollar cáncer cervical invasivo (AOR: CI 2,37, 95%: 1,04 a 5,38 y AOR: 2,82; IC del 95%: 1,20 a 6,58, lesiones, respectivamente), pero también precancerosas (AOR: 5,26; IC del 95%: 2,22 a 12,50 y AOR: 4,83; IC del 95%: 1,90 a 12,35, respectivamente) en comparación con GG /GA (Tabla 2)
Análisis de frecuencias de los alelos de
quitinasa 3-1 como
polimorfismos en la cohorte del estudio
Análisis de las frecuencias de los alelos de los cuatro
CHI3L1
polimorfismos de genes en el 470 las muestras recogidas, las frecuencias de los alelos en
CHI3L1
SNP rs6691378 y rs10399805 polimorfismos fueron distribuidos de forma diferente entre las mujeres con cáncer de cuello uterino invasivo, aquellos con lesiones pre-cancerosas, y los sujetos normales (
p =
0.008 y
p
= 0,012, respectivamente) (Tabla 3). No hubo diferencias en estos SNP rs4950928 y rs880633. Los alelos mutantes A y A en rs6691378 y rs10399805 SNP aumentaron y tendieron a aumentar el riesgo de desarrollar lesiones precancerosas del cuello uterino (OR: 1,66; IC del 95%: 1,11 a 2,49 y OR: 1,48; IC del 95%: 0,98 a 2,25, respectivamente; Tabla 3). También aumentó el riesgo de desarrollar cáncer cervical invasivo (OR: 1,51; IC del 95%: 1.8 a 2.12 y OR: 1,60 IC del 95%: 1.14 a 2.25, respectivamente, Tabla 3) guía empresas
. haplotipos de
quitinasa 3-1 como
SNPs en base a las mujeres taiwanesas y su implicación en el cáncer de cuello de útero
sobre la base de la ubicación de las variantes analizadas (rs6691378, rs10399805, rs4950928 y rs880663), el
CHI3L1
gen, la ubicación de las variantes genotipo, y sus patrones de vinculación desequilibrio entre parejas se representan gráficamente (Figura 1). Debido a que el AA y AA homocigoto mutante en
CHI3L1
SNP rs6691378 y rs10399805 aumenta el riesgo de desarrollar lesiones precancerosas del cuello uterino o cáncer invasivo, los haplotipos que los contienen (AACC y AACT) fueron considerados como un subgrupo de riesgo, mientras que la otra haplotipos (es decir, CCGG, GGCT, GGGC, GGGT, GACC, GACT, AGCC, y AGCT) fueron considerados como un subgrupo de control. Los individuos con haplotipos AACC y AACT tenían un mayor riesgo de desarrollar neoplasia cervical (
p
= 0,002). Cuando el grupo de las neoplasias cervicales se subdivide a su vez en subgrupos de cáncer invasivo y lesiones pre-cancerosas, existen diferencias significativas en la distribución de
CHI3L1
haplotipos entre las mujeres con cáncer invasivo de cuello uterino y las lesiones pre-cancerosas y los controles (
p
= 0,01). Las mujeres con las AACC o AACT haplotipos tenían un mayor riesgo de desarrollar cáncer cervical invasivo (OR: 1,60; IC del 95%: 1.13 a 2.26; Tabla 4).
(A) Representación esquemática de la
CHI3L1 gratis (Identificación de genes: 1116) indica las ubicaciones de las variantes analizadas (rs6691378, rs10399805, rs4950928, rs880663 y). Las cajas blancas y negras indican las regiones sin traducir y codificación, respectivamente. El número exón etiqueta situado debajo de los exones y sitios de variante comienza con el sitio de inicio de la traducción. (B) la observada haploblock que la LD por parejas medida es D'etiquetado y coloreado en escala de grises utilizando los datos de población de chinos Han en Beijing, China (CHB) en el HapMap 3.
Asociación de
quitinasa 3-1 como
polimorfismos de genes y haplotipos con variables clínico-patológicas de cáncer de cuello uterino, la recurrencia del cáncer y la supervivencia del paciente
No se encontraron asociaciones entre los
CHI3L1
polimorfismos de genes y las variables clínico-patológicas de cáncer de cuello uterino, la recurrencia del cáncer y la supervivencia del paciente. Cuando el
CHI3L1
haplotipos fueron incluidos en el análisis, que estaban relacionados con la etapa clínica (
p = 0,040
, OR: 2,31; IC del 95%: 0,95 a 5,72; ≥ estadio II vs . la etapa I, Tabla 5), el diámetro del tumor (
p = 0,054
; OR: 2,19; IC del 95%: 0,90 a 5,43; & gt; 4 cm vs. ≤4 cm) y la invasión vaginal (
p = 0,024
; OR: 2,66; IC del 95%: 0,98 a 6,83; invasión contra ninguna invasión). Por otra parte, las asociaciones significativas se hizo aún más evidente entre los
CHI3L1
haplotipos de riesgo y el estadio clínico (
p = 0,009
; OR: 3,29; IC del 95%: 1,18 a 9,63; ≥ estadio II vs. la etapa I, Tabla 5), el diámetro del tumor (
p = 0,029
; OR: 2,75, IC del 95%: 0,99 a 8,04; & gt; 4 cm vs. ≤4 cm), y la invasión vaginal (
p = 0,004
; OR: 4,10; IC del 95%: 1,40 a 11,62; invasión contra ninguna invasión) en muestras de SCC, pero no en los tejidos de adenocarcinoma
p>
haplotipos CHI3L1
riesgo tendían a tener una mala caso de supervivencia (modelo de regresión logística;
p = 0,078
; OR: 2,99; IC del 95%: 0,89 a 10,08; Tabla 6). Sin embargo, la clasificación celular 2/3 (
p = 0,049
; OR: 5,47, IC del 95%: 1,01 a 29,78) y pélvica metástasis en los ganglios linfáticos positivos (
p = 0,002
; OR: 5,58 , IC del 95%: 1,92 a 12,63) fueron factores predictivos independientes para el evento de la supervivencia del paciente. La tasa de supervivencia a cinco años fue del 66,1% para los pacientes con los
CHI3L1
haplotipos de riesgo, y esto aumentó a 88,1% para los que tienen otros haplotipos. Sin embargo, no se pudo llegar a una significación estadística (
p = 0,21
; OR: 1,68; IC del 95%: 0,73 a 3,85; Tabla 7). Por otra parte,
CHI3L1
haplotipos también tenían una tendencia a estar relacionado con una mayor probabilidad de recurrencia de eventos (
p = 0,081
; OR: 3,07; IC del 95%: 0,87 a 10,81; Tabla 6) . clasificación celular 2/3 (
p = 0,015
; OR: 8,73, IC del 95%: 1,52 a 50,29) y pélvica metástasis en los ganglios linfáticos positivos (
p = 0,001
; OR: 6,52, 95 % IC: 2,25-18,93) fueron factores predictivos independientes para el evento de la recurrencia del cáncer. En los pacientes con cáncer de cuello uterino con SCC,
CHI3L1
haplotipos de riesgo aumenta el riesgo de recurrencia de eventos (
p = 0,011
; OR: 7,50; IC del 95%: 1,60 a 35,16) y tendió a aumentar el riesgo de una mala caso de supervivencia (
p = 0,051
; OR: 4,36; IC del 95%: 0,99 a 19,14), en el modelo de regresión logística. profundidad de invasión profunda y ≥stage II también aumentó el riesgo de recurrencia de eventos (
p = 0,04
; OR: 4,61; IC del 95%: 1,08 a 19,74 y
p = 0,047
; OR: 6,17 , IC del 95%: 1,03 a 37,04, respectivamente). Positivo pélvica metástasis en ganglios linfáticos aumenta el riesgo de recurrencia de eventos (
p = 0,012
; OR: 4,49, IC del 95%: 1,40 a 14,46) y tendió a aumentar el riesgo de una mala caso de supervivencia (
p
= 0,058; OR:. CI 3,10, 95%: 0,96 a 10,00)
Sólo de clasificación celular se encontró que era un predictor independiente para la supervivencia global en el análisis multivariante (
p = 0,037
, razón de riesgo: 5,59 IC del 95%: 1,11 a 28,57; Tabla 7). Sin embargo,
CHI3L1
haplotipos de riesgo, la profundidad de la invasión del estroma, clasificación celular y pélvica metástasis en ganglios linfáticos eran factores predictivos independientes para la probabilidad de recurrencia (Tabla 8). En el análisis multivariado para la probabilidad de recurrencia y la supervivencia global de los pacientes con SCC,
CHI3L1
haplotipos de riesgo mostraron una asociación significativa con la probabilidad de recurrencia (
p = 0,002
; razón de riesgo: 6,21 , IC del 95%: 1,90 a 20,41) y una asociación marginal con la supervivencia global (
p = 0,051
; razón de riesgo: 3,76; IC del 95%: 0,99 a 14,29) entre los parámetros clínico y
CHI3L1
haplotipos, utilizando el modelo de riesgos proporcionales de Cox (tabla 8). Sin embargo, estos hallazgos no se demostraron en los pacientes con adenocarcinoma.
Discusión
A lo mejor de nuestro conocimiento, el presente estudio es el primero en demostrar una asociación significativa entre el
polimorfismos CHI3L1
de genes y la susceptibilidad a cáncer de cuello uterino. Ambos mutantes homocigotos los genotipos AA y AA en las regiones promotoras -1371 y -247 de
CHI3L1
rs6691378 SNP rs10399805 y no sólo aumentaron la susceptibilidad a las lesiones pre-cancerosas sino también el cáncer invasor del cuello uterino incluso después de controlar años. No se observaron tales diferencias en rs4950928 (-131, región promotora) y rs880633 (2950, exón 5). Varios estudios sobre
CHI3L1
SNPs han documentado que las variaciones genéticas de
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afectar los niveles circulantes de YKL-40, tanto en adultos sanos y en pacientes con enfermedades [17] - [20]. Kajergarred et al. y Thomsen et al. demostrado los efectos reguladores de algunos SNPs promotor, incluyendo rs6691378, rs10399805, rs4950928 y, en YKL-40 niveles en plasma en la población general danesa [21], [22]. YKL-40 niveles El alelo menor de rs10399805 ha informado para mejorar la unión de la proteína de unión a potenciador-CCAAT (C /EBFα) para el promotor del gen y aumentar
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transcripción, en consecuencia, el aumento de plasma [23], [ ,,,0],24]. En contraste, Zheng et al. no mostraron ninguna asociación significativa entre el SNP rs10399805 y 40-YKL niveles en una población china [17]. Las diferentes poblaciones de estudio pueden afectar los resultados. Verlaan et al. reveló que rs10399805 y rs4950928 modular
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transcripción y promotor polimorfismos en
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y están asociados con el asma [25]. La mayor parte de los genes de susceptibilidad para enfermedades comunes no juegan un papel vital en la predisposición a la enfermedad, sino que actúan como modificadores de la respuesta a factores ambientales internos o externos [26], [27].
La proteína YKL-40 está codificada por los
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, y SNPs en el
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promotor se han asociado con suero elevada YKL-40 niveles [20], [28], y la expresión diferencial de genes [28] y los niveles de transcripción [29]. YKL-40 se ha descrito para iniciar la proteína quinasa activada por mitógenos (MAPK) y phosphoinoside-3-quinasa (PI3K) vías de señalización, que conducen a un aumento de la proliferación celular en las células del tejido conectivo [30]. El homólogo murino de YKL-40 es una proteína de regresión de mama de 39 kDa (BRP-39) que se ha descrito que se expresa en las células cancerosas, y YKL-40 /BRP-39 se ha demostrado que desempeñan un papel en la proliferación celular, supervivencia, y la remodelación de tejidos [30] - [32]. Serum YKL-40 puede ser secretada a partir de macrófagos activados completamente asociados con el tumor y puede ser producido por las células tumorales mismas o por células no malignas tales como neutrófilos activados y los fibroblastos, condrocitos, y células sinoviales [32] - [34]. se ha informado de las células tumorales para expresar y producir YKL-40 en cáncer de mama y de colon [35], mientras que los macrófagos asociados a tumores, pero no las células tumorales, se han reportado para secretar YKL-40 en el cáncer de pulmón [36]. Mitsuhashi et al. encontraron que el tratamiento previo de los niveles séricos de YKL-40 se elevan en el cáncer cervical, incluso en las primeras etapas [15]. Debido a
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SNPs influyen YKL-40 expresión, pueden influir posteriormente el desarrollo de enfermedades como el cáncer de cuello uterino.
Las MAF en rs6691378, rs10399805 y rs4950928 de
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promotores en las mujeres taiwanesas en el presente estudio (27,4%, 25,5% y 18,1%, respectivamente) son similares a los reportados en los chinos Han en Beijing, china (HCB, 25,6%, 25,6% y 17,1%, respectivamente ), que se basa en el Centro Nacional de Información Biotecnológica (NCBI base de datos) SNP (dbSNP). El MAF en rs880633 (33,9%) en el exón 5 del gen
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también es similar a la de HCB (35,6%), que también se basa en la dbSNP. Por otra parte, el alelo mutante A en rs6691378 SNP aumentó el riesgo de desarrollar lesiones precancerosas de cuello uterino y cáncer invasivo. Aunque el alelo mutante A en SNP rs10399805 también aumentó la susceptibilidad al cáncer de cuello de útero, su efecto sobre el desarrollo de lesiones pre-cancerosas no era tan fuerte como la de A en rs6691378 SNP. Para la aplicación de los haplotipos, se establecieron los patrones de desequilibrio de ligamiento por pares de estos SNPs, y los resultados revelaron que rs6691378 tiene un fuerte desequilibrio de unión con rs10399805 (D '= 0,94). El AA homocigotos mutantes, así como AA en la
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rs6691378 y rs10399805 SNP estaban asociados con la carcinogénesis cervical. Por lo tanto,
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haplotipos se pueden utilizar para su posterior correlación con el desarrollo y las variables clínico-patológicas de cáncer de cuello uterino y el pronóstico del paciente.
No sólo el alelo distribución de
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SNPs, pero también
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haplotipos de riesgo, AACC y AACT, en correlación con la susceptibilidad a las lesiones precancerosas de cuello uterino y cáncer invasivo en el presente estudio. Hay pocos estudios existentes que han informado de las relaciones de
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haplotipos con las enfermedades. Zhao et al. reveló asociaciones significativas de tres SNP en la región promotora de la
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gen (rs6691378, -1,371; rs10399805, rs4950928 y -247, -131) con esquizofrenia [28]. Construyeron aún más estos tres SNP como
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haplotipos y encontraron que el
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haplotipos implicados en la susceptibilidad esquizofrenia se asocian con alteraciones de los niveles de expresión del gen. Las variaciones genéticas que modifican la expresión de
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pueden influir en algunos procesos clave que son
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-dosage dependiente. Una de ellas es la ruta de señal de AKT mediada por PI3K dependiente de fosforilación [30]. Esta vía de AKT se ha asociado con la supervivencia celular [37], [38] y puede regular las respuestas celulares inducidas por citoquinas [39]. Sin embargo, Zheng et al. no pudo demostrar ninguna relación entre el
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haplotipos comunes y la enfermedad de las arterias coronarias o su gravedad [17].
Mitsuhashi et al. demostró que el suero nivel de YKL-40 es la mejor biomarcador para el cáncer de cuello uterino en comparación con los antígenos de SCC, CA-125, proteínas CA19-9, y C-reactiva [15]. YKL-40 niveles previos al tratamiento se correlacionaron significativamente con el estadio de la FIGO y con recaída o estado de la enfermedad persistente, mientras que las correlaciones con el estado y el tamaño tumoral ganglionar fueron marginales en el adenocarcinoma de cuello uterino. El análisis de regresión de Cox mostró que un nivel elevado YKL-40 se asocia con recaída o persistencia de la enfermedad en el adenocarcinoma cervical [15]. YKL-40 se ha sugerido que desempeñar un papel en la proliferación celular, la diferenciación, y para proteger las células de las señales de apoptosis, y actuar sobre el tejido extracelular remodelación [30], [40]. Informó como un estimulador de la angiogénesis en los tumores, se postula YKL-40 estar implicado en la metástasis del cáncer [41], [42]. El presente estudio postula que
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SNP o haplotipos afectan a la expresión de YKL-40. El análisis de la relación entre los
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SNP o haplotipos, variables clínico-patológicas, la recurrencia del cáncer y la supervivencia del paciente, no pudimos demostrar ninguna asociación significativa entre la
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SNPs y estas características.