Extracto
La enfermedad inflamatoria intestinal (EII) puede conducir a un mayor riesgo de desarrollar cáncer colorrectal (CCR). El objetivo de este estudio fue establecer un modelo para el trasplante de médula ósea combinada (BMT) y el cáncer colorrectal asociado con la colitis (CAC) y definir la contribución de las células derivadas de la médula ósea durante la inflamación asociada a la carcinogénesis. Hemos establecido un modelo de trasplante de médula ósea utilizando la proteína fluorescente (GFP) ratones transgénicos verdes, seguido de la OMA CAC /inducida por DSS, y se realizó un análisis de microscopía confocal en
in vivo
tejidos y secciones congeladas de tumores viviente. Nuestro análisis de imagen mostró que las células positivas para GFP ampliamente infiltraron en el estroma tumoral y que se observaron algunas células WGA y GFP o CD31 y GFP de doble positivas en el revestimiento de los vasos tumorales. Citometría de flujo El análisis de las células infiltrantes de tumores mostraron que las células del CD11c positivas para GFP + DCs eran un tercio de la GFP + /CD11C- células, y que la mitad de estas DCs (0,96% frente a 1,02%) fueron BM derivados de GFP-positivas Células. La mayoría de las células CD4
+ T células fueron GFP-negativos (12,02% frente a 1,9%), y descubrimos una novela de CD4
+ CD11c
+ DC subconjunto (0,34% frente a 1,64%). En conclusión, hemos definido la distribución de células endoteliales derivadas-BM, células CD11c
+ DC y CD4
+ T en los tumores. Este modelo podría ser útil para dilucidar los diversos tipos de células derivadas de BM y funciones durante la progresión del cáncer colorrectal asociado con la colitis
Visto:. Xiao CX, Wang HH, Shi Y, Li P, Liu YP, Ren JL, et al. (2013) Distribución de médula ósea procedentes de células endoteliales y inmune en un Modelo de cáncer colorrectal murino asociado con la colitis. PLoS ONE 8 (9): e73666. doi: 10.1371 /journal.pone.0073666
Editor: Shi Yu Yang, University College de Londres, Reino Unido
Recibido: 12 de mayo de 2013; Aceptado: July 19, 2013; Publicado: 10 Septiembre 2013
Derechos de Autor © 2013 Xiao et al. Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos de la licencia Creative Commons Attribution License, que permite el uso ilimitado, distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que el autor original y la fuente se acreditan
Financiación:. Este trabajo fue apoyado por la Fundación Nacional de Ciencias Naturales de China (Nº 81072013 y 91229201), Fondos de investigación Fundamental para las universidades centrales en China (Nº 2010111082) y Fundamentos de la Oficina de Salud de Xiamen en China (Nº 3502Z200940010). Los donantes no tenía papel en el diseño del estudio, la recogida y análisis de datos, decisión a publicar, o la preparación del manuscrito
Conflicto de intereses:.. Los autores han declarado que no existen intereses en competencia
Introducción
el cáncer colorrectal (CCR) es una de las principales causas de muerte por cáncer en el hemisferio occidental. Su desarrollo se produce de forma esporádica o puede ser una complicación a largo plazo de la inflamación crónica, como se ve en la enfermedad inflamatoria intestinal (EII) [1]. El riesgo acumulado para la adquisición de CRC puede aumentar hasta aproximadamente el 20% en los pacientes con EII que viven desde hace 30 años con la enfermedad [2,3]. cánceres de colon colitis asociada se desarrollan en mucosa inflamación crónica y se cree que el desarrollo de una manera escalonada, con la mucosa inflamada dando lugar a displasia y finalmente a cáncer. Se cree inflamación crónica para promover la carcinogénesis. Los estudios clínicos han demostrado que los pacientes con colitis tienen un riesgo relativo de 2 a 8 veces mayor de desarrollar cáncer colorrectal en comparación con la población general [4].
Los ratones que recibieron DSS para inducir la inflamación (OMA /DSS) muestran una aumento de la incidencia y la extensión de la formación de tumores de colon en comparación con ratones de tipo salvaje [5]. Los componentes individuales de la respuesta inmune innata y adaptativa también han sido implicados en la carcinogénesis [4]. factores proinflamatorios de los sistemas inmune innata y adaptativa contribuyen al desarrollo y crecimiento de la neoplasia de colon. las células progenitoras derivadas de la médula ósea, que contribuyen a la respuesta inflamatoria y la neovascularización del tumor, se ha sugerido que tienen diversas funciones en la progresión del tumor. Sin embargo, poco se sabe sobre el papel de las células derivadas de la médula ósea en el cáncer de colon asociado con la colitis (CAC) [6].
células derivadas de médula ósea son sorprendentemente plástico [7], asumiendo funciones a veces fuera de la sistema hematopoyético. En los receptores de trasplante de médula ósea (BMT), los investigadores han encontrado células derivadas del donante en diversos tejidos no hematopoyéticos tales como el músculo esquelético, el músculo cardíaco, el endotelio vascular, células neuronales y células epiteliales [8]. células derivadas de médula ósea también se han demostrado que desempeñan múltiples funciones en el desarrollo de tumores. De médula ósea derivadas de células progenitoras endoteliales (CPE) contribuyen a la neovascularización tumoral, mientras que las células del linaje mieloide inmaduras que tienen diversas funciones en la progresión del tumor como células iniciadoras del cáncer actúan como fibroblastos asociados a tumores que orquestan la reacción desmoplásico [9].
evidencia convincente apoya la noción de que las células derivadas de médula ósea tienen un papel importante en la regulación de la angiogénesis tumoral y la progresión [10-12] y pueden contribuir a la angiogénesis tumoral mediante la secreción de factores pro-angiogénicos o por incorporación directa en el tumor vasculatura [13,14]. EPCs circulantes movilizados de la médula ósea se han detectado en la sangre periférica de varias especies y se han demostrado estar involucrados en la neoangiogénesis en tumores, así como en la formación de nuevos vasos después de trauma, lesiones por quemadura, y el infarto de miocardio [15-17 ]. Por otra parte, hemos documentado previamente que las células progenitoras CXCR4-positivas derivadas de médula ósea murina contribuyen al crecimiento del tumor mediante la promoción de la angiogénesis del tumor [18]
.
Sin embargo, la evidencia acumulada indica que las células progenitoras derivadas de la médula ósea tienen diversas funciones en las respuestas inflamatorias durante la progresión tumoral. Derivadas de médula ósea las células inflamatorias en el microambiente tumoral promueven la angiogénesis tumoral, la proliferación de tumores, la supervivencia y la invasión y suprimen la respuesta inmune anti-tumor específico de linfocitos CD4 y CD8 [19]. Por lo tanto, es importante para determinar la relación entre las células óseas derivadas de médula y células inmunitarias específicas, citoquinas y quimioquinas durante la carcinogénesis. Todos los linfocitos se originan dentro de la médula ósea de un progenitor linfoide común antes de diferenciarse en sus tipos de linfocitos diferentes. Las células B maduran en linfocitos B en la médula ósea, mientras que las células T migran a y maduran en el timo. Después de la maduración, los linfocitos entran en los órganos linfoides periféricos de circulación y, en su búsqueda de los patógenos invasores y células tumorales [20]. Otros tipos de células, incluyendo las células dendríticas (DC), neutrófilos y eosinófilos, también se han reportado para promover la angiogénesis tumoral [13,21]. DCS se considera que desempeñan un papel importante en la inmuno-vigilancia tumor mediante la obtención de células T respuestas específicas de tumor. La evidencia reciente indica que las CD también podría contribuir a la angiogénesis tumoral mediante la liberación de factores proangiogénicos, tales como VEGF y IL-8, en respuesta a la hipoxia [22].
Estos hallazgos, junto con la plasticidad intrínseca de hueso marrow- células derivadas y células inflamatorias en respuesta a señales microambientales y la persistencia de las señales de polarización en el microambiente tumoral, sugieren que las células derivadas de la médula ósea en el microambiente tumoral pudiere producir factores pro-angiogénicos y pro-invasivos que promueven la progresión del tumor [19] .
en este estudio, se estableció combinado BM transplantes y un modelo de cáncer colorrectal asociado con la colitis para definir la distribución de células endoteliales derivadas-BM, CD11c
+ DC y CD4
+ células T en tumores. Este modelo proporciona una poderosa herramienta para el estudio de las aportaciones de diversas células derivadas de la médula ósea durante la progresión del cáncer colorrectal asociado con la colitis y puede revelar nuevos BM derivados de tipos de células y funciones que podrían ser aplicables en las futuras estrategias terapéuticas.
Materiales Métodos y
Animales y células
C57BL /6, BALB /cy GFP ratones fueron adquiridos desde el centro de animales de laboratorio, Shanghai, china. Todos los procedimientos con animales experimentales se realizaron de acuerdo con los protocolos aprobados por el Comité de Investigación Animal de la Universidad de Xiamen y cumplieron con la Guía para el Cuidado y Uso de Animales de Laboratorio (NIH publicación No. 86-23, revisada 1985). Los ratones se mantuvieron en un (
Helicobacter
incluyendo exento y libre de parvovirus) entorno específico libre de patógenos y se utilizan generalmente entre 6 y 8 semanas de edad. células CT26-WT y CMT93 se derivaron de ratones BALB /c y C57BL /6 ratones, respectivamente. células CT26-WT y CMT93 (adquiridos comercialmente de ATCC, EE.UU.) se cultivaron en DMEM y se suplementó con 10% de suero bovino fetal, 100 U /ml de penicilina, 100 mg /ml de estreptomicina, glutamina 2 mM, piruvato de sodio 1 mM y 0,1 mM aminoácidos no esenciales a 37 ° C y 5% de CO2.
trasplante de médula ósea
La médula ósea de ratones irradiados letalmente C57BL /6 se reconstituyó por el trasplante de células de médula ósea de GFP quimérico ratones (ratones GFP-BMT). En pocas palabras, de tipo salvaje C57BL /6 ratones se irradiaron letalmente con una dosis de 950 rads, después de lo cual 2x10
se inyectaron células de la médula ósea de los ratones 6 GFP en las venas de la cola de los ratones receptores irradiados. Se evaluaron las células de médula ósea de los ratones GFP-BMT a las 4 semanas después del trasplante de médula ósea, y el grado de quimerismo se midió por citometría de flujo. Más del 90% de las células en las células mononucleares circulantes fueron reemplazadas por células positivas para GFP en estas condiciones experimentales.
cáncer colorrectal colitis relacionada con el (CAC) y el tumor modelo de implantación
La GFP los ratones se inyectaron ip -BMT con 10 mg /kg de AOM en 0,2 ml de solución salina. Una semana después de la administración AOM, 3% DSS se administró en el agua de bebida durante 7 días y después se cambiaron a agua potable normal para 14 días. Este procedimiento se repitió durante 3 ciclos, seguido de un cambio a agua normal. Los tumores se indujeron por s.c. inyección de 2x10
6 células CT26-WT y CMT93 en el flanco a las 4 semanas después del trasplante de médula ósea. Los tumores grandes se observaron típicamente por 4 semanas después de la implantación del tumor y los tejidos tumorales se recogieron para su análisis histológico.
La microscopía confocal
En los ratones GFP-BMT CAC, los vasos sanguíneos se tiñeron con 50 mg Alexa Fluor® 647 WGA (Molecular Probes, Invitrogen), que se inyecta retrorbitally. Siete minutos después de Alexa Fluor ® 647 WGA administración, los ratones fueron sacrificados por asfixia con CO2. Todos los procedimientos se realizaron bajo anestesia (0,5 ml Avertin, i.p.). Los tejidos fueron retirados inmediatamente, abierto por incisión longitudinal y se enjuagó con PBS. Viven muestras de tejidos tumorales se obtuvieron imágenes con un Bio-Rad Resplandor 2000 microscopio confocal (Bio-Rad, Hercules, CA). La adquisición de imágenes se realizó con láser de Sharp software de exploración (Bio-Rad), y reconstrucciones en 3D se completa con el software Volocity (Waltham, MA).
La citometría de flujo análisis
El tejido tumoral se aisló de ratones GFP-BMT CAC y cortado en pedazos en 1 mg /ml de colagenasa ⅳ. digestión con colagenasa se realizó en solución de colagenasa durante 45 minutos a 37 ° C. células eluidas se pasan entonces a través de un filtro de células de 70-l. Las células se centrifugaron durante 10 minutos a 1400 rpm a temperatura ambiente y se recogió. Las células entonces se incubaron en suero de burro al 10% y Fc bloqueados (BD Pharmingen, San Jose, CA) durante 20 minutos a 4 ° C, después de lo cual se tiñeron con anticuerpos conjugados fluorescentes. APC conjugado con CD11c anti-ratón (HL-3) y PE conjugado con anti-CD4 de ratón (OX-38) se adquirieron de BD Pharmingen (San Diego, CA) y se utilizaron para el análisis FACS. Las células se analizaron en un citómetro FACSCaliber (BD Bioscience, San Diego, CA) y luego se analizaron utilizando el software FlowJo (Árbol Star, Ashland, Oregón).
La tinción de inmunofluorescencia
C57BL /6 ratones fueron sacrificados por CO
2 asfixia y los tejidos de colon fueron inmediatamente retirados, fijo durante 4 a 5 horas a temperatura ambiente en tampón de fijación GFP, incrustado en Tissue-Tek compuesto OCT (Miles Inc., Elkhart, IN) y se congelaron rápidamente y se almacenaron a -80 ° C, después de lo cual 5-10 micras secciones se cortaron en un criostato y se transfieren a portas pre-recubiertos de poli-lisina (Sigma-Aldrich). Las secciones fueron fijadas con acetona fría durante 20 minutos a temperatura ambiente. secciones fijadas se lavaron tres veces con PBS y se incubaron con 5% de suero normal de burro y 0,02% BSA-PBS durante una hora a temperatura ambiente. Los anticuerpos primarios utilizados fueron específicos para CD31 (concentración inicial, 0,5 mg /ml; dilución, 1/500; eBioscience), CD4 (dilución, 1/200; BD), CD11c (dilución, 1/1000; BD), y Ly6C (dilución, 1/100; BD). DAPI (Vector Laboratories, Burlingame, CA) se utilizó para la tinción nuclear.
El análisis estadístico
Los datos se expresan como la media ± desviación estándar. Las comparaciones entre grupos se analizaron usando de Student
t-test
.
P Hotel & lt; 0,05 fue considerado estadísticamente significativo.
Resultados
Establecimiento de una combinación de trasplante de médula ósea y modelo de cáncer colorrectal asociado con la colitis
De tipo salvaje C57BL /6 ratones fueron irradiados letalmente con una dosis total de 950 rads, después de lo cual 2x10
se inyectaron células de la médula ósea de los ratones 6 GFP en las venas de la cola de los ratones receptores irradiados. Cuatro semanas después del trasplante de médula ósea, tejido de colon se aisló de ratones GFP-BMT para el análisis de microscopía confocal, y el grado de quimerismo se midió por citometría de flujo. Se encontró que el intestino se llenó de fluorescencia verde, y más de 90% de las células mononucleares circulantes en los ratones receptores fueron positivas para GFP (Figura 1C, D).
(A) vista macroscópico muestra un número de los tumores de colon en los dos puntos distales del modelo de ratones. (B) H & amp; E manchas de secciones en serie de tejidos de colon de ratón. (C) La microscopía confocal análisis de las secciones congeladas de colon mostró que las células derivadas de la médula ósea (verde) en el colon. (D) La citometría de flujo análisis de células mononucleares periféricas en el modelo GFP-BMT.
Los ratones GFP-BMT fueron inyectados por vía intraperitoneal con 10 mg /kg AOM en 0,2 ml de solución salina. Una semana después de la administración AOM, 3% DSS se administró en el agua de bebida durante 7 días, seguido por 14 días de agua normal, esta alternancia se repitió durante 3 ciclos. Hemos observado tumores intestinales en la mayoría de los ratones, y los tipos de tumores se confirmaron mediante análisis histológico (Figura 1A, B).
médula ósea derivada de células endoteliales contribuido a la angiogénesis durante el cáncer colorrectal colitis asociada
para investigar si las células endoteliales derivadas de BM contribuyeron a la angiogénesis tumoral en este modelo, se analizó la expresión de GFP en el endotelio de tumores en ratones GFP-BMT después de la inducción de cáncer de colon asociado con la colitis. análisis de microscopía confocal en muestras de tejido vivo mostró que las células positivas para GFP ampliamente infiltraron al estroma tumoral, y algunas de las células se vieron cercados por un margen WGA-positiva en el endotelio del tumor. se observaron células de WGA y GFP-positivas doble revestimiento de los vasos (Figura 2A). secciones de tumores congeladas se tiñeron con anticuerpo anti-CD31 (n = 5), y como se muestra en la Figura 2B, las células positivas para GFP se infiltraron en el endotelio del tumor. Tomados en conjunto, nuestros datos indican que BM-deriva células endoteliales contribuido a la angiogénesis del cáncer de colon asociado con la colitis.
(A) Los vasos sanguíneos se tiñeron con 647 WGA (azul), que se inyecta retrorbitally. análisis de microscopía confocal de muestras de tejido vivo mostró que las células derivadas de BM (verde) se infiltraron en el estroma, y una parte de las células se vieron cercados por un margen WGA-647-positivo (azul) en el endotelio del tumor. se observaron células doble positivas que revisten los vasos. (B) Las secciones de tumores congeladas se tiñeron con un anticuerpo anti-CD31 para detectar las células endoteliales derivadas de BM (verde). se observaron células positivas para GFP (verde) con márgenes de CD31-positivo en el endotelio del tumor. C (CMT93) y D (CT26) tejidos tumorales de xenoinjertos aisladas de ratones de trasplante BM se tiñeron con anti-CD31 anticuerpos (rojo). No se observaron células positivas para GFP alrededor de los vasos del tumor, y algunos se alinearon el endotelio.
Además, en consonancia con nuestro informe anterior (22), que hemos detectado endotelio GFP-positivas en los tumores de xenoinjertos CMT93 y CT26 en ratones GFP-BMT (Figura 2 C, D).
Distribución de CD11c derivadas de la médula ósea
+ células dendríticas y células CD4
+ T en el cáncer colorrectal asociado con la colitis
Para determinar la distribución de células inflamatorias derivados de BM en el microambiente del tumor, se analizaron los ratones que se sometió a trasplante de médula ósea seguido por la inducción de cáncer colorrectal colitis asociada por microscopía confocal. Como se muestra en la Figura 3A, B y C, los tejidos tumorales fueron ampliamente infiltradas por CD11c
+, Ly-6C y CD4
+ células inmunes, la mayoría de los cuales expresan GFP. Además, hemos detectado la células T CD4 + CD11c + DC GFP-positivas y en el tumor de los tumores de xenoinjertos CMT93 y CT26 en ratones GFP-BMT (Figura 3D, E, F y G).
(A- tinción C) Inmunofluorescencia del BMT combinado y muestras de cáncer colorrectal colitis asociada con anti-CD11c, Ly-6C y anticuerpos CD4-específicos (rojo). tejidos tumorales (D-E) CMT93 aisladas de ratones de trasplante BM se tiñeron con anti-CD11c y CD4-anticuerpos específicos (rojo). tejidos tumorales (F-G) CT26 aislados de ratones trasplantados-BM fueron teñidas con anti-CD11c y CD4-anticuerpos específicos (rojo).
Para definir cuantitativamente la distribución de CD11c derivados BM-DC + y células T CD4 + en nuestro modelo de cáncer colorrectal colitis asociada, aislamos las células infiltrantes de tumor de los tejidos tumorales de ratón y se realizó el análisis FACS. Nuestros datos de protocolo de aislamiento indicaron que entre las células infiltrantes de tumor, 4,16 ± 0,12% eran células GFP-positivas, 14,2 ± 0,34% eran células CD4 +, y 2,05 ± 0,23% eran CD11c + DCs (Figura 4A). Sorprendentemente, la células CD CD11c + GFP-positivas eran de un tercio de las células GFP + /CD11C-, y la mitad de la DCs (0,96% frente a 1,02%) fueron células originales de médula ósea positivas para GFP. La mayoría de las células T CD4 + fueron GFP-negativo (12,02% vs 1,9%). Curiosamente, hemos encontrado una nueva CD4 + CD11c + subconjunto de CC (0,34% vs 1,64%) en este modelo (Figura 4B, C).
(A) Aislamiento de células de tejido del tumor seguida de análisis FACS mostró que la proporción de las células derivadas de la médula ósea, células CD4
+ CD11c células y
+ DC del tejido del tumor de colon. (B-C) Composición del CD11c
+ y CD4
+ células T derivadas de la médula ósea. (C) Las barras representan la media ± SD; análisis de las muestras se realizaron por triplicado.
Discusión
La enfermedad inflamatoria intestinal (EII) puede conducir a un mayor riesgo de desarrollar cáncer colorrectal (CCR). La patogénesis molecular del cáncer colorrectal asociado con EII difiere de la de CCR esporádico [23]. La inflamación es un factor clave en la carcinogénesis y enfermedades inflamatorias crónicas como la EII iniciar vías complejas a la neoplasia [24]. En este estudio, hemos utilizado un agente carcinógeno potente, otitis media aguda, que induce aductos de ADN a través de las especies alquilantes. Estos aductos se forman enlaces covalentes entre el agente carcinógeno reactiva y el ADN genómico, dando como resultado mutaciones durante la reparación del ADN y la promoción del desarrollo del tumor. Tales mutaciones incluyen las mutaciones genéticas en las vías de tumorigénesis murina (APC, p53, MSH2) [25]. administración o repetidos ciclos de largo plazo de DSS, un producto químico que causa daño epitelial, pueden inducir la colitis crónica y posterior displasia en los roedores [26].
Durante la última década, los avances notables se han hecho en la comprensión de biología de células madre y el papel de las células madre en enfermedades tales como CRC [27]. En particular, los descubrimientos relacionados con el control de la proliferación de células madre y a la forma en la desregulación de la proliferación conduce a la oncogénesis han estado en la vanguardia. Por lo tanto, se estableció un trasplante de médula ósea combinado y modelo de cáncer colorrectal colitis asociada para definir la distribución y función de las células derivadas de BM en el cáncer de colon.
Recientemente, EPCs circulantes movilizados de la BM se han detectado en el sangre periférica de varias especies y se han demostrado estar involucrados en la neoangiogénesis en tumores, así como en la formación de nuevos vasos después de trauma, lesiones por quemadura, y el infarto de miocardio [28,29]. La mayoría de los tumores sólidos requieren un suministro vascular para proporcionar oxígeno y nutrientes para mejorar la progresión del tumor y la invasión. El tumor puede explotar cualquiera de los buques existentes, o reclutar y movilizar celulares derivadas de BM para inducir neovascularización [30]. EPCs se originan a partir de células derivadas-BM y poseen la capacidad de diferenciarse en células endoteliales maduras, contribuyendo al complejo proceso de la neovascularización tumoral. Hay pruebas de que la angiogénesis tumoral puede ser estimulada por células tumorales secretada quimiocinas CXC ligandos CXCL5 y CXCL8, a través de su receptor común CXCR2 [31]. Audollent et al muestran que Bone endotelial derivada de la médula y células de precursores hematopoyéticos mejorar la metástasis de cáncer de colon en un modelo de ratones desnudos ortotópico [32]. Nuestro informe anterior mostró que no se detectaron células endoteliales derivadas de BM en xenoinjertos de tumores utilizando Colon38 y células Panco2 [18]. En este estudio, hemos demostrado a través de análisis de microscopía confocal que las células endoteliales derivadas de BM participaron en la angiogénesis del cáncer de colon colitis asociada. Además, se detectó la expresión de GFP en el endotelio de los xenoinjertos tumorales CMT93 y CT26 en ratones GFP-BMT, en consonancia con nuestro informe anterior [18].
Al igual que en otros tumores malignos sólidos, colorrectal y tumores colitis asociada están infiltrados por varios tipos de células del sistema inmune [33]. Las células del sistema inmune innato, tales como los neutrófilos, mastocitos, células asesinas naturales (NK), células dendríticas y macrófagos asociados a tumores, pueden detectarse fácilmente en estos tumores. Además, los tumores avanzados reclutan subgrupos mieloides específicos que representan una población fenotípicamente heterogéneo pero funcionalmente similar de CD11b
+ Gr1
+ células, denominadas células supresoras de origen mieloide [34,35]. Estas células comparten algunas características con monocitos, macrófagos, neutrófilos, y los países en desarrollo y ayudan a suprimir las respuestas inmunes antitumorales y la angiogénesis tumoral. Estudios previos han establecido que las APC derivados de BM son principalmente responsables de la inducción de tolerancia de células T inducida por tumor [36]. derivados BM-DC, clásico marcador de CD11c, puede capturar y antígenos específicos de tejidos periféricos presentes a Naïve células CD8
+ T, lo que lleva a su eliminación [37]. Hay un requisito similar para el procesamiento de antígeno propio del parénquima por el anfitrión DC en la inducción de CD4
+ tolerancia de las células T en el tumor. Países en desarrollo derivados-BM de ratones BALB /c son capaces de promover la expansión de las células CD4
+ CD25
+ Foxp3
+ células T
in vitro
y que esto ocurre independientemente del estado de maduración los países en desarrollo como células maduras e inmaduras son capaces de ampliar la Foxp3
+ población celular [38,39]. Esta ignorancia inmunológica y los mecanismos de tolerancia inmune contribuyen al desarrollo de tumores. Mostramos la distribución de células inflamatorias derivadas-BM (CD11c
+, Ly-6C y CD4
+ células T) en el microambiente tumoral. Sorprendentemente, la células CD CD11c + GFP-positivas eran de un tercio de las células GFP + /CD11C-, y la mitad de todos los DC eran células originales BM GFP-positivas. También descubrimos un nuevo CD4
+ CD11c
+ DC subconjunto (0,34 vs 1,64) en nuestro modelo de cáncer colorrectal asociado con la colitis. Las células del sistema inmune adaptativo son reclutados en los tumores de colon y colitis asociada, en los que juegan un papel, ya sea a favor o, antitumoral [40]. células T, por ejemplo, se requiere no sólo para la inflamación, el desarrollo del cáncer y la progresión del tumor, sino también para el cáncer inmunidad [41].
establecido con éxito un trasplante de BM combinado y modelo de cáncer colorrectal colitis asociada. Este modelo proporciona una poderosa herramienta para el estudio de las aportaciones de diversas células derivadas de la médula ósea durante la progresión del cáncer colorrectal asociado con la colitis y puede revelar nuevos BM derivados de tipos de células y funciones que podrían ser aplicables en las futuras estrategias terapéuticas.