Extracto
Recientemente, un gen relacionado con ETS-(
ERG)
reordenamientos del gen, fosfatasa homólogo de tensina (
PTEN
) supresiones y
EGFR
aberraciones de la familia fueron caracterizados como biomarcadores potenciales para el cáncer de próstata (CaP) el manejo del paciente. Aunque
ERG
reordenamiento del gen ha sido identificado en aproximadamente el 50% de los cánceres de próstata localizados en los países occidentales, sigue siendo desconocida en pacientes chinos el significado pronóstico de este evento molecular crítico. El uso de hibridación in situ fluorescente (FISH) e inmunohistoquímica, se evaluó
ERG
,
PTEN
y
EGFR
aberraciones de la familia en una cohorte de 224 pacientes con cáncer de próstata diagnosticados chinos en transuretral resección de la próstata (RTU-P). En general,
se detectó ERG
reordenamiento en (44/190) de los casos el 23,2%, de los cuales el 54,5% (24/44) indicó una deleción del extremo 5 'de
ERG
.
PTEN
deleción se identificó en el 10,8% (19/176) de los casos. La amplificación de
EGFR
y
HER2
genes estuvo presente en el 1,1% (2/178) y 5,8% (10/173) de los casos, respectivamente. correlación significativa entre la
ERG
reordenamiento y
PTEN
eliminación fue identificado en esta cohorte.
EGFR
y
HER2
aberraciones fueron más frecuentes en los PCA sin
ERG
reordenamiento que en aquellos con
ERG
reordenamiento, aunque esto no alcanzó significación estadística . En general,
ERG
reordenamiento se asoció con los valores preoperatorios de PSA (p = 0,038) y la muerte relacionada con el cáncer (p = 0,02), pero no con la edad, estadio T clínica, puntuación de Gleason, o Ki- 67 índice de marcaje (LI). En particular, el análisis multivariado incluyendo marcadores de pronóstico conocidos reveladas
ERG
reordenamiento fue un factor pronóstico independiente (p = 0,022). Además,
ERG
estado de reordenamiento fue útil para identificar a los pacientes con mal pronóstico del grupo de CaP con baja Ki-67 LI. En resumen, se informó de que
ERG
reordenamiento se asoció con la muerte relacionada con el cáncer en pacientes con CaP chinos. Determinación de
ERG
estado de reordenación permite la estratificación de los pacientes con CaP en diferentes categorías de supervivencia
Visto:. Qi M, X Yang, Zhang M, T Lin, Sun X, Y Li, et al. (2014)
ERG
transposición se asocia con la muerte relacionada con el cáncer de próstata en pacientes con cáncer de próstata chinos. PLoS ONE 9 (2): e84959. doi: 10.1371 /journal.pone.0084959
Editor: Jindan Yu, de la Northwestern University, Estados Unidos de América
Recibido: 15 de agosto de 2013; Aceptado: noviembre 20, 2013; Publicado: 7 Febrero 2014
Derechos de Autor © 2014 Qi et al. Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos de la licencia Creative Commons Attribution License, que permite el uso ilimitado, distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que el autor original y la fuente se acreditan
Financiación:. Esta investigación fue apoyado por la Fundación Nacional de Ciencias Naturales de China (los números de subvención 81072110 y 81171951); Fundación de Investigación del Departamento de Salud de Shandong (número de concesión 2011HZ037). Los donantes no tenía papel en el diseño del estudio, la recogida y análisis de datos, decisión a publicar, o la preparación del manuscrito
Conflicto de intereses:.. Los autores han declarado que no existen intereses en competencia
Introducción
el cáncer de próstata (CaP) es una enfermedad heterogénea con una historia natural variables [1], [2]. Se estima que sólo una pequeña fracción de los pacientes sufre de potencial enfermedad potencialmente mortal que requiere un tratamiento agresivo. En la actualidad, los factores de pronóstico establecidos (puntuación de Gleason, estadio patológico y prostático específico en suero del antígeno (PSA)) no pueden distinguir con precisión clínicamente agresiva PCAS de los indolentes clínicamente [3], [4]. Por lo tanto, nuevos biomarcadores de pronóstico se necesitan con urgencia para el manejo del paciente CaP.
Recientemente, las fusiones genéticas recurrentes que implican la familia ETS de factores de transcripción,
ERG
,
ETV1
,
ETV4
,
ETV5
y
ELK4
, fusionado al gen regulado por andrógenos
TMPRSS2
u otros socios aguas arriba, se han identificado en la mayoría de los PCA, en el oeste países [5] - [8]. Entre estas aberraciones,
ERG
reordenamiento, que en su mayoría los resultados de
TMPRSS2-ERG sobre Fusion, es el más frecuente y ocurre en aproximadamente el 50% de los PCA localizadas [8]. Como
TMPRSS2
y
ERG
se encuentra ~ 3 Mb aparte en el cromosoma 21, el reordenamiento entre ellos se produce bien a través de la inserción o por una deleción intersticial (Edel) [6].
TMPRSS2-ERG sobre Fusion conduce a la sobre-expresión de ERG, que puede jugar un papel crítico en el desarrollo del CaP [8]. Hasta la fecha, el significado pronóstico de
ERG
reordenamiento en el CaP sigue siendo controvertido. Aunque varios estudios han indicado que
ERG
reordenamiento confiere un peor pronóstico [9] - [12], o bien otros encontraron una asociación pronóstico favorable [13] - [17] o ninguna asociación con el resultado clínico [18] - [20]. Es de destacar que la mayoría de estos datos provienen de los pacientes de raza blanca en los países occidentales. Aunque los datos emergentes sugirió la distinta prevalencia de
ERG
reordenamiento en PCAS entre los diferentes grupos étnicos [21], [22], el análisis de supervivencia de
ERG
aberraciones es rara en las poblaciones de Asia.
PTEN gratis (fosfatasa y tensina suprimido homólogo en el cromosoma 10) es una clave gen supresor de tumores en el CaP [23]. Supresión de la
PTEN
ocurre en el 20-70% de los PCA y se ha relacionado con la progresión tumoral rápido y temprano de recurrencia [24]. Anteriormente, nosotros y otros informaron la asociación significativa entre el
PTEN
eliminación y
ERG
reordenamiento tanto en localizado y metastásico PCA [25]. datos clínicos recientes han sugerido que
PTEN
eliminación y
ERG
reordenación podría ser utilizado para la estratificación pronóstica de los pacientes con CaP [26]
.
El receptor del factor de crecimiento epidérmico (
EGFR
) y
HER2
pertenecen a la
EGFR
familia y se sabe que regulan la proliferación celular, la diferenciación, la angiogénesis y la supervivencia. La amplificación y sobre-expresión de
EGFR
y
HER2
se han descrito en CaP y se asocia con la progresión del cáncer, mal pronóstico o el desarrollo de la independencia de andrógenos [27]. Sin embargo, hasta el momento, el vínculo entre el
ERG
reordenamiento y aberraciones genéticas de
EGFR
y
HER2
sigue sin estar clara.
El Ki-67 es un LI clásico marcador de proliferación y se ha encontrado para ser un predictor de los resultados para los pacientes con CaP tratados con prostatectomía radical [28], [29] o la radioterapia. Ki-67 se ha convertido en uno de los marcadores predictivos globales de los resultados del tratamiento en pacientes con CaP.
El objetivo del presente estudio fue investigar si
ERG
reordenamiento se asoció con un fenotipo más agresivo del CP. En este documento, que caracteriza de manera sistemática la frecuencia y la importancia pronóstica de
ERG
reordenamiento en una gran cohorte de pacientes con CaP chinos (n & gt; 200). Nos determina además si el
ERG
reordenamiento puede utilizarse como un indicador pronóstico y proporcionar un valor adicional en el análisis de pronóstico. Además, la relación de
ERG
reordenamiento del gen con otros marcadores moleculares, incluyendo
PTEN
deleción y genéticos aberraciones de
EGFR
y
HER2, España también fue investigado.
Materiales y Métodos
Los pacientes
Un total de 224 pacientes con CaP que fueron sometidos a resección del tumor mediante la resección transuretral de la próstata (RTU-P) se incluyeron en nuestro estudio. Las muestras tumorales se obtuvieron del Hospital de la Universidad de Shandong Qilu (Jinan, China), el Hospital Afiliado de la Universidad de Qingdao (Qingdao, China) y el Hospital General de Liaocheng (Liaocheng, China) entre 2003 y 2011. Todos estos pacientes fueron hospitalizados debido a las síntomas del tracto urinario inferior. obstrucción Ochenta y cinco pacientes con CaP en el estudio actual tenían ecografía transrectal
-
guiada biopsia de próstata y el 63,5% (54/85) de los casos tenían cáncer de zona periférica que se extendió a la zona de transición. Ninguno de los pacientes recibió radioterapia preoperatoria o la terapia de privación de andrógenos. La terapia antiandrógeno flutamida fue seguido después de la cirugía y estaban disponibles los datos de seguimiento de 190 pacientes, que van desde 3 a 147 meses (media 47 meses). Debido a que el número de muertes no-PCA (n = 17) se limita en esta cohorte, la muerte relacionada con el cáncer de próstata se acercó a la mortalidad por todas las causas. Las características clínicas y patológicas de los 190 casos de CaP en nuestra cohorte se resumen en la Tabla 1. Tres microarrays de tejidos (TMA) fueron ensambladas utilizando un arrayer manual de tejidos; para cada caso, se tomaron dos núcleos (1.0 mm de diámetro) de cada foco tumoral representativa y la morfología fue verificado por tres patólogos (M.Q., B.H. y X.Y.). Una forma de la sección 4 micras, cada TMA se tiñó con H & amp; E para verificar la presencia de tumor en los casos de CaP. perfil clínico y patológico se obtuvieron de los registros médicos y se mantiene en una base de datos relacional seguro con TMA datos. consentimientos informados escritos se obtuvieron de los pacientes con CaP y este estudio fue aprobado por la Junta de Revisión Institucional de la Facultad de Medicina de la Universidad de Shandong y de ética local.
fluorescencia
La hibridación in situ
(FISH)
Una prueba FISH ruptura aparte de dos colores interfase anteriormente descrito se realizó para detectar
ERG
reordenamiento [25]. cromosomas artificiales bacterianos (BAC) se obtuvieron del Centro de Recursos BACPAC (Oakland, CA), y sondas RP11-95I21 (5 'a
ERG
) y RP11-476D17 (3' a
ERG
) se prepararon como se describe [25]. La integridad y la correcta localización de todas las sondas fueron verificadas mediante hibridación con los diferenciales en metafase de linfocitos periféricos normales. Para detectar
PTEN
su eliminación, las sondas de ADN disponibles comercialmente para cytoband 10q23 (Espectro de Orange
PTEN
específica del locus de la sonda) y la región 10p11.1-Q11.1 (Spectrum centrómero del cromosoma 10 Verde sonda) (LSI
PTEN
/CEP 10; Vysis Inc. de Des Plaines, IL, EE.UU.) para la identificación de cromosomas se utilizaron. El
PTEN
sonda genómica abarca 368 kb y 166 kb comienza desde el extremo 5 'del gen y se extiende 98 kb más allá del extremo 3' del gen. Evaluación de
EGFR
y
HER2
aberraciones de genes se realizó utilizando el GLP
EGFR
/CSP 7 sonda y GLP
HER2
/CSP17, respectivamente (GP Medical Technologies, Pekín, china).
interfase FISH se realizó como se describe anteriormente [25], [30]. Los portaobjetos se examinaron usando un microscopio ImagingZ1 (Carl Zeiss, Oberkochen, Alemania). señales de FISH fueron anotados manualmente (100 × inmersión en aceite) en núcleos morfológicamente intactas y que no se solapan por dos patólogos (B.H., y M.Q.), y un mínimo de 50 células de cáncer de cada sitio se registraron. los tipos de cáncer con muy débil o sin señal se registraron como insuficientemente hibridado. Se excluyeron los casos que carecen de tejido tumoral en todos los dos núcleos.
Para validar la supresión de
PTEN
y amplificación de
EGFR
y
HER2
, se utilizó un método previamente documentado con modificación menor [25], [31]. En resumen, basado en la hibridación en cinco núcleos de control (datos no mostrados), la supresión de hemizygous
PTEN
gen se denominó como & gt; 50% de núcleos (media ± 3 desviaciones estándar de los controles no neoplásicas) que contiene ya sea una señal de una sonda de locus y ≥ 2 señales de sonda de referencia (supresión absoluta), o dos señales de una sonda de locus y ≥ 4 señales de sonda de referencia (supresión relativa). homocigotos supresión de
PTEN
fue exhibida por la falta concurrente de los dos
PTEN
señales locus y la presencia de señales de control en & gt; 30% de las células. Se consideraron las muestras amplificadas por
EGFR cuando
& gt; 10% de las células tumorales aparezca alguna
EGFR
: Relación de CEP 7 & gt; 2 o incontables racimos apretados de las señales de la sonda de locus (3-5copies ).
EGFR
copiar el número de ganancia se definió como un aumento del número de copia bajo debido al cromosoma 7 polysomy. Del mismo modo, las muestras se consideraron amplificadas por
HER2
cuando & gt; 10% de las células tumorales, ya sea representada
HER2
: Relación de CEP 17 & gt; 2 o incontables racimos apretados de las señales de la sonda de locus (3 -5copies).
HER2
ganancias de número de copias se define como un aumento de bajo número de copias, debido al cromosoma 17 polysomy. FISH imágenes Representante de
ERG
reordenamiento se muestra en la Figura 1. La Figura 2A y 2B demostraron casos representativos con
PTEN
su eliminación, así como
HER2
amplificación.
(a) mapa esquemático de '
TMPRSS2 de búsqueda:' '
ERG de búsqueda:' posición sobre 21q22.2-22.3 y. T y C se orientan hacia las regiones teloméricas y centroméricas, respectivamente. BAC encuentran 5 'y 3' de
ERG
fueron utilizados como sondas para la interfase FISH. coordenadas cromosómicas son la acumulación de marzo de 2006 del genoma humano utilizando la UCSC Genome Browser. El
TMPRSS2
y
ERG
loci están separados por aproximadamente 3 Mb. (B) FISH se realizó a través de BAC como se indica con la etiqueta fluorescente correspondiente en las secciones de tejido incluidas en parafina fijadas en formalina para FISH ruptura aparte del gen
ERG
. (B & amp; E),
ERG
reordenamiento caso negativo, como se indica por dos pares de señales verdes y rojas co-localizados. (C & amp; M),
ERG
reordenamiento positivo (translocación) caso mostró un par de escisión 5 'y 3' de señales. (D & amp; G),
ERG
reordenamiento positivo (con supresión) mostraron caso de pérdida de un verde con la etiqueta sonda 5 'a
ERG
(A1. -A3) FISH imágenes de no borrado, hemizygous y homocigotos
PTEN
deleción en el CP. A1,
PTEN
caso negativo eliminación mostró las señales rojas pareadas (10q23 /
PTEN
locus) y las señales verdes en las células tumorales. A2, Caso representativo con
PTEN
eliminación hemizygous mostró uno señales rojas y verdes pares de señales en las células tumorales. A3, Caso representativo con
PTEN
deleción homocigota mostró ausencia de señales rojas, pero retuvo pares de señales verdes. Para todos los ensayos, se evaluaron al menos 50 núcleos celulares de cáncer. (B1-B3) La detección de la expresión de HER2 por IHC y FISH en el CaP. B1, el análisis FISH de caso representativo sin
HER2
amplificación. B2, FISH análisis de caso de
HER2
amplificación. B3, HER2 IHC tinción muestra la reactividad membranosa completa de fuerte intensidad (3+) en las células tumorales (aumento original, × 200). (C1-C3) El Ki-67 tinción por IHC en células de CaP. C1, No tinción (0) de Ki-67 en las células tumorales. C2, Low Ki-67 (LI & lt; 10%) positividad nuclear en las células tumorales. C3, alta Ki-67 (LI≥10%) positividad nuclear en las células tumorales.
La inmunohistoquímica
La inmunohistoquímica (IHC) para PTEN, EGFR y HER2 se ha realizado mediante una polimerización basado en el método (EnvisionTM + Sistema Dual Link-HRP). Fuentes y diluciones de anticuerpos primarios fueron los siguientes: anti-PTEN (señalización celular, 1:100), anti-EGFR (DAKO, 1:500), anti-HER2 (DAKO, 1:500) y anti-Ki67 anticuerpos (DAKO , 1:100). Secciones de TMA (4 m) se desparafinaron y preparados por pasadas sucesivas a través de xileno y el grado de concentración de etanol como procedimiento de rutina, a continuación, los antígenos se recuperaron por olla a presión utilizando un tampón de citrato (0,01 M), durante 8 minutos a 120 ° C. la actividad de peroxidasa endógena se bloqueó por incubación con una solución de peróxido de hidrógeno 0,3% durante 15 min. Las secciones de tejido se incubaron durante la noche a 4 ° C con anticuerpos primarios. Después de un lavado en PBS, las secciones se trataron con reactivo EnvisionTM + Dual Link System-HRP a temperatura ambiente durante 30 min. 3, 3'-diaminobenzidina tetrahidrocloruro se utilizó como cromógeno durante 3 minutos y las secciones de tejido se contratiñeron con hematoxilina.
La inmunotinción de EGFR y HER2 se semicuantitativamente evalúa en función de la intensidad de la reactividad de la membrana después de la original de DAKO Herceptest criterios con un umbral de células inmunopositivas 10%. El sistema de puntuación se ha descrito en otra parte [27]. Evaluación de PTEN se basa en la intensidad de la tinción citoplásmica; los tumores se dividen en tres categorías como se describe anteriormente [25]. Grado 2 mostró un aumento o la intensidad de tinción igual en comparación con el tejido normal correspondiente; grado 1 había disminuido la intensidad de tinción y grado 0 demostrado ausencia total de manchas. El índice de etiquetado Ki-67 (LI) se definió como la fracción de células tumorales que muestran cualquier Ki-67 inmunoreactividad nuclear y se considera alta si el 10% o más de los núcleos tumorales se tiñeron. Para este propósito, se analizaron 100-200 células tumorales para cada caso. inmunohistoquímicos imágenes representativas de Ki-67 se muestran en la Figura 2C.
Análisis estadístico
Los análisis estadísticos se realizaron utilizando el paquete estadístico para Ciencias Sociales, versión 19.0 (SPSS), con un nivel de significación de 0,05 (probabilidad de dos colas). prueba de χ2 de Pearson y la prueba exacta de Fisher se utilizaron para evaluar las asociaciones entre la
ERG
reordenación y las variables clínico-patológicas, así como otras aberraciones moleculares. Se utilizó el análisis de Kaplan-Meier para evaluar el valor pronóstico de
ERG
reordenamiento en pacientes con CaP. El valor pronóstico de
ERG
reordenamiento se determinó aún más en el análisis univariable y multivariable, incluyendo los valores de PSA en el diagnóstico, la puntuación de Gleason, estadio clínico del tumor, metástasis a distancia, Ki-67 LI y
EGFR
familia aberraciones genéticas.
Resultados
La frecuencia de
ERG
Reordenamiento
PTEN
Supresión y
EGFR
Familia aberraciones
en general,
ERG
fue cambiado en el 23,2% (44/190) de los pacientes chinos con CaP, de los cuales el 54,5% (24/44) demostró supresión del extremo 5 'de
ERG
. Curiosamente, dos de estos 24 casos se manifestaron dos copias de la 3 '-
ERG
señales, lo que sugiere la duplicación de
ERG
reordenamiento.
PTEN
deleción se identificó en el 10,8% (19/176) de los casos, con hemizygous y deleciones homocigóticas presentes en 12 de 19 (63,2%) y 7 de 19 (36,8%) casos, respectivamente. La amplificación de
HER2
fue identificado en 10 de 173 tumores (5,8%) y polysomy del cromosoma 17 se observó en 41 de 173 (23,8%) casos. Por el contrario, sólo 2 de 178 (1,1%) casos mostraron amplificación de
EGFR
con polysomy de estar presente el cromosoma 7 en 18 de los 178 tumores (10,1%).
Las relaciones entre los
ERG
reordenamiento y variables clinicopatológicas
ERG
reordenamiento del gen se asoció significativamente con los niveles de PSA preoperatorios en pacientes con CaP (p = 0,038) (tabla 2). La incidencia de
ERG
reordenamiento fue significativamente menor en los pacientes con bajo nivel de PSA (& lt; 4 ng /ml) en comparación con los que tienen niveles medios o altos de PSA. Sin embargo, no se identificó ninguna correlación significativa entre la
ERG
reordenamiento y la edad, la puntuación de Gleason, estadio T clínica, o metástasis a distancia al momento del diagnóstico.
Asociación de
ERG
el reordenamiento con otros marcadores moleculares
a medida que la supresión de
PTEN Opiniones y amplificaciones de
EGFR
y
¿Cuáles son HER2 aberraciones genómicas relevantes en el CP, que exploraron la próxima asociación de
ERG
reordenamiento con estos eventos moleculares en nuestra cohorte. Como se muestra en la Tabla 2, el
ERG
reordenamiento estaba presente en aproximadamente el 63,2% (12/19) de los pacientes con CaP que
PTEN
deleción (hemizygous u homocigóticos). Del mismo modo,
PTEN
eliminación fue más frecuente en los casos que albergaban
ERG
reordenamiento (30,8%, 12/39) en comparación con los
ERG
reordenamiento casos negativos (5,1% , 7/137). En general, una asociación significativa entre el
PTEN
eliminación y
se observó ERG
reordenamiento en la cohorte CaP Chino (P = 0,0008). Es de destacar que los casos 46/182 (25,2%) CaP mostró disminución de expresión de la proteína PTEN mediante técnicas de inmunohistoquímica. La concordancia entre los
PTEN
la presencia de deleción y expresión de la proteína PTEN también fue identificado en nuestra cohorte (datos no mostrados).
La amplificación de
EGFR
fue identificado sólo en dos casos de CaP, ambos de los cuales fueron negativos para
ERG
reordenamiento. Del mismo modo, 9 de cada 10 (90,0%) casos de CaP con
HER2
amplificación estaban ausentes para
ERG
reordenamiento.
ERG
reordenamiento fue más a menudo presentes en los casos de CaP y sin
HER2
amplificación (34/163, 20,9%) que en
HER2
tumores -amplified (1/10, 10,0 %) (p = 0,149).
sobreexpresiones inmunohistoquímica de EGFR y HER2 se identificaron en el 17,6% (31/176) y el 6,0% (11/181) de los casos, respectivamente. HER2 sobreexpresión de la proteína se correlacionó significativamente con la amplificación de
HER2 gratis (P & lt; 0,01). Sin embargo, no hubo correlación entre la expresión de proteína EGFR y la amplificación de genes (datos no mostrados).
ERG
reordenación no se asoció con EGFR ni expresión de la proteína HER2.
Análisis de supervivencia de
ERG
Reordenamiento en relación con la muerte relacionada con el cáncer
Para determinar si la presencia de
ERG
reordenamiento fue un factor pronóstico de CaP, se compararon las tasas de mortalidad relacionadas con el cáncer entre los pacientes con o sin
ERG
reordenamiento. Sobre la base de las estimaciones de supervivencia de Kaplan-Meier, el grupo de pacientes con
ERG
reordenamiento tenía una mucho mayor tasa de mortalidad que los pacientes que carecían del reordenamiento del gen (p = 0,02) (Figura 3).
las tasas de supervivencia relacionados con el cáncer se compararon entre los pacientes con y sin
ERG
reordenamiento usando la prueba de log-rank.
ERG
estado de reordenamiento ha demostrado ser un factor importante para predecir el pronóstico de la supervivencia relacionada con el cáncer de próstata [HR (IC del 95%): 3.368 (1,261-8,955), P = 0,015] en el análisis univariante (Tabla 3). los valores de PSA en el diagnóstico (p = 0,009), la puntuación de Gleason (P & lt; 0,001), la etapa clínica del tumor (p = 0,011), metástasis a distancia (p = 0,006), Ki-67 LI (P = 0,002),
EGFR
amplificación (p = 0,023), y
HER2
amplificación (p = 0,001) fueron también significativamente relacionados con la supervivencia relacionada con el cáncer en el análisis univariado. Cabe destacar que, en un análisis multivariado que incluía conocido marcadores de pronóstico,
ERG
estado de reordenamiento siguió siendo un predictor significativo (p = 0,022), con un riesgo relativo de 2,099 (IC del 95%: 1,112 a 3,962) (Tabla 3).
La relevancia pronóstica de la
ERG
Reordenamiento y Ki-67 LI
a continuación se determinó si los marcadores que combinan mejorarse aún más valor pronóstico. Desde Ki-67 es un pronosticador fuerte conocido en el CaP y tiene un valor predictivo independiente para la supervivencia relacionada con el cáncer en nuestra cohorte, que directamente compararon los efectos pronósticos de
ERG
reordenamiento y Ki-67 LI en combinación. Para este análisis, se agruparon todos los cánceres en función de su
ERG
estado (no reordenado vs. reordenado) y el estado del índice de etiqueta Ki-67 (LI & lt; 10% vs LI & gt; 10%). Por lo tanto, los análisis de regresión de Cox se realizaron utilizando el grupo con baja Ki-67 LI y sin
ERG
aberración como la referencia. Como se muestra en la Figura 4, el grupo más grande, que comprendía los que no tenían
ERG
reordenamiento y baja Ki-67 LI, tuvieron una mayor supervivencia relacionada con el cáncer en comparación con los otros tres grupos. Cabe destacar que el subgrupo de pacientes con
ERG
reordenamiento y alta Ki-67 LI tuvo la supervivencia peor relacionada con el cáncer.
Los pacientes fueron estratificados por
ERG
reordenamiento y Ki se realizó -67 LI en combinación log-rank test.
determina además si
ERG
estado de reordenamiento podrían ser utilizados para mejorar la estratificación del riesgo de los pacientes con CaP de bajo Ki-67 LI. De Kaplan-Meier análisis mostró que
ERG
estado de reordenación era un factor pronóstico en el grupo de pacientes con baja Ki-67 LI (P = 0,019) (Figura 5). La mediana de supervivencia de los pacientes con CaP con y sin
ERG
reordenamiento fue de 69 y 89 meses, respectivamente. Sin embargo,
ERG
estado de reordenamiento perdió su valor predictivo de los resultados en aquellos con alta Ki-67 LI (Figura 5B). Por el contrario,
ERG
estado de reordenamiento no era útil en la identificación de pacientes con CaP de alto riesgo con baja puntuación de Gleason (datos no mostrados)
(A) bajo ki-67 LI (& lt; 10. %) de subgrupos, (B) de alta ki-67 LI (≥10%) subgrupo
Discusión
Esta es una de las más grandes series de pacientes con CaP (n & gt;. 200) reportado hasta el momento en china análisis de
ERG
reordenamiento. Nuestra cohorte comprende los hombres tratados con RTU-P y todos los pacientes del estudio tenían síntomas del tracto urinario inferior obstrucción, por lo tanto, lo que representa un selecto subgrupo de reconocido clínicamente PCAS. Los pacientes con PCA incidentales fueron excluidos de nuestro estudio. A pesar de que cada vez más pacientes con CaP de PSA-solado se han identificado en los países occidentales, hay datos limitados en relación con el fenotipo clínico o historia natural de CaP. Es de destacar que nuestra cohorte incluyó un subgrupo de pacientes con alto grado PCAS. Esto difiere de la mayoría de los pacientes occidentales que se encontró que tenían CaP debido a la detección de PSA y con frecuencia fueron tratados con prostatectomía radical.
En general, la frecuencia de
ERG
reordenamiento fue del 23,2% en nuestra cohorte y esto fue comparable a la previamente por Mao et al [21] y Ren et al [32] en pacientes chinos con CaP. En consonancia con estos resultados, Kimura et al [17] y Lee et al [33] informaron de la prevalencia de
TMPRSS2-ERG
fusión de genes fue del 16,3% (15/92) en japonés y el 20,9% (53 /254) en pacientes con CaP de Corea, respectivamente. Anteriormente, Mosquera et al [34] detectado
TMPRSS2-ERG sobre Fusion en 100 caucásicos y los pacientes con CaP no caucásica sometidos a biopsia de próstata. Se informó de que la incidencia fue significativamente diferente en los caucásicos (44/85, 52%) y en los no caucásicos (2/15, 13%). Más recientemente, el uso de un ensayo de FISH multicolor, Magi-Galluzzi et al [35] encontró que
TMPRSS2 CD -
ERG
fusión del gen estaba presente en el 50% (21/42) de los caucásicos, 31.3 % (20/64) de los afroamericanos y el 15,9% (7/44) de los japoneses (P = 0,003). En conjunto, estos estudios se destaca la baja prevalencia de
TMPRSS2-ERG
fusiones de genes en pacientes con CaP en Asia en comparación con los países occidentales y esta disparidad al menos en parte el resultado de diferentes antecedentes genéticos en vez de los efectos de estilo de vida o dieta. Es de destacar que la diferencia puede reflejar también los hallazgos previos de que la fusión es menos común en los tumores de la zona de transición (de la que la mayoría de los tumores que se encuentran en las muestras de la RTU-P) que en los tumores de la zona periférica [17], [36], [37]. Además, el diseño de cohorte y la consideración de la multifocalidad podrían tener impactos en el
ERG
reordenación de frecuencias [38].
Hasta ahora, el significado pronóstico de
ERG
reordenamiento en el CaP permanece contradictorio. Una serie de estudios retrospectivos que buscaban una asociación entre el
TMPRSS2-ERG
y el resultado después de la prostatectomía radical PSA proyectará dio resultados mixtos. Varios estudios publicados han demostrado que los pacientes con CaP con el
TMPRSS2-ERG
fusión de genes confieren un mayor riesgo de recurrencia, mientras que otros reportaron una asociación significativa con un pronóstico favorable o una relación nula con el resultado clínico. Entre los pacientes tratados con la espera vigilante,
TMPRSS2-ERG
parecía estar asociado con peores resultados. En un meta-análisis que incluyó 227 hombres diagnosticados con RTU-P, los hombres con tumores de fusión positivos fueron 1,37 (IC del 95%, 0.53-3.51) veces más probabilidades de experimentar metástasis a distancia o morir a causa de la ACP, como los negativos para la fusión [18 ]. Las discrepancias en los informes sobre la importancia pronóstica de
ERG
reordenamientos puede ser debido a un diseño de cohorte (multifocalidad y el origen zonal del tumor), técnica de detección de la fusión, y también son responsables hasta el punto final primario del estudio (es decir, recurrencia bioquímica, la supervivencia global). Por lo tanto, se necesitan más estudios estandarizados para abordar esta cuestión. En el presente estudio, encontramos que
ERG
reordenamiento se asoció significativamente con la muerte relacionada con el cáncer de próstata en pacientes con CaP chinos. Más importante aún,
ERG
reordenamiento se sugirió a ser un predictor independiente de la supervivencia global en el análisis multivariado. Es notable que la recurrencia bioquímica es un predictor imprecisa de muerte por cáncer de próstata. Aunque el PSA podría servir como punto final alternativo para la supervivencia general, la mayoría de los hombres con PSA fallo bioquímico morirán de otras causas. Ward et al encontró que en una población de 3897 pacientes sometidos a prostatectomía radical, sólo el 8,3% de los hombres con PSA fallo bioquímico murió de CaP [39]. la muerte, por lo tanto, relacionada con el cáncer de próstata como el punto final primario podría ser más fiable para el análisis de pronóstico. En total, nuestros datos apoyan el concepto de que si se deja sin tratamiento o la falta de la terapia inicial,
TMPRSS2-ERG
CaP se ejecutará un curso clínico más agresivo que el cáncer de fusión-negativo.
Hasta la fecha, Ki-67 ha sido ampliamente utilizado como un biomarcador pronóstico en tumores malignos incluyendo CaP. Su valor predictivo independiente para la supervivencia relacionada con CaP se ha confirmado en nuestro estudio. De acuerdo con el informe del Antonarakis [40], ninguna asociación significativa entre la
fue identificado ERG
reordenamiento y el estado de Ki-67 LI. Una explicación es que
ERG
reordenamiento tiene diferentes efectos sobre la proliferación y la invasión
in vitro
, respectivamente, Ki-67 es un marcador de proliferación bien conocido [41] - [43]. Por el contrario, en 2008, Tomlins et al informaron de que la alternancia de
ERG
expresión génica afectar significativamente la invasión
in vitro
pero no tiene ningún efecto sobre la proliferación celular [41]. Sin embargo, al estratificar la condición de Ki-67,
ERG
reordenamiento fue un factor pronóstico para la supervivencia cáncer-relacionada sólo en pacientes con CaP con baja Ki-67 LI. Un reto importante en la gestión clínica del CP es la incapacidad de distinguir fácilmente indolente de tumores agresivos en pacientes que se presentan con bajo grado de Gleason, volumen tumoral baja o baja Ki-67 LI. Nuestros datos sugieren que la determinación de
ERG
estado de reordenación podría ser útil en la estratificación de los pacientes con CaP con baja Ki-67 LI en diferentes categorías de supervivencia.
A pesar de que la fusión de genes es un evento molecular clave en el CP desarrollo y
TMPRSS2-ERG sobre fusion puede inducir neoplasia prostática de alto grado (PIN de alto grado), no es suficiente para generar un fenotipo totalmente transformado
in vitro Opiniones y en
in vivo
[ ,,,0],41], [44]. Varios grupos independientes han sugerido
ERG
puede cooperar con otras aberraciones genéticas para promover el desarrollo y la progresión del CaP, como
PTEN
haploinsuficiencia, mayor receptor de andrógenos (AR) de señalización, la sobreexpresión de SOX9 y fosfoinosítido aberrante 3-quinasa (PI3K) vía [45] - [47]. Más recientemente,
TMPRSS2-ERG
fue mostrado para mediar epitelial a mesenquimal transición (EMT) a través de la inducción de la vía de señalización Wnt a través de FZD4 así como eje ZEB1 /ZEB2 [48], [49]. Anteriormente, nosotros y otros han sugerido la asociación significativa entre el
PTEN
eliminación y
ERG
reordenamiento tanto en localizado y metastásico PCA en los países occidentales.