Extracto
Aplicaciones
Este estudio se realizó para explorar los efectos de los polimorfismos genéticos (CYP1B1 G355T * 2, * 3 CYP1B1 C4326G, y CYP2E1 * 5 G-1293C) y los factores ambientales (fumar y beber) en la susceptibilidad al cáncer de laringe en un grupo de estudio de los chinos Han.
Métodos
Este estudio de caso-control incluyó 552 pacientes chinos Han diagnosticados con cáncer de laringe y 666 sujetos de control sanos de la misma etnia, edad similar, y el género. polimorfismos genéticos fueron examinadas usando multi-PCR y desorción por láser asistida por matriz de ionización - tiempo de vuelo (MALDI-TOF MS) metodología. La asociación de estos factores genéticos y ambientales con la susceptibilidad al cáncer de laringe se evaluó utilizando un enfoque estadístico.
Resultados
Las frecuencias de los tres polimorfismos en la cohorte de pacientes fueron significativamente diferentes de los de la cohorte de control. En comparación con el grupo de control, los portadores de alelos variantes de CYP1B1 * 2 355T y CYP2E1 * 5 -1293C mostraron un mayor riesgo de desarrollar cáncer de laringe (por CYP1B1 * 2 355T, OR ajustada = 2,657, P & lt; 0,001; para CYP2E1 * 5 -1293C, OR ajustada = 1,938, P & lt; 0,001), mientras que los portadores de la mutación de alelos CYP1B1 * 3 4326G mostraron un menor riesgo (OR ajustada = 0,562, P & lt; 0,001). No se observaron efectos conjuntos de estos polimorfismos. En comparación con el haplotipo G
355C
4326G
-1293, los haplotipos T
355C
4326G
-1293 (OR ajustada = 1,809, P & lt; 0,001), G
355C
4326C
-1293 (OR ajustada = 1,644, p = 0,044), y T
355C
4326C
-1293 (OR ajustada = 3.104, P & lt; 0,001) se asociaron con un riesgo significativamente mayor de cáncer de laringe. Las OR ajustadas para los no fumadores, los no bebedores, fumadores y bebedores con el GT genotipo /TT en CYP1B1 * 2 G355T eran 2.190 (p = 0.006), 2.008 (p = 0,001), 5,875 (P & lt; 0,001), y 4.518 (P & lt; 0,001), respectivamente
Conclusiones
CYP1B1 * 2 355T y CYP2E1 * 5 -1293C están asociados con un mayor riesgo de cáncer de laringe, mientras que CYP1B1 * 3 4326G está asociado. con un menor riesgo. Estos polimorfismos mostraron efectos conjuntos sobre el riesgo de cáncer de laringe. Fumar y beber mostraron efectos de colaboración con dos alelos de alto riesgo (CYP1B1 * 2 355T y CYP1B1 * 3 4326G) para promover el riesgo de cáncer de laringe
Visto:. Jin J, Lin M, S Liao, Bao Q, Ni L (2014) Efectos de SNPs (CYP1B1 G355T * 2, * 3 CYP1B1 C4326G, y CYP2E1 * 5 G-1293C), fumar y tomar en la susceptibilidad al cáncer de laringe entre los chinos Han. PLoS ONE 9 (10): e106580. doi: 10.1371 /journal.pone.0106580
Editor: Qing Yi-Wei, el Instituto del Cáncer de Duke, Estados Unidos de América
Recibido: 27 de enero de 2014; Aceptado: August 7, 2014; Publicado: 9 Octubre 2014
Derechos de Autor © 2014 Jin et al. Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos de la licencia Creative Commons Attribution License, que permite el uso ilimitado, distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que el autor original y la fuente se acreditan
Financiación:. Este trabajo con el apoyo de la Fundación de Ciencia y Tecnología de la ciudad de Wenzhou, provincia de Zhejiang, china (H20090025, URL: http://www.wzkj.gov.cn) y la Fundación de Ciencia y Tecnología de la Salud oficina de la provincia de Zhejiang, china (2012ZB106, URL: http://zgj.zjtcm.net). Los donantes no tenía papel en el diseño del estudio, la recogida y análisis de datos, decisión a publicar, o la preparación del manuscrito
Conflicto de intereses:.. Los autores han declarado que no existen intereses en competencia
Introducción
el cáncer de laringe, la maligna del cáncer del cuello más común, es también un tumor maligno común en china [1]; sin embargo, la etiología del cáncer de laringe sigue siendo poco clara. Mientras que la mayoría de pacientes con cáncer de laringe tiene una larga historia de tabaquismo y alcohol supuesto de [2], sólo un pequeño porcentaje de estos individuos, finalmente, el desarrollo de cáncer de laringe. Esto sugiere que un individuo genética juega un papel importante su susceptibilidad al cáncer de laringe [3], y apoya la idea actual de que la susceptibilidad al cáncer de laringe está asociada con las interacciones entre los genes y el medio ambiente. Por lo tanto, el uso de métodos de genética molecular y análisis de asociación genética para identificar los genes potencialmente relacionados con el cáncer de laringe debe ayudar a revelar la etiología de la enfermedad.
CYP1B1 y CYP2E1 son dos enzimas del citocromo P450 que catalizan la hidroxilación de pro- carcinógenos como hidrocarburos aromáticos policíclicos (HAP), aminas aromáticas heterocíclicas (HAA), aminas aromáticas, y N-nitrosaminas [4] - [7]. Estas reacciones pueden producir agentes citotóxicos, inducir mutaciones en proto-oncogenes o genes supresores de tumores, dar lugar a daños en el ADN, intensificar los lípidos y la peroxidación de proteínas, y en última instancia conducir a un mayor riesgo de desarrollar varios tipos de cáncer [8], [9]. Actualmente, & gt; 50 variantes polimórficas se han notificado a afectar a la codificación de la proteína CYP1B1, y entre estos, cuatro polimorfismos de nucleótido único (SNP) (CYP1B1 * 2 C142G, CYP1B1 * 2 G355T, CYP1B1 * 3 C4326G, y CYP1B1 * 4 A4390G) dan como resultado cambios en la composición de aminoácidos de la enzima y por lo tanto afectar el metabolismo de carcinógenos [10], [11]. El SNP CYP1B1 * 3 (Leu
432) ha sido reportado para dar como resultado una mayor actividad catalítica para la oxidación de benzo [α] pireno de 7,8-dihidroxi-7,8-dihidrodiol, en comparación con el Val
432 forma de la enzima [12]. Helmig et al. llevó a cabo un estudio que investigó la asociación entre las interacciones gen-ambiente y la susceptibilidad al cáncer, e informó que los fumadores tenían una alta frecuencia de tipo salvaje alelo C en el nucleótido 4326 (nt4326) locus de CYP1B1 [13]. Los estudios de la cabeza humana y el cuello del cáncer de células escamosas (HNSCC) reveló que el polimorfismo CYP1B1 * 3 C4326G se asocia con la exposición al tabaco [14]. Singh et al. informó que si bien el CYP1B1 G355T * 2 y * 3 CYP1B1 C4326G tanto aumenta la susceptibilidad de un individuo a CECC, la susceptibilidad también se vio afectada por las interacciones entre genes y factores ambientales (principalmente tabaco y la exposición al alcohol) [15]. Por otra parte, una asociación entre estos SPN y otros cánceres de células escamosas también se ha sugerido. Un meta-análisis llevado a cabo por Xu et al. encontraron que las mutaciones homocigóticas de CYP1B1 * 2 G355T y CYP1B1 * 3 C4326G pueden ser factores de bajo riesgo penetrancia de aparición de cáncer de pulmón [16], que es coherente con los resultados reportados por Chen et al. [17]. Además, CYP1B1 G355T * 2 y * 3 CYP1B1 C4326G También se ha informado que se asocia con la susceptibilidad a los cánceres relacionados con las hormonas, como el cáncer de próstata, cáncer de vejiga y carcinoma del endometrio [18] - [20].
Mientras que una mutación G-1293C en la región promotora 5 'del CYP2E1 altera la expresión del gen [21], el impacto de este SNP sobre el riesgo de un individuo de desarrollar cáncer de cabeza y cuello sigue siendo controvertido. Gajeka et al. informó de que CYP2E1 no se asoció con la susceptibilidad a cáncer de laringe, ya sea o carcinoma nasofaríngeo [22], y Cury et al. informó que el CYP2E1 no se asoció con la susceptibilidad al cáncer de cabeza y cuello [23]. Sin embargo, se informó de que la presencia del alelo CYP2E1 mutación * 5 puede aumentar el riesgo de desarrollar CECC, y un efecto de unión entre los factores de este polimorfismo genético y el medio ambiente, como el tabaquismo y consumo de alcohol también fue observado [24].
a continuación, mostramos los resultados de un estudio de casos y controles investigar la asociación de tres SNPs importantes de P450 (CYP1B1 * 2 G355T, CYP1B1 * 3 C4326G, y CYP2E1 * 5 G-1293C) y dos factores ambientales importantes (fumar y beber ) con la susceptibilidad a cáncer de laringe. El objetivo de este estudio fue mejorar ayudar a mejorar el diagnóstico precoz, y en última instancia a reducir la incidencia de cáncer de laringe en una población de alto riesgo en China.
Los sujetos del estudio y métodos
se estableció el protocolo experimental, de acuerdo con las directrices éticas de la Declaración de Helsinki. Este estudio fue aprobado por el Comité de Ética del Hospital Afiliado En segundo lugar y el Hospital de Niños Yuying de la Universidad de Medicina de Wenzhou, y todos los sujetos en ambos grupos firmaron un consentimiento informado antes de la inscripción. La cohorte de pacientes en este estudio incluyó a 552 individuos chinos Han diagnosticados con cáncer de laringe entre agosto de 2007 y agosto de 2014, a varios hospitales afiliados a Wenzhou Medical College (WMC). Los sujetos fueron elegibles para su inclusión en el estudio en base a los siguientes criterios: (1) un diagnóstico de cáncer de células escamosas de laringe como una enfermedad primaria en base a un examen histopatológico; (2) la disponibilidad de una muestra de sangre periférica que se recogió antes de la radio-quimioterapia y fue preservado adecuadamente; (3) la disponibilidad de los registros clínicos completos; (4) el sujeto no estaba relacionado con otros pacientes chinos Han. El grupo de control incluyó 666 individuos sanos que habían sido sometidos a un examen de salud de rutina durante el mismo período de tiempo en el segundo hospital afiliado a WMC. Los criterios de selección utilizados para la cohorte de control eran los mismos que los utilizados para la cohorte de pacientes, a excepción de que los sujetos de control se requiere no tener una historia personal de cáncer, una historia familiar de cáncer, o una historia de exposición a radiactivos o tóxicos gas u otros carcinógenos conocidos. Las cohortes de pacientes y de control fueron emparejados por sexo y edad, y no hubo diferencias estadísticamente significativas entre sus características demográficas. Este estudio fue aprobado por el Comité de Ética del segundo hospital afiliado a WMC, y todos los sujetos en ambos grupos firmaron un consentimiento informado antes de la inscripción.
Diseño del cebador
Los cebadores para la Polimerasa Multiplex Reacción en cadena (Multi-PCR) fueron diseñados por el sistema de diseño de ensayo 3.1 (Sequenom, Inc., San Diego, CA, EE.UU.) y sintetizada por TsingKe Inc, (Pekín, china). El primer secuencias utilizadas en este estudio se enumeran en la Tabla 1.
El ADN genómico de extracción
Las muestras de sangre periférica se recogieron en tubos de EDTA-revestido y se almacena a -70 ° C. Se extrajo el ADN de las células de la sangre utilizando el Kit de Sangre AxyPrep ADN genómico maxiprep (Axygen BioScience, Inc., Union City, CA, EE.UU.)
La amplificación génica y análisis de polimorfismo:.
Las regiones de ADN que contiene SNPs específicos fueron amplificados utilizando Multi-PCR con el GeneAmp PCR System 9700 (Applied Biosystems, Inc., Carlsbad, CA, EE.UU.). Condiciones para la PCR fueron las siguientes: incubación inicial a 95 ° C durante 2 min, seguido de 45 ciclos de 95 ° C durante 30 s y recocido a 56 ° C durante 30 s y 72 ° C durante 60 s. La extensión final se llevó a cabo por incubación a 72 ° C durante 5 min. Los productos de PCR fueron purificados por adición de la enzima SAP, que se utilizó como molde para la amplificación de SNPs mediante reacciones de extensión de cebador con ddNTP. La extensión del cebador se realizó mediante las siguientes etapas secuenciales: incubación inicial a 95 ° C durante 30 s; desnaturalización a 95 ° C durante 5 s; cinco ciclos de hibridación a 52 ° C durante 5 s y extensión a 80 ° C durante 5 s; 40 ciclos de desnaturalización a 95 ° C durante 5 s, hibridación a 52 ° C durante 5 s y extensión a 80 ° C durante 5 s; extensión final a 72 ° C durante 53 min. Genotipado de productos de reacción de extensión se realizó mediante láser asistida por matriz de desorción ionización tiempo de vuelo MS (MLDI-TOF MS) [25].
El análisis estadístico
Se utilizó el equilibrio de Hardy-Weinberg para determinar si las frecuencias genotípicas y alélicas en el paciente y para las cohortes de control eran representativas de las frecuencias en la población general. Las evaluaciones de la construcción de haplotipos y el desequilibrio de ligamiento se realizaron utilizando el software Haploview 3.2 (http://www.broad.mit.edu/mpg/haploview/). Las diferencias en las frecuencias alélicas y genotípicas fueron examinadas usando el chi cuadrado (χ
2) prueba. OR ajustadas en base a la edad, sexo, hábito de fumar, beber y el estado se calcularon mediante regresión logística y análisis de regresión logística no condicional. Se utilizó un análisis de regresión logística incondicional para tener acceso a los efectos combinados de SNPs y la exposición al tabaco /alcohol [26], [27].
El fumar se cuantificó utilizando la fórmula del índice de fumar (SI = Paquete años = número de cigarrillos por día /20 x años de fumar), y los individuos fueron clasificados como fumadores ligeros o pesados sobre la base de los valores del IE de ≤ 20 o & gt; 20, respectivamente [28]. Potable se cuantificó usando el índice de beber (DI = ml de bebidas por día x años de beber), y los individuos fueron clasificados como bebedores ligeros o pesados sobre la base de los valores de DI ≤ 60 o & gt; 60, respectivamente [29].
Todos los análisis estadísticos se realizaron utilizando el software SPSS 20.0. Un valor de p. & Lt; 0,05 se consideró estadísticamente significativa
Resultados
Características de los sujetos
La información demográfica de los sujetos de estudio en ambos grupos se resumen en la Tabla 2. No hubo no hubo diferencias estadísticamente significativas en relación con el sexo (p = 0,643) o la edad (media = 63,5 años en el grupo de pacientes frente a 62,3 años en el grupo control, p = 0,678) de los sujetos en los dos grupos. Sin embargo, los hombres representaron el 96,7% de los sujetos inscritos en la cohorte de pacientes (P & lt; 0,001). La mayoría de los sujetos de ambos grupos informó de una larga historia de fumar y /o beber, pero había más fumadores en la cohorte de pacientes que en la cohorte de control (86,4% vs. 65,6%, p & lt; 0,001). Los grandes fumadores mostraron una significativa (P & lt; 0,001) mayor riesgo para el cáncer de laringe (OR = 5,552; IC del 95%: 4,069-7,574), mientras que el riesgo para los fumadores ligeros no fue significativa (OR = 1.299 IC del 95%: 0.913- 1,848, P = 0,164). El efecto de beber alcohol en el riesgo de cáncer de laringe fue similar a la producida por el tabaco (P & lt; 0,001), y había más bebedores en la cohorte de pacientes que en el grupo de control (69,4% vs. 49,4%, respectivamente, P & lt; 0,001). Además, consumo excesivo de alcohol se asoció con un riesgo significativo de desarrollar cáncer de laringe (OR = 4,085, IC del 95%: 3,113 a 5,361, P & lt; 0,001) de CI, mientras que este riesgo entre los bebedores moderados no fue significativa (OR = 0,949, 95% :. 0,693-1,298; p = 0,741) guía empresas
distribución de alelos y genotipo
el alelo y genotipo frecuencias para los tres loci SNP (CYP1B1 G355T * 2, * 3 CYP1B1 C4326G, y CYP2E1 * 5 G-1293C) se resumen en la Tabla 3. la distribución de las frecuencias alélicas y genotípicas de estas tres loci fueron consistentes con el equilibrio de Hardy-Weinberg (χ
2 = 0,270, p = 0,603; χ
2 = 0,045, p = 0,832; χ
2 = 3,127, p = 0,077; respectivamente). Las frecuencias alélicas para CYP1B1 * 2 355T, CYP1B1 * 3 4326G, y CYP2E1 * 5 -1293C fueron 35,2, 8,2 y 15,5%, respectivamente, en la cohorte de pacientes, y el 20,2, 13,2 y 8,3%, respectivamente, en el grupo de control ( P & lt; 0,05). Las frecuencias de los genotipos en estos tres loci en las dos cohortes fueron significativamente diferentes (P & lt; 0,001, respectivamente), y las frecuencias del genotipo de tipo salvaje en el paciente y de control de cohortes también fueron significativamente diferentes (64,5% vs. 36,6 %, P & lt; 0,001; 15,2% vs. 24,8%, p & lt; 0,001; 20,3% vs. 15,3%, p. & lt; 0,001, respectivamente) guía empresas
SNPs individuales y riesgo de cáncer de laringe
los individuos con el genotipo GT o TT (GT + TT) en el CYP1B1 * 2 locus G355T mostró un riesgo significativamente mayor de desarrollar cáncer de laringe que los individuos con el genotipo GG (crudo o = 3,141, IC del 95%: 2,483 a 3,974, P & lt; 0,001), y esta diferencia entre los grupos de genotipo siguió siendo significativa incluso después de ajustar por diferencias en edad, sexo, tabaquismo y los hábitos de bebida (OR ajustada = 2.657 IC, 95%: 2,078 a 3,398, P & lt ;. 0.001)
por el contrario, los individuos con el genotipo GG CG o en el CYP1B1 * 3 C4326G locus mostraron un riesgo significativamente menor de desarrollar cáncer de laringe en comparación con los individuos con el genotipo CC (crudo o = 0,545, 95 % CI: 0,407 a 0,729, P & lt; 0,001). Los valores ajustados también fueron significativas: (OR ajustada = 0,562, IC del 95%: 0,414 a 0,763, P & lt; 0,001)
Los individuos con el genotipo CC o GC en el 5 * G-1293C locus CYP2E1 también. mostraron un riesgo significativamente mayor de cáncer de laringe en comparación con los individuos con el genotipo GG (OR crudo = 1,773, IC del 95%: 1,330 a 2,362, P & lt; 0,001), mientras que los individuos heterocigóticos para el genotipo CC mostraron un riesgo mucho más alto (OR crudo = 6.240 , IC del 95%: 2,876 a 13,540, P & lt; 0,001). Los valores ajustados también mostraron significación estadística: (para GC + CC, ajustado o CI = 1,938, 95%: 1,426 a 2,633, P & lt; 0,001; para CC, ajustado o CI = 8,718, 95%: 3,785 a 20,076, P & lt ; 0,001)
efecto conjunto de SNPs en la susceptibilidad al cáncer de laringe
la distribución de haplotipos en las dos cohortes y los resultados de los análisis estadísticos pertinentes se resumen en la Tabla 4. Seis de los ocho haplotipos. posiblemente asociado con el cáncer de laringe se identificaron en los grupos de pacientes y de control. El haplotipo más común, G
335C
4326G
-1293, se encontró en el 56,4% de los pacientes y el 67,7% de los sujetos de control. Se encontraron seis haplotipos que se asocia con una susceptibilidad a cáncer de laringe. Por ejemplo, el T
355C
4326G
-1293 haplotipo, que contiene dos alelos de alto riesgo (T355 y C4326), mostró una fuerte asociación con el cáncer de laringe que el principal haplotipo G
335C
4326G
-1293 (OR ajustada = 1,809, IC del 95%: 1,434 a 2,282, P & lt; 0,001). Además, el T
355C
4326C
-1293 haplotipo, que contiene tres alelos de alto riesgo, mostró una asociación aún más fuerte (OR ajustada = 3,104, IC del 95%: 2,135 a 4,512, P & lt; 0,001) . En consecuencia, el haplotipo G
355g
4326G
-1293, que contiene tres alelos de protección, mostró una débil asociación con el cáncer de laringe que el principal haplotipo G
335C
4326G
-1293 (OR ajustada = 0,573; IC del 95%: 0,391 a 0,841, P = 0,004).
los genotipos fueron definidos en los tres loci para los individuos en el paciente y el control de las cohortes. Los individuos con el genotipo GT /TT + CC + GG o GT /TT + CG /GG + GC /CC, que contiene dos alelos de riesgo en dos loci, mostró un mayor riesgo de desarrollar cáncer de laringe en comparación con los individuos con el genotipo GG + CG /GG + GG (OR ajustado = 3,331; IC del 95%: 2,144 a 5,176, P & lt; 0,001 y OR ajustada IC = 2.418, 95%: 0,999 a 5,856, p = 0,050, respectivamente). Por otra parte, los individuos con tres alelos de riesgo en los tres loci (GT /TT + CC + GC /CC) mostraron el mayor riesgo de desarrollar cáncer de laringe (OR ajustada = 5.297 IC del 95%: 3,123 a 8,986, P & lt; 0,001).
interacciones genético-ambientales y el riesgo de cáncer de laringe
los efectos conjuntos de los tres SNP y los factores ambientales se presentan en la Tabla 5. Nuestro análisis mostró que el 58,5% de los pacientes expuestos al tabaco fumar tenido el GT o genotipo TT en el locus CYP1B1 G355T * 2, y 38.3% tienen el genotipo GG en ese locus. Entre los pacientes que consumen alcohol, el 47,6% tenía el genotipo GT o TT y el 21,7% tenía el genotipo GG. Los no fumadores con el genotipo TT o GT mostraron un mayor riesgo de desarrollar cáncer de laringe que los no fumadores con el genotipo GG (OR ajustada = 2.190 IC, 95%: 1,257 a 3,816, P = 006). Los valores correspondientes para los no bebedores eran o CI = 2.008, 95%: 1,361 a 2,963 y P = 0,001, y para los fumadores, los valores fueron o CI = 5,875, 95%: 3,950 a 8,739, y P & lt; 0,001. Este valor de OR, lo que refleja el efecto conjunto de tener el GT o genotipo TT y también ser un fumador, es mayor que el valor resultante de multiplicar el valor o por tener el genotipo solas con el valor de OR por ser un fumador solo (5,875 & gt ; 2.190 x 2.098 = 4.595). Entre los bebedores, los valores correspondientes fueron o CI = 4.518, 95%: 3,181 a 6,415, P & lt; 0,001. Este valor también O era más grande que el valor resultante de multiplicar el valor de OR por tener el genotipo solas con el valor o por ser un fumador solo (4.518 & gt; 2.008 × 1.414 = 2.839). El o valores para los grandes fumadores y bebedores con el genotipo GT + TT eran 9.995 (P & lt; 0,001) y 8,668 (P & lt; 0,001), respectivamente. También se indicaron efectos conjuntos similares de fumar en exceso o beber en exceso junto con factores genéticos (9.995 & gt; 2.190 × 3.515 = 7.700 y 8.668 & gt; 2.008 × 2.312 = 4.642, respectivamente). Estos datos demuestran que la presencia de un SNP en el locus CYP1B1 G355T * 2, cuando se combina con fumar o beber, produce un efecto de conjunto sobre la susceptibilidad de un individuo para el cáncer de laringe. Además, la presencia del alelo 335T, cuando se combina con fumar o beber, en colaboración aumenta el riesgo de cáncer de laringe. Nuestros resultados muestran que el efecto conjunto de dos factores de riesgo es más fuerte que el simple efecto aditivo de los dos factores individuales.
Del mismo modo, tanto fumar y beber mostraron un efecto de colaboración para aumentar el riesgo de cáncer de laringe en pacientes con el alelo 4326C tipo salvaje en el CYP1B1 * 3 C4326G locus. Por ejemplo, los individuos con el genotipo CG + GG en este locus se presenta con un menor riesgo de cáncer de laringe que el aquellos con el genotipo CC y experimentar las mismas exposiciones ambientales, como el tabaquismo (OR = 1,542 vs OR = 2,959, P & lt ; 0,05). No se observó el mismo efecto de colaboración entre el SNP en el CYP2E1 * 5 locus G-1293C y fumar o beber.
Los resultados del pronóstico de análisis multivariados para los efectos de las interacciones de factores de riesgo en el riesgo de cáncer de laringe se muestran en la Tabla 6. los factores ambientales (tabaco y alcohol) y los factores genéticos (CYP1B1 * 2 355T y CYP2E1 * 5 -1293C) están asociados con la susceptibilidad de un individuo para desarrollar cáncer de laringe (valor de p para todas estas evaluaciones fueron & lt; 0,001). El CYP1B1 alelo mutante * 2 4326G muestra un efecto protector contra el desarrollo de cáncer de laringe (P & lt; 0,001). Los factores de riesgo genéticos y fumar Show /beber efectos conjuntos sobre la incidencia de cáncer de laringe.
Discusión
Nuestro estudio de casos y controles de la población china Han reveló que tres SNPs en CYP1B1 * 2 G355T, CYP1B1 * 2 C4326G, y CYP2E1 * 5 G-1293C están asociados con la susceptibilidad de un individuo para el cáncer de laringe. En la cohorte de pacientes, las frecuencias de alelos CYP1B1 * 2 355T y CYP2E1 * 5 -1293C eran más altas que las de la cohorte de control, y la frecuencia del alelo CYP1B1 * 3 4326G en la cohorte de pacientes era inferior a la de la cohorte de control. Además, todas estas diferencias fueron estadísticamente significativas. Estos resultados sugieren fuertemente que los alelos CYP1B1 * 2 355T y CYP2E1 * 5 -1293C aumentar el riesgo de cáncer de laringe, mientras que los alelos CYP1B1 * 3 4326G puede reducir el riesgo.
CYP1B1 G355T * 2 se localiza en el segundo exón del el gen CYP1B1 y provoca un cambio de aminoácido Ala119Ser en la enzima codificada. La mutación CYP1B1 * 2 C355T se ha informado a aumentar el riesgo de cánceres de cabeza y cuello [15], y Jawarowska et al. informó que el CYP1B1 * 2 alelo 355T aumenta la susceptibilidad de un individuo para el cáncer de laringe [30]. Además, un estudio sobre el carcinoma de células escamosas del tracto respiratorio encontró una alta frecuencia de la CYP1B1 * 2 alelo 355T en pacientes con cáncer de pulmón, lo que sugiere que la presencia de este alelo aumenta el riesgo de desarrollar cáncer de pulmón [31]. Por último, también se informó de la CYP1B1 * 2 355T alelo que se asocia con una mayor susceptibilidad a otros tipos de cáncer, tales como cáncer de mama y de endometrio [32]. En nuestro estudio, se encontró que los individuos con una historia de las exposiciones ambientales similares, las personas que lleven el CYP1B1 * 2 355T alelo (genotipo GT + TT) mostraron un aumento significativo del riesgo de cáncer de laringe en comparación con los individuos con el gen de tipo salvaje (GG ) (Tabla 5). Por lo tanto, los datos de nuestro estudio y otros estudios han demostrado consistentemente que la CYP1B1 G355T * 2 alelo está vinculado a la susceptibilidad al cáncer. alelo la mutación (CYP1B1 * 2 355T) también puede aumentar el riesgo de cáncer de laringe, posiblemente debido a la mayor actividad catalítica para 17β-estradiol 4-hidroxilación aportado por que la mutación [12]. Sin embargo, el mecanismo subyacente el efecto de este alelo en la promoción de riesgo de cáncer sigue siendo poco clara y requiere investigación adicional.
CYP1B1 * 3 C4326G localiza en el tercer exón del gen y provoca un cambio de aminoácido Leu432Val en la enzima codificada . Mientras que el CYP1B1 * 3 C4326G mutación se ha informado a aumentar la susceptibilidad de un individuo a los cánceres de cabeza y cuello [8], [33], Tai et al. informó de que esta mutación no se asoció con la susceptibilidad a cualquiera de carcinoma de células escamosas hipofaringe o el cáncer de laringe [28]. Sin embargo, otro estudio encontró una menor frecuencia de mutación alelo CYP1B1 4326G en pacientes con cáncer de colon, lo que indica que este alelo puede reducir el riesgo de cáncer de colon e incluso ejercer un efecto protector [34]. Es muy posible que las discrepancias observadas entre estos resultados en relación con el efecto de la mutación de alelo 4326G CYP1B1 en el riesgo de cáncer podrían derivar de las diferentes etnias, los datos están sujetos, y SNPs adicionales incluidos en los estudios.
En nuestro estudio, mutación alelo CYP1B1 4326G se asoció con una disminución del riesgo de cáncer de laringe (Tabla 3). Un posible mecanismo que subyace a este efecto protector podría ser que la conformación de la enzima alterada producido por la sustitución de aminoácidos puede conducir a una capacidad enzimática disminuida o disminuido para la activación de carcinógenos.
CYP2E1 * 5 G-1293C, también conocido como el Rsa I /Pst I de restricción de longitud de fragmentos polimórficos (RFLP), se localiza en el 5 'UTR (región no traducida) del gen CYP2E1. El cambio de nucleótido G-1293C crea un sitio de reconocimiento para la enzima de restricción Pst I, y se altera un sitio de reconocimiento Rsa I, alterando así la expresión de genes [21], [35]. Se realizó un metanálisis que incluyó 12562 casos para examinar la asociación entre el CYP2E1 Rsa I /Pst I RFLP y la susceptibilidad a cáncer de cabeza y cuello [36]. Los resultados del estudio mostraron que el OR para los individuos portadores de un alelo la mutación (CYP2E1 * 5 -1293C) y que tienen un cáncer de cabeza y cuello fue de 1,11 en comparación con los individuos con los homocigotos de tipo salvaje CYP2E1 * 5 -1293G alelo. Este resultado indica que el CYP2E1 * 5 alelo -1293C se asocia con un mayor riesgo de cáncer de cabeza y cuello. Otro meta-análisis de estudios de casos y controles sobre la asociación entre polimorfismos CYP2E1 y la cabeza y el riesgo de cáncer de cuello mostró que los individuos, especialmente los asiáticos, los homocigotos para CYP2E1 * 5 -1293C tenían un mayor riesgo de desarrollar cáncer de cabeza y cuello [37]. Nuestro estudio de casos y controles mostró que el CYP2E1 * 5 alelo -1293C se asocia con un mayor riesgo de cáncer de laringe, y por lo tanto es un factor genético de susceptibilidad al cáncer de laringe (Tabla 3).
Nuestro análisis mostró que el haplotipo G
355C
4326G
-1293 fue el haplotipo más común que se encuentra en los grupos de pacientes y de control (Tabla 4), y también confirmó que ambos alelos de mutación, CYP1B1 * 2 355T y CYP2E1 * 5 -1293C , son los factores genéticos de alto riesgo para desarrollar cáncer de laringe, mientras que el CYP1B1 mutación del alelo * 3 4326G es un factor genético de protección. Estos hallazgos sugieren que el alelo de tipo salvaje CYP1B1 * 3 4326C podría ser un factor genético alto riesgo de cáncer de laringe. El haplotipo T
355C
4326C
-1293, que incluye los tres alelos de alto riesgo, se asoció con un riesgo significativamente mayor de cáncer de laringe en comparación con otros haplotipos y otros genotipos de copia única, lo que sugiere el papel de una la interacción gen-gen en el desarrollo del cáncer de laringe. Haplotipo G
355g
4326G
-1293 se asoció con un riesgo de cáncer laríngeo inferior a haplotipo G
355C
4326G
-1293, lo cual es consistente con el efecto protector de la CYP1B1 * 3 alelo 4326G, y también sugirió un efecto genético aditivo entre estos alelos. Los análisis de estos haplotipos y genotipos mostraron que el riesgo de cáncer de laringe aumenta junto con el aumento de los números de los alelos de alto riesgo, y disminuyeron cuando los alelos más protectoras estaban presentes. Estos análisis no sólo confirmó el efecto de riesgo de cada individuo alelo como se ve por los análisis de un solo alelo, sino que también sugiere un efecto aditivo conjunta de los tres alelos.
Los estudios epidemiológicos han demostrado que los factores ambientales, especialmente el tabaquismo y consumo de alcohol , juegan un papel importante en el desarrollo del cáncer. Pro-carcinógenos como PAH, HAA, aminas aromáticas, N-nitrosamina, e hidrocarburos aromáticos policíclicos nitrados derivados del tabaco y el acetaldehído producido por el metabolismo del alcohol se pueden activar y ser metabolizados para formar cancerígenos por diversos enzimas del citocromo P450 [38], [39 ]. Nuestros resultados del estudio mostraron que el tabaquismo y el consumo de alcohol, el tabaquismo, especialmente pesado y alto consumo de alcohol, se asocian con un riesgo significativamente mayor de desarrollar cáncer de laringe (Tabla 5). Los análisis para el efecto conjunto de los tres SNPs más fumar /beber en el riesgo de cáncer de laringe revelaron que los fumadores con dos de los alelos de alto riesgo antes mencionados (mutación de alelos CYP1B1 * 2 355T y alelo de tipo salvaje CYP1B1 * 3 4326C) estaban en una forma significativa mayor riesgo de desarrollar cáncer de laringe (Tabla 5). Además, este riesgo era mucho mayor que el riesgo conferido por cualquiera de factor por sí solo, lo que sugiere que cuando se combina con la exposición al tabaco, los dos alelos tenían un efecto sinérgico para aumentar el riesgo de cáncer de laringe. CYP1B1 es una enzima metabólica inducible responsable de la activación de múltiples pro-carcinógenos, y la traducción CYP1B1 está regulado por receptor de aril hidrocarburos (AHR), Ahr translocador nuclear (ARNT), y el factor de transcripción Sp1 [32]. Por lo tanto, el mayor riesgo de cáncer de laringe encontrado en los fumadores o bebedores portadores de alelos CYP1B1 * 2 355T y CYP1B1 * 3 4326C podría resultar del hecho de que la exposición al tabaco o alcohol, no sólo conduce a altos niveles celulares de pro-carcinógenos derivados del tabaco y el metabolismo del alcohol, pero también da como resultado del aumento de la expresión y actividad de P-450 enzimas metabólicas que se modulan a través de diversos mecanismos de retroalimentación positiva. Los productos químicos tales como etanol, agentes aromáticos, y nitrosamina derivados del tabaco y el metabolismo del alcohol también son sustratos e inductores para CYP2E1 [40]; Sin embargo, sólo un número limitado de estudios se han llevado a cabo el examen de las interacciones cruzadas entre los factores genéticos y fumar o beber. Nuestros datos muestran que los efectos conjuntos de CYP2E1 * 5 G-1293C y el fumar o beber en el riesgo de cáncer de laringe no son significativamente diferentes de los efectos de los factores genéticos o ambientales individuales (Tabla 5). Además, nuestros resultados no mostraron ningún efecto de colaboración entre CYP2E1 * 5 G-1293C y fumar /beber, lo cual es consistente con los resultados de un meta-análisis reportado por Tang et al.