Extracto
Los objetivos de este estudio fueron evaluar simultáneamente la expresión de Y-cuadro de la proteína-1 (YB-1) de unión en el tejido rectal no neoplásico y tejido de cáncer de recto, y para recoger el seguimiento clínico -up de datos de pacientes individuales. Además, el objetivo fue investigar las funciones de desarrollo y valor pronóstico de YB-1 en el cáncer de recto. Realizamos estudios de inmunohistoquímica para examinar YB-1 en muestras de tejido de 80 pacientes con cáncer de recto, 30 pacientes con adenoma tubular recto, y 30 pacientes con rectitis. La media YB-1 histológicos anota para el cáncer de recto, adenoma tubular recto, y rectitis muestras de tejido fueron 205,5, 164,3, 137,7 y, respectivamente. Se encontraron más cortos tiempos libres de la enfermedad y la supervivencia global en pacientes con cáncer rectal que tenían mayor YB-1 de expresión que en aquellos con menor expresión (38,2 meses frente a 52,4 meses, p = 0,013; y 44,4 meses frente a 57,3 meses, p = 0,008, respectivamente). Nuestros resultados indican que YB-1 de expresión es mayor en tejido de cáncer de recto que en el adenoma tubular rectal y rectitis tejidos y que puede ser un factor pronóstico independiente para el cáncer rectal
Visto:. Zhang Y, Zhao PW, Feng G, Xie G, Wang AQ, Yang YH, et al. (2015) el nivel de expresión y el valor pronóstico de Y-Box Binding Protein-1 en cáncer rectal. PLoS ONE 10 (3): e0119385. doi: 10.1371 /journal.pone.0119385
Editor Académico: Hiromu Suzuki, Universidad Médica de Sapporo, Japón
Recibido: Octubre 15, 2014; Aceptado 30 de enero de 2015; Publicado: 19 Marzo 2015
Derechos de Autor © 2015 Zhang et al. Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos de la licencia Creative Commons Attribution License, que permite el uso ilimitado, distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que el autor original y la fuente se acreditan
Disponibilidad de datos: Todos los datos relevantes están dentro del papel
financiación:.. los autores no recibieron ninguna financiación específica para este trabajo
Conflicto de intereses:. los autores han declarado que no existen intereses en competencia
Introducción
el cáncer rectal es uno de los tumores malignos más comunes del sistema digestivo. La introducción de la quimiorradioterapia adyuvante para el tratamiento del cáncer mejorado las tasas de supervivencia de recto, pero una alta tasa de mortalidad todavía se asocia con la malignidad. Los principales factores que afectan el pronóstico de los pacientes con cáncer rectal incluyen el estadio del tumor, la distancia entre el tumor y el ano, y el margen de resección circunferencial [1-2]. Dado que los pacientes similares pueden recibir el mismo tratamiento en última instancia, sin embargo, tener diferentes resultados, que postula que hay otros factores que contribuyen.
Y-box proteína de unión-1 (YB-1) es el más conservado evolutivamente de unión a ácidos nucleicos proteína conocida [3]. Está implicado en la regulación de la transcripción y la traducción, la reparación del ADN, corte y empalme alternativo de ARNm, la reparación de RNA, la proliferación celular, apoptosis, y la resistencia a fármacos [4-7]. Un creciente número de estudios han demostrado una asociación entre YB-1 y varios tipos de cáncer. Por ejemplo, esta proteína podría conducir a la transición G1-S en las células tumorales a través de la vía CDC6 para promover la proliferación [8]. YB-1 puede actuar como un regulador negativo de la p53 gen supresor de tumores y represor del promotor p53 [9]. YB-1 puede formar complejos con la proteína activadora de 2 y p53. Posterior unión al elemento de respuesta RE-1 de la matriz metaloproteinasa 2 gen (MMP2) elemento potenciador activa la transcripción de
MMP2
, promoviendo así la metástasis del tumor [10]. PIK3CA, receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGFR), y el factor de transición mesenquimal-epitelial son modulados por YB-1 para promover el crecimiento y supervivencia de células de cáncer de mama [11-13]. YB-1 también se ha asociado con la resistencia de las células tumorales a la terapéutica [14-15].
Varios estudios ilustran que YB-1 sobreexpresión se asocia con un mal pronóstico para los pacientes con tumores malignos tales como cabeza y cáncer de cuello [16], el linfoma no Hodgkin [17], cáncer de mama [18], osteosarcoma [19], cáncer de pulmón de células no pequeñas [20], cáncer gástrico [21], y el carcinoma de células escamosas de esófago [22]. En la actualidad, hay pocos informes sobre si la expresión YB-1 afecta el pronóstico de los pacientes con cáncer de recto. Estudios anteriores han ilustrado que la inflamación juega un papel extremadamente importante en la iniciación y progresión del cáncer, incluyendo el cáncer de colon [23]. Los objetivos de este estudio fueron evaluar la expresión de YB-1 en el tejido rectal no neoplásico y tejido de cáncer de recto, y para evaluar la relación entre YB-1 de expresión y el pronóstico de los pacientes con cáncer de recto.
materiales y Métodos
las muestras de tejido y los datos clínicos
el estudio fue aprobado por el Comité de Ética médica del hospital central de Mianyang. Todos los tejidos se obtuvieron con el consentimiento de los pacientes, y el consentimiento informado por escrito de los donantes o los familiares se obtuvo para el uso de las muestras de tejidos con fines de investigación. Para este estudio, se obtuvieron 140 muestras, tejidos embebidos en parafina fijado en formol entre 2008 y 2009, del Departamento de Patología del Hospital Central de Mianyang. Las muestras se obtuvieron de 140 pacientes, incluidos 80 con cáncer de recto, 30 con adenoma tubular recto, y 30 con rectitis. Todos los pacientes con cáncer de recto se sometieron a la cirugía, y después de la cirugía, 69 de estos pacientes recibieron adyuvante (DT dosis de radiación: 50 Gy /25 fracciones; 5-fluorouracilo [FU-5] -basado régimen de quimioterapia) quimiorradioterapia. El tiempo de seguimiento medio fue de 46,8 meses (rango: 7-75 meses). Ocho pacientes con cáncer de recto se perdieron durante el seguimiento, y por lo tanto, se recogieron datos clínicos de 72 pacientes.
La inmunohistoquímica
Se realizó un análisis inmunohistoquímico como se describe anteriormente [24]. Cuatro micrómetros de espesor, fijado con formalina, secciones de tejidos embebidos en parafina fueron desparafinados, rehidratada en un gradiente de alcohol, y se sometió a un tampón de recuperación de epítopo inducida por calor que consiste en Tris-EDTA a pH 7,4. Las diapositivas fueron hervidas durante 3 min en una olla a presión y después se enfrió en tampón para recuperar los epítopos. Los portaobjetos se sumergen en 3% H
2O
2 de 8 min y luego se lavó con agua. Después se incubaron en una dilución 1: 200 de un anticuerpo policlonal de conejo generado contra humano YB-1 (Cell Signaling Technology, Inc., Boston, MA, EE.UU.) durante 1 h a temperatura ambiente. se añadió después de la incubación con anticuerpo de cabra anti-conejo anticuerpo secundario, polímero marcado con enzima peroxidasa de rábano biotina desde el Kit de Detección Dako EnVision ChemMate (Dako Diagnósticos Co. Ltd., Shanghai, China). El cromógeno era 3,3 'diaminobencidina (Dako Diagnósticos Co. Ltd.). Por último, las secciones se contratiñeron con hematoxilina. diapositivas de tejido de cáncer de mama se utilizaron como control positivo para YB-1 tinción. Una diapositiva que no se trató con el anticuerpo primario se utilizó como control negativo. YB-1 immunopositivity se analizó de forma semicuantitativa. Este método, desarrollado por McCarty et al., Lleva el nombre del YB-1 puntuación histológica (HSCORE) [25]. El HSCORE en cuenta tanto la intensidad de la tinción y el porcentaje de células que se tiñen para cada nivel de intensidad de la tinción. Los HSCOREs se obtuvieron utilizando el siguiente algoritmo: HSCORE = Σ (I × PC), donde I y PC representan la intensidad de la tinción y el porcentaje de células que se tiñeron para cada nivel de intensidad de la tinción, respectivamente. Las intensidades se clasifican de cero (sin tinción) a tres (tinción muy fuerte). Todas las diapositivas fueron examinados y se calificó como independiente por tres patólogos que desconocían tanto los datos clínicos y patológicos. YB-1 immunopositivity se definió como la presencia de cualquier tinción específica en el citoplasma y /o núcleo.
El análisis estadístico
Se realizó el análisis estadístico utilizando el software estadístico SPSS (IBM Corp., Armonk, NY, EE.UU.). La expresión diferencial de YB-1 en muestras de tejido de pacientes con rectitis rectal, adenoma tubular rectal y cáncer de recto se analizaron mediante ANOVA pruebas estadísticas. ANOVA o
t
-pruebas se utilizaron para analizar la correlación entre los parámetros clínico-patológicos y YB-1 de expresión. Un modelo de regresión de riesgos proporcionales de Cox se utilizó en un análisis multivariante de los efectos de los factores pronósticos en la supervivencia. los valores & lt P;. 0,05 se consideraron estadísticamente significativos en todas las pruebas
Resultados
difusa YB-1 de expresión en cáncer rectal y no neoplásicas tejidos rectales
células de cáncer rectal exhibió YB-1 tinción en el citoplasma (. las figuras 1-3). En el tejido rectal no cancerosos, sólo se observó una débil YB-1 tinción. tinción nuclear se observa raramente en ninguna de las muestras de tejido. La media de YB-1 HSCOREs del cáncer de recto, adenoma tubular, y rectitis muestras de tejido fueron 205,5, 164,3, 137,7 y, respectivamente. YB-1 los niveles de expresión eran más altas en el tejido de pacientes con cáncer de recto que en el tejido rectal no neoplásico (P = 0,000; Tabla 1). Sin embargo, YB-1 de expresión no mostró ninguna correlación obvia con la edad del paciente (p = 0,153), el sexo (p = 0,657), la etapa del cáncer (p = 0,245), o quimiorradioterapia adyuvante (P = 0,761). Las características clínicas de estos pacientes se muestran en la Tabla 2.
El análisis de supervivencia de YB-1 de expresión en el cáncer de recto
Superior YB-1 de expresión (HSCORE ≥ 200) se asocia a peor supervivencia libre de enfermedad (DFS) y supervivencia global (SG) (. Las figuras 4-5). El COS promedio fue de 38,2 meses en 50/72 pacientes con cáncer de recto, lo cual era más corta que la de los pacientes con menor YB-1 de expresión (HSCORE & lt; 200). El DFS media de los pacientes con menor YB-1 de expresión fue de 52,4 meses (p = 0,013). Un análisis de OS reveló resultados similares. El tiempo de OS media de los pacientes con mayor YB-1 de expresión (HSCORE ≥ 200) fue de 44,4 meses, en comparación con 57,3 meses (p = 0,008) para pacientes con menor YB-1 de expresión (YB-1 HSCORE & lt; 200).
La influencia de las características clínicas y patológicas en el cáncer de recto se analizó en un análisis multivariado mediante el modelo de riesgos proporcionales de Cox una. Los resultados indicaron que el estadio clínico, la quimiorradioterapia adyuvante, y YB-1 de expresión se correlacionó con SLE y la SG y que pueden ser factores pronósticos independientes que afectan a los tiempos de supervivencia de pacientes con cáncer de recto (Tabla 3).
Discusión
son reportados Muchas proteínas que se asocia con el pronóstico de los pacientes con cáncer de recto incluyendo vasohibin-1 [26] y miR-25 [27]. Pocos estudios se han centrado en la asociación entre YB-1 y el cáncer de recto usando un enfoque de inmunohistoquímica. se observó la regulación positiva de YB-1 en varios tumores del sistema digestivo. Por ejemplo, YB-1 se sobreexpresa en el citoplasma de células de carcinoma de células escamosas de esófago [22]. De la expresión de YB-1 se observa también en el citoplasma de las células de cáncer gástrico, pero la tinción nuclear se observa raramente [21]. En nuestro estudio, observamos YB-1 de expresión en el citoplasma de las células de los tres tejidos diferentes. El HSCORE para el tejido de cáncer de recto fue significativamente superiores a las de los tejidos rectales no neoplásicas, lo que sugiere que
YB-1
puede haber un oncogén rectal asociada al cáncer.
YB-1 es un indicador del pronóstico en varios tipos de cáncer. Por ejemplo, la tasa de recurrencia fue mayor en los pacientes con carcinoma nasofaríngeo con alta expresión YB-1 que en los pacientes con baja expresión de esta proteína [28]. En el cáncer de mama, la expresión nuclear elevada YB-1 puede correlacionarse con menor DFS, la supervivencia específica de la enfermedad, y OS [29]. Nuestro estudio reveló resultados similares. La media de SLE y la SG de los pacientes con una mayor expresión de YB-1 fueron de 38,3 y 44,4 meses, respectivamente, frente a 52,4 y 57,3 meses, respectivamente, en los pacientes con menor YB-1 de expresión. Los pacientes con mayor expresión de YB-1 tenían más corto DFS (P = 0,013) y OS (P = 0,008) que aquellos con menor YB-1 de expresión. El análisis multivariado del pronóstico del paciente utilizando un modelo de riesgos proporcionales de Cox indicó que la etapa del tumor, la edad y el sexo no tenían correlación con el pronóstico, sino que la expresión YB-1 fue un factor pronóstico independiente para el cáncer rectal.
El mal pronóstico de pacientes con sobreexpresión de YB-1 puede ser debido a YB-1 inducida por la resistencia a la quimioterapia. En las células de cáncer de mama, la activación de YB-1 en la serina 102 media la resistencia a trastuzumab mediante el aumento del número de células CD44-positivas [30]. YB-1 podría modular la reactividad de las células tumorales al tamoxifeno y fulvestrant por afectar al receptor de estrógeno (ER) humana- EGFR2 vía de señalización en células de cáncer de mama ER-positivos [31]. YB-1 puede activar el gen de resistencia a múltiples fármacos
MDR1
y la proteína asociada a la resistencia a múltiples fármacos [32-35]. También se puede inducir la resistencia a la mitomicina y cisplatino [36]. YB-1 está directamente implicado en la regulación de la activación inducida por 5-FU del promotor MVP, que media la resistencia a los medicamentos [37]. El régimen de quimioterapia utilizado en este estudio se basa en platino y 5-FU. Nuestra hipótesis es que el mal pronóstico del paciente podría haber resultado de resistencia a las drogas inducida por la sobreexpresión YB-1. Inducida por la radiación YB-1 fosforilación promueve la reparación de roturas en el ADN y la supervivencia después de la irradiación doble hebra a través de la fosfatidilinositol 3-quinasa /AKT y MAPK /señalización de la quinasa vías reguladas por señales extracelulares, que son aguas abajo de la señalización del EGFR. Además, el agotamiento de YB-1 por siRNA podría aumentar la sensibilidad de las células de cáncer de mama a la radiación [38]. Es posible que mecanismos similares subyacen a los resultados de nuestro estudio. Sin embargo, los mecanismos que subyacen a YB-1 sobreexpresión en pacientes con cáncer de recto y las consecuencias funcionales siguen sin estar claros.
Conclusión
En conclusión, nuestro estudio indica que YB-1 de expresión es mayor en rectal tejido de cáncer que en adenoma tubular rectal y el tejido rectitis. La expresión elevada de YB-1 puede indicar un mal pronóstico para los pacientes con cáncer de recto. Una comprensión más detallada de las vías de señalización en la que YB-1 participa puede dar lugar a la identificación de nuevas dianas terapéuticas para el tratamiento del cáncer rectal.