Extracto
Antecedentes
Cáncer de testículo antígenos (CTA) son proteínas inmunogénicas que son pobres marcadores de pronóstico en el cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC). Hemos investigado la expresión de CTA en el CPNM y su asociación con la respuesta a la quimioterapia, mutaciones genéticas y la supervivencia
Métodos
Se estudiaron 199 pacientes con CPNM N2 patológico tratado con quimioterapia neoadyuvante (NAC;.
n
= 94), la observación post-operatorio (
n
= 49), la quimioterapia adyuvante (
n
= 47) o desconocido (
n = 9
). Se realizó inmunohistoquímica para NY-ESO-1, MAGE-A y MAGE-C1. características clínico, la respuesta al tratamiento neoadyuvante y la supervivencia global fueron correlacionados. mutaciones en el ADN se caracterizaron utilizando el panel de Sequenom v1.0 Oncocarta. Affymetrix datos del estudio de la quimioterapia adyuvante JBR.10 se obtuvieron a partir de un repositorio público, normalizado y se asignan a las CTA.
Resultados
NY-ESO-1 se expresó en 50/199 (25% ) muestras. La expresión de NY-ESO-1 en la cohorte de NAC se asoció con un aumento significativo de las tasas de respuesta (
P
= 0,03), pero no la supervivencia global. En la cohorte post-operatorio, análisis multivariado identificó NY-ESO-1 como un marcador de mal pronóstico independiente para los no tratados con quimioterapia (HR 2,61, IC del 95%: 1,28 a 5,33;
P
= 0,008), mientras que el tratamiento con la quimioterapia y la expresión de NY-ESO-1 fue un predictor independiente de la mejora de la supervivencia (HR 0,267, IC del 95%: 0,07 hasta 0,980;
P = 0,046
). Se observaron resultados similares para MAGE-A, pero no cumplieron con significación estadística. los datos de expresión de genes independientes del conjunto de datos JBR.10 apoyan estos hallazgos, pero tuvieron el poder suficiente para demostrar diferencias significativas. No hubo asociación entre las mutaciones oncogénicas y la expresión de CTA.
Conclusiones
NY-ESO-1 fue predictivo de aumento de la respuesta a la quimioterapia neoadyuvante y el beneficio de la quimioterapia adyuvante. Se necesitan más estudios que investigan la relación entre estos resultados y los mecanismos inmunes
Visto:. John T, Starmans MHW, Chen Y-T, Russell PA, SA Barnett, Blanco SC, et al. (2013) El papel de cáncer de testículo antígenos como predictivo y pronóstico marcadores de células no pequeñas de cáncer de pulmón. PLoS ONE 8 (7): e67876. doi: 10.1371 /journal.pone.0067876
Editor: William C. S. Cho, Hospital Queen Elizabeth, Hong Kong
Recibido: 28 Febrero, 2013; Aceptado: 23-may de 2013; Publicado: 23 de julio 2013
Copyright: © 2013 John et al. Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos de la licencia Creative Commons Attribution License, que permite el uso ilimitado, distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que el autor original y la fuente se acreditan
Financiación:. Este trabajo fue apoyado por la Agencia del cáncer de estilo victoriano, Clinical Research Fellowship (CRF09-04), una donación de Pfizer de Investigación del cáncer, el Centro de Medicina traslacional Molecular (www.ctmm.nl), National Health & amp (FUERZA AÉREA proyecto Ref 030-103.); Consejo de Investigación Médica (NHMRC) de Australia practicante Fellowship (487.905) y las subvenciones de proyectos (542510 & Amp; 1.007.381), así como el Instituto de Ontario para la Investigación del Cáncer a través de fondos proporcionados por el Gobierno de Ontario para PB. Apoyado en parte por el apoyo a la infraestructura operativa del programa de financiación del Gobierno del Estado de Victoria. Los donantes no tenía papel en el diseño del estudio, la recogida y análisis de datos, decisión a publicar, o la preparación del manuscrito
Conflicto de intereses:. La donación de Pfizer de Investigación del Cáncer es una revisión por pares, subvención competitiva. Esto no altera la adhesión de los autores a todas las políticas de PLoS ONE sobre los datos y compartir materiales.
Antecedentes
A pesar de que la incidencia global de cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC) parece ser disminuyendo en América del Norte, la mortalidad se ha estancado recientemente [1]. Más muertes son atribuibles a NSCLC que cualquier otro cáncer [1]. A medida que los síntomas aparecen tarde, la mayoría de los pacientes son diagnosticados con enfermedad localmente avanzada o metastásica. Manejo de la enfermedad en etapa tardía ha evolucionado para incluir sub-tipificación molecular de las mutaciones somáticas y reordenamientos del gen. Por desgracia, la rápida traducción de la información molecular en el adyuvante y neoadyuvante configuración ha producido resultados contradictorios y confusos. Por ejemplo, las mutaciones en el receptor del factor de crecimiento epidérmico (
EGFR
) de genes son claramente predictivos de la respuesta a los inhibidores de tirosina quinasa y mejora de la supervivencia para los pacientes metastásicos. En la enfermedad localmente avanzada, sin embargo, dos estudios de poca potencia, no lograron reproducir esta observación, y no está claro si los inhibidores de la tirosina cinasa son beneficiosos para la etapa temprana CPNM [2], [3].
actualmente no hay consenso para la gestión de localmente avanzado (estadio IIIA) NSCLC. Esto sigue siendo controvertido debido a las variaciones en las técnicas de puesta en escena, los conflictos de los resultados del ensayo y prácticas idiosincrásicas entre las diferentes instituciones [4]. Las opciones incluyen la cirugía seguida de quimioterapia adyuvante (ACT), la quimioterapia neoadyuvante (NAC), seguida de cirugía y definitiva quimio-radioterapia sola o seguida de cirugía. Hasta la fecha, la única modalidad demostrado que mejora significativamente la supervivencia es la resección quirúrgica seguida de ACT, como se muestra en una serie de grandes estudios [5]. Aunque los estudios iniciales de NAC parecían alentadores, el entusiasmo disminuye a medida que se disponga de más datos de grandes estudios de tratamiento adyuvante, lo que lleva a una mala contratación y análisis de poca potencia [6]. Sólo un estudio comparó NAC a ACT y demostró la equivalencia en los pacientes con enfermedad en estadio temprano [7], aunque hubo advertencias [4].
Una razón particular para el uso de la NAC en oposición a la post-operatorio terapia adyuvante, se que proporciona información valiosa, potencialmente predictivo, basado en la sensibilidad de drogas
in vivo
. En contraste actual marcadores predictivos, no puede determinar si un individuo con NSCLC responderá a un determinado tratamiento [8]. Esto es importante como respuesta al tratamiento puede mejorar la resecabilidad y puede traducirse en una mejora en la supervivencia [9]. Por otra parte, la capacidad de predecir a priori qué pacientes se beneficiarán hace posible la optimización de la terapia y evitar la toxicidad innecesaria en los que es poco probable que responder
.
antígenos del cáncer de testículo (CTA) son moléculas caracterizadas por la expresión restringida a tejido normal testículo pero la expresión aberrante en una variedad de tipos de cáncer, incluyendo 10 a 50% de NSCLC [10], [11]. Su expresión a menudo se coordina [12] y se asocia con una peor resultado clínico [13] y la enfermedad avanzada [14], [15]. Hay algunas pruebas de que son funcionales; corta selección de ARN de interferencia de una línea celular de cáncer de pulmón mostró que varias llamadas a la acción se asociaron con la resistencia a la quimioterapia paclitaxel [16]. Sin embargo, las llamadas a la acción identificadas en estas pantallas no han sido ampliamente estudiados y su presencia en los tumores de pulmón de pacientes aún no se ha evaluado. La asociación con la quimio-resistencia es análoga a lo observado en otros tipos de tumores donde se ha especulado que las CTA marcar más primitivo, células "stem-like" [10], [17] - [19]. De hecho, el estudio actual se llevó a cabo inicialmente con el fin de evaluar la relación entre estos antígenos y quimiorresistencia. Por lo tanto, fue una sorpresa descubrir que NY-ESO-1 y en menor medida MAGE-A3 se asociaron con la quimiosensibilidad.
Mientras que el papel funcional de las CTA en el cáncer sigue siendo poco clara, la inmunogenicidad de estas moléculas tiene sido bien documentado [10]. De hecho CTAs se identificaron originalmente por la clonación de antígenos que activan los linfocitos T citotóxicos y cribado de sueros de pacientes para los anticuerpos inmunorreactivos [20]. Hasta la fecha más de 100 familias CTA distintas han sido identificadas [21] con aproximadamente 30 codificada por genes localizados en el cromosoma X (genes CT-X). Las regiones promotoras para todos los genes CT-X estudiados contienen islas CpG y, a menudo están metiladas en tejidos somáticos y por lo tanto no expresan. En el cáncer, desmetilación global del cromosoma X que incluye las regiones promotoras de CT-X genes se cree que resulta en la activación coordinada de múltiples llamadas a la acción [10], aunque no está claro si la CTA son transeúntes o participar funcionalmente en la tumorigénesis.
Para evaluar la relación entre la quimiosensibilidad y la expresión de CTA en el CPNM, hemos realizado estudios de inmunohistoquímica en tumores de pacientes con N2 (pN2) afectación ganglionar patológica (al menos las fases III a). Se investigaron dos cohortes clínicas, una cohorte pre-operatorio y post-operatorio. Los pacientes habían sido sometidos ya sea pre-operatorio NAC, donde se investigó el tejido ganglionar mediastinal antes del tratamiento o que fueron tratados quirúrgicamente con o sin quimioterapia adyuvante en el grupo post-operatorio; donde se investigó el tejido del tumor primario después de la resección. Aquí se demuestra que la CTA NY-ESO-1 es pronóstico de mala evolución clínica, sin embargo también parece ser predictivo para mejorar la respuesta y el beneficio en la supervivencia de la quimioterapia.
Materiales y Métodos
Pacientes y muestras clínicas
en virtud de un protocolo aprobado por el comité ético de Austin de la Salud, el hospital de San Vicente y hospitales Weill Cornell Medical Centre, los pacientes que se sometieron a cirugía de NAC o preoperatoria con o sin ACT para la enfermedad pN2 fueron identificados y clínica La información capturada de forma retrospectiva. El consentimiento para el acceso tejidos y los registros clínicos se renunció a la condición de que se aplica el anonimato a los datos del paciente. NAC pacientes fueron tratados con al menos tres ciclos de quimioterapia basada en platino antes de la cirugía. ACT pacientes fueron tratados con cuatro ciclos de base de platino quimioterapia post resección. Los pacientes que no recibieron ACT se observaron sin ningún tratamiento adicional. Para la cohorte pre-operatorio, las muestras obtenidas a partir de muestras de ganglios linfáticos del mediastino antes de la administración de quimioterapia fueron utilizados para la tinción de CTA y aislamiento de ADN. En la cohorte de post-operatorio, se utilizó la muestra de tumor de pulmón quirúrgica primaria. Respuesta a la NAC se define patológicamente por abajo de la puesta en escena de la lesión inicial después de la operación. Los pacientes se llevaron a cabo antes de la operación con la PET o la mediastinoscopia.
Para una validación adicional que investigó los pacientes tratados como parte del estudio BR.10 [22] cuyos tumores fueron sometidos a perfiles moleculares utilizando vectores Affymetrix. El estudio original asignó al azar a 482 pacientes a recibir quimioterapia adyuvante o la observación después de la resección quirúrgica, sin embargo, sólo 133 de estas muestras estaban disponibles para los arrays de expresión de genes [23].
CT antígeno tinción
Para CTA tinción, se cortaron y se tiñeron secciones de 4 micras de parafina de tejidos fijados con formol (FFPE) como se ha descrito anteriormente [19]. NY-ESO-1 (E978) se obtuvo del Instituto Ludwig para la Investigación del Cáncer y utiliza a una concentración de 2,5 mg /ml. MAGE-A de anticuerpos (6C1) se adquirió de Abcam y se utiliza en 0,3 mg /ml. anticuerpo MAGE-C1 /CT7 (CT7-33) se obtuvo de Santa Cruz (cat no sc-20034) y se usó en 0,5 mg /ml. La detección de la tinción nuclear y /o citoplásmica en cualquier porcentaje de células tumorales se consideró positiva. total ausencia de tinción se considera negativo para cada prueba CTA. tejido testicular se utilizó como control positivo; tejido pulmonar normal y ausencia de anticuerpo primario se utilizaron como controles negativos.
mutacional de perfiles
ADN fue aislado de FFPE bloques o diapositivas sin teñir. Para bloques tumorales, un H & amp; E diapositivas se examinó histológicamente y 1,5 mm núcleos fueron tomadas desde el bloque correspondiente en las zonas de alta celularidad tumoral. Para las diapositivas, las zonas de alta celularidad tumoral se rasparon de la diapositiva. El tejido o núcleo era entonces de-con parafina mediante pases seriados en xileno y alcohol, el ADN aislado a partir de sangre DNeasy y kits de tejido (Qiagen, Melbourne, Australia) y sometidas a mutacional de perfiles utilizando la plataforma MassArray de Sequenom, v1.0 Panel Oncocarta, como antes se describe [24]. Esta plataforma interroga 238 mutaciones en 19 oncogenes (http://www.sequenom.com/sites/genetic-analysis/applications/somatic-mutation-profiling.
Microarray Análisis
abundancias CTA mRNA fueron evaluados en el conjunto de datos BR.10 [23]. están a disposición del público estos datos en el Centro Nacional de Información de Biotecnología Expresión Génica Omnibus (GSE14814) y del Proyecto de Desafío del Director [25]. Estos análisis se realizaron en R (v2.14.2). Los datos pre-procesamiento se realizó a través de RMA [26] (paquete de Affymetrix versión 1.20.0) y actualizada Entrez GeneID anotación [27] (paquete hgu133ahsentrezgcdf v14.1.0). CTA fueron emparejados a la plataforma de microarrays de expresión génica a través de sus GeneIDs Entrez. Cada gen se utilizó para la mediana dicotomizan la cohorte de pacientes. Las diferencias en la supervivencia entre los dos grupos fueron evaluados con las curvas de supervivencia de Kaplan-Meier y Cox cociente de riesgos proporcionales de modelado seguido por el test de Wald (supervivencia paquete v2.36-12) en toda la cohorte, los pacientes tratados con ACT y los pacientes no tratados con ACT .
Estadísticas
Las diferencias en la demografía de los pacientes de los grupos de pacientes positivos y negativos CTA CTA fueron evaluados con χ
2-pruebas. Un valor de p & lt; 0,05 se consideró significativo. Además, para evaluar el valor pronóstico y predictivo de la expresión de CTA tanto los análisis de modelado cociente de riesgos proporcionales de Cox univariante y multivariante se realizaron en R (v2.14.2, la supervivencia paquete v2.36-12).
Resultados
estaban disponibles para 199 pacientes en dos cohortes
Los pacientes
Clinicopathological datos. La primera, una cohorte pre-operatorio, incluidos 94 pacientes que se sometieron a la quimioterapia neoadyuvante seguida de cirugía. En el segundo, una cohorte post-operatorio, se incluyeron 105 pacientes; 49 años que tenía la resección quirúrgica sola, 47 que recibieron quimioterapia adyuvante adicional y 9, donde no se registró datos de la quimioterapia adyuvante. La información clínica de cada grupo se resume en la Tabla 1. Los pacientes tratados con NAC que procedieron a la cirugía representan un subgrupo altamente seleccionados basándose principalmente en la resecabilidad y buen estado general después de la quimioterapia. En la cohorte post-operatorio, los pacientes que no recibieron quimioterapia fueron tratados principalmente antes de 2004, cuando el tratamiento adyuvante fue más ampliamente aceptado.
expresión de antígenos CT
NY-ESO-1 manchado proporciones similares en cada cohorte, con 24/94 (26%) de los nodos de pN2 en la cohorte pre-operatorio y 26/105 (25%) de los tumores de pulmón resecados en la cohorte post-operatorio (Figura 1). La edad media de los pacientes cuyos tumores teñido positivo para NY-ESO-1 fue de 62 años en el pre-operatorio y 66 años en la cohorte post-operatorio, que eran similares a los pacientes con NY-ESO-1 tumores negativos. Más varones eran NY-ESO-1 positivo en ambas cohortes con 14/24 (58%) positivos en la cohorte pre-operatorio (Pχ
2 = 0,728) y 16/26 (62%) en la cohorte post-operatorio (Pχ
2 = 0,605)
A:. Testis (control positivo), B: NY-ESO-1, C: MAGE-A, D: MAGE-C1, E: mapa de calor solapamiento detallando en la expresión de CTA y otras características clínico-patológicas en la cohorte neoadyuvante.
MAGE-a expresión se observó sólo en 27/94 (29%) de los pacientes antes de la operación, pero en 52/105 (50%) en la cohorte post-operatorio (Pχ
2 = 0,004). MAGE-C1 manchado menor número de muestras, con 13/94 (13%) en la cohorte NAC pero 32/105 (44%) en la cohorte post-operatorio.
CTA se expresaron tanto en el adenocarcinoma y el carcinoma de células escamosas (Figura 1E, 1F). Sin embargo carcinomas de células escamosas más fueron positivos en ambos conjuntos de datos, aunque esto no alcanzó significación estadística en la cohorte pre-operatorio. Por NY-ESO-1 en la cohorte de 8/22 (36%) carcinomas de células escamosas preoperatorios fueron positivos en comparación con 9/60 (15%) adenocarcinomas (Pχ
2 = 0,070). Del mismo modo en el post-operatorio cohorte 12/30 (30%) fueron positivos en comparación con 8/59 (14%; Pχ
2 = 0,011) adenocarcinomas. Estas diferencias histológicas en la tinción de antígeno CT fueron similares para MAGE-A y MAGE-C1 y para que se informó anteriormente [13]. Además expresión de uno CTA se asocia a menudo con la expresión de los otros, un fenómeno que también se ha observado anteriormente [13].
Las mutaciones genéticas y la expresión de antígenos CT
A continuación trató de determinar si CTA expresión se asocia con mutaciones genéticas específicas. Se seleccionaron 238 mutaciones somáticas en 19 oncogenes utilizando v1.0 panel de OncoCarta de Sequenom. Se observaron tasas más bajas de las mutaciones en la cohorte pre-operatorio a la esperada en una población caucásica NSCLC, con sólo cuatro
EGFR
(4%) y nueve mutaciones
KRAS
(9%) mutaciones , todos los que ocurren en adenocarcinomas como se esperaba. Dos casos adicionales albergaban
BRAF
mutaciones, mientras que tres tenían
TP53
mutaciones y uno de un
ANR
mutación. Las bajas tasas de
EGFR
y
KRAS
mutaciones pueden reflejar una mayor tasa de resultados falsos negativos debido al bajo porcentaje de células tumorales en proporción a las células no neoplásicas en estos ganglios linfáticos, aunque áreas de celularidad tumoral alta fueron seleccionados específicamente para el aislamiento de ADN. En la cohorte post-operatorio, las tasas de mutaciones fueron significativamente mayores, y más cerca de los esperados para la fase final del CPNM, con 16
EGFR
mutaciones (15%) y 18 (17%)
KRAS
mutaciones. CTA expresión no se asoció con mutaciones oncogénicas en los adenocarcinomas (Figura 1E).
respuesta a la quimioterapia neoadyuvante
Respuesta a la NAC se evaluó sobre la base de abajo patológica puesta en escena. De los 24 NY-ESO-1 tumores positivos, dos pacientes lograron una respuesta completa (RC;
es decir
ningún tumor residual fue patológicamente detectable), 14 una respuesta parcial (RP), seis tenían enfermedad estable (SD) y dos avanzaron por la quimioterapia (PD). En los 70 NY-ESO-1 en pacientes negativos, había una CR, 23, RP 36 SD, nueve PDS y una respuesta que falta (Figura 2). Hubo un aumento significativo en la tasa de respuesta (CR + PR) en NY-ESO-1 en comparación con tumores que expresan NY-ESO-1 negativas (Pχ
2 = 0,034).
CR = respuesta completa, PR = respuesta parcial, SD = Enfermedad estable, la enfermedad PD = progresivo, ND = No evaluables. Diagrama de bosque factores asociados con la supervivencia en los pacientes que fueron tratados en la cohorte post-operatorio que detalla. Cuadrados = células escamosas, adenocarcinoma = ADC, ACT = quimioterapia adyuvante (B).
A pesar de la mejora de las respuestas a las NAC, no se observaron diferencias en la supervivencia en pacientes que expresan NY-ESO-1 o cualquier otro CTA comparó a aquellos tumores que no lo hicieron. Patológica CR se asoció con una supervivencia prolongada; sin embargo, para la mayoría de pacientes, la mejor respuesta fue un PR. Debe tenerse en cuenta que los pacientes que se sabe que han progresado a través de la quimioterapia antes de la cirugía y por lo tanto incapaces de proceder a la cirugía no fueron incluidos en este estudio. Por otra parte, dada la baja tasa de NY-ESO-1 de expresión, estos análisis fueron suficiente para detectar una diferencia en la supervivencia.
La supervivencia después de la quimioterapia adyuvante
Las respuestas mejoradas a NAC en pacientes con NSCLC que expresa pN2 NY-ESO-1 nos llevó a investigar una cohorte post-operatorio de los pacientes con enfermedad N2 oculta, la mitad de los cuales recibieron la quimioterapia en el tratamiento adyuvante. De 105 pacientes de la cohorte post-operatorio, el uso de la quimioterapia adyuvante no pudo ser determinada en nueve, dejando a 96 pacientes en los que la supervivencia se correlacionó con la expresión de CTA. La expresión de MAGE-A y /o NY-ESO-1 se asocia con una peor supervivencia de MAGE-A negativo tumores negativos o NY-ESO-1. la expresión de MAGE-C1 no se asoció con un peor resultado. El tratamiento con quimioterapia sin embargo resultó en la supervivencia significativamente mejorada especialmente en NY-ESO-1 que expresan los tumores (Figura 3). En el análisis multivariante NY-ESO-1 de expresión siguió siendo un factor independiente de pronóstico pobre (HR 2,61, IC del 95%: 1,28 a 5,33; p = 0,008 prueba de Wald) mientras que el tratamiento con quimioterapia y la expresión de NY-ESO-1 fue un predictor independiente de la mejora la supervivencia (HR 0,267, IC 95% 0,073-0,980;. p = 0,046 Wald prueba de la Tabla 2).
supervivencia en una cohorte independiente utilizando los datos de expresión génica
buscado para validar nuestros resultados utilizando microarrays de datos previamente publicados por la quimioterapia adyuvante BR.10 conjunto de datos [23]. Esta cohorte contenía los datos de microarrays de Affymetrix para la abundancia de ARNm de 133 pacientes de los cuales 71 recibieron quimioterapia adyuvante. Por desgracia, a pesar de las sondas de oligonucleótidos que representan MAGE-A1, MAGE-A4 y MAGE-C1 podría ser asignada a la matriz, NY-ESO-1 no estaba presente después de la cartografía a los modernos de genes anotaciones. La expresión de antígenos MAGE-A1 y 4 se asoció con una supervivencia inferior en los pacientes asignados al azar a la observación. Sin embargo MAGE-A1 y 4 pacientes positivos tratados con quimioterapia habían mejorado la supervivencia en comparación con MAGE-A1 y se observaron 4 pacientes negativos y las curvas de supervivencia similares a los observados en nuestra cohorte post-operatorio de los pacientes tratados de manera similar (Figura 4). Sin embargo, estas diferencias en la supervivencia no alcanzaron el nivel de significación estadística. Es importante señalar que aunque la supervivencia en el conjunto de datos BR.10 global demostró diferencias estadísticamente significativas para los pacientes tratados con quimioterapia adyuvante, en este subconjunto de 133 pacientes, la tendencia hacia una mejor supervivencia se mantuvo, sin embargo no fue significativa. Esto puede explicar por qué en esta cohorte de poca potencia, se observaron tendencias similares a los observados en nuestra cohorte post-operatorio, aunque no alcanzó el nivel de significación estadística.
Discusión
Estos datos proporcionar una confirmación adicional de que la expresión de CTA en el CPNM se asocia con un mal pronóstico en general. En particular NY-ESO-1 se asoció con resultados significativamente más pobre en pacientes no tratados con quimioterapia adyuvante en comparación con NY-ESO-1 en pacientes negativos que también no fueron tratados con quimioterapia adyuvante. Aunque se observaron tendencias similares para MAGE-A y MAGE-C1, NY-ESO-1 sigue siendo el más fuerte predictor de la respuesta a la quimioterapia neoadyuvante en el entorno, sino también para beneficio de la quimioterapia adyuvante. Estos hallazgos apoyan NY-ESO-1 como un factor pronóstico útil, sino también un factor predictivo potencial de beneficio significativo de adyuvante y quimioterapia neoadyuvante.
A pesar de la mejora de las respuestas a la quimioterapia neoadyuvante en el ajuste de un equipo era sorprendente que ninguna traducción de la respuesta en un beneficio en la supervivencia se observó en los pacientes con tumores NY-ESO-1 +. Sin embargo, cabe destacar que estos análisis fueron suficiente para detectar una diferencia en la supervivencia. Estos resultados paralelos a conclusiones similares en los pacientes tratados con quimioterapia neoadyuvante en el cáncer de mama. Los tumores de mama que fueron negativos para el receptor de estrógeno, receptor de progesterona y la amplificación del gen HER2, también conocido como "cánceres de triple negativo" en el seno están expresados fuertemente antígenos CT-X [28], [29] en comparación con los tumores con receptores positivos. Además, triples cánceres de mama negativas han demostrado ser más sensible a la quimioterapia de antraciclina y platino quimioterapia basada en [30], [31]. Curiosamente, sin embargo, a pesar de respuesta a la quimioterapia mejoró significativamente en los tumores triple negativos, la supervivencia no fue afectada en estos estudios, excepto en la minoría de pacientes que lograron una respuesta completa. Esto condujo a la hipótesis de que el fenotipo asociado con la expresión más pobre CTA y triples negatividad consecuencia un aumento de las tasas de recaída, a pesar de las buenas respuestas iniciales [31]. Estos hallazgos podrían explicar por qué los pacientes en nuestro estudio cuyos tumores expresan NY-ESO-1 había mejorado significativamente las respuestas a la quimioterapia neoadyuvante y sin embargo ningún beneficio en la supervivencia en comparación con los pacientes con NY-ESO-1 tumores negativos.
Una advertencia en nuestro estudio es que el tejido investigado para nuestros dos cohortes fueron diferentes, con la cohorte pre-operatoria consiste en el tejido de los ganglios linfáticos y la cohorte post-operatorio el tumor de pulmón primario. Hubo claras diferencias en el número de muestras que fueron positivas para CTAs, así como para las mutaciones entre estas cohortes. Sin embargo, en pacientes sometidos a quimioterapia neoadyuvante, no es posible obtener una gran parte del tejido primario y el uso de tejido post-quimioterapia también puede ser inexacta. En nuestro estudio también a prueba la muestra de tumor de pulmón primario después de la NAC para NY-ESO-1. En muestras con tumor viable, NY-ESO-1 de expresión no se observó en el tumor resecado primario si el ganglio linfático pre-tratamiento fue negativo; sin embargo, en 13 casos, a pesar de NY-ESO-1 + ganglios tejido nodal, después de la quimioterapia NY-ESO-1 no se detectó expresión en el tumor resecado primario (datos no mostrados).
A medida que el papel funcional de los CTAs es poco conocido, es difícil definir un mecanismo por el cual su expresión podría influir en la quimiosensibilidad. Mientras que algunos existen datos de soporte
KRAS mutaciones
como un marcador de la quimio-resistencia y
EGFR mutaciones
como un marcador de la quimiosensibilidad [8], nuestros datos no demuestran una asociación entre estas mutaciones y NY-ESO expresión -1. Ciertamente, nuestros resultados están en contraste con los estudios recientes que demuestran que, en líneas celulares, incluyendo otra CTA acrosina-proteína de unión (
ACRBP
) se asociaron con
resistencia a la quimioterapia con taxanos [16]. Sin embargo, a diferencia de
ACRBP
que es un no-X-CTA con una función específica asociada con el huso mitótico [32], los antígenos CT-X evaluados en su estudio tienen una función bien definida hasta la fecha. Esta diferencia probablemente subyace en sus diferentes influencias sobre la quimiosensibilidad. Otros estudios han demostrado que las proteínas MAGE forman complejos con Kap-1, un conocido co-represor de
TP53
y MAGE por lo tanto puede actuar para evitar que las células de la apoptosis y promover la tumorigénesis. Sin embargo, la vinculación de estas vías para explicar la mejor respuesta a la quimioterapia en cáncer de mama y cáncer de pulmón ahora garantiza una mayor investigación.
A medida que las CTA son conocidos por ser inmunogénica, es quizá más plausible que la mejor respuesta y la supervivencia de los pacientes cuyo tumores expresan NY-ESO-1 no eran el resultado de un aumento de la citotoxicidad, sino más bien se mediada a través de mecanismos inmunológicos. NY-ESO-1 es un potente estimulador de las células T y se ha utilizado como una vacuna tumoral en una variedad de tipos de tumores [21], [33] La quimioterapia inducida por la lisis de las células tumorales podría permitir a los antígenos previamente ignorantes a las células T para ser procesados y presentados a través de antígeno de las células con la estimulación resultante de células T que presenta. Esto puede explicar, en parte, el aumento de los pies en la estadificación de los tumores en el corto plazo, aunque se podría esperar una respuesta de células T para dar como resultado remisiones más duraderas. La evidencia de esto es apoyada por estudios recientes que investigan los inhibidores de punto de control inmunes donde el impacto de la activación inmune se puede retrasar la progresión de tal manera que la enfermedad inicial puede ser observado seguido de remisiones más duraderas [34]. Curiosamente, se ha informado de NY-ESO-1 respuestas de células T específicas para aumentar la frecuencia y la funcionalidad durante anti-CTLA-4 tratamiento, un inhibidor de puesto de control inmunológico, con remisiones de la enfermedad duraderos resultantes, por lo tanto, poner de relieve la importancia de este antígeno [35]. Los estudios anteriores no han mostrado una correlación entre el desarrollo de anticuerpos a los antígenos tumorales y remisiones espontáneas. Sin embargo, en el contexto de la quimioterapia, el reconocimiento y la respuesta inmunológica, además de la quimioterapia inducida por el agotamiento de las células T reguladoras podrían explicar las mejores tasas de respuesta que hemos observado y el de más largo plazo ventaja en la supervivencia en el entorno adyuvante. Una alternativa a estas hipótesis es que la ventaja de supervivencia visto en el tratamiento adyuvante puede no representar respuestas tumorales mejorado, pero una peor supervivencia en ausencia de quimioterapia. Se necesitan más estudios para explicar mejor a nuestros hallazgos.
Los ensayos clínicos recientes que investigan los inhibidores de punto de control inmunes en el CPNM han demostrado una promesa significativa sobre todo en los carcinomas de células escamosas [36], [37]. Un estudio de investigación de un anticuerpo monoclonal dirigido contra CTLA-4, una molécula que inhibe la activación de células T, demostró un beneficio global en la prolongación de la supervivencia libre de progresión relacionada con la inmunidad. Aunque los tumores de todos los diferentes tipos histológicos parecían beneficiarse, una tendencia hacia un mejor beneficio se observó en pacientes con histología de células escamosas, un subgrupo que también hemos observado que expresa altamente CTA [36]. Estos datos se han traducido en la puesta en marcha de un estudio aleatorizado de fase III que compara la adición de ipilimumab a la quimioterapia en pacientes con histología de células escamosas. Del mismo modo un inhibidor de la muerte-1 eficacia (PD-1), una molécula también implicado en la inhibición de células T, recientemente ha demostrado programado en un estudio de fase I [37]. No se observaron significativamente más respuestas en pacientes con carcinoma de células escamosas en comparación con los tipos de tumores no escamosas. Aunque en estos momentos no para demostrar que las CTA jugar un papel en estos primeros estudios, la fuerte asociación de estas moléculas inmunogénicas con la misma histología se beneficie de la inmuno requiere investigación adicional.
Estos datos demuestran que la expresión de la CTA NY-ESO-1 se asocia con mayor downstaging con quimioterapia administrada en el tratamiento neoadyuvante y beneficio significativo de supervivencia con quimioterapia administrada en el tratamiento adyuvante. Por lo tanto, nuestros datos apoyan NY-ESO-1 tanto como una (mala) marcador pronóstico y también un marcador predictivo. A medida que el ensayo es sencillo y fácil de interpretar, NY-ESO-1 podría fácilmente ser estudiado de forma prospectiva como marcador. Quizás lo más importante, la inmunogenicidad de esta molécula puede ser una justificación para futuros estudios que utilizan NY-ESO-1 como diana terapéutica, el tratamiento de una mejor personalización hacia los más propensos a obtener un beneficio.
Reconocimientos
Los autores agradecen al Dr. Syed Haider para soporte técnico.