Extracto
Antecedentes y objetivos
El factor de transcripción 3 (
TCF3
) implica a vía de señalización Wnt y regula la expresión de e-cadherina, que está implicado en la agresividad de los tumores. Este estudio tiene como objetivo investigar el papel de
TCF3
para predecir el pronóstico de los pacientes con estadio II y III de cáncer colorrectal (CCR).
Métodos
Real-Time PCR cuantitativa fue realizado en 64 tejidos frescos CRC y 6 líneas de células para examinar
TCF3
la expresión del ARNm. proteínas TCF3 dinámica de la expresión se detectaron mediante inmunohistoquímica de 118 muestras incluidas en parafina, y la importancia clínica de TCF3 se evaluó mediante la correlación clínica y Kaplan-Meier análisis. hipometilación aberrante de
TCF3
promotor también se investigó mediante la secuenciación de bisulfito y PCR específica de metilación.
Resultados
La regulación de
TCF3
mRNA fue con frecuencia detectado tanto en los tejidos de CRC con recidiva y metástasis líneas celulares derivadas. El nivel de expresión de la proteína TCF3 se correlacionó significativamente con el tipo histológico (
P = 0,038
) y el tiempo de supervivencia libre de enfermedad (
P
= 0,002). TCF3 expresión más alta indica los resultados de mal pronóstico (
P Hotel & lt; 0,05, prueba de log-rank). El análisis multivariado mostró también una fuerte expresión de la proteína TCF3 y la invasión perineural fueron pronosticadores independientes adversos en el CCR (
P
= 0,010, 0,000). Además, se mostró que el promotor de la hipometilación del
TCF3
se asocia con su hasta-expresión.
Conclusiones
Este estudio pone de relieve el valor pronóstico de
TCF3
en la etapa II y III CRC. La regulación de
TCF3
, que es causado principalmente por el promotor de la hipometilación, es uno de los mecanismos moleculares implicados en el desarrollo y progresión del CRC
Visto:. Li C, Cai S, Wang X, Z Jiang (2014) hipometilación asociada a la regulación de
TCF3
Expresión y recurrencia en la etapa II y III de cáncer colorrectal. PLoS ONE 9 (11): e112005. doi: 10.1371 /journal.pone.0112005
Editor: Anthony WI. He aquí, el Queen Mary Hospital, Hong Kong
Recibido: Abril 10, 2014; Aceptado: 11 Octubre 2014; Publicado: 6 Noviembre 2014
Derechos de Autor © 2014 Li et al. Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos de la licencia Creative Commons Attribution License, que permite el uso ilimitado, distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que el autor original y la fuente se acreditan
Disponibilidad de datos:. La autores confirman que, por razones aprobadas, algunas restricciones de acceso se aplican a los datos subyacentes a los hallazgos. Los datos están disponibles en el Comité de Ética del Centro de Cáncer de Shanghai Fudan University para los investigadores que cumplan con los criterios de acceso a los datos confidenciales. Las solicitudes de acceso a los datos se pueden enviar al profesor Sanjun Cai. (E-mail:
[email protected])
Financiación: Este estudio fue apoyado por la Fundación de Ciencias Postdoctoral de la provincia de Heilongjiang (LRB87859), Fundación para la Investigación Científica Médica de la provincia de Heilongjiang (2011-144), el Proyecto de apertura de la clave Laboratorio de Genética médica de instituciones de educación superior de Heilongjiang y la Fundación de Ciencias Naturales de la provincia de Heilongjiang (H201332). Los donantes no tenía papel en el diseño del estudio, la recogida y análisis de datos, decisión a publicar, o la preparación del manuscrito
Conflicto de intereses:.. Los autores han declarado que no existen intereses en competencia
Introducción
el cáncer colorrectal (CCR) es una de las tres principales causas de muerte por cáncer en las de todo el mundo [1]. Etapa II y III tumores juntos representan aproximadamente el 70% de los pacientes de CRC [2]. Metástasis ganglionares regionales es uno de los indicadores más potentes de la agresividad de los CRC y ayuda en la predicción del resultado clínico. Sin embargo, un tercio de los pacientes con CCR y sin evidencia histológica de los ganglios linfáticos mueren dentro de los cinco años después de la cirugía de metástasis a distancia o recurrencia local, lo que sugiere que el estado de los ganglios no puede predecir el curso clínico de la CRC adecuada [3]. Por tanto, es importante identificar los factores pronósticos que predicen un peor pronóstico y la terapia de guía en la etapa II y III CRC.
gen del factor de transcripción 3 (
TCF3
) fue localizado en 19p13.3 banda cromosómica.
TCF3
es un regulador de transcripción expresado de forma ubicua y codifica dos hélice-bucle-hélice básico (HLH) factores de transcripción, E12 y E47 [4]. Estas dos proteínas se caracterizan por patrón de expresión amplio y la capacidad de unirse al ADN [5] - [8]. Varios estudios han descrito el papel emergente de
TCF3 Hoteles en tumores experimentales. La sobreexpresión de TCF3 se ha detectado en CRC [9], cáncer de próstata [10], [11], cáncer gástrico [12] y el cáncer renal [13]. Como un represor transcripcional de la E-cadherina,
TCF3
ha implicado en la transición epitelial a mesenquimal y pueden estar relacionados con la agresividad del tumor [14]. El aumento de la actividad transcripcional de
compleja TCF /β-catenina ¿Cuáles son las suceso iniciador en los tumores colorrectales esporádicos más [15]. Aunque los estudios habían demostrado considerables
TCF3
fue un promotor de tumores, su papel en la progresión del cáncer sigue siendo controvertida [16], [17]. Patel
et al
. proporcionado tres escenarios para demostrar el potencial
TCF3
mecanismos regulados a nivel molecular [11].
El objetivo de este estudio es evaluar la importancia clínica de
Hoteles en TCF3 CRC humana, y para investigar los mecanismos que median la sobreexpresión de
TCF3
, que ayudan en la identificación temprana de un subgrupo de alto riesgo de recurrencia de los pacientes con estadio II y III CRC.
Materiales y Métodos
pacientes y muestras de tejido
Entre abril de 2000 noviembre de 2004, 64 tejidos frescos CRC, 36 y 28 con la recurrencia sin recurrencia, se recogieron inmediatamente después de la operación en el Centro de cáncer de la Universidad de Fudan de Shanghai (Shanghai, china ). Características de las muestras se muestran en la Tabla 1. Total de 118 muestras incluidas en parafina, 78 con la recurrencia y 40 sin recurrencia, se recogieron retrospectivamente a partir de material de archivo almacenado en el departamento de patología de la Universidad Fudan de Shanghai Centro de Cáncer (Shanghai, China) entre febrero de 1993 y marzo de 2004, estas muestras eran de pacientes diferentes de los utilizados para el análisis de ARNm (Tabla 2).
Todos los especímenes examinados fueron tomados de los núcleos vitales de los cánceres confirmados histopatológicamente en la cirugía primaria en pacientes que no se sometió a ningún tratamiento local o sistémico antes de la operación. Las muestras tumorales fueron revisados por al menos 2 patólogos experimentados, y el estadio tumoral se asignan sobre la base del sistema de la Unión Internacional Contra el Cáncer. Sin fase II, pero todos en estadio III pacientes recibieron quimioterapia postoperatoria, pero ninguno de los pacientes recibieron radioterapia.
Supervivencia
libre de enfermedad se define como el tiempo transcurrido desde la fecha del diagnóstico inicial a la aparición de recidiva local o metástasis a distancia . escrito el consentimiento informado se obtuvo de todos los pacientes, y el protocolo de investigación fue aprobado por el comité ético del Centro de Cáncer de la Universidad Fudan de Shanghai.
Las líneas celulares
Seis líneas celulares de CRC humanos se obtuvieron de la American Type Culture Collection (ATCC, Manassas, VA). Tres son las líneas derivadas de primario del tumor (SW480, Caco-2, HCT116), 2 son líneas derivadas de los ganglios linfáticos-metástasis (SW620, LoVo), y 1 es la línea abdominal derivada de hidropesía-metástasis (Colo205). Las líneas celulares LoVo y Colo205 se cultivaron en medio RPMI-1640, mientras que Caco-2 y HCT116 se cultivaron en medio esencial mínimo de Eagle y medio 5A de McCoy modificado, respectivamente. Tanto SW480 y SW620 se cultivaron en medio L-15 de Leibovitz. Todos los medios se complementaron con 10% de suero fetal bovino (Gibco, EE.UU.), penicilina 100 UI /ml, y estreptomicina 100 g /ml a 37 ° C en un 5% CO
2- atmósfera humidificada. El método de cultivo celular se describió anteriormente [18].
análisis de mRNA por qPCR
El ARN total se aisló con un RNeasy Mini Kit (Qiagen GmbH, Hilden, Alemania) y se trató con DNasa. De acuerdo con las instrucciones del fabricante, los ADNc se sintetizaron con cebadores oligo-dT (Promega, Madison, WI). El
TCF3
cebadores específicos de usados fueron 5'-CTCGAGAAGAACAGGCCAAG-3 '(forword) y 5'-GGGGCAGGTACTGAACACAT-3' (hacia atrás). Gliceraldehído-3-fosfato deshidrogenasa (
GAPDH
) sirvió como control para la normalización de la expresión génica y se amplificó usando los cebadores 5'-GAAGGTGAAGGTCGGAGTC-3 '(hacia delante) y 5'-GAAGATGGTGATGGGATTTC-3' (hacia atrás) . El qPCR se llevaron a cabo utilizando el ciclo de PCR predeterminada en un sistema de detección de secuencias ABI Prism 7900HT (Applied Biosystems), y cDNA amplificado se detecta por SYBR Green I colorante (Qiagen GmbH, Alemania). Los datos se analizaron utilizando software ABI Prism 7900 SDS (Sistema de Detección de Secuencia 2.0; Applied Biosystems). Las relaciones de las intensidades de gen diana y
GAPDH
señales se utilizan como una medida relativa del nivel de expresión de los genes diana. Todos los experimentos se repitieron tres veces.
La inmunohistoquímica
Archivo hematoxilina y eosina diapositivas fueron revisados por 2 patólogos experimentados en accordence con la clasificación de la Organización Mundial de la Salud 2000. Se aplicó un sistema de gradación de 3 niveles. El estadio TNM se evaluó de acuerdo con la Unión Internacional de 2002 contra el cáncer de clasificación.
Un conejo policlonal antihumano
TCF3
anticuerpo (dilución 1:400) se obtuvo de Abcam (Cambridge, Reino Unido). En el estudio, 4-micras secciones de bloques de parafina de archivo se desparafinaron y se calientan dos veces durante 10 minutos cada una en un horno de microondas (500 W) antes de la exposición al primer anticuerpo. tinción con inmunoperoxidasa se llevó a cabo utilizando el método de EnVision 2-etapa (DAKO, Glostrup, Dinamarca) según las instrucciones del fabricante y se visualizó con 3,3'-diaminobencidina tetracloruro de (Sigma, St Louis, MO).
Citoplasma y la tinción nuclear se midió para este anticuerpo. Las células positivas fueron contados por 2 patólogos que eran ciegos a los resultados clínicos. Para la correlación clínico, se utilizó un sistema de puntuación de 4 niveles (negativo a 3+), que tuvo en cuenta el porcentaje de células positivas y la intensidad de la tinción como se describe anteriormente [18]. El enfoque detallado se utilizó para generar una puntuación para cada núcleo de tejido de la siguiente manera: sin manchas o manchas en & lt; 10% de las células tumorales (puntuación 0), tinción parcial débil /apenas perceptible en & gt; 10% de las células tumorales (puntuación 1 +), tinción débil a moderada en & gt; 10% de las células tumorales (puntuación 2 +), y una fuerte tinción en & gt; 10% de las células tumorales (puntuación de 3+). Interpretamos separado TCF3 - 1+ y como 'baja expresión' y
TCF3
2+ y 3+ como "fuerte expresión '
bisulfito de secuenciación genómica (BGS)
. ADN genómico se aisló de los tejidos utilizando el kit DNeasy (Qiagen, Hilden, Alemania) y se almacenó a -20 ° C antes de su uso. ADN fue modificado con EZ metilación del ADN-Gold Kit ™ (Zymo, Orange, CA) según las instrucciones del fabricante. Generalmente, se utilizó 1 l modificados ADN en PCRs subsiguientes. Los cebadores para BGS son 5'-GTATAAGGTTGAAAATTTGGGT-3 '(hacia delante) y 5'-CTCCCTAAAATCCTAAAAATCTTA-3' (hacia atrás). La PCR condiciones de termociclado fueron 1 ciclo a 95 ° C durante 15 minutos; 30 ciclos a 94 ° C durante 30 segundos, 52 ° C durante 30 segundos, y 72 ° C durante 30 segundos y extensión final a 72 ° C durante 7 minutos. Los productos de PCR se purificaron con el kit de extracción de gel (Qiagen), clonado en el pMD20-T Vector (Promega, Madison, WI, EE.UU.), y luego transformados en
Escherichia coli
cepa DH10B. Se seleccionaron 10-15 colonias para confirmar la presencia y el tamaño del inserto clonado. Se seleccionaron cinco clones positivos para cada muestra y se amplificaron usando el vector universal P2 cebadores, 5'-GTAAAACGACGGCCAGT-3 ', P4, 5'-AGAGGATAACAATTTCACACAGGA-3'. Después de la purificación, se analiza la secuencia de producto de PCR utilizando ABI 3730 DNA Sequencer (Applied Biosystems).
PCR específica de metilación (MSP)
Los cebadores para la secuencia metilada del gen TCF3 eran 5' AATTTTATAGGAAAAAGGCGC-3 '(hacia delante) y 5'-AACCTCGAACGCACATACTA-3' (hacia atrás). Para la secuencia no metilada fueron 5'-TGGAATTTTATAGGAAAAAGCTGT-3 '(hacia delante) y 5'-AAAAACCTCAAACACACATACTA-3' (hacia atrás). ADN HotStarTaq Qiagen polimerasa se utilizó para la PCR. condiciones termociclado utilizados fueron 1 ciclo a 95 ° C durante 15 min; 30 ciclos a 94 ° C durante 30 s, 53 ° C (para el juego de primers M) o 51 ° C (para U conjunto de cebadores) durante 30 s, y 72 ° C durante 30 s; y extensión final a 72 ° C durante 7 min. Los productos de PCR se cargaron 2 geles% de agarosa seguido de tinción con bromuro de etidio y visualizado directamente bajo iluminación UV. Una muestra se clasifica como hypermethylated cuando se observó el producto de amplificación de metilación solo, parcialmente metilada cuando se observaron los productos de amplificación tanto metilados y no metilados, y no metilado cuando se mostró productos de amplificación no metiladas solo, o se encuentran ni productos de amplificación. Para el análisis estadístico, las muestras hypermethylated y parcialmente metilados fueron considerados como el grupo metilado (M) y se compararon con el grupo no metilado (U) [19].
El análisis estadístico
Los análisis estadísticos se llevado a cabo con Stata (versión SE /10; StataCorp, College Station, TX). La asociación entre los datos categóricos se analizaron mediante la prueba de χ2. Las curvas de supervivencia se generaron mediante el método de Kaplan-Meier, y las distribuciones de supervivencia univariante se compararon con el uso de la prueba de log-rank. La Cox de riesgos proporcionales multivariado se utilizó para la detección de factor pronóstico independiente. El 2-cola
valor de p Opiniones de significación se estableció en 0,05.
Resultados
TCF3
expresión es regulada hasta en los tejidos y recurrentes CRC CRC - líneas celulares derivadas de metástasis
en 64 muestras frescas,
TCF3
la expresión de ARNm fue significativamente mayor en los tejidos CRC recurrentes que en aquellos sin recurrencia (
P = 0,026
; la figura 1a). de curvas ROC, el análisis (ROC) mostró que el mejor valor de corte para distinguir entre recurrentes y no recurrentes CRC fue 0,0041. Las áreas bajo la curva ROC fue de 0,668 (IC del 95%: 0,534-0,803) (Figura 1b). cantidades relativas de
TCF3
ARNm en las líneas celulares de CRC se expresaron como diferencia de N veces en relación con las células Caco-2 y normalizado a la
GAPDH
como un gen de referencia. El
TCF3
expresión de mRNA en SW620, LoVo, y Colo205 se incrementaron 3.4-, 1.8- y 6.9 veces, respectivamente, en comparación con la de las células Caco-2. Mientras que
TCF3
niveles de mRNA de SW480 y HCT116 se redujeron de 0,5 y 0,4 veces, respectivamente (Figura 1c). Para 118 muestras de inmunotinción, expresión de la proteína TCF3 se asoció significativamente con la recurrencia (Tabla 3).
(a) En el CRC recurrente,
TCF3
niveles de mRNA aumentaron significativamente comared a la CRC sin recurrencia ( Prueba de los rangos con signo de Wilcoxon,
P Hotel & lt; 0,05). (B) la curva ROC que muestra el rendimiento de
TCF3
en la predicción de la recidiva del CCR. El área bajo la curva (AUC) = 0,668 (IC del 95%: 0,534-0,803),
P = 0,012
valor. (C)
TCF3
niveles de mRNA se midieron con qPCR en 6 líneas celulares de CRC.
GAPDH
señales se utilizaron como una medida relativa del nivel de expresión de los genes diana. Los resultados representativos, llevados a cabo por triplicado, se muestran como media ± desviación estándar.
Correlación entre los
TCF3
expresión de la proteína y las características clinicopatológicas
La tinción positiva fue observado principalmente en el citoplasma y nuclear de las células cancerosas. Análisis de la expresión TCF3 en los tejidos 118 CRC reveló que el 37% de las muestras demostrando fuerte (2+ y 3+) y el 63% intensidades bajas (- y +) intensidades. La inmunotinción de la proteína TCF3 se ilustra en la Figura 2.
Los ejemplos de la inmunotinción de TCF3 en la expresión fuerte (a, b) y baja expresión (c, d) los niveles (aumento x 400).
No se observaron diferencias significativas en cuanto a edad, sexo, tamaño, lymphvascular y la invasión perineural. Sin embargo, la tasa de supervivencia libre de enfermedad fue significativamente menor en los pacientes con alta expresión de la proteína TCF3 que en aquellos con baja expresión (
P
= 0,002), y la expresión TCF3 se asoció significativamente con el tipo histológico de cáncer (
P = 0,038
). La Tabla 2 muestra las relaciones entre las características clínico-patológicos y la expresión de proteínas TCF3 in118 muestras.
expresión de proteínas y libre de enfermedad TCF3
tiempo de supervivencia
El análisis univariante mediante gráficos de Kaplan-Meier reveló que una fuerte expresión TCF3 se asoció significativamente con los resultados de supervivencia libre de enfermedad desfavorables (
P
= 0,0001). Las curvas de Kaplan-Meier no demostraron ninguna diferencia en la supervivencia en el CCR de acuerdo con otros parámetros, incluyendo el sexo, la edad, la localización del tumor y la invasión lymphvascular (
P Hotel & lt; 0,05). Sin embargo, las distribuciones de supervivencia fueron significativamente diferentes en CRC con y sin invasión perineural. parcelas característicos de expresión TCF3 y la invasión perineural se muestran en la Figura 3. Expresión TCF3 Strong se asoció con recurrencia (Tabla 3). El análisis multivariante de Cox indicó que la invasión perineural, la expresión de proteínas TCF3, y la quimioterapia eran variables independientes (
P
= 0.00, 0,01, y 0,01) (Tabla 4).
(a) Los pacientes con alto expresión TCF3 (n = 44) mostró una prognisis significativamente peor que aquellos con baja expresión TCF3 (n = 74;
P Hotel & lt; 0,05; prueba de log-rank). (B) Los pacientes con invasión perineural (n = 17) mostró prognisis significativamente más pobres que los que no tienen dicha invasión (n = 101;
P Hotel & lt; 0,05; log-rank test).
TCF3
gen Up-expresión de
TCF3
se asocia con su promotor CpG hipometilación isla
Una isla CpG que abarca aproximadamente 2,3 kb se encontró en el ser humano región promotora (Figura 4c). Para comprender el mecanismo de
TCF3
regulación en el CCR, el estado de metilación de la región promotora del
TCF3
se puso a prueba. Nos amplificado y secuenciado la región promotora del
TCF3
ADN genómico tratado con bisulfito de sodio usando preparado a partir de tejidos de CRC. Más densamente se detectaron sitios CpG metilados (90,7% vs. 44,3%) en los tejidos no recurrentes CRC en este estudio (Figura 4d, 4e, 4f y). A fin de validar los resultados de la secuenciación, la región promotora se caracteriza por el uso de metilación MSP o cebadores específicos de no metilación en 47 muestras de CRC. La metilación de
TCF3
se detectó en 23 de (95.8%) de 24 muestras de CRC no recurrentes. Por el contrario, la frecuencia de metilación fue notablemente menor en las muestras de CRC recurrentes (16/23, 69,6%;
P = 0,023
, la figura 5a, 5b). Además, se demostró que el
TCF3
expresión se asocia significativamente con el estado de metilación, lo que indica la inactivación epigenetical podría desempeñar un papel importante en la reglamentación de los
TCF3
expresión (
P
= 0,001, Figura 5c).
Ubicación de la
TCF3
de genes dentro del cromosoma humano 19 (ch19p13.3). (A) Estructura de exones del ser humano
TCF3
gen. (B) Estructura del extremo 5 'de la
TCF3
gen. Gráfico del porcentaje de guanina (G) y citosina (C) los nucleótidos a través de esta región, la ubicación de los dinucleótidos CpG dentro de esta región, y los límites de la isla CpG (región sombreada). (C) Los ejemplos representativos de los cromatogramas de sitios CpG obtenidos a partir de la secuenciación de bisulfito de la
TCF3
fragmento en el CCR sin recurrencia (d), y con la recurrencia (e, f).
M, alelo metilado; U, no metilado alelo. (C) Correlación inversa entre los
estado de metilación de genes y TCF3
nivel de expresión mediante análisis de qPCR de
TCF3
expresión en los 47 tejidos de CRC. La barra representa la relación de
TCF3 Opiniones y
los niveles de expresión de ARNm de GAPDH
.
TCF3
niveles de expresión correlaciona con el estado de metilación del gen (
P = 0,001
, prueba de Mann-Whitney).
Discusión
Nuestro estudio investiga la correlación entre la expresión TCF3 y las características clínico en pacientes con estadio II y III CRC. La expresión en los tejidos TCF3 CRC recurrentes se encontró significativamente mayor que en aquellos sin recurrencia. El análisis de supervivencia mostró que la fuerte expresión de la proteína TCF3 y la invasión perineural fueron factores pronósticos independientes negativamente, y la quimioterapia fue un factor de protección independiente. Para eliminar el sesgo de tratamiento causada por la quimioterapia adyuvante, se analizó la correlación entre la expresión TCF3 y tiempo de supervivencia en fase II y III, los pacientes, respectivamente. La quimioterapia no influyó en la asociación entre la expresión TCF3 y pronóstico (Figura S1).
hipometilación del promotor islas CpG de oncogén es capaz de activar estos genes. Para determinar si la regulación al alza de TCF3 se asoció con la metilación aberrante, se determinó la frecuencia de metilación en 47 tejidos CRC por MSP. El alelo metilado se detectó en 39 de 47 (83%) tumores ensayados. La frecuencia de metilación fue significativamente menor en las muestras de CRC recurrentes en comparación con los tumores sin recurrencia (
P
= 0,023). La
TCF3
expresión en 39 tumores con la metilación del promotor fue significativamente menor que en 8 casos sin promotor de la metilación (
P
= 0,001), lo que indica que el promotor hipometilación fue el principal mecanismo de la regulación al alza de
TCF3
. El aumento de
TCF /β-catenina
señalización es una de las señas de identidad de CRC [20]. Nosotros, en este documento, proporcionamos la evidencia que muestra la metilación de
TCF3
es un evento común en los tumores colorrectales. Estos datos sugieren que
es necesario TCF3
inactivación metilación para el potencial oncogénico inhibidor de la
TCF /β-catenina
señalización. Por el contrario, aumenta hipometiladores aberrantes
TCF3
expresión, que está asociada con la recurrencia de la etapa II y III CRC.
Los miembros de
TCF
familia se unen a β- no fosforilada catenina [21] - [24] y regular la transcripción de genes diana, como
TCF
en sí y los oncogenes
ciclina D1
y
c-myc
[25], [26]. Regulación deficiente de esta vía de señalización es un acontecimiento importante en el desarrollo de varios tumores malignos tales como cáncer de colon, melanoma y cáncer de próstata. Además misregulation de
TCF /β-catenina
ruta en células tumorales, se ha sabido que el mal funcionamiento de E-cadherina permite a las células tumorales para invadir los tejidos circundantes [27]. E-cadherina expresión también está reducida o ausente en muchos cánceres epiteliales, incluyendo gástrico y cáncer de mama [28] - [30]. Como un represor transcripcional, el papel de los
TCF3
está abajo de la regulación de E-cadherina durante la progresión tumoral [31], [32].
TCF3
une los elementos de E-box en el sitio del promotor proximal de la E-cadherina conduce a transciption inactivación de E-cadherina, y la regulación a la baja de E-cadherina juega un papel importante en la reducción de los sistemas de adhesión célula-célula y promueve metástasis [33].
a la vista de los datos completos presentados en este estudio, se propone que la sobre-expresión de TCF3 en fase II y III CRC pacientes se asoció significativamente con un mal pronóstico y la baja tasa de supervivencia libre de enfermedad (Figura 3), lo que contribuye a identificar los pacientes de alto riesgo de CRC. Algunos todos los casos de CCR en estadio III y estadio II podrían ser considerados para la terapia adyuvante [34]. Sin embargo, el papel de la quimioterapia adyuvante en aquellos pacientes con tumores en estadio II sigue siendo poco clara [35], [36]. Para seleccionar la enfermedad de alto riesgo en las fases II y maximizar los beneficios de la terapia adyuvante, un marcador pronóstico independiente podría ser útil en la identificación de fenotipos agresivos dentro de la etapa II CRC. Hemos identificado GAS1 como un factor para seleccionar los pacientes con alto riesgo de recurrencia en nuestro trabajo previo [18], y algunos genes candidatos interesantes como factores pronósticos de estas muestras también están validando en nuestro laboratorio (datos no publicados). En este estudio, mostramos que la fuerte
TCF3
expresión se puede identificar un subgrupo de pacientes con alto riesgo de recurrencia y, por tanto, estos pacientes pueden beneficiarse de un tratamiento más agresivo.
En conclusión, nuestros datos pone de relieve el papel fundamental de
TCF3
hipometilación en el desarrollo CRC recurrente. Estos resultados subrayan el potencial valor pronóstico de
TCF3
como un biomarcador para la elección de la terapia adyuvante para pacientes con alto riesgo de un mal resultado.
Apoyo a la Información
Figura S1.
de Kaplan-Meier estima tasas de supervivencia según la expresión TCF3. Los pacientes con una expresión de alto TCF3 mostraron prognisis significativamente peor que aquellos con baja expresión TCF3 en la etapa II (a) y III pacientes (b) (
P Hotel & lt; 0,05, log-rank test)
doi.: 10.1371 /journal.pone.0112005.s001 gratis (TIF)