Extracto
genómica y análisis proteómico de tejidos normales y cancerosas ha proporcionado información abundante para molecular potencial biomarcador y dianas terapéuticas. Teniendo en cuenta las ventajas potenciales de la accesibilidad a la intervención farmacológica, la identificación de objetivos residente en el endotelio vascular dentro de los tumores es particularmente atractivo. Mediante el empleo de la espectrometría de masas (MS) como una herramienta para identificar las proteínas que se sobre-expresan en el endotelio asociado al tumor con respecto a las células normales, que tuvo como objetivo descubrir los objetivos que podrían ser utilizados en la terapia del cáncer angiogénesis tumoral. Hemos desarrollado métodos proteómicos que nos permitieron enfocar nuestros estudios sobre el descubrimiento de las proteínas secretadas /de la superficie celular, ya que representan oportunidades terapéuticas y biomarcadores de anticuerpos clave. En primer lugar, se aislaron células endoteliales (EC) a partir de tejidos de cáncer de riñón humano normal y por FACS utilizando CD146 como marcador. Además, dispersa tejidos de cáncer de pulmón y de colon humanos y sus correspondientes tejidos normales se cultivaron
ex-vivo
y su contenido endoteliales se expandieron preferentemente, aislado y se pasaron. proteínas de superficie celular fueron luego capturados preferentemente, se digirió con tripsina y se sometieron a análisis proteómicos basada en MS. Los péptidos fueron cuantificados primero, y luego las secuencias de los péptidos expresados diferencialmente se resolvieron mediante análisis de MS. Un total de 127 única no superpuesto (157 en total) de las células endoteliales de tumores sobre-expresados proteínas identificadas a partir de los CE y de riñón aislado asociado directamente a aquellos identificados a partir de
ex vivo-
tejidos de pulmón y colon cultivadas incluidos los marcadores de la CE conocidos tales como CD146, CD31, y VWF. El análisis de expresión de un panel de los objetivos identificados fueron confirmados por inmunohistoquímica (IHC) incluyendo CD146, B7H3, Thy-1 y ATP1B3. Para determinar si las proteínas identificadas mediar ningún papel funcional, se realizó siRNA estudios que condujeron a la dependencia funcional previamente no identificado para B7H3 y ATP1B3
Visto:. Mesri M, C Birse, Heidbrink J, K McKinnon, marca E, Bermingham CL, et al. (2013) Identificación y caracterización de los objetivos de la angiogénesis a través de perfiles proteómicos de las células endoteliales en cáncer de tejidos humanos. PLoS ONE 8 (11): e78885. doi: 10.1371 /journal.pone.0078885
Editor: Benedetta Bussolati, Centro de Biotecnología Molecular, Italia