Extracto
Antecedentes
El cuadro de factor de transcripción forkhead A1 (FOXA1) se sugiere que es importante en cánceres dependientes de hormonas, aunque con pocos datos para el cáncer de endometrio. Se investigaron los niveles de expresión de FOXA1 en el cáncer de endometrio primario y metastásico en relación con el fenotipo clínico, y las alteraciones de la transcripción relacionados con el estado FOXA1.
Métodos
La expresión proteica de FOXA1 fue explorada por inmunohistoquímica en 529 primaria y 199 lesiones metastásicas de carcinoma de endometrio. los niveles de mRNA de 158 lesiones correspondientes congelados primarios y metastásicos 42 frescos fueron analizados utilizando microarrays de Agilent (44k) en paralelo.
Resultados
expresión de la proteína baja en tumores primarios FOXA1 correlacionaron significativamente con baja ARNm FOXA1, alta edad, histología no endometrioide, de alto grado, la pérdida de ER y PR y baja supervivencia (todos los valores de p & lt; 0,05). A través de una búsqueda Mapa de Conectividad, los inhibidores de HDAC se sugieren como tratamiento potencial para pacientes con baja expresión FOXA1. Un aumento en la expresión FOXA1 se observó desde la primaria hasta lesiones metastásicas y se correlaciona con la expresión del gen CDKN2A en las metástasis.
Conclusión
Bajo FOXA1 se asocia con una supervivencia pobre y sugiere un potencial de los inhibidores de HDAC en endometrio carcinoma. Un interruptor en la expresión FOXA1 de primaria a lesiones metastásicas se observa y la expresión génica indica un vínculo entre FOXA1 y CDKN2A en lesiones metastásicas
Visto:. Tangen IL, Kråkstad C, Halle MK, Werner HMJ, Øyan AM, Kusonmano K, et al. (2014) Interruptor de Asociados FOXA1 de estado con la progresión del cáncer endometrial. PLoS ONE 9 (5): e98069. doi: 10.1371 /journal.pone.0098069
Editor: Natasha Kyprianou, Universidad de Kentucky College of Medicine, Estados Unidos de América
Recibido: 28 Enero, 2014; Aceptado: 18 de abril de 2014; Publicado: 21 de mayo de 2014
Derechos de Autor © 2014 Tangen et al. Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos de la licencia Creative Commons Attribution License, que permite el uso ilimitado, distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que el autor original y la fuente se acreditan
Financiación:. Este estudio fue apoyado por Helse chaleco, la Universidad de Bergen, la Sociedad del cáncer de Noruega y el Consejo de Investigación de Noruega. Los donantes no tenía papel en el diseño del estudio, la recogida y análisis de datos, decisión a publicar, o la preparación del manuscrito
Conflicto de intereses:.. Los autores han declarado que no existen intereses en competencia
Introducción
En el cáncer de endometrio mundo occidental es la neoplasia ginecológica más común, y la incidencia va en aumento [1]. cánceres del endometrio son ampliamente clasificados en dos grupos. Me cáncer de endometrio es el tipo más común y se caracteriza por resultado favorable, la histología endometrioide, baja etapa y el grado y la expresión a menudo intacta de los receptores hormonales. Tipo II del cáncer de endometrio se asocia con un mal resultado, histología no endometrioide, alta estadio y grado, y por lo general ha perdido la expresión de receptores de hormonas [2]. Los pacientes son tratados quirúrgicamente de forma estándar con la histerectomía con salpingooforectomía bilateral con o sin linfadenectomía. El efecto del tratamiento sistémico adyuvante es menos estudiada para endometrial en comparación con el cáncer de ovario, aunque el platino similares regímenes de quimioterapia basados en combinación con paclitaxel se utiliza a menudo en el tratamiento adyuvante y la enfermedad sistémica.
Se cree que los cánceres endometriales dependientes de estrógeno para derivarse de la exposición prolongada a los estrógenos sin oposición. activación dependientes de estrógenos de los receptores de estrógenos α (ER) se ha reportado que conducir a la proliferación a través de la regulación positiva de factores de crecimiento tales como el factor de crecimiento epidérmico (EGF) [3], su receptor EGFR [4], insulina como factor de crecimiento (IGF-1) [5] y de crecimiento mejora de los proto-oncogenes como c-myc [6]. Regulación de la actividad ER también se conoce la participación de varios cofactores incluyendo tanto coactivadores y correpresores. Además, el cuadro de Forkhead factor de pionero A1 (FOXA1) ha demostrado ser un importante regulador de la actividad de ER mediante la facilitación de la unión de ER [7].
FOXA1 es un miembro de la familia de factores de transcripción Forkhead Box, anteriormente conocido como factor nuclear de hepatocitos familia (HNF). proteínas FoxA1 unirse al ADN e inducen reordenamiento nucleosomal que a menudo resulta en una estructura de cromatina abierta [8], [9]. Esto facilita la unión de factores de transcripción adicionales, incluyendo ER [7]. FOXA1 se ha encontrado para ser reclutado a casi la mitad de todas las regiones de unión a ER [7].
La asociación entre los receptores de hormonas y las variables de pronóstico conocidos como el estadio FIGO, el grado histológico y la supervivencia ha sido bien documentado en el carcinoma de endometrio [10] - [12]. Se requieren más conocimientos acerca de los mecanismos moleculares implicados en la señalización de estrógenos y cofactores relacionados con el estrógeno en los cánceres relacionados con las hormonas para desarrollar nuevas estrategias terapéuticas. Varios estudios han sugerido un papel para FOXA1 en diferentes cánceres dependientes de hormonas [13]. La expresión de alto FOXA1 se correlaciona con buen pronóstico en el cáncer de mama positivo para RE, pero en el nivel FOXA1 cáncer de próstata se ha asociado con el bien o el mal pronóstico en función del grupo de pacientes, y se ha propuesto como un marcador dependiente del contexto para la supervivencia en cánceres dependientes de hormonas [ ,,,0],14] - [17]
Además, la asociación entre FOXA1 y ER en el cáncer de mama y FOXA1 y del receptor de andrógenos (AR) en el cáncer de próstata sugiere que los niveles de expresión de FOXA1 pueden influir en la capacidad de respuesta al tratamiento antihormonal en la hormona dependiente. tipos de cáncer. En este contexto, se determinó el nivel de expresión de FOXA1 en el cáncer de endometrio en relación con el fenotipo y marcadores biológicos establecidos, incluyendo el estado de los receptores hormonales; y posteriormente explorar transcripcional alteraciones relacionadas con los niveles de proteína FOXA1 en las lesiones de carcinoma endometrial primarios y metastásicos.
Materiales y Métodos
Ética declaración
Todas las partes del estudio han sido aprobados de acuerdo a la legislación noruega. El estudio fue aprobado por la Inspección de Datos de Noruega, Noruega Ciencias Sociales de datos del Comité Regional de Ética de Investigación Médica, REC West Servicios y (NSD15501; REK 052,01). Todos los participantes dieron su consentimiento informado por escrito.
serie de pacientes del
Una serie de pacientes basado en la población, incluyendo 529 pacientes con diagnóstico de cáncer de endometrio en el condado de Hordaland (Noruega) durante el período comprendido entre 2001-2011 se estudió . Tejido de tumores primarios se incluyó de forma prospectiva de pacientes consentido quirúrgicamente por etapas de acuerdo con la Federación Internacional de Ginecología y Obstetricia (FIGO) 2009 criterios. Las variables clínico, edad al momento del diagnóstico, estadio FIGO, subtipo histológico y grado, de tratamiento y de seguimiento se recogieron mediante revisión de los registros médicos como se informó anteriormente [18]. Para 91 pacientes con enfermedad avanzada o recurrente, biopsias estaban disponibles a partir de tejido metastásico (un total de 199 lesiones FFPE). de tejido fresco congelado (158 primario y lesiones metastásicas 42) se recogió y se preparan de forma paralela a los tejidos embebidos en parafina fijado en formol (FFPE) cuando esté disponible
microarrays de tejidos
microarrays de tejidos. (TMA) se prepararon a partir de tejido FFPE de tumores primarios y metástasis. El área de mayor grado del tumor fue identificado en hematoxilina y eosina tiñen diapositivas. Tres cilindros de tejido de tumores primarios, y un cilindro de tejido de metástasis (0,6 mm) fueron perforados hacia fuera de las áreas seleccionadas, y se montaron en un bloque de parafina receptor usando un instrumento de precisión hecho a medida (instrumentos Beecher, Silver Spring, MD, EE.UU.). Este método para producir TMA ha sido previamente descrito y validado [19].
La inmunohistoquímica
cinco micras de espesor TMA secciones se dewaxed con xileno y rehidratada en serie de etanol. Para la detección FOXA1, la recuperación de antígenos se realizó por ebullición de microondas durante 20 minutos en tampón de citrato (pH 6). peroxidasa endógena y la unión no específica del anticuerpo primario se bloquearon con peroxidasa bloque (S2023, Dako, Dinamarca) y suero bloque de proteína libre (X0909, Dako, Dinamarca). Los portaobjetos se incubaron con anticuerpo primario anti-FOXA1 (ab23738, Abcam, UK), se diluyó 1:800, durante 30 minutos a temperatura ambiente. El anticuerpo secundario, anti-ratón combinado y anti-conejo (K5007, Dako, Dinamarca), se aplicó durante 30 minutos, seguido de 8 minutos con diaminobenzidina (DAB +, K4007, Dako, Dinamarca) antes de la contratinción con hematoxilina. La tinción inmunohistoquímica de ER ha sido previamente descrito para 477 tumores primarios y 78 metástasis. Adicionales 92 tumores primarios se tiñeron de acuerdo con el método descrito anteriormente [12].
Evaluación de la tinción
IHC tinción se evaluó utilizando un sistema semicuantitativo donde tanto la intensidad de la tinción, y el área de tumor se consideraron células con tinción positiva. intensidad de la tinción se graduó desde 0 (sin manchas) a 3 (tinción fuerte). Proporción de células tumorales teñidas se calificó como 0, 1 (& lt; 10%), 2 (10% a 50%) y 3 (& gt; 50%). Un índice de tinción se calcula como el producto de la intensidad y el área de tinción. En el análisis estadístico, los índices de tinción para FOXA1 se clasificaron en terciles teniendo en cuenta la distribución de frecuencias para el marcador, el tamaño de los subgrupos y el número de eventos en cada categoría. Los dos terciles inferior, que muestra las estimaciones de supervivencia similares, se fusionaron posteriormente. Se aplicó el valor de corte para la ER como se define anteriormente [12]. Para evaluar la reproducibilidad, dos observadores independientes (ILT y CK) se calificó como TMA diapositivas al azar, dando κ-valor de 0,80 para FOXA1 y 0,82 para ER [12]. Al evaluar múltiples lesiones metastásicas heterogéneos forman un mismo paciente, FOXA1 se define como baja si alguna de las lesiones metastásicas mostraron una baja expresión.
Microarray análisis
tejidos recién congelados de 158 tumores primarios y 42 metástasis se recogieron en paralelo con los tejidos FFPE. La extracción de ARN se realizó utilizando el Kit RNeasy Mini (Qiagen, Hilden, Alemania). El ARN se hibrida con Agilent Whole Genoma Humano Microarrays 44k (Cat. No. G4112F) de acuerdo con las instrucciones del fabricante, y las matrices fueron escaneados utilizando el escáner de Agilent Microarray Bundle. El software J-express (Molmine, Bergen, Noruega) se utilizó para analizar los datos. La mediana de la señal de punto se utilizó como medida de intensidad y los datos de expresión se normalizaron utilizando cuantil normalización. los datos de microarrays se han depositado en la base de datos ArrayExpress Archivo, http://www.ebi.ac.uk/arrayexpress/con el número E-MTAB-2532. Los genes expresados diferencialmente entre los grupos fueron identificados por SAM (Importancia Análisis de microarrays) análisis y se consideraron significativos si Tasa de Falso Descubrimiento (FDR) & lt; 0,01. Si el número de muestras no permitió el uso de SAM, el FSS (característica subconjunto de selección) se utilizó el análisis y P & lt; 0,01 fue considerado significativo
Mapa de Conectividad
Correlación entre la expresión génica y potencial. terapéutica se investigó utilizando la base de datos medicamentos firma Mapa de Conectividad [20]. Las firmas de drogas en esta base de datos es generada por los genes expresados diferencialmente en líneas de células tratadas con fármacos en comparación con líneas de células no tratadas, y reflejan los genes que se presumen ser alterado por la droga. Los genes expresados diferencialmente en función del estado FOXA1, tanto dentro de toda la población de pacientes y dentro del grupo ER negativos fueron la base para el análisis en el Mapa de Conectividad.
El análisis estadístico
El paquete de software SPSS 19.0 (SPSS Inc, Chicago, IL) fue utilizado para los análisis estadísticos. La significancia estadística se definió como la probabilidad & lt; 0,05. Asociación entre grupos se evaluó mediante el Pearson χ
2 para las variables categóricas. análisis de supervivencia univariante se realizó mediante el método de la fecha de la cirugía primaria como la fecha y la hora de entrada a la muerte de Kaplan-Meier (producto-límite) debido a un carcinoma de endometrio como punto final (la supervivencia específica de la enfermedad). Los pacientes que murieron por otras causas fueron censurados en la fecha de la muerte. La prueba de log-rank (Mantel-Cox) se utilizó para comparar la supervivencia entre los grupos. El modelo de regresión de riesgos proporcionales de Cox se utilizó para evaluar el impacto pronóstico de FOXA1 ajustado por otros marcadores de pronóstico en el cáncer de endometrio. Debido a una interacción entre la FIGO etapa y el tipo histológico, el análisis de Cox se realizó en el subtipo endometrioide.
Resultados
expresión bajo FOXA1 se asocia con un mal pronóstico en el cáncer de endometrio
FOXA1 previamente se ha demostrado que es un factor de pionero para ER en cáncer de mama (Figura S1). Investigamos una colección grande y única de las muestras de cáncer de endometrio para dilucidar un posible papel similar para FOXA1 en estas enfermedades. expresión de la proteína de FOXA1 era principalmente nuclear. La expresión de la proteína se observó tanto en estromal y los tejidos glandulares, pero se obtuvo solamente en la tinción de los núcleos de tejido glandular. Al comparar el estado FOXA1 con variables clinicopatológicas disponibles, la expresión FOXA1 baja (índice de puntuación de 0-4) se correlacionó significativamente con la alta edad (p = 0,04), histología no endometrioide (P = 0,002), grado histológico alto (p = 0,003) , pérdida de PR (P = 0,02) y ER (P = 0,003) (Tabla 1). baja expresión de proteínas FOXA1 se asoció significativamente con la supervivencia enfermedad reducida específico (P = 0,004) (Figura 1A) y baja expresión FOXA1 mRNA (P = 0,001) (Figura 1B). Para los pacientes con tumores ER positivos, no se encontraron efectos de FOXA1 (Figura 2A), en contraste con el grupo negativo ER donde la expresión bajo FOXA1 se asoció significativamente con un peor resultado (Figura 2B). En un análisis multivariado, en el subgrupo endometrioide, utilizando el modelo de riesgos proporcionales de Cox con la edad, estadio FIGO, el grado histológico, FOXA1 y expresión ER como variables, se encontró que la expresión FOXA1 tener impacto pronóstico similar al grado y estado de ER, aunque sin impacto pronóstico independiente (Tabla S1).
(a) curva de Kaplan-Meier que muestra la supervivencia específica de la enfermedad de acuerdo con el nivel de proteína FOXA1. FOXA1 baja expresión se correlaciona significativamente con la reducción de la supervivencia para los pacientes con carcinoma de endometrio. La izquierda y la derecha muestra inserto expresión nuclear de baja y alta de FOXA1 respectivamente. (B) la expresión de proteínas de bajo de FOXA1 se correlaciona significativamente con baja expresión de ARNm FOXA1.
(A) bajo la expresión FOXA1 entre los pacientes ER positivos no afectó significativamente la supervivencia. (B) Entre los pacientes ER negativos expresión FOXA1 influyó significativamente en la supervivencia con peor pronóstico para los pacientes con baja FOXA1.
La expresión de genes relacionados con FOXA1 y expresión ER no se superpone
en cuanto a cáncer de mama, la pérdida de ER ha sido consistentemente asociado con una baja supervivencia en pacientes con cáncer de endometrio [2], [11], [12]. Como se muestra FOXA1 ser importante para las interacciones ER-cromatina en cáncer de mama, se investigó además si la expresión de genes relacionados con FOXA1 se asemeja a la expresión del gen regulado ER en el cáncer de endometrio. SAM análisis identificó 468 genes expresados diferencialmente en los tumores con expresión ER intacta en comparación con la pérdida, mientras que 506 genes fueron expresados diferencialmente en los tumores con expresión alta en comparación con FOXA1 baja. Sólo tres superposición de genes fueron identificados en el ER y las listas de genes relacionados FoxA1 (Tabla S2 y S3).
inhibidores de HDAC se sugieren como posibles fármacos para el tratamiento de cánceres de endometrio con baja FOXA1
Los genes diferencialmente expresado en relación con el estado FOXA1 se utilizaron para consultar Mapa de Conectividad para compuestos con potencial para revertir la firma genética de los pacientes con bajo estatus FOXA1. Dos inhibidores de HDAC salía entre los cinco primeros clasificados compuestos (Tabla 2). Estos dos inhibidores de HDAC fueron también los dos primeros clasifican compuestos anticorrelated de baja expresión FOXA1 dentro del subgrupo de pacientes ER negativos (Tabla 2) (Tabla S4).
La diseminación metastásica está asociada con un cambio en la expresión FOXA1
Las lesiones metastásicas de 91 pacientes fueron teñidas para la expresión FOXA1 para investigar el estado FOXA1 en las lesiones metastásicas. Al definir un precio tan bajo FOXA1 si alguna de las lesiones metastásicas mostraron una baja expresión, no se observó ningún cambio significativo en la expresión entre toda la población de los tumores primarios y metastásicos las lesiones (Figura 3A). Sorprendentemente, al comparar los niveles FoxA1 para tumores primarios de pacientes con enfermedad sistémica con sus homólogos lesión metastásica, se encontró expresión de FOXA1 a ser significativamente mayor en las lesiones metastásicas en comparación con la lesión primaria correspondiente. Esto también era cierto cuando todas las lesiones metastásicas, independientemente del número de metástasis por paciente, se examinaron (Figura 3B). Hemos encontrado previamente que hay una pérdida significativa de la expresión de ER de primaria a lesiones metastásicas [12]. Al comparar FOXA1 y expresión ER en lesión metastásica no se encontró correlación entre los niveles de expresión (r
2 = 0,012) (Figura 3C). Lo mismo se observó al comparar los niveles FoxA1 en metástasis de tumores endometriales primarios solamente ER positivos (r
2 = 0,11) (Figura 3D).
(A) expresión FOXA1 se retiene de tumores primarios de metástasis, mientras que la expresión se incrementa significativamente de tumores primarios emparejados a sus correspondientes metástasis. FOXA1 se define como baja si alguna de las lesiones metastásicas de los casos individuales exploraron (n = 78) demostraron una baja expresión. (B) En cuanto a todas las metástasis (n = 199) hay un aumento significativo en la expresión de la primaria a lesiones metastásicas. Los números indican el número de casos investigados con el número de casos con alta expresión entre paréntesis. (C) No hay correlación entre la expresión de ER FOXA1 y en las metástasis y la correlación entre la expresión de ER FOXA1 y en las metástasis sólo de ER tumores primarios positivos es bajo (D).
Niveles
FoxA1 y CDKN2A son vinculado en lesiones metastásicas
para investigar las diferencias en la transcripción efectos relacionados con los niveles FoxA1 en lesiones primarios y metastásicos nosotros los genes expresados diferencialmente más explorados según el estado FOXA1 en tumores primarios en comparación con metástasis (Tabla S3 y S5). El solapamiento entre los genes expresados diferencialmente fue bajo (sólo 26 genes). Curiosamente, uno de los genes expresados diferencialmente mejor clasificado de acuerdo con la expresión de la proteína FOXA1 en lesiones metastásicas fue CDKN2A. FOXA1 ha demostrado recientemente para controlar la expresión del gen CDKN2A [21]. Para investigar si esta asociación se limitaba al tratamiento del cáncer metastásico, se investigó la posible relación existente entre FOXA1 y CDKN2A también en tumores primarios (Figura 4). Una asociación significativa entre FOXA1 y CDKN2A se observó sólo en las lesiones metastásicas.
La expresión proteica de FOXA1 se asocia significativamente con la expresión del ARNm del gen CDKN2A en las metástasis, pero no en los tumores primarios.
Discusión
FOXA1 ha sido reconocido como un importante factor de transcripción que modula las funciones de los receptores de esteroides tales como el receptor de estrógeno en cáncer de mama y AR en el cáncer de próstata. FOXA1 como un marcador de pronóstico en el cáncer de mama ha sido ampliamente estudiado [14], [22], y la alta expresión de FOXA1 se correlaciona con una mejor supervivencia específica de la enfermedad, la positividad ER y el subtipo luminal A. En el cáncer de próstata alta expresión de FOXA1 predice pobre pronóstico, y se correlaciona con AR positividad [15]. Además, la reciente publicación por parte del Genoma del Cáncer Atlas (TCGA) Red de Investigación mostró ER baja /señalización de estar asociado con una pobre supervivencia en el cáncer de endometrio [23] FOXA1. Nuestros resultados que la baja expresión de FOXA1 se asocia significativamente con marcadores de peor evolución, así como la mala supervivencia parecen estar en línea con los datos del TCGA y los resultados del cáncer de mama, pero en contraste con cáncer de próstata y un estudio pequeño, y potencialmente poca potencia anterior de 109 casos de carcinoma de endometrio que no muestran ningún impacto pronóstico significativo de la expresión FOXA1 [24].
En las células de cáncer de mama FOXA1 se ha demostrado que sea necesario para la respuesta de los estrógenos [7]. Al igual que en el cáncer de mama, cáncer endometrial es un cáncer dependiente de estrógeno y de tipo 1 cáncer endometrial se asocia con la expresión de ER. pacientes ER positivos tienen una supervivencia significativamente mejor que los pacientes con pérdida de ER y ER es un fuerte factor pronóstico en el cáncer de endometrio [2]. Los estudios realizados en cáncer de mama han demostrado que los pacientes ER positivas con alta expresión de FOXA1 tienen una supervivencia significativamente mejor en comparación con los pacientes con baja expresión de FOXA1 [14], [25]. No pudimos encontrar un efecto de supervivencia fuerte similar para FOXA1 dentro del grupo ER positivo, pero sólo dentro del grupo ER negativos de los pacientes. Si la reducción de la supervivencia observada para el grupo negativo FOXA1 solamente era debido a la pérdida de ER no se habría esperado una asociación significativa entre FOXA1 y la supervivencia en el grupo negativo ER. Esto podría indicar que FOXA1 en el cáncer de endometrio puede tener una función que no está vinculada a ER, y el efecto de FOXA1 podría ser específica de órganos. FOXA1 previamente se ha demostrado que regulan la transcripción distintos programas en células de diferentes linajes [26], y la experiencia clínica con mayor riesgo de cáncer de endometrio entre las mujeres con cáncer de mama ER positivo tratadas con tamoxifeno también es compatible con las diferencias específicas de órganos en la regulación hormonal. Más apoyo a esta, la expresión de genes relacionados con los niveles de FoxA1 no se superponían con el patrón de expresión relacionada con ER. Si FOXA1 es importante para la regulación de la actividad ER en el cáncer endometrial, como se ve en el cáncer de mama, se espera una superposición entre los genes expresados diferencialmente. Además, nuestros datos sugieren inhibidores de HDAC como tratamiento potencial para pacientes con baja expresión FOXA1, tanto dentro de toda la población de pacientes y dentro del grupo ER negativos. Esto es interesante, ya que los inhibidores de PI3K y mTOR recientemente se han sugerido como fármacos prometedores para pacientes con tumores ER negativos, en particular [11]. El presente hallazgo sugiere que la participación en la regulación FOXA1 ER podría ser diferente en el cáncer de endometrio en comparación con lo que se encuentra en el cáncer de mama. Esto parece estar en línea con un estudio de línea celular de cáncer de endometrio que demuestra que la introducción de FOXA1 suprime tanto la proliferación y la migración [24] en contraste con ER que conduce a la proliferación. El papel de FOXA1 como un factor pionero para ER también se ha encontrado que difieren en varios tipos de células de cáncer. Reclutamiento a la cromatina se demostró que era dependiente de FOXA1 en células de cáncer de mama, sin embargo, en un osteoblasto como línea celular (U2OS-ER) FOXA1 no se expresa y ER de unión es independiente de FOXA1 [27]. En el cáncer de endometrio, FOXA1 es importante para la inhibición de la proliferación celular y la migración [24], y en la próstata líneas celulares de cáncer FOXA1 fue recientemente demostrado inhibir la motilidad celular y la transición epitelial a mesenquimal (EMT) a través de la regulación de la SLUG factor de transcripción [17] . Poco se sabe respecto bindingpartners para FOXA1 en el cáncer de endometrio, y se necesita más trabajo para aclarar esto.
Nuestra conclusión de que el aumento de la expresión de proteínas FOXA1 de tumores primarios a metástasis, podría aparecer como contradictorio con nuestro hallazgo de que los asociados alta FoxA1 con buenos resultados en pacientes con cáncer de endometrio. la pérdida de la expresión de ER se ha informado a aumentar de primaria a lesiones metastásicas de carcinoma de endometrio [12]. La baja correlación entre ER y expresión FOXA1 en lesiones metastásicas, sugiere que FOXA1 es menos crítico para la función de ER en el cáncer de endometrio en comparación con lo observado para el cáncer de mama [28]. En ambos tipos de cáncer de mama y próstata se encontró una alta expresión de FOXA1 en las lesiones metastásicas, sin embargo con la expresión retenida de AR y ER, respectivamente [28], [29]. Tomados en conjunto, esto sugiere que el papel de los factores pioneros en la regulación de los receptores nucleares en los cánceres dependientes de hormonas se relaciona tejido. En el cáncer de mama FOXA1 parece importante para la transcripción mediada por ER, y el silenciamiento de FOXA1 conduce a la inhibición de la unión ER y la actividad transcripcional [30]. En la próstata FOXA1 cáncer se ha encontrado para ser un factor pionero para AR para algunos eventos de unión, sino también un represor. Cambio en la expresión FOXA1 en cáncer de próstata, por tanto, parece conducir a la reprogramación de los eventos de unión AR [15].
La mayor expresión de FOXA1 metástasis en comparación con sus homólogos del tumor primario, y la asociación entre la expresión de la proteína de FOXA1 y CDKN2A mRNA sólo en las lesiones metastásicas, puede indicar un cambio en el papel de FOXA1 durante la progresión del cáncer de endometrio. Metástasis con alta expresión de FOXA1 también tienen una alta expresión de CDKN2A. CDKN2A es conocido para codificar varias proteínas distintas, incluyendo p16
INK4A, p15
INK4B y p14
ARF. Curiosamente FOXA1 ha demostrado recientemente para controlar p16
expresión INK4A durante la senescencia celular [21]. ¿Qué proteína codificada por el gen CDKN2A que se expresa en las metástasis Sin embargo, es desconocido y necesita de mayor investigación.
FOXA1 parece tener funciones específicas de tejido, que también pueden cambiar durante la progresión del cáncer de endometrio. Además, es probable que otros factores desconocidos que FOXA1 se requiere para la regulación de la función ER en el cáncer de endometrio. La identificación de más de éstos va a mejorar nuestra comprensión de la señalización del receptor de la hormona específica de tejido y será de relevancia en el desarrollo de terapias dirigidas en enfermedades malignas relacionadas con ER, incluyendo el cáncer de endometrio. Por lo tanto, FOXA1 puede añadir información clínicamente relevante como un biomarcador de cáncer de endometrio y apunta a un papel para los inhibidores de HDAC para el tratamiento.
Apoyo a la Información
Figura S1.
Ilustración esquemática de los factores que intervienen en la regulación de la transcripción mediada por ER (E2: estradiol).
doi: 10.1371 /journal.pone.0098069.s001 gratis (TIF)
Tabla S1.
análisis Cox de predictores de la supervivencia específica del cáncer de endometrio:. influencia del estado de la FIGO, la edad, el grado histológico, y la expresión de ER FOXA1 dentro del subgrupo endometrioide
doi: 10.1371 /journal.pone.0098069.s002 gratis ( DOCX)
Tabla S2.
SAM análisis de ER positivo frente a los casos ER negativos (FDR & lt; 0,01)
doi:. 10.1371 /journal.pone.0098069.s003 gratis (XLSX) sobre Table S3.
SAM análisis de FOXA1 alta en comparación con los casos de baja FoxA1 (FDR & lt; 0,01)
doi: 10.1371 /journal.pone.0098069.s004 gratis (XLSX) sobre Table S4.. El análisis
SFS de alta versus FOXA1 FoxA1 casos bajos en muestras ER negativos (valor de p & lt; 0,01)
doi:. 10.1371 /journal.pone.0098069.s005 gratis (XLSX) sobre Table S5. El análisis
SFS de FOXA1 alta versus baja FoxA1 casos en metástasis (p-value<0.01).
doi:10.1371/journal.pone.0098069.s006
(XLSX)
Acknowledgments
We gracias Ellen Valen, Britt Edvardsen, Kadri Madissoo, Tormund S Njølstad, Gerd Lillian Hallseth, Bendik Nordanger y Hua Mi Hoang para la asistencia técnica.