Extracto
Antecedentes
Para investigar la frecuencia y la relación de la
KRAS
,
BRAF
y
PIK3CA
mutaciones y la pérdida de expresión de PTEN en pacientes chinos con cáncer colorrectal (CCR).
Metodología /Principales conclusiones
ADN genómico fue extraído de los (FFPE) los tejidos fijados en formalina en parafina de 69 pacientes con diagnóstico histológico de CCR. Se llevó a cabo el análisis de secuenciación automatizada para detectar mutaciones en los
KRAS
(codones 12, 13 y 14),
BRAF
(codón 600) y
PIK3CA gratis (codones 542, 545 y 1047). expresión de la proteína PTEN se evaluó por inmunohistoquímica en secciones de tejido FFPE 3 mm. El análisis estadístico se realizó utilizando el software SPSS 16.0. La frecuencia de
KRAS
,
BRAF
y
PIK3CA
mutaciones y la pérdida de expresión de PTEN fue del 43,9% (25/57), el 25,4% (15/59), 8.2 % (5/61) y 47,8% (33/69), respectivamente. La mutación más frecuente en
KRAS
,
BRAF
y
PIK3CA
era V14G (26,7% de todas las mutaciones), V600E (40,0% de todas las mutaciones) y V600L (40,0 % de todas las mutaciones) y H1047L (80,0% de todas las mutaciones), respectivly. Seis
KRAS
pacientes mutatant (24,0%) albergaban
BRAF
mutaciones.
BRAF
y
PIK3CA
mutaciones eran mutuamente excluyentes. No se observó correlación significativa entre los cuatro biomarcadores y características del paciente.
Conclusiones /Importancia
BRAF
tasa de mutación es mucho mayor en este estudio que en otros estudios, y solaparse mucho con
KRAS
mutaciones. Además, los tipos específicos de
KRAS
y
PIK3CA
mutaciones en pacientes chinos podría ser bastante diferente de la de los pacientes en otros países. Se necesitan más estudios para examinar su impacto sobre el pronóstico y la respuesta al tratamiento dirigido
Visto:. Mao C, Zhou J, Yang Z, Huang Y, Wu X, Shen H, et al. (2012)
KRAS
,
BRAF Opiniones y
Las mutaciones PIK3CA
y la pérdida de PTEN expresión en pacientes chinos con cáncer colorrectal. PLoS ONE 7 (5): e36653. doi: 10.1371 /journal.pone.0036653
Editor: Chad Creighton, Baylor College of Medicine, Estados Unidos de América
Recibido: 4 Enero, 2012; Aceptado: 8 Abril 2012; Publicado: May 7, 2012
Derechos de Autor © 2012 Mao et al. Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos de la licencia Creative Commons Attribution License, que permite el uso ilimitado, distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que el autor original y la fuente se acreditan
Financiación:. No hay corriente fuentes externas de financiación para este estudio
Conflicto de intereses:. Los autores han declarado que no existen intereses en competencia
Introducción
Dos anticuerpos monoclonales (MoAb) dirigidos a factor de crecimiento epidérmico. receptor (EGFR), el quimérico cetuximab IgG1 MoAb y la panitumumab IgG2 completamente humanizado, han demostrado ser eficaz en combinación con quimioterapia o como agente único para el tratamiento de cáncer colorrectal metastásico (CCRm) [1], [2], [3] . Sin embargo, la eficacia de Moab no es consistente para todos los pacientes; algunos pacientes experimentan respuesta dramática a Moab, mientras que otros no muestran respuesta [4], [5], [6]. Con el fin de facilitar la selección de los pacientes con CCRm que pueden beneficiarse de los tratamientos anti-EGFR MoAbs, existe una clara necesidad de identificar biomarcadores predictivos que indican la probabilidad de respuesta entre los posibles receptores.
Se ha informado de que las activaciones de oncogénicos vías de señalización intracelular corriente abajo de EGFR, incluyendo los RAS-RAF-MAPK y vías de señalización PI3K-AKT-PTEN, son mecanismos importantes para generar resistencia a los anti-EGFR MoAb. En la vía RAS-RAF-MAPK, las mutaciones activas de
KRAS
o
BRAF
no son infrecuentes, ya que tales mutaciones están presentes en 35,0 a 45,0% y en 4,0 a 15,0% de los pacientes con CCRm respectivamente [7]. En la vía PI3K-PTEN-AKT, las mutaciones de
PI3KCA
o pérdida de expresión de PTEN se observan en 10,0 a 18,0% y 19,0 a 42,0% de los pacientes con CCRm respectivamente [7]. Las mutaciones de
PIK3CA
, pueden coexistir con cualquiera de
KRAS
o
BRAF
dentro del mismo tumor [8], pero
KRAS
y
BRAF
mutaciones parecen ser mutuamente excluyentes [7].
hasta la fecha,
KRAS
mutaciones se han identificado como un marcador predictivo de la resistencia a los anti-EGFR MoAb en pacientes con cáncer colorrectal metastásico, y el uso de anti-EGFR AcMo se limita ahora a los pacientes con CCRm con el tipo salvaje
KRAS
[9]. Sin embargo, la aparición de
KRAS mutaciones
sólo representa aproximadamente el 30% y el 40% de los pacientes que no responden [10]. En los pacientes con
KRAS
tumores de tipo salvaje, no queda claro por qué un gran número de pacientes todavía no responden al tratamiento. Más recientemente, otras mutaciones oncogénicas, tales como
BRAF
[11], [12],
PIK3CA
mutaciones [10] o la pérdida de expresión de PTEN [12], [13], se encuentran probabilidades de ser predictores prometedores para la resistencia en pacientes con CCRm de tipo salvaje
KRAS
.
la mayoría de los estudios que investigaron el valor predictivo de
KRAS
,
BRAF
,
PIK3CA
mutaciones y la pérdida de expresión de PTEN se llevaron a cabo en los países occidentales. Poco se sabe sobre la relación de estos biomarcadores con los resultados clínicos del tratamiento MoAb en pacientes chinos con cáncer colorrectal metastásico. Ni siquiera nos conocemos la frecuencia de estos biomarcadores ocurrido en pacientes chinos. En este estudio, se investigó el estado de
KRAS
,
BRAF
,
PI3KCA
expresión de PTEN mutación y en el tumor primario de 69 pacientes con CCRm chinos, para aclarar la tasa de mutaciones y para detectar la correlación entre las mutaciones y los factores clínico-patológicos.
Materiales y Métodos
pacientes y muestras de tejidos
el análisis se llevó a cabo en 69 pacientes con diagnóstico histológico de cáncer colorrectal ( 40 hombres y 29 mujeres con una edad media de 54 años) que se sometieron a la resección del tumor en el hospital Nanfang durante el período comprendido entre julio de 2010 y marzo de 2011. Sesenta y nueve muestras de tumores primarios se obtuvieron de muestras quirúrgicas. Todas las muestras recogidas son parafina de tejidos fijados con formol (FFPE). Este estudio fue aprobado por el Comité Institucional de Ética del Hospital Nanfang y se llevó a cabo de acuerdo con las directrices institucionales. consentimiento escrito fue dado por los pacientes para su información que se almacena en la base de datos del hospital y se utiliza para la investigación. En nuestro estudio, el consentimiento informado por escrito, no se obtuvo de los participantes, ya que el estudio fue retrospectivo y se analizó nuestros datos de forma anónima. Un resumen de los datos demográficos y clínico-patológico se enumeran en la Tabla 1. Los pacientes que nunca han fumado al menos un cigarrillo al día durante al menos 6 meses fueron clasificados como fumadores, incluidos los fumadores y los fumadores anteriores. El resto de los pacientes fueron clasificados como no fumadores. Se consideró que los pacientes que tienen al menos 3 bebidas por semana de media en los últimos dos años como bebedores, mientras que el resto de los pacientes se clasificaron como no bebedor.
extracción de ADN y análisis mutacional del gen KRAS, BRAF y PIK3CA
Dos muestras FFPE apropiados fueron seleccionados de cada paciente. Para cada muestra, se prepararon tres 5-10 micras secciones. ADN genómico fue extraído mediante un procedimiento estándar de SDS-proteinasa K. Después de la extracción, se purificó el ADN.
Se buscaron mutaciones en
KRAS
exón 2,
BRAF
exón 15 y
PIK3CA
exones 9 y 20.
KRAS
exón 2 incluye los codones 12, 13 y 14,
BRAF
exón 15 incluye el codón 600,
PIK3CA
exón 9 incluye los codones 542 y 545 y
PIK3CA
exón 20 incluye el codón 1047, donde la gran mayoría de las mutaciones se producen en estos genes [11]. Diez tipos de mutaciones en
KRAS
codones 12, 13 y 14 (G12C, G12D, G12V, G12R, G12A, G12G, G13D, G13G, V14G y V14A), 4 tipos de mutaciones en
BRAF
codón 600 (V600E, V600Q, V600L y V600V), 4 tipos de mutaciones en
PIK3CA
los codones 542 y 545 (E542K, E545K, E545G y E545A) y dos tipos de
PIK3CA
se detectaron codón 1047 (H1047R y H1047L). La secuencia de nucleótidos correspondiente a cada exón se amplificó a partir de ADN genómico extraído. La Tabla 2 muestra la lista de los cebadores usados para cada exón. Condiciones para la amplificación de regiones específicos de exón del ADN genómico por PCR se han descrito en el estudio anterior [11]. Los productos de PCR se sometieron a secuenciación automatizada por ABI PRISM 3730 (Applied Biosystems, Foster City, CA, EE.UU.). Todos los casos mutados se confirmaron dos veces con reacciones de PCR independientes. Los nuevos datos no se ha generado en nuestro estudio. Los resultados de los análisis de mutaciones se dan en el apéndice S1 y S2 (Las cifras de resultados de la secuenciación).
expresión de PTEN
expresión de la proteína PTEN se evaluó por inmunohistoquímica en 3 mm
secciones de tejido FFPE como se informó en el estudio anterior [13]. El anticuerpo monoclonal anti-ratón de PTEN anti-humano se aplicó a dilución 1: 50. Cada ejecución incluye portaobjetos de control positivo y negativo adecuados. Una puntuación semicuantitativa fue dado a PTEN tinción del tejido tumoral por dos patólogos independientes sin conocimiento de los datos clínicos o resultados de los análisis moleculares: negativo (-), ninguna tinción en absoluto; débil (+), tinción débil, independientemente de los porcentajes de células positivas o tinción moderada de ≤30% de las células; moderada (++), tinción moderada de & gt; 30% de células o fuerte tinción de ≤50% de las células; fuerte (+++), fuerte tinción de & gt; 50% de las células. Los tumores con puntuaciones de PTEN de -, + o ++ se considera que tienen pérdida de PTEN. Las cifras para el análisis inmunohistoquímico se dan en el apéndice S3.
El análisis estadístico
El análisis estadístico se realizó con el programa SPSS 16.0 (SPSS, Inc., Chicago, IL). La χ
2 de prueba y la prueba exacta de Fisher se utilizaron para comparar la proporción de
KRAS
,
BRAF PIK3CA
mutaciones y la pérdida de expresión de PTEN entre los diferentes grupos clínico-patológicas. Para investigar los efectos de las covariables o de mutaciones genéticas, análisis de regresión logística múltiple utilizando un método por pasos hacia adelante (cociente de probabilidad) se hizo con odds ratio (OR) calculado. Las pruebas iniciales fueron edad, sexo, antecedentes de tabaquismo, historia potable, sitio del tumor y la diferenciación. Sólo las variables que muestran asociación estadísticamente significativa con mutaciones genéticas se sometieron a análisis de regresión final. El nivel de significación bilateral se estableció en p. & Lt; 0,05
Resultados
KRAS mutación
KRAS
el estado mutacional probado en 57 tejidos tumorales, de las cuales 25 (43.9%) albergaba al menos una mutación en los codones 12, 13 o 14. El espectro de estas mutaciones se resumen en la Tabla 3. Dieciocho (31,6%) los tejidos tenían una mutación en el codón 12, 4 (7,0%) en el codón 13 y 8 (14,0%) en el codón 14. La mutación más frecuente fue V14G, que representaba 26,7% de todas las mutaciones, seguido por G12D (20,0% de todas las mutaciones). Cinco tejidos tenían mutaciones concomitantes en dos codones (Apéndice 1). No se encontró ninguna asociación significativa entre las mutaciones KRAS y las características de los pacientes mediante el análisis univariante (Tabla 4) y el análisis multivariado (datos no mostrados).
BRAF mutación
Hemos detectado
BRAF
codón 600 mutaciones en 15 (25,4%) de un total de 59 tejidos tumorales. La mutación más frecuente fue V600E (40,0% de todas las mutaciones) y V600L (40,0% de todas las mutaciones) (Tabla 3).
BRAF
y
KRAS
mutaciones no eran mutuamente excluyentes, con el 24,0%
KRAS mutado
pacientes y 29,0% de tipo salvaje
KRAS
pacientes portadores de
BRAF
mutaciones (Figura 1). No se encontró asociación significativa entre el
KRAS
mutaciones y características de los pacientes se encontró por análisis univariante (Tabla 4) y el análisis multivariado (datos no mostrados).
PIK3CA
mutación
El estado de
PIK3CA mutaciones
se analizó en 61 tejidos tumorales con 5 resultados positivos, dando una tasa de mutación total de 8.2%.
PIK3CA
mutación Exon9 se observó en sólo uno (1,7%) de 58 tejidos tumorales analizadas (Tabla 3). Por el contrario,
PIK3CA mutaciones
Exon20 fueron identificados en 4 de los 57 tejidos tumorales (7,0%), todos H1047L ser (Tabla 3).
KRAS
y
PIK3CA
mutaciones no eran mutuamente excluyentes (Figura 1). Tres (12,0%)
KRAS mutado
pacientes tenían
PIK3CA
mutaciones, todas ellas situadas en Exon20, mientras que dos (6,3%)
KRAS
pacientes de tipo salvaje albergado
PIK3CA mutaciones
, una en Exon9 y el otro en Exon20. Es de destacar que
BRAF
y
PIK3CA
mutaciones eran mutuamente excluyentes en el presente grupo de pacientes. No se encontró asociación significativa entre el
PIK3CA
mutaciones y características de los pacientes se encontró por análisis univariante (Tabla 4) y el análisis multivariado (datos no mostrados).
La pérdida de expresión de PTEN
hemos probado la expresión de PTEN en 69 tejidos tumorales. Se detectó la pérdida de expresión de PTEN en 33 de ellos (47,8%), y no era mutuamente excluyente con
KRAS
,
BRAF
o
PIK3CA
mutaciones (Figura 1). Catorce (56,0%)
KRAS mutado
pacientes tenían pérdida de la expresión de PTEN (Figura 1). No se detectó ninguna asociación estadísticamente significativa entre la expresión de PTEN y las características de los pacientes mediante el análisis univariante (Tabla 4) y el análisis multivariado (datos no mostrados).
Discusión
En este estudio, se detectó varias mutaciones de los genes KRAS, BRAF y PIK3CA, así como la pérdida de expresión de PTEN en 69 pacientes de CRC chinos. Además, también tratamos de correlacionar las mutaciones con algunas características clínicas y patológicas. Algunos estudios anteriores han investigado la relación entre estos eventos moleculares y diferentes características clinicopatológicas. Los resultados fueron sin embargo inconsistente. Por ejemplo, Sartore-Bianchi et al encontró que
KRAS
mutaciones fueron significativamente más en las mujeres que en los hombres, mientras que
PIK3CA
mutaciones y la pérdida de PTEN no se asociaron significativamente con el sexo, la edad o el sitio de tumor [14]. Por el contrario, al Barault et y Benvenuti et al encontraron que
PIK3CA Opiniones y
BRAF
mutaciones, pero no mutaciones de
KRAS
, ocurren con una frecuencia mayor en las mujeres que en los hombres [10]. En pacientes con CRC chinos, Shen et al encontró que el género era el único factor que mostró una relación evidente con
KRAS mutaciones (
femenina 44,7% frente a 28,2% de sexo masculino, P = 0,037) [15]; Liou et al informaron más frecuentes
KRAS
mutaciones en las hembras y en los no fumadores, y
KRAS
y
BRAF
mutaciones se asociaron significativamente con la localización proximal del cáncer [16 ]. Sin embargo, en el estudio de Li y otros,
BRAF
mutación no se correlacionó con la edad, sexo, tipo histológico o puesta en escena de Dukes, pero coexistente
KRAS
y
PIK3CA
mutaciones eran más propensos a convertirse en metástasis hepática [17].
En el presente estudio, no se encontraron correlaciones significativas entre estos eventos moleculares y diferentes características clinicopatológicas (Tabla 4), que puede ser en parte atribuible al tamaño de la muestra relativamente pequeña. Hemos observado algunas tendencias potenciales. Por ejemplo,
KRAS
mutaciones y la pérdida de PTEN parecía ser mayor en mujeres que en hombres. Además,
KRAS
,
BRAF
y
PIK3CA
mutaciones parecen ser más frecuentes en las personas con un historial beber o fumar. Sin embargo, se necesitan estudios más grandes para llegar a una conclusión firme sobre estos temas.
KRAS
gen codifica una proteína de 21 kDa RAS, que es un miembro de la familia de GTPasas que participan en los procesos de transducción de señales. Las mutaciones en el
KRAS
constitutivamente pueden activar la proteína en la señalización mediante la eliminación de la actividad GTPasa [15]. Se ha establecido que
KRAS
mutaciones son biomarcador predictivo de la resistencia a los anticuerpos monoclonales anti-EGFR (MoAbs) de tratamiento en términos de tasa de respuesta, la supervivencia libre de progresión y la supervivencia global. De acuerdo con informes anteriores, el
KRAS
tasa de mutación de los pacientes con CCR varía de 20,0% a 50,0%, sobre todo acerca de 35.0% -45.0% [10], [15]. En este estudio, el 43,9% tenían un mutante
KRAS
genotipo, lo que significa que, si
KRAS
pruebas de estado mutacional se aplica para seleccionar candidatos para el tratamiento anti-EGFR MoAb, la proporción de CRC china los pacientes que serían excluidos es similar a la de otros países
.
Sin embargo, cabe señalar que en este estudio, el 14,0% de los pacientes tenían mutaciones del codón 14 (V14G). Entre los pocos estudios que se han llevado interés en el codón 14, una serie grande de los Estados Unidos mostró que el codón 14 mutaciones (V14I) se produjo en sólo el 0,1% de los pacientes con CCR [18]. Y no se sabe si estas variantes son de patogenicidad específica [18]. Por lo tanto, sería interesante ver si los resultados son reproducibles en futuros pacientes chinos con cáncer colorrectal metastásico. Más importante aún, se justifican más estudios para investigar el impacto de codón 14 mutaciones en el pronóstico y la respuesta de los pacientes a los anti-EGFR MoAb. Si estas mutaciones no confieren resistencia al tratamiento, a continuación, más pacientes chinos con CCRm pueden beneficiarse de AcMo anti-EGFR.
En informes anteriores de las poblaciones occidentales, transiciones G12D eran el tipo más frecuentemente encontrado de
KRAS
codón 12 mutaciones, seguido de G12V, G12C, G12S y G12A [18], [19]. Sin embargo, en nuestro estudio, la orden correspondiente es G12D, G12V, G12A, G12G y G12C, entre los que se G12G rara vez se ve en otros estudios. Como para el codón 13 mutaciones, la mayoría de ellos eran G13D, seguido por G13C y G13R en las poblaciones occidentales [18], [19]. En el presente estudio, se detectaron solamente G13G, una variante recién descubierta, y G13D. Estos datos sugieren que puede haber diferencias raciales en los patrones de
KRAS
mutaciones. Se ha informado de que el uso de cetuximab se asoció con más global y la supervivencia libre de progresión en pacientes con cáncer colorrectal refractarios a la quimioterapia con tumores G13D-mutado que los pacientes con otras
KRAS
tumores -mutated [20]. Si algunas de las mutaciones raras veces visto o nuevas que se encuentran en nuestro estudio también se asocian con un mejor resultado del tratamiento sigue siendo desconocida y merece una mayor investigación.
Al igual que en gen KRAS,
BRAF
también codifica proteínas que actúan en la vía de señalización RAS-RAF-MAPK. Estudios previos, tanto occidentales y chinos, informó que
se detectaron mutaciones de BRAF
en 5,0% -10,0% de los pacientes con CCR. Sorprendentemente, nuestro estudio demostró una muy alta tasa de mutación, el 25,4%, por
BRAF
. Una posible explicación es que la mayoría de los estudios de
BRAF
mutación V600E se centraron en única [21], mientras que nuestro estudio se analizaron cuatro tipos de mutaciones, es decir, V600E, V600Q, V600L y V600V. Sin embargo, incluso en el estudio de De Roock que detecta D594G, V600E, V600M y K601E, la tasa de mutación era sólo el 10,9% [22]. Por lo tanto, la alta tasa de mutación en nuestro estudio puede deberse a otras razones, como la diferencia racial y los factores ambientales. Aún no hay un consenso sobre el papel predictivo de
BRAF
mutaciones en el tratamiento anti-EGFR MoAb del cáncer colorrectal metastásico. Algunos encontraron que la mutación V600E se asoció con un peor pronóstico en pacientes con CCR metastásico tratados con anti-EGFR MoAb [23]. Otros sugirieron que esta mutación era sólo un factor pronóstico general en lugar de un factor de predicción específica a los anticuerpos monoclonales anti-EGFR, porque su relación con mal pronóstico es independiente del tratamiento dado [24]. Las mutaciones de
KRAS
y
BRAF
genes se encuentran con frecuencia para ser mutuamente excluyentes en el cáncer colorrectal, tanto en pacientes chinos y occidentales [25], [26]. Así, en general, con un
KRAS
tasa de mutación del 40,0% y un
BRAF
tasa de mutación del 10,0%, un sexto o el 16,7% de la
KRAS de tipo salvaje
escriba los pacientes albergaron
BRAF
mutaciones. Es de destacar que
BRAF
mutaciones se solapan mucho con
KRAS
mutaciones en este estudio, con el 29,0% de los de tipo salvaje
KRAS
pacientes que albergan
BRAF
mutaciones. Si
BRAF
mutaciones se utilizaron para seleccionar más de tipo salvaje
KRAS
pacientes para el tratamiento anti-EGFR MoAb, a continuación, significativamente más pacientes con CCRm china pueden ser excluidos.
El PIK3CA gen codifica la subunidad catalítica de p110 de PI3K que regula las vías [27]. De acuerdo con estudios anteriores, se encontró que la tasa de mutación para
PIK3CA
es de 8,7% y
PIK3CA
mutaciones son coexistente con
KRAS
mutaciones [10], [23 ], [28]. Además, se observó más mutaciones en el exón 20 que en el exón 9, que es coherente con los estudios de pacientes chinos [29], [30], pero bastante diferentes de los resultados de la población occidental. Esto es muy importante, ya que el exón 9 y el exón 20 mutaciones difieren en gran medida en que afecta a la respuesta a MoAbs anti-EGFR. Nuestra revisión sistemática anterior encontró que
PIK3CA
exón 20 mutaciones se asoció con una menor tasa de respuesta, la supervivencia libre de progresión y la supervivencia global más corta y por lo tanto puede ser un biomarcador potencial de resistencia a los anti-EGFR MoAb en
KRAS de tipo salvaje
cáncer colorrectal metastásico, mientras que
PIK3CA
exón 9 mutaciones parecía no tener tal función [31]. Por lo tanto, mediante el ensayo
PIK3CA
estado de la mutación, más pacientes chinos con CCRm se puede impedir la recepción de AcMo anti-EGFR en los que son resistentes.
En un análisis retrospectivo consorcio de más de 1.000 tumores se reunieron de siete países europeos, de Roock encontró que la E542K, las mutaciones E545K y Q546K en el exón 9 representaron el 15,6%, 26,8% y 4,2% de todos los
PIK3CA
mutaciones, mientras que las mutaciones H1047R y H1047L en el exón 20 representaron el 20,5% y el 3,8% de todas las mutaciones [22]. En el presente estudio, sin embargo, el tipo más frecuente de mutaciones que detectamos es H1047L, no los puntos antes mencionados, tales como E542K, E545K o H1047R. Esto indica que puede haber grandes variaciones entre diferentes razas. Curiosamente, encontramos que todos los pacientes que se llevó a cabo
PIK3CA
análisis de la mutación E542K y albergaba mutaciones E545K. Nosotros consideramos estos como resultados "falsos positivos", que ha sido reportados por otros [32].
La pérdida de expresión de PTEN, que fue reportado a ocurrir en el 19,0% -42,0% -64,0 del occidental y el 30,0% % de los tumores de CRC chinos [13], [33], [34], [35], [36], [37], induce un aumento en la concentración de PIP-3 y
PIK3CA
activación de la vía [23] . Se detectó la pérdida de expresión de PTEN en el 47,8% de los pacientes, en consonancia con los estudios anteriores. La pérdida de expresión de PTEN se ha informado para conferir resistencia a los anti tumor de EGFR-MoAbs [38]. Sin embargo, ya que esta pérdida de PTEN puede coexistir con
PIK3CA
mutaciones, como se muestra por los presentes y otros estudios, a menudo es difícil diferenciar la contribución de la pérdida de PTEN de la de
PIK3CA mutaciones
a la falta de respuesta [28].
la fuerza de este estudio es el análisis exhaustivo de cuatro biomarcadores en pacientes con CCRm chinos. Sin embargo, el tamaño de las muestras es relativamente pequeña, lo que hace que algunos de nuestros resultados no concluyentes. Por otra parte, no recogimos los datos sobre el tratamiento y los resultados clínicos, que se abordará en nuestros estudios futuros
.
En resumen, este estudio se suma a la evidencia de que
KRAS
y
PIK3CA
mutaciones y la pérdida de expresión de PTEN en pacientes con CCRm chinos se producen a un nivel comparable al de los pacientes occidentales. Sin embargo,
BRAF
tasa de mutación es mucho mayor en este estudio que en los estudios anteriores. Además, los tipos específicos de
KRAS
y
PIK3CA
mutaciones en la población china podría ser bastante diferente de la de los pacientes en otros países, especialmente teniendo en cuenta la relativamente alta frecuencia de
KRAS
codón 14 mutaciones y
PIK3CA
exón 20 mutaciones. Estos resultados tienen importantes implicaciones para el tratamiento personalizado de pacientes con CCRm china. Se necesitan más estudios para examinar el impacto de algunos tipos de
KRAS
,
BRAF
y
PIK3CA
mutaciones en el pronóstico y la respuesta al tratamiento específico.
Apoyo a la Información
Apéndice S1.
Los patrones de mutaciones KRAS, BRAF, y PIK3CA.
doi: 10.1371 /journal.pone.0036653.s001 gratis (DOC)
Apéndice S2.
secuenciación resulta de mutaciones KRAS, BRAF, y PIK3CA.
doi: 10.1371 /journal.pone.0036653.s002 gratis (DOCX)
apéndice S3.
tinción inmunohistoquímica de PTEN en tejido de cáncer colorrectal y del tejido normal.
doi: 10.1371 /journal.pone.0036653.s003 gratis (DOC)