Extracto
Asociación RAS dominio de proteína de la familia 1a (RASSF1A) es un putativo gen supresor de tumor se encuentra en 3p21, se ha considerado que juega un papel importante en la regulación de los diferentes tipos de tumores humanos. Los informes anteriores han demostrado que la frecuencia de metilación RASSF1A fue significativamente mayor en el grupo de pacientes en comparación con los controles, pero la relación entre el promotor RASSF1A metilación y características patológicas o el grado del tumor de cáncer de vejiga sigue siendo controvertido. Por lo tanto, un meta-análisis de estudios publicados que investigan los efectos del estado RASSF1A metilación en la incidencia de cáncer de vejiga y de asociación tanto con pTNM (p, el estadio patológico; T, el tamaño del tumor; N, estado de los ganglios; M, estado metastásico) y el grado tumoral en cáncer de vejiga se realizó en el estudio. Un total de 10 estudios elegibles que incluían 543 casos y 217 controles se incluyeron en los análisis agrupados. Bajo el modelo de efectos fijos, el OR de metilación RASSF1A en pacientes con cáncer de vejiga, en comparación con los controles sin cáncer, fue de 8. 40 con IC del 95% = 4. 96-14. 23. El OR combinado con el modelo de efectos aleatorios de pTNM y el grado tumoral en pacientes metilados RASSF1A, en comparación con los pacientes no metilados, de 0. 75 (IC del 95% = 0. 28-1. 99) y 0. 39 (95% CI = 0. 14-1. 09). Este estudio mostró que la metilación RASSF1A parece ser un factor pronóstico independiente para el cáncer de vejiga. Los presentes hallazgos también requieren confirmación mediante estudios prospectivos diseñados adecuadamente
Visto:. Gao T, Wang S, Él B, Pan Y, Song G, Gu L, et al. (2012) La Asociación de RAS Asociación de dominio de la familia Protein1A (RASSF1A) La metilación Unidos y cáncer de vejiga del riesgo: una revisión sistemática y meta-análisis. PLoS ONE 7 (11): e48300. doi: 10.1371 /journal.pone.0048300
Editor: William B. Coleman, Universidad de Carolina del Norte Facultad de Medicina, Estados Unidos de América
Recibido: 24 Julio, 2012; Aceptado: September 20, 2012; Publicado: 6 Noviembre 2012
Derechos de Autor © 2012 Gao et al. Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos de la licencia Creative Commons Attribution License, que permite el uso ilimitado, distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que el autor original y la fuente se acreditan
Financiación:. El estudio fue apoyado por la Fundación Nacional de ciencias Naturales de China, (81172141 /H1611; http://isisn.nsfc.gov.cn/egrantweb/). Los donantes no tenía papel en el diseño del estudio, la recogida y análisis de datos, decisión a publicar, o la preparación del manuscrito
Conflicto de intereses:.. Los autores han declarado que no existen intereses en competencia
Introducción
el cáncer de vejiga es el tumor maligno más común del tracto urinario, y el 9 diagnóstico de cáncer más común en todo el mundo, con más de 330, 000 nuevos casos cada año y más de 130, 000 muertes por año. Se estima generalmente que la relación hombre: la incidencia en mujeres es 3. 08:01. 0 [1]. El tipo histológico y patológico de cáncer de vejiga es el carcinoma urotelial, principalmente, también llamado carcinoma de células transicionales, que representa aproximadamente el 90% [2]. Otros tipos, incluyendo carcinoma de células escamosas y adenocarcinoma, representan el 3-7% y & lt; 2%, respectivamente [3] |
metilación del ADN de las regiones promotoras está emergiendo como el principal mecanismo de la inactivación de ETG (supresor de tumor. gene). ADN está metilado sólo a citosinas situadas 5 'a guanosinas en dinucleótidos CpG y la metilación del ADN es un evento frecuente epigenético en muchos cánceres humanos [4]. Esta modificación tiene importantes efectos regula-conservadores en la expresión génica, especialmente cuando implican áreas ricas en CpG conocidas como islas CpG, ubicadas en las regiones promotoras de muchos genes. En muchos casos, la metilación aberrante de los genes de la isla CpG se ha correlacionado con una pérdida de la expresión génica, y se propone que la metilación del ADN proporciona una vía alternativa para la deleción del gen o la mutación de la pérdida de la función TSG. Marcadores para la metilación aberrante pueden representar un método prometedor para el seguimiento de la ocurrencia y la progresión del cáncer. El (dominio de la familia Ras-asociación 1) RASSF1 familia de proteínas representa una clase de Ras efectores que poseen propiedades supresoras de tumores. RASSF1A, una de las siete diferentes isoformas de RASSF1, es un putativo gen supresor de tumor se encuentra en 3p21, una región de deleciones heterocigotos y homocigotos comunes en diferentes tipos de tumores humanos [5] - [6]. Se comparte una alta homología de secuencia con una proteína de ratón conocida (NORE1) y puede servir como un efector que media los efectos apoptóticos por Ras de unión de una manera dependiente de trifosfato de guanosina-[6]. Los informes posteriores indican que la hipermetilación de las islas CpG en la región promotora RASSF1A, en lugar de los eventos clásicos de mutación /deleción, son la principal causa de pérdida de la expresión [6]. Las células tratadas con agentes de desmetilación re-expresa RASSF1A confirmando el papel de la metilación del ADN en la inactivación de RASSF1A en líneas celulares de tumor [7]. En muchos tumores de órganos sólidos humanos, la metilación de RASSF1 se ha identificado [Genebank nº de acceso AC002481, los nucleótidos 17730-18370] y su frecuencia varía entre 30% y 50% [8], [9]. Además, la metilación RASSF1A se informó como un indicador de pronóstico en el carcinoma de células renales, cáncer de pulmón de células no pequeñas, neuroblastoma, melanoma, cáncer de endometrio y cáncer de mama [10] - [17]. Todos estos hallazgos sugieren que podría desempeñar un papel fundamental en el desarrollo del cáncer humano.
A pesar de una serie de estudios individuales realizados en pacientes con cáncer de vejiga, el valor pronóstico de la condición de RASSF1A metilación en cáncer de vejiga diagnóstico del paciente y la relación entre la metilación RASSF1A y características patológicas o el grado del tumor de cáncer de vejiga sigue siendo controvertido. Por lo tanto, una revisión sistemática se llevó a cabo de la literatura con metaanálisis para obtener una evaluación más precisa de su valor pronóstico en el cáncer de vejiga.
Materiales y Métodos
Publicación selección
los estudios se identificaron mediante una búsqueda electrónica en PubMed y EMBASE usando las siguientes palabras clave: cáncer de vejiga, UBC, RAS protein1A dominio de la familia asociación, RASSF1A, metilación, pronóstico, pronóstico, las características patológicas y el grado tumoral. También se realizaron búsquedas manuales en las referencias de estas publicaciones con el fin de recuperar los estudios adicionales. Sólo los publicados como artículos de texto completo y en Inglés se incluyeron como candidatos. La búsqueda actualizada el 28 de julio de 2012.
Cada punto representa un estudio separado de la asociación indicada. Logor logaritmo natural de O, línea horizontal significa la magnitud del efecto. Higo. 1: gráfico en embudo de Begg prueba de sesgo de publicación
Criterios de inclusión y exclusión
Los estudios fueron seleccionados para el análisis si cumplían los siguientes criterios:. 1) que eran originales epidemiológica estudios sobre la correlación entre el promotor RASSF1A metilación y el pronóstico de pacientes con cáncer de vejiga, características patológicas o el grado del tumor de cáncer de vejiga; 2) Estado de RASSF1A metilación se examinó mediante PCR específica de metilación (MSP) o MSP cuantitativa (QMSP); 3) los sujetos en cada estudio comprendió los pacientes y los controles sin cáncer; 3) Los estudios se completa con el texto no sólo los resúmenes para la extracción de información relevante; 4) cuando la misma población de pacientes reportados en varias publicaciones, sólo el más reciente informe o la más completa se incluyen en este análisis para evitar la superposición entre las cohortes; 5) el número de pacientes y controles en cada estudio deben ser más de 3, respectivamente.
Recogida de datos
Para cada estudio elegible, se recopiló información sobre los autores, el año y la fuente de publicación, país de origen, los criterios de inclusión, criterios de exclusión, características patológicas, el grado del tumor, las frecuencias de metilación RASSF1A en los controles sin cáncer y pacientes de cáncer de vejiga y el método para la detección de la metilación. Todos los estudios incluidos utilizaron las personas que no tienen cáncer como un grupo de control, aunque algunos de ellos no proporcionaron la definición de no oncológico. En los estudios que definen las personas que no tienen cáncer, hay dos definiciones: (1) persona normal y saludable; (2) personas con enfermedad urológica, pero sin historia previa de malignidad genitourinario. Dado que es imposible para redefinir las personas que no tienen cáncer en un estándar unificado, se combinaron las personas que no tienen cáncer en nuestro meta-análisis de acuerdo con su grupo original en cada estudio individual. De estos estudios, el grado del tumor ≤1 se definió como de bajo grado, y el grado tumoral ≥2 se define como de alto grado que se define por la diferenciación celular. Los artículos elegibles finales seleccionados para su posterior metanálisis se evaluaron de forma independiente por dos revisores. Las pequeñas discrepancias se resolvieron mediante discusión de los autores.
El metanálisis y análisis estadístico
El análisis examina ante todo las diferencias en la frecuencia de metilación RASSF1A entre los pacientes con cáncer de vejiga y las personas que no tienen cáncer de odds ratio (OR) y su IC del 95%. Por otra parte, la fuerza de asociación entre la metilación RASSF1A y pTNM de los pacientes (p, el estadio patológico; T, el tamaño del tumor; N, estado de los ganglios; M, estado metastásico) y el grado tumoral también fueron evaluados por OR y su IC del 95%. Para evaluar la heterogeneidad entre los estudios, una prueba estadística para la heterogeneidad fue realizado basándose en las estadísticas [18]. Si se muestran los estudios para ser homogénea con P & gt; 0. 05 a Q-estadísticas, el resumen de O se calculó mediante un modelo de efectos fijos (el método de Mantel-Haenszel) cuando la heterogeneidad entre estudios estaba ausente [19]. De lo contrario, se seleccionó un modelo de efectos aleatorios (método de DerSimonian y Laird) [20]. Además, los análisis estratificados también se llevaron a cabo por el material y el método. Por otra parte, se realizó un análisis de sensibilidad, por el cual se elimina un solo estudio en el meta-análisis cada vez para determinar la influencia de los datos individuales fijados al general OR agrupado, para evaluar la estabilidad de los resultados. El potencial de sesgo de publicación se examinó visualmente en un gráfico en embudo de registro [O] en contra de su error estándar (SE), y el grado de asimetría fue probada por la prueba de Egger [21]. Este meta-análisis se realizó utilizando la versión de software STATA 12. 0. Todos los valores de p se basan en dos lados pruebas y un valor P inferior a 0. 05 fue considerado estadísticamente significativo.
Resultados
Características de los estudios
de acuerdo con los criterios de inclusión, con un total de 10 estudios elegibles [22] - [31] que implican 543 casos y 217 controles se incluyeron en los análisis agrupados. Las características de estos estudios se resumen en la Tabla 1. De estos estudios, se llevaron a cabo seis estudios en Asia, dos estaban en Europa, y el resto estaban en EE.UU., Brasil. Los niveles RASSF1A metiladas se detectaron utilizando PCR específica de metilación (MSP) [22], [24], [25], [28] - [31] o la metilación de PCR cuantitativa específica (QMSP) [23], [26], [ ,,,0],27]. estado de metilación del ADN del promotor de RASSF1A se evaluó en los tejidos tumorales o de orina. Los cánceres de vejiga fueron confirmados histológicamente o patológicamente en todos los estudios.
El metanálisis
En general, las frecuencias de metilación RASSF1A se pusieron a prueba en diez estudios fiables. Los principales resultados se resumen en la Tabla 2. En el marco del modelo de efectos fijos, el OR combinado de la metilación RASSF1A en pacientes con cáncer de vejiga, en comparación con los controles sin cáncer, era 8. 40 con IC del 95% = 4. 96-14. 23. En el análisis estratificado por el material, riesgos significativamente mayores fueron encontrados en las muestras de orina en la metilación RASSF1A Detction en el cáncer de vejiga (OR = 7. 29; IC del 95% = 4. 20-12. 65) y en los tejidos (OR = 28 . 76; IC del 95% = 3. 73-221. 59). Como el análisis estratificado por el método, también se encontró un aumento significativo de los riesgos en el MSP (O 14. CI 76, 95% = 6. 89-31. 61) y QMSP (OR = 3. 68; IC del 95% = 1. 69-8 . 03). En la evaluación de la metilación RASSF1A y pTNM /grado en el cáncer de vejiga, cada uno se llevó a cabo en seis estudios. Los principales resultados se resumen en la Tabla 3. En el marco del modelo de efectos aleatorios, el OR combinado de pTNM y el grado tumoral en pacientes metilados RASSF1A, en comparación con los pacientes no metilados fue de 0. 75 (IC del 95% = 0. 28-1. 99) y 0. (IC del 95% = 0. 14-1 09.) 39
análisis de sensibilidad
el análisis de sensibilidad reveló que cuatro estudios independientes fueron la principal fuente de heterogeneidad [22] -. [ ,,,0],25]. A continuación, la heterogeneidad de la metilación RASSF1A en pacientes con cáncer de vejiga, en comparación con los controles no cancerosas se redujo cuando se eliminaron estos cuatro estudios (P = 0,49). Además, se ha encontrado ningún otro estudio solo para impactar el OR agrupado según lo indicado por los análisis de sensibilidad.
Publicación Bias
Como se muestra en la Figura 1, la forma de los gráficos en embudo parecía asimétrica en el comparación de metilación entre los pacientes con cáncer de vejiga y los controles no cancerosas, lo que sugiere la presencia de sesgo de publicación. Entonces, la prueba de Egger proporciona evidencia estadística de asimetría del gráfico en embudo (t = 5. 14, P = 0. 001). Para ajustar este sesgo, un método de ajuste y relleno desarrollado por Duval y Tweedie [32] fue implementado (Figura 2). El meta-análisis con o sin el método de ajuste y relleno no sacó conclusiones diferentes, lo que indica que los resultados fueron estadísticamente robusto. gráfico de embudo y la prueba de Egger se llevaron a cabo para evaluar el sesgo de publicación en los estudios de asociación entre la metilación RASSF1A y pTNM /grado, la forma del gráfico en embudo no indicó ninguna evidencia de asimetría evidente (figura no se muestra) y el test de Egger sugiere la ausencia de sesgo de publicación (P & gt;. 0 05).
Discusión
Los resultados de esta revisión sistemática mostró que la metilación RASSF1A en el cáncer de vejiga se asoció con el riesgo de tumor como sea detectada en la orina o tejido por MSP o QMSP. Sin embargo, la metilación RASSF1A no se asoció con un mayor riesgo para el desarrollo de características patológicas o el grado del tumor de cáncer de vejiga en comparación btween RASSF1A metiladas vejiga cnacer pacientes y los pacientes no metilados.
Los datos acumulados documentado que los pacientes con cáncer de vejiga siempre muestran RASSF1A metilación [31]. En informes anteriores también demostraron que las variaciones genéticas de RASSF1A afectar a la susceptibilidad del cáncer de vejiga [28] y la frecuencia de metilación RASSF1A se encontró que era significativamente mayor en el grupo pacientes en comparación con los controles [27], [28]. Para confirmar aún más el estado de metilación RASSF1A promotor en el diagnóstico del paciente con cáncer de vejiga, llevamos a cabo un meta-análisis de 10 estudios que incluyeron 543 casos y 217 controles para derivar una estimación más precisa de la asociación. Nuestros resultados sugieren que la metilación RASSF1A es un factor de riesgo potencial para el cáncer de vejiga como se detecta tanto en los tejidos tumorales y de orina. La frecuencia de metilación RASSF1A en pacientes con cáncer de vejiga era 8. 40 veces mayor que en las personas no cancerosas. Sin embargo, MSP es un método de PCR nonfluorometric no cuantitativo para investigar la metilación del promotor. Este método puede no detectar bajas concentraciones de alelos metilados, a diferencia de lo que QMSP puede detectar hasta 1/1000 alelos metilados [27]. En este meta-análisis, tanto de ellos presentan un efecto positivo en la detección de la metilación RASSF1A. Además, se detectó metilación frecuente en RASSF1A con asociaciones significativas con el estadio del tumor, grado y capacidad de invasión muscular [30], [38] que no se encontró en otros estudios [27], [31]. Para resolver los resultados conflictivos, que también llevó a cabo un meta-análisis que indica que la frecuencia de metilación RASSF1A no se correlacionó con la pTNM o tumor de grado de pacientes con cáncer de vejiga. Estos resultados sugirieron que la inactivación de RASSF1A puede ser un evento temprano en la carcinogénesis de vejiga.
alteraciones epigenéticas son un sello del cáncer humano. En particular, la metilación del ADN es un mecanismo común para la inactivación de supresor de tumores y otros genes del cáncer en las células tumorales [33]. Los patrones de metilación aberrante se han usado como objetivos para la detección de células tumorales en muestras clínicas tales como biopsias de tejidos o fluidos corporales [34]. RAS dominio asociación proteína de la familia 1A (RASSF1A) es un putativo gen supresor de tumor se encuentra en 3p21, se ha considerado que juega un papel importante en la regulación de diferentes tipos de tumores humanos [5], [6]. Ha sido bien documentado que las proteínas Ras se unen un conjunto diverso de moléculas efectoras y median efectos supresores tumorales, tales como la diferenciación terminal y la apoptosis, así como efectos oncogénicos [35], [36]. Por otra parte, la activación de la vía de señalización Ras es un acontecimiento importante en el proceso de desarrollo del cáncer. Las mutaciones dentro de la Ras proto-oncogén ocurren comúnmente en el cáncer, lo que lleva a su hiperactivación, la señalización de crecimiento aberrante, y la proliferación de células sin marcar. Se sugirió que RASSF1 podría mediar en la inhibición del crecimiento activados por Ras a través de su función y RASSF1A proapoptótico inactivación puede ser un mecanismo tumorigénico que es distinta de la activación oncogénica de señalización Ras en tumores [37]. Estudios previos han demostrado también que la contaminación de arsénico se asocia con DAPK y metilación RASSF1A en el cáncer de vejiga [39], [40]. También puede ser uno de los factores que contribuyen a esta epigenotype metilación distinta.
Después de todo, esta meta-análisis todavía existen algunas limitaciones. En primer lugar, los controles incluidos en el análisis no fueron uniformes. La mayor parte de los controles eran población sana, mientras que algunos de ellos eran pacientes. De este modo, algunos de los controles, especialmente los que tienen enfermedad benigna deben tener diferentes riesgos que sufren de cáncer de vejiga. En segundo lugar, sólo hubo dos estudios de detección en los tejidos en el análisis de subgrupos. El tamaño de la muestra era demasiado pequeño como para tener un poder sustancial para explorar la asociación real. En tercer lugar, sólo había seis literaturas inscritos en el meta-análisis de asociación entre la metilación y pTNM /grado, y se observó la heterogeneidad entre los estudios. Por lo tanto, las RUP agrupados se calcularon por el modelo al azar. En cuarto lugar, la información detallada (como la edad, el sexo y estilo de vida) no pudo ser rastreado por lo que nuestras estimaciones no ajustadas deben ser confirmados por otros estudios.
Conclusión
Nuestra meta-análisis sugiere que la detección de la metilación RASSF1A en la orina anulado es una herramienta de diagnóstico no invasivo potencial en el cáncer de vejiga. Es necesario realizar estudios de gran tamaño de muestra de la asociación entre la metilación RASSF1A y el riesgo de cáncer de vejiga, llevando eventualmente a nuestro mejor entendimiento.