Extracto
Recientemente, estudios in vitro han demostrado que la adiponectina tiene propiedades antiangiogénicas y tumorales limitantes del crecimiento. Además, los niveles de adiponectina en suero se han asociado con el riesgo de varios tipos de cáncer; En concreto, la adiponectina sérica fue significativamente menor en los pacientes con cáncer de pulmón con enfermedad en estadio avanzado. En este estudio, hemos examinado la asociación de genes adiponectina variaciones promotor asociado con la expresión génica de adiponectina y los niveles plasmáticos en el cáncer de pulmón de células no pequeñas (CPCNP) en una población china Han. Un total de 319 pacientes con NSCLC y 489 individuos sanos fueron reclutados para evaluar la asociación de cuatro polimorfismos de un solo nucleótido promotor del gen de adiponectina (SNP) (SNP-12140G & gt; A, SNP-11426A & gt; G, SNP-11391G & gt; A y SNP- 11377C & gt; G) con el riesgo NSCLS. Además, se construyeron haplotipos de estos cuatro SNPs y evaluó la asociación de estos haplotipos con riesgo NSCLS. Nuestros resultados mostraron que entre estos cuatro SNPs, sólo el SNP-12140G & gt; A se asoció con el riesgo de NSCLC (P & lt; 0,05). El análisis de haplotipo mostró que no haplotipo se asoció con NSCLC después de realizar una corrección de Bonferroni (P & gt; 0,05). Además, un análisis de asociación de los cuatro SNPs estratificada en estadios patológicos I + II + III y IV mostraron que estos SNPs no mostraron diferencias significativas entre estadios patológicos I + II + III y IV. Por otra parte, no se observó ninguna diferencia en el alelo y genotipo frecuencias para estos SNPs entre el adenocarcinoma y el carcinoma de células escamosas. Nuestros resultados indican que el alelo G del SNP-12140may ser un factor de riesgo para el NSCLC (OR = 1,516; IC del 95%: 1,098-2,094). En esta población china Han
Visto: Li Y, Yao Y, Qian X, Shi L, Zhou J, Ma Q, et al. (2015) La Asociación de adiponectina Variaciones promotor del gen con células no pequeñas de cáncer de pulmón en un chino Han Población. PLoS ONE 10 (5): e0127751. doi: 10.1371 /journal.pone.0127751
Editor Académico: Srikumar P. Chellappan, H. Lee Moffitt Centro de Cáncer & amp; Research Institute, Estados Unidos |
Recibido: Octubre 15, 2014; Aceptado: April 20, 2015; Publicado: 27 de mayo de 2015
Derechos de Autor © 2015 Li et al. Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos de la licencia Creative Commons Attribution License, que permite el uso ilimitado, distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que el autor original y la fuente se acreditan
Disponibilidad de datos: Todos los datos relevantes están dentro del apoyo de sus archivos de información en papel y
Financiación:. Este trabajo fue apoyado por becas de la Fundación Programa de Asociación del Programa Provincial de Yunnan Departamento de Ciencia y Tecnología y la Universidad de Medicina de Kunming (No.2012FB064) y la Fundación de la provincia de Yunnan (No.2014NS139)
Conflicto de intereses:.. los autores han declarado que no existen intereses en competencia
Introducción
el cáncer de pulmón es una de las principales causas de las muertes por cáncer en todo el mundo y tiene una tasa de supervivencia a 5 años de aproximadamente 15% [1], y el cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC) representa aproximadamente el 80% de los casos de cáncer de pulmón [2]. En China, la incidencia y mortalidad del cáncer de pulmón se estiman en 0,7 y 0,6 millones de casos, respectivamente.
La adiponectina es una proteína secretada tejido adiposo que actúa como un sensibilizador de insulina endógena mediante la unión a los receptores de insulina [3 ]. Estudios anteriores han demostrado que la adiponectina se asocia con y diabetes tipo 2 la obesidad [4, 5], resistencia a la insulina [6 5,] [7, 8]. Recientemente, varios estudios han informado de que la adiponectina tiene efectos antiproliferativos y proapoptóticos en líneas celulares de cáncer de mama in vitro [9, 10]. Además, se han reportado muchos estudios que los niveles de adiponectina más bajos están asociados con un mayor riesgo de cáncer de endometrio [11-14], cáncer renal [15], el cáncer de colon [16] y el cáncer de mama [10, 17-19]. Los resultados anteriores sugieren que la adiponectina puede jugar un papel importante en el desarrollo de tumores y el crecimiento. En 2007, Petridou
et al
. se encontró que la adiponectina sérica no fue significativamente diferente en pacientes con cáncer de pulmón en comparación con los controles, a pesar de que fue significativamente menor en los pacientes con enfermedad en estadio avanzado, lo que sugiere que la adiponectina podría ser un marcador potencial para la progresión del cáncer de pulmón [3]. Recientemente, Nigro
et al
. proporcionado evidencia de un efecto directo de la adiponectina sobre el estado de la proliferación y la inflamación de las células A549, que apoya la hipótesis de que la adiponectina juega un papel protector en el pulmón y sugirió que la adiponectina podría ser un objetivo terapéutico prometedor en las enfermedades pulmonares [20].
En 2006, Heid
et al
. informado de que
adiponectina
polimorfismos de un solo promotor nucleótido (SNPs) se asocian con las concentraciones de adiponectina [21]. Laumen
et al
. más tarde demostraron que
adiponectina
promotor SNPs regulan
adiponectina
actividad promotora [22]. Por lo tanto,
adiponectina
variaciones promotor puede tener un impacto en el riesgo de cáncer
ya se ha informado la asociación de dos promotor del gen de la adiponectina SNP (SNP-12410G & gt; A y SNP-11377C & gt; G). Con riesgo de CPNM en una población china Han, y los resultados mostraron que el SNP-12140G & gt; a (rs266730) se asocia con un mayor riesgo de NSCLC [23]. Para confirmar estos resultados, en este estudio, hemos aumentado el tamaño de la muestra (de 179 a 319 casos, de 242 a 489 controles) y añadimos otros dos promotor del gen de la adiponectina SNP (SNP-11426A & gt; G y SNP-11391G & gt; A) para evaluar la asociación de estos promotor SNPs, es decir, SNP-12140G & gt gen de cuatro adiponectina; A (rs266730), SNP-11426A & gt; G (rs16861194), SNP-11391G & gt; A (rs17200539) y SNP-11377C & gt; G (rs266729), y su haplotipos con riesgo de CPNM en una población china Han.
Materiales y Métodos
1.1 Ética declaración
Este protocolo se realizó de conformidad con la declaración de Helsinki y fue aprobado por el Juntas de Revisión institucional de la No.1 y No.3 hospitales afiliados de la Universidad de Medicina de Kunming. Todos los participantes proporcionaron su consentimiento informado por escrito.
1.2 Los sujetos
El grupo de casos incluyó 319 pacientes (213 varones y 106 mujeres) que fueron diagnosticados con NSCLC en el Nº 1 y Nº 3 Hospitales Afiliado de la Universidad de Medicina de Kunming a partir de julio de 2012 hasta mayo de 2014. se identificó el tipo histológico de cáncer de pulmón, según la Organización Mundial de la Salud (OMS 2004) clasificaciones. El estadio patológico se determinó de acuerdo con el Sistema Internacional para la estadificación del cáncer [24] de pulmón. Sobre la base de los informes patomorfológicos, los casos de NSCLC incluyen adenocarcinoma (AC), carcinoma de células escamosas (SCC), y el adenocarcinoma y el carcinoma de células escamosas (SCC + AC). pacientes con CPNM con una historia previa de cáncer primario que no sea cáncer de pulmón fueron excluidos del estudio. Además, también se excluyeron los individuos con hipertensión, las enfermedades coronarias y la diabetes de este estudio para evitar cualquier interferencia potencial de la superposición de genes. características y los datos clínicos, como el sexo, la edad, antecedentes familiares de cáncer, y el tipo histológico de cáncer, se obtuvieron. El grupo de control sano incluyó 489 sujetos (313 varones y 176 mujeres) que no tenían antecedentes familiares de NSCLC y fueron reclutados de una población de someterse a exámenes de salud de rutina en el Nº 1 y Nº 3 hospitales afiliados de la Universidad de Medicina de Kunming. Todos los participantes (pacientes con CPNM y controles sanos) auto-reportados como Hans étnicas y han vivido más o menos dentro de la misma región geográfica (provincia de Yunnan, China).
1,3 NP genotipificación método de ensayo utilizando TaqMan
Genómica se extrajo el ADN a partir de linfocitos periféricos utilizando un método hidroxibenceno-cloroformo estándar. Cuatro
adiponectina
promotor SNPs, a saber SNP-12140G & gt; A (rs266730), SNP-11426A & gt; G (rs16861194), SNP-11391G & gt; A (rs17200539) y SNP-11377C & gt; G (rs266729), se genotipo usando amplificación por PCR con un ensayo de TaqMan. Los cebadores y sondas fueron adquiridos de Applied Biosystems (Foster City, CA, EE.UU.). Los productos de PCR seleccionados se caracterizaron por secuenciación directa en un Analizador Genético 3100 (Applied Biosystems, Tokio, Japón).
1.4 estadístico El análisis
Las frecuencias alélicas y genotípicas de los cuatro SNPs se calcularon por el método de conteo directo. Hardy-Weinberg (HWE) se puso a prueba para los SNPs, tanto en el CPNM y grupos de control. El desequilibrio de ligamiento (LD) y las frecuencias de haplotipos (deducida a partir del fenotipo) se calcularon sobre la base de los resultados de genotipado por la expectativa de maximización algoritmo en el software SHEsis [25, 26] .A χ
2 se utilizó la prueba para determinar las diferencias en se calcularon las frecuencias alélicas, genotípicas y haplotipos entre el NSCLC y los grupos de control, y los odds ratios (OR) con intervalos de 95% asociados de confianza (IC) de los riesgos específicos de alelo. corrección de Bonferroni se utilizó para el ensayo de comparaciones múltiples. La asociación entre cada SNP y NSCLC se analizó para el modo de herencia usando software SNPStats [27]. El criterio de información de Akaike (AIC) y el criterio de información bayesiano (BIC) se utilizaron para determinar el modelo de mejor ajuste para cada SNP. La potencia estadística se calculó utilizando PS Software [28]. Los análisis estadísticos se realizaron con SPSS 13 (Chicago, IL). Un valor de p menor de 0,05 fue considerado estadísticamente significativo.
Resultados
1.1 Sujeto características
La Tabla 1 muestra las características de los sujetos inscritos. No hubo diferencias de edad o de género entre el NSCLC y el grupo control (P & gt; 0,05). En los individuos con CPNM, 193 tenía aire acondicionado, 121 tenían SCC, y 5 tenía aire acondicionado y SCC. Había 47 pacientes en estadio I patológico, 55 en estadio II, 115 en estadio III y 102 en estadio IV
1.2 Asociación de adiponectina gen promoterSNP-12140G & gt;. A, SNP-11426A & gt; G, SNP-11391G & gt; A, y SNP-11377C & gt; G con NSCLC
Las frecuencias alélicas y genotípicas para SNP-12140G & gt; A, SNP-11426A & gt; G, SNP-11391G & gt; A y SNP-11377C & gt; G en los grupos de NSCLC y control se enumeran en la Tabla 2. SNP-11391G & gt; a se encontró que era monomórfica (alelo G) tanto en el NSCLC y grupos de control. Las frecuencias de genotipo para SNP-12140G & gt; A, SNP-11426A & gt; G y SNP-11377C & gt; G eran en HWE para el NSCLC y grupos de control (P & gt; 0,05). Sin embargo, las frecuencias de los alelos y genotipo de SNP-12140G & gt; A fueron significativamente diferentes en el NSCLC y grupos de control (p = 0,011 y 0,046, respectivamente). El alelo G de SNP-12140G & gt; A se produjo a una frecuencia significativamente mayor en el grupo de NSCLC en comparación con el grupo control (OR = 1,516; IC del 95%: 1,098-2,094). Las frecuencias alélicas y genotípicas para SNP-11426A & gt; G y SNP-11377C & gt; G no fueron significativamente diferentes en el CPNM y el grupo control (P & gt; 0,05).
1.3 Modo de análisis de herencia de
promotor adiponectina
SNP-12140G & gt; a, SNP-11426A & gt; G y SNP-11377C & gt; G
Tablas 3-5 se presentan los resultados del análisis del modo de herencia para los cuatro SNPs. Para comparar cada modelo de herencia (codominante, dominante, recesivo, overdominant y log-aditivo) para el modelo más general (codominante), la AIC y BIC se calcularon para identificar el modelo de herencia que mejor se ajusta a los datos [27]. El modelo con el valor de AIC y BIC más pequeña corresponde a la entropía prevista mínima [27]. El mejor modelo de herencia en forma con menor AIC y BIC SNP-12140G & gt; A y SNP-11426A & gt; G era el diario de un modelo aditivo. El mejor modelo de herencia en forma con menor AIC y BIC SNP-11377C & gt; G era el modelo dominante y log-aditivo. El análisis de los diferentes modelos genéticos revelaron que el genotipo GG de SNP-12140G & gt; A confiere mayor riesgo de CPNM en el diario de un modelo aditivo. No se observaron diferencias significativas para SNP-11426A & gt; G y SNP-11377C & gt;. Se encontraron G entre los grupos de NSCLC y de control en los diferentes modelos genéticos
1.4 desequilibrio de ligamiento (LD) y análisis de haplotipos de
adiponectina
promotor SNP-12140G & gt; A, SNP-11426A & gt; G y SNP-11377C & gt; G
importantes LD (D ') valores entre theSNP-12140G & gt; A, SNP -11426A & gt; G y SNP-11377C & gt; G loci se encontraron en todos los individuos. valor de la D 'fue 0,899 entre el SNP-12140G & gt; A y SNP-11426A & gt; G, 0.857 entre SNP-12140G & gt; A y SNP-11377C & gt; G y 0.864 entre SNP-11426A & gt; G y SNP-11377C & gt; G. Con base en el resultado de LD, se calcularon los haplotipos de estos tres SNP, y en la Tabla 6 se muestran las frecuencias estimadas de SNP-12140G & gt; A-SNP-11426A & gt; G-SNP-11377C & gt; G haplotipos con frecuencias de más de 3%. Ninguno de los haplotipos fueron significativamente diferentes en el CPNM y grupos de control después de la corrección de Bonferroni (P & gt; 0,05) guía empresas
1.5 Análisis Asociación de
adiponectina
promotor SNP-12140G & gt;. A, SNP -11426A & gt; G y SNP-11377C & gt; G con diferentes estadios patológicos
No hubo diferencias en las frecuencias alélicas y genotípicas forSNP-12140G & gt; a, SNP-11426A & gt; G y SNP-11377C & gt; G entre patológica etapas I + II y III + IV (Tabla 7) guía empresas
1.6 Asociación análisis de
adiponectina
promotor SNP-12140G & gt;. A, SNP-11426A & gt; G y SNP-11377C & gt ; G con adenocarcinoma (AC) y el carcinoma de células escamosas (SCC)
Nuestros resultados no revelaron diferencias en las frecuencias alélicas y genotípicas para SNP-12140G & gt; A, SNP-11426A & gt; G y SNP-11377C & gt; G entre AC y SCC (Tabla 8).
Discusión
La evidencia reciente ha demostrado que la adiponectina tiene efectos antiproliferativos y proapoptóticos en líneas celulares de cáncer de mama in vitro [9, 10]. En 2007, Petridou
et al
. se encontró que la adiponectina sérica no fue significativamente diferente en pacientes con cáncer de pulmón en comparación con los controles, pero que era significativamente menor en los pacientes en las etapas avanzadas de la enfermedad, lo que sugiere que la adiponectina podría ser un marcador potencial para la progresión del cáncer de pulmón [3] .Pei
et al
. a continuación, llevó a cabo un meta-análisis para explotar la relevancia causal de la adiponectina con el cáncer de circulación; sus hallazgos demostraron que genéticamente superior adiponectina circulante confiere un efecto protector contra el cáncer de pulmón, pero un riesgo para el cáncer colorrectal [29].
En 2011, Cui
et al
. investigado la asociación de SNPs en el gen de la adiponectina (rs266729, rs822395, rs822396 y rs2241766) con NSCLC [30], y se informó de los SNPs que eligieron estar relacionado con los niveles circulantes de adiponectina [30]. Aunque Cui
et al
. no observó una asociación de SNP-11377C & gt; G (rs266729), que se encuentra en el
adiponectina
promotor, con NSCLC [30], los resultados revelaron que el genotipo rs2241766 TT se asoció significativamente con NSCLC susceptibilidad. En 2006, Heid
et al
. informó de que rs2241766 se asoció con los niveles de adiponectina, con el genotipo GG se correlaciona con el aumento de los niveles de adiponectina en comparación con el genotipo TT [21]. Además, Pei
et al
. también observaron que el genotipo GG rs2241766 o alelo G se asoció con los niveles circulantes de adiponectina significativamente más altos que el genotipo TT, sin heterogeneidad [29]. Por otra parte, un meta-análisis de polimorfismos de genes de riesgo de cáncer y la adiponectina por Xu
et al
. y Yang
et al
. indicó que el alelo G del rs2241766 era un factor de protección potencial de riesgo de cáncer [31, 32]. Por lo tanto, rs2241766TTisassociated con los niveles de adiponectina inferiores, y thers2241766TT genotipo puede estar asociado de forma significativa con la susceptibilidad NSCLC.
En 2009, Laumen
et al
. encontrado que los SNP-11426A & gt; G, SNP-11391G & gt; A y SNP-11377C & gt; G dentro de la
adiponectina
promotor fuera SNPs reguladoras para
adiponectina
actividad promotora [22]. En consecuencia, elegimos cuatro
adiponectina
promotor SNPs para evaluar la asociación de estos SNPs y sus haplotipos con NSCLC en una población china Han. Nuestros resultados confirmaron nuestra anterior conclusión de que el alelo G del
adiponectina
promotor SNP-12140G & gt; A es un factor de riesgo para el NSCLC [23] y que los individuos con el SNP-12140G & gt; Un genotipo GG tienen mayor riesgo de CPNM bajo modelos log-adictivo. Los otros SNPs promotor del gen de adiponectina, incluyendo tres SNP-11377C & gt; G, no se correlacionaron con NSCLC en el estudio actual. En 2008, Kaklamani
et al
. informado de que el promotor del gen de adiponectina SNP-11377C & gt; G se asocia con el riesgo de cáncer de colon [33]. Sin embargo, Carvajal-Carmona
et al
. no observaron una asociación entre el SNP-11377C & gt; G y el riesgo de cáncer colorrectal en pacientes del Reino Unido [34], indicando que la discrepancia entre los resultados de andthose Kaklamani
et al
. puede ser debido a las diferencias entre los grupos étnicos, los efectos diferenciales del medio ambiente o resultados falsos positivos [34]. Pei
et al
. informó de un hallazgo interesante que genéticamente elevados de adiponectina circulante puede conferir un efecto protector contra el cáncer de pulmón, pero un riesgo para el cáncer colorrectal [29]. Por lo tanto, el tipo de cáncer podría ser un factor clave en la relación entre el cáncer y el gen de la adiponectina. Nuestros resultados, junto con los de Cui
et al
. [30], indicó que SNP-11377C & gt; G no se asocia con el riesgo de CPNM y sugirieron que el papel del gen de la adiponectina SNP-11377C & gt; G puede ser específica para el tipo de cáncer o etnia. Además, nuestros resultados indicaron que el papel de promotor del gen de la adiponectina SNPs puede ser específica para el sitio SNP, por ejemplo, SNP-12140G & gt; A tal vez más importante que SNP-11377C & gt; G en la población china. Basándose en estos resultados, la hipótesis de que SNP-12140G & gt; A puede influir
adiponectina
la actividad del promotor, la expresión de genes, el nivel de adiponectina en plasma y, en definitiva, el riesgo de NSCLC. Desafortunadamente, hasta la fecha, el papel de los SNP-12140G & gt; A en
adiponectina
promotor de la actividad y la expresión génica no ha sido probado. Por lo tanto, la función de este SNP en
adiponectina
promotor de la actividad y la expresión génica debe ser investigado en el futuro. Fue un hallazgo interesante que sólo SNP-12140G & gt; A se asoció con CPNM en nuestro estudio. Nuestros datos muestran que SNP-12140G & gt; Un solo fue parcialmente en desequilibrio de ligamiento con SNP-11426A & gt; G y SNP-11377C & gt; G. Por lo tanto, asumimos que esto podría ser posible una de las causas de la divergencia que sólo SNP-12140G & gt; A asociada con NSCLC en esta población china Han, pero no SNP-11426A & gt; G y SNP-11377C & gt;. G
en este estudio, también se observó que no existían diferencias en alelo y la frecuencia del genotipo para SNP-12140G & gt; A, SNP-11426A & gt; G y SNP-11377C & gt; G entre AC y SCC (Tabla 8). Además, no hubo diferencias en alelo y la frecuencia del genotipo para SNP-12140G & gt; A, SNP-11426A & gt; G y SNP-11377C & gt; G entre las etapas patológicas I + II y III + IV (Tabla 7). Sin embargo, en 2007, Petridou
et al
. encontró que el nivel de adiponectina no fue significativamente diferente entre los pacientes con cáncer de pulmón en comparación con los controles, aunque fue significativamente menor en los pacientes con enfermedad en estadio avanzado [3]. Estos autor spostulated que la razón de que un nivel de adiponectina significativamente más baja se observó en los pacientes con enfermedad en estadio avanzado puede ser debido a la disminución de la masa grasa total en el cáncer de pulmón avanzado, que conduce a la disminución en la producción de adiponectina por el tejido adiposo subcutáneo [3]. por lo tanto, SNP-12140G & gt; a pueden ser simplemente un factor de susceptibilidad para el NSCLC en la población china Han y no está asociada con la etapa del cáncer de pulmón. La asociación de la adiponectina inferior con enfermedad en estadio avanzado podría ser el debido a la disminución en la producción de adiponectina inducida por la disminución de la masa grasa en los estadios avanzados de cáncer de pulmón. Debido a que no medimos los niveles de adiponectina en el CPNM y los grupos de control, lo cual es una limitación de nuestro estudio, no se observó una asociación entre los datos genéticos, los niveles de adiponectina y el riesgo de CPNM y estadio patológico NSCLC.
Había otras varias limitaciones en el presente estudio. Un tamaño de muestra relativamente pequeña puede limitar el poder estadístico de nuestro estudio. La potencia estadística para el efecto de los SNP-12140G & gt; A se calculó utilizando el software PS [28], y se encontró que la muestra alcanzó el 74,1% de la eficacia estadística. Por lo tanto, una población más grande se debe investigar para comprobar la veracidad de los resultados. La otra limitación de este estudio fue que no comprobó el estado de tabaquismo de los individuos de control, por lo que es difícil de realizar futuros análisis de tales variables de exposición y para llevar a cabo un análisis de la interacción gen-fumar. Esta limitación puede neutralizar el efecto del tabaquismo y exponer los efectos de las variantes genéticas en nuestro estudio.
Conclusiones
En este estudio, hemos realizado un estudio de asociación para
adiponectina
promotor SNP-12140G & gt; a, SNP-11426A & gt; G y SNP-11377C & gt; G y NSCLC en una población china Han y se encontró que el alelo G del SNP-12140G & gt; a es un factor de riesgo para el NSCLC; los individuos con el SNP-12140G & gt; Un genotipo GG mostraron mayor riesgo de CPNM bajo modelos log-adictivo. En el futuro, se necesitan estudios de mayor escala para aclarar mejor y examinar la asociación de genes adiponectina variaciones del promotor con NSCLC susceptibilidad. Por otra parte, la función de SNP-12140 en
adiponectina
promotor de la actividad y la expresión génica se debe investigar.
Apoyo a la Información sobre Table S1.
doi: 10.1371 /journal.pone.0127751.s001 gratis (XLSX)
S2 tabla.
doi: 10.1371 /journal.pone.0127751.s002 gratis (XLSX)