Extracto
El beta2 del receptor de ácido retinoico (RARβ2) es un tipo de receptor nuclear que se activa por tanto el ácido retinoico todo-trans retinoico y ácido 9-cis, que se ha demostrado que funcionan como un tumor gen supresor en diferentes tipos de tumores humanos. Informes anteriores demostraron que la frecuencia de RARβ2 metilación fue significativamente mayor en los pacientes con cáncer de próstata en comparación con los controles, pero la relación entre RARβ2 la metilación del promotor y el estadio patológico o puntuación de Gleason de cáncer de próstata sigue siendo controvertido. Por lo tanto, se realizó un meta-análisis de estudios publicados que investigan los efectos del estado de metilación RARβ2 en la incidencia de cáncer de próstata y de asociación tanto con el estadio patológico y la puntuación de Gleason en el cáncer de próstata en el estudio. Un total de 12 estudios elegibles que incluían 777 casos y 404 controles se incluyeron en los análisis agrupados. Bajo el modelo de efectos aleatorios, el OR combinado de RARβ2 metilación en pacientes con cáncer de próstata, en comparación con los controles sin cáncer, fue 17.62 con IC del 95% = 6,30 a 49,28. El OR combinado con el modelo de efectos fijos del estadio patológico en pacientes metilados RASSF1A, en comparación con los pacientes no metilados, fue de 0,67 (IC del 95% = 0,40-1,09) y el OR combinado de bajo GS en pacientes metilados RARβ2 por el de efectos aleatorios modelo, en comparación con los pacientes de alto metilados-GS RARβ2, fue de 0,54 (IC del 95% = 0,28-1,04). Este estudio mostró que RARβ2 podría ser un biomarcador potencial en la prevención del cáncer de próstata y diagnóstico. La detección de metilación RARβ2 en la orina o suero es una herramienta de diagnóstico no invasiva potencial en el cáncer de próstata. Los presentes hallazgos también requieren confirmación mediante estudios prospectivos diseñados adecuadamente
Visto:. Gao T, Él B, Pan Y, Li R, Xu Y, Chen L, et al. (2013) La Asociación de ácido retinoico receptor beta 2 (RARβ2) estado de metilación de próstata y el riesgo de cáncer: una revisión sistemática y meta-análisis. PLoS ONE 8 (5): e62950. doi: 10.1371 /journal.pone.0062950
Editor: Moray Campbell, Roswell Park Cancer Institute, Estados Unidos de América
Recibido: 28 Enero, 2013; Aceptado: March 27, 2013; Publicado: 13 de mayo de 2013
Derechos de Autor © 2013 Gao et al. Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos de la licencia Creative Commons Attribution License, que permite el uso ilimitado, distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que el autor original y la fuente se acreditan
Financiación:. Este trabajo fue apoyado por la Fundación Nacional de Ciencias Naturales de China (http://www.nsfc.gov.cn/Portal0/default152.htm) SNCF: C0606. Los donantes no tenía papel en el diseño del estudio, la recogida y análisis de datos, decisión a publicar, o la preparación del manuscrito
Conflicto de intereses:.. Los autores han declarado que no existen intereses en competencia
Introducción
el cáncer de próstata es la neoplasia no cutáneos más comúnmente diagnosticado en el mundo. La enfermedad afecta principalmente a los hombres después de la sexta década de la vida y se asocia con una considerable morbilidad y mortalidad [1]. El tratamiento curativo implica prostatectomía radical o la radioterapia, y el mejor resultado se observa en pacientes con la enfermedad etapa más temprana [2], [3]. Los pacientes con enfermedad localmente avanzada o sistémica llevan un mal pronóstico a largo plazo debido a la notable falta de un tratamiento curativo [4].
Recientemente, la metilación de las islas CpG en el promotor y 5 'o regiones de los genes /es reconocida como una alteración común en genes relacionados con el cáncer a menudo asociados con la interrupción parcial o completa de la transcripción [5]. Esta alteración epigenética proporciona una vía alternativa para el silenciamiento de genes, además de la mutación o supresión de genes, que se sugiere a ser un nuevo marcador molecular para la detección temprana del cáncer [6]. El receptor de ácido retinoico (RAR) es un tipo de receptor nuclear que se activa por tanto el ácido trans-retinoico y el ácido 9-cis retinoico [7]. Hay tres receptores del ácido retinoico (RAR), RAR, RARβ, y RARγ, que se expresan diferencialmente durante el desarrollo y en la vida adulta, y hay fuerte evidencia de que RARβ juega un papel central en la regulación del crecimiento de las células epiteliales y en la tumorigénesis [8 ] - [10]. El gen de RARβ humano genera múltiples isoformas mediante el uso de promotores P1 y P2 y empalme alternativo [11], [12]. P1 dirige la transcripción de la isoforma RARβ1, mientras que P2 promueve la transcripción de las isoformas RARβ2 y RARβ4 [13].
El RARβ2 se asigna a cromosómica 3p24 región (-477 /+ 392, los números de acceso de GenBank S82362 y M96016) , que se expresa en la mayoría de los tejidos y se ha demostrado que funcionan como un gen supresor de tumor en el pulmón, mama y neoplasia ginecológica [14] - [17]. El promotor RARβ2 se caracteriza por un CpG (citidina guanosina fosfato) ricos región, la isla CpG [18], que se encuentra en la región 5 'no traducida, junto con varios motivos que son potenciales sitios de unión para factores de transcripción tales como AP -1, AP-2, y Sp1. Por otra parte, RARβ2 ha demostrado recientemente ser hypermethylated frecuencia en varias neoplasias humanas primarias, incluyendo el cáncer de próstata [19] - [21]. Todos estos hallazgos sugieren que podría desempeñar un papel fundamental en el desarrollo del cáncer humano.
Hasta la fecha, RARβ2 metilación se ha demostrado en una serie de estudios individuales, que se detecta no solamente en muestras de tejido, sino también en muestras de orina y suero. El valor pronóstico de estado de metilación RARβ2 en el diagnóstico del paciente con cáncer de próstata y la relación entre RARβ2 metilación y el estadio patológico de cáncer de próstata y la puntuación de Gleason sigue sin estar clara. Por lo tanto, una revisión sistemática se llevó a cabo de la literatura con metaanálisis para obtener una evaluación más precisa del papel de RARβ2 metilación en el manejo del cáncer de próstata.
Materiales y Métodos
Selección de publicación
los estudios se identificaron mediante una búsqueda electrónica en PubMed y Google Académico usando las siguientes palabras clave: cáncer de próstata, el CP, β2 receptor de ácido retinoico, RARβ2, RARbeta2, la metilación. También se realizaron búsquedas manuales en las referencias de estas publicaciones con el fin de recuperar los estudios adicionales. Sólo los publicados como artículos de texto completo y en Inglés se incluyeron como candidatos. La búsqueda actualizada el 28 de diciembre de 2012
Los criterios de inclusión y exclusión
Los estudios fueron seleccionados para el análisis si cumplían los siguientes criterios:. 1) eran estudios epidemiológicos originales sobre la correlación entre RARβ2 promotor de la metilación y el pronóstico de pacientes con cáncer de próstata; 2) Estado de RARβ2 metilación se examinó mediante PCR específica de metilación (MSP) o MSP cuantitativa (QMSP); 3) los sujetos en cada estudio comprendió los pacientes y los controles sin cáncer; 3) Los estudios se completa con el texto no sólo los resúmenes para la extracción de información relevante; 4) cuando la misma población de pacientes reportados en varias publicaciones, sólo el más reciente informe o la más completa se incluyen en este análisis para evitar la superposición entre las cohortes; 5) el número de pacientes y controles en cada estudio deben ser más de 5 respectivamente.
La recolección de datos
Para cada estudio elegible, se recopiló información sobre los autores, el año y la fuente de publicación, país de origen, criterios de inclusión, criterios de exclusión, el estadio patológico, la puntuación de Gleason, RARβ2 frecuencias de metilación en los controles sin cáncer y pacientes de cáncer de próstata y el método para la detección de metilación. Todos los estudios incluidos utilizaron las personas que no tienen cáncer como un grupo de control, aunque algunos de ellos no proporcionaron la definición de la no-cáncer. En los estudios que definen las personas que no tienen cáncer, hay dos definiciones: (1) persona normal y saludable; (2) personas con hiperplasia benigna de próstata. Dado que es imposible para redefinir las personas que no tienen cáncer en un estándar unificado, se combinaron las personas que no tienen cáncer en nuestro meta-análisis de acuerdo con su grupo original en cada estudio individual. De estos estudios, patológico etapa ≤ T2 se definió como un estadio más temprano, y patológico etapa ≥ T3 se definió como grado alto que se define por la diferenciación clínica. Gleason score≥7 se definió como alto GS y Gleason score≤6 se definió como bajo GS. Los artículos elegibles finales seleccionados para su posterior metanálisis se evaluaron de forma independiente por dos revisores. Las pequeñas discrepancias se resolvieron mediante discusión de los autores.
El metanálisis y el análisis estadístico
El análisis de todo examinó las diferencias en la frecuencia de metilación RARβ2 entre los pacientes con cáncer de próstata y personas que no tienen cáncer de odds ratio (OR) y su IC del 95%. Por otra parte, la fuerza de asociación entre RARβ2 metilación y el estadio patológico de los pacientes y la puntuación de Gleason tumor también se evaluaron por OR y su IC del 95%. Para evaluar la heterogeneidad entre los estudios, se realizó el análisis de las estadísticas para la heterogeneidad [22]. Si se muestran los estudios para ser homogénea con P & gt; 0. 05 a Q-estadísticas, el resumen de O se calculó mediante un modelo de efectos fijos (el método de Mantel-Haenszel) cuando la heterogeneidad entre estudios estaba ausente [23]. De lo contrario, se seleccionó un modelo de efectos aleatorios (método de DerSimonian y Laird) [24]. Además, los análisis estratificados también se llevaron a cabo por el material y el método. Además, se realizó un análisis de sensibilidad, por el cual se elimina un solo estudio en el meta-análisis cada vez para determinar la influencia de los datos individuales fijados al general OR agrupado, para evaluar la estabilidad de los resultados. El potencial de sesgo de publicación se examinó visualmente en un gráfico en embudo de registro [O] en contra de su error estándar (SE), y el grado de asimetría fue probada por la prueba de Egger [25]. Este meta-análisis se realizó utilizando la versión de software STATA 12. 0. Todos los valores de p se basan en dos lados pruebas y un valor P inferior a 0. 05 fue considerado estadísticamente significativo.
Resultados
características del estudio
de acuerdo con los criterios de inclusión, con un total de 12 estudios elegibles [21], [26] - [36] la participación de 777 casos y 404 controles se incluyeron en los análisis agrupados. Las características de estos estudios se resumen en la Tabla 1. De estos estudios, se llevaron a cabo dos estudios en Asia, tres estaban en Europa, y el resto estaban en EE.UU.. Los niveles RARβ2 metilados fueron detectados utilizando cualquiera de PCR específica de metilación (MSP) [21], [32], [34] - [36] o la metilación cuantitativa PCR específico (QMSP) [26] - [31], [33]. estado de metilación del ADN del promotor RARβ2 se evaluó en los tejidos de orina, suero o tumorales. pacientes con cáncer de próstata fueron confirmadas patológicamente en todos los estudios.
El metanálisis
En general, las frecuencias de metilación RARβ2 se pusieron a prueba en 12 estudios fiables. Los principales resultados se resumen en la Tabla 2. En el marco del modelo de efectos aleatorios, el OR combinado de RARβ2 metilación en pacientes con cáncer de próstata, en comparación con los controles sin cáncer, fue 63.44 con IC del 95% = 23,94 a 168,11. En el análisis estratificado por el material, un aumento significativo de los riesgos se encontraron en las muestras de tejidos en la detección de metilación RARβ2 en cáncer de próstata (OR = 67,85; IC del 95% = 33,75 a 136,42) y en los no tejidos (OR = 46,76; IC del 95% = 2,68 -817,26). Como el análisis estratificado por el método, también se encontró un aumento significativo de los riesgos en el MSP (O 89. 15; IC del 95% = 31,93 a 248,90) y QMSP (OR = 47,10; IC 95% = 10,59 a 209,53). En la evaluación de la asociación entre la metilación y RARβ2 estadio patológico en el cáncer de próstata, el estudio se llevó a cabo en cinco estudios según el modelo de efectos fijos. El OR combinado del estadio bajo metilados en pacientes RARβ2, en comparación con los de etapa alta RARβ2 pacientes metilados fue de 0,67 (IC del 95% = 0,40 a 1,09, Tabla 3). La relación entre RARβ2 metilación y la puntuación de Gleason tumor también se comparó mediante el modelo de efectos aleatorios. El OR combinado de bajo GS en pacientes metilados RARβ2, en comparación con los pacientes de alto GS metilados RARβ2 fue de 0,54 (IC del 95% = 0,28 a 1,04, Tabla 3).
Análisis de sensibilidad
el análisis de sensibilidad reveló que 11 estudios independientes fueron la principal fuente de heterogeneidad [21], [26] - [29], [31] - [36]. A continuación, la heterogeneidad de RARβ2 metilación en pacientes con cáncer de próstata, en comparación con los controles no cancerosas se disminuyó cuando se retiró el estudio de Hoque MO (P = 0,54). Además, se ha encontrado ningún otro estudio solo para impactar el OR agrupado según lo indicado por los análisis de sensibilidad.
El sesgo de publicación
Como se muestra en la Figura 1A, la forma de los gráficos en embudo parecía asimétrica en el comparación de metilación entre los pacientes de cáncer de próstata y los controles no cancerosas, lo que sugiere la presencia de sesgo de publicación. Entonces, la prueba de Egger proporciona evidencia estadística de asimetría del gráfico en embudo (t = 2. 38, P = 0. 038). Para ajustar este sesgo, un método de ajuste y relleno desarrollado por Duval y Tweedie [38] se puso en práctica (Figura 1B). El OR agrupado de RARβ2 metilación en pacientes con cáncer de próstata, en comparación con los controles no cancerosas, era 17.62 con IC del 95% = 6,30 a 49,28 por el método y relleno de ajuste (tabla 2). El meta-análisis con o sin el método de ajuste y relleno no sacó conclusiones diferentes, lo que indica que los resultados fueron estadísticamente robusto. gráfico de embudo y la prueba de Egger se llevaron a cabo para evaluar el sesgo de publicación en los estudios de asociación entre RARβ2 metilación y la puntuación patológica etapa /Gleason, La forma del gráfico en embudo no indicó ninguna evidencia de asimetría evidente (figura 2, 3) y el test de Egger sugerido la ausencia de sesgo de publicación (P & gt; 0,05).
Cada punto representa un estudio separado de la asociación indicada. Logor logaritmo natural de O, línea horizontal significa la magnitud del efecto. A: gráfico en embudo de Begg prueba de sesgo de publicación. B:. Embudo parcela de prueba de Begg sesgo de publicación posterior al método de ajuste y relleno
Discusión
Los resultados de esta revisión sistemática mostró que la metilación en RARβ2 cáncer de próstata se asoció con el riesgo de tumor como sea detectado en la orina, suero o tejido por MSP o QMSP. Sin embargo, la metilación RARβ2 no se asoció con un mayor riesgo de desarrollar estadio patológico o puntuación de Gleason de cáncer de próstata en comparación entre los pacientes con cáncer de vejiga metilado RARβ2 y los pacientes no metilados.
Hypermethylations del gen RARβ2 de haber sido reportada en muchos estudios declaró que se encontró la frecuencia de metilación RARβ a ser significativamente mayor en el grupo pacientes en comparación con los controles [21], [26] - [37]. En informes anteriores también demostraron que las variaciones genéticas de RARβ afectar a la susceptibilidad del cáncer de próstata [39] .Para confirmar aún RARβ2 estado de metilación en el diagnóstico del paciente 's cáncer de próstata, se llevó a cabo un meta-análisis de 12 estudios que incluyeron 777 casos y 404 controles para derivar una estimación más precisa de la asociación. El análisis mostró que RARβ2 metilación en pacientes con cáncer de próstata, en comparación con los controles no cancerosas, era 17,62 veces mayor que en las personas sin cáncer después del método de ajuste y relleno que confirmó además RARβ2 metilación fue un factor de riesgo potencial para el cáncer de próstata tal como se detecta tanto en los tejidos de orina, suero y tumorales. MSP es un método de PCR nonfluorometric no cuantitativo para investigar la metilación del promotor. Este método puede no detectar bajas concentraciones de alelos metilados, a diferencia de lo que QMSP puede detectar hasta 1/1000 alelos metilados [40]. En este meta-análisis, tanto MSP y QMSP tienen el mismo efecto en la detección de la metilación RASSF1A.
Sin embargo, el estudio de Carmen Jerónimo sugirió que los niveles de metilación RARβ2 correlacionado con el estadio tumoral patológico, pero no con puntuación de Gleason [32]. El estudio de R. Dumache demostró que RARβ2 metilación se correlaciona no sólo el estadio tumoral patológico, sino también la puntuación de Gleason [26]. Pero en el estudio de Woodson K, la metilación de RARβ2 se demostró que se correlaciona con el grado del tumor, pero no el estadio patológico [41]. Para resolver los resultados contradictorios, se llevó a cabo un meta-análisis que indicó que el estado de metilación RARβ2 no se correlaciona bien con el estadio patológico o puntuación de Gleason de pacientes con cáncer de próstata, sugirió que la inactivación de RARβ2 puede ser un evento temprano en la carcinogénesis de próstata.
el diagnóstico precoz del cáncer de próstata actualmente confiado en transrectal guiada por ultrasonido biopsia con aguja (10 a 12 núcleos) en hombres con aumento de PSA total (superior a 4,0 ng /ml) y /o hallazgos anormales DRE [42] . Sin embargo, 65% a 70% de los hombres con PSA total en el intervalo /ml 4,0 a 10,0 ng tenía un resultado de la biopsia de próstata negativa [43]. Además, se encontró que más del 20% de los hombres con PSA en el intervalo /ml 2,0 a 4,0 ng de tener cáncer cuando se evaluó por biopsia de próstata [44]. Más problemático, no había pruebas concluyentes de que el cribado basado en PSA disminuye la mortalidad por cáncer de próstata [45]. La detección temprana del cáncer de próstata puede ser más eficaz y eficiente como RARβ2 puede ser un biomarcador temprano en la carcinogénesis de próstata diagnóstico.
El cáncer no es una enfermedad única célula. Se necesitan las células de cáncer aberrantes y su microambiente interactivo para el cáncer de progresar a la independencia de andrógenos y metástasis a distancia [46]. heterogeneidad tumoral en los patrones de metilación puede estar influenciada por la respuesta a la expresión microambiente y local de genes, hormonas, estrés oxidativo, o algún otro factor que puede modular la metilación. Tsuyoshi Nakayama'study indicó que tres sitios CpG (números 20 a 22) cerca de la región βRARE eran regiones de consenso de la metilación en el CaP, que puede ser crítico para el silenciamiento del gen bloqueando el acceso de RAR heterodímeros liganded /RXR y otros cis- actuando factores de transcripción a sus secuencias de unión [35].
RARB2 podría ser silenciado, no sólo por la metilación del ADN, sino también por la desacetilación de histonas. Acetilación y desacetilación de los residuos de lisina de colas amino-terminales de las histonas tenido profundos efectos en la transcripción de genes [47]. El promotor de RARβ estaba bajo el control de un elemento de respuesta a ácido retinoico de alta afinidad en sí. Por lo tanto, una vez que se había producido silenciamiento de RARβ, la falta de RAR-beta podría reforzar el estado de silencio inactivo en su propio promotor probablemente la promoción de metilación como un mecanismo de represión secundario [48]. El estudio de Fuks F demostró que las células de metilación-negativas RARβ (LNCaP, PC3, DU145 y) fueron acetilados-hipo por lo tanto H3 y H4. TSA combinado y tratamiento todo- trans del ácido retinoico después de tratamiento con 5-azacitidina aumenta la acumulación de acetilado histonas, lo que lleva a la reactivación del promotor RARβ metilado y, posteriormente, la expresión de RARβ [49].
En conclusión, nuestro meta -análisis sugiere que la detección de RARβ2 metilación podría ser una herramienta de diagnóstico biomarcador potencial en el cáncer de próstata. La detección de metilación RARβ2 en la orina o suero es una herramienta de diagnóstico no invasiva potencial en el cáncer de próstata. Es necesario realizar estudios de gran tamaño de muestra de la asociación entre RARβ2 metilación y el riesgo de cáncer de próstata, llevando eventualmente a nuestro mejor entendimiento.