Extracto
Antecedentes
Se determinó recientemente que la dentina sialophosphoprotein (DSPP), un miembro del hermano (glicoproteínas N-ligados Pequeño ligando de unión a integrina) la familia de phosphoglycoproteins, está altamente regulada positivamente en carcinomas humanos orales de células escamosas (OSCCs), donde la regulación positiva se asocia con la agresividad del tumor. Para investigar los efectos de
DSPP
-silencing en los perfiles oncogénicas de la línea celular de cáncer de boca, se empleó OSC2, ARN corto horquilla (shRNA) de interferencia para silenciar
DSPP Hoteles en OSC2 células.
Metodología /Principales conclusiones
Varias regiones del DSPP transcripción fueron objeto de interferencia shRNA utilizando partículas de lentivirus HDSP-shRNA diseñados para silenciar la expresión del gen DSPP. Control de shRNA plásmido que codifica una secuencia codificada incapaz de degradar cualquier ARNm celular conocida se utiliza para el control negativo. Después de la selección de puromicina líneas estables de
DSSP
-silenced OSC2 células, características fenotípicas de la carcinogénesis oral, se analizaron por Western blot y análisis de RT-PCR, MTT (viabilidad celular), la formación de colonias, modificado cámara de Boyden (migración y la invasión), y citometría de flujo (del ciclo celular y la apoptosis) análisis.
DSPP
células OSC2 -silenced mostraron alteración de la morfología celular, viabilidad reducida, disminución de la capacidad de colonias de la formación, la disminución de la migración y la invasión, G0 /detención del ciclo celular G1, y el aumento de la sensibilidad de las células tumorales a la apoptosis inducida por cisplatino. Por otra parte, la MMP-2, MMP-3, MMP-9, VEGF, Ki-67, p53, y EGFR se redujeron regulado. Hubo una correlación directa entre el grado de
DSPP
-silencing y supresión de MMP, como se indica por regresión de mínimos cuadrados: MMP-2 {(y = 0.850x, p & lt; 0,001) (y = 1.156x, p & lt ; 0,001)}, MMP-3 {(y = 0.994x, p & lt; 0,001) (y = 1.324x, p = 0,004)}, y MMP-9 {(y = 1.248x, p = 0,005, y = 0,809, p = 0,013)}.
Conclusiones /Importancia
DSPP
-silencing en la celda OSC2 disminuido características más destacadas de la tumorigénesis oral y proporciona la primera evidencia funcional de un papel clave potencial para DSPP en la biología del cáncer oral. La baja regulación de MMP-2, MMP-3, MMP-9, p53 y VEGF en
DSPP
células OSC2 -silenced proporciona un marco funcional /molecular significativo para descifrar los mecanismos de actividades DSPP en la biología del cáncer oral .
Visto: Joshi R, Tawfik A, Edeh N, V McCloud, Looney S, Lewis J, et al. (2010) La dentina Sialophosphoprotein (DSPP) Inhibe el silenciamiento de genes clave tumorigenos Las actividades en la línea celular de cáncer oral humana, OSC2. PLoS ONE 5 (11): e13974. doi: 10.1371 /journal.pone.0013974
Editor: Torbjorn Ramqvist, Karolinska Institutet, Suecia