Extracto
Introducción
La galectina-9 (Gal-9) induce la adhesión y agregación de ciertos tipos de células e inhibe la metástasis de las células tumorales. De células T a inmunoglobulina y de mucina molécula que contiene el dominio-3-3 (TIM-3) juega un papel fundamental en la regulación inmune. El objetivo de este estudio es investigar sus valores pronósticos Gal-9 y TIM-3 alteraciones en el cáncer gástrico y.
Métodos
Gal-9 y Tim-3 de expresión se evaluó usando un pañuelo de papel método de inmunohistoquímica microarrays en 305 cánceres gástricos, de los cuales 84 habían emparejado muestras normales adyacentes. Las líneas celulares SGC-7901, BGC-823, MGC-803, MKN45 y también se tiñeron GES-1. Las correlaciones fueron analizados entre los niveles de expresión de Gal-9 y Tim-3 parámetros de proteínas y tumorales o los resultados clínicos.
Resultados
Gal-9 y Tim-3 tiñeron positivo en las células tumorales en el 86,2% (263/305), y 60,0% (183/305) de los pacientes con cáncer gástrico, respectivamente. Gal-9 expresión fue significativamente mayor en el cáncer de que en la mucosa normal (
P
& lt; 0,001). Reducción de la expresión de Gal-9 se asoció con invasión linfático-vascular, metástasis en los ganglios linfáticos, metástasis a distancia y peor estadificación TNM (
P = 0,034
,
P = 0,009
,
P
= 0,002 y
P = 0,043
, respectivamente). Por el contrario, Tim-3 expresión fue significativamente menor en el cáncer que en mucosa de control (
P
& lt; 0,001). Los pacientes con invasión linfático vascular tenían altos niveles de expresión de Tim-3 (
P Hotel & lt; 0,001). Por otra parte, el análisis multivariante muestra que tanto la alta expresión de Gal-9 y baja expresión Tim-3 se asociaron significativamente con la supervivencia global de largo (
P = 0,002
,
P
= 0,010, respectivamente); la combinación de Gal-9 y Tim-3 de expresión fue un predictor pronóstico independiente para los pacientes con cáncer gástrico (RR: 0,43; IC del 95%: 0,20-0,93).
H. pylori
estado de infección no se asoció con Gal-9 y Tim-3 de expresión (
P = 0,102
,
P = 0,565
).
Conclusión
Los resultados sugieren que la expresión de Gal-9 y Tim-3 en las células tumorales puede ser un potencial, factor de pronóstico independiente para los pacientes con cáncer gástrico. Gal-9 y TIM-3 pueden desempeñar un papel importante en la carcinogénesis gástrica
Visto:. J Jiang, Jin M-S, F Kong, Cao D, Ma H-X, Jia Z, et al. (2013) Disminución de la galectina-9 y el aumento de Tim-3 Expresión están relacionados con un mal pronóstico en cáncer gástrico. PLoS ONE 8 (12): e81799. doi: 10.1371 /journal.pone.0081799
Editor: Pierre Busson, Instituto Gustave Roussy de Cancerología, Francia |
Recibido: 6 Enero, 2013; Aceptado: 26 Octubre 2013; Publicado: December 10, 2013
Derechos de Autor © 2013 Jiang et al. Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos de la licencia Creative Commons Attribution License, que permite el uso ilimitado, distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que el autor original y la fuente se acreditan
Financiación:. Este estudio ha sido apoyado por la Fundación Nacional de Ciencias Naturales de China (81072369 y 81273065). Los donantes no tenía papel en el diseño del estudio, la recogida y análisis de datos, decisión a publicar, o la preparación del manuscrito
Conflicto de intereses:.. Los autores han declarado que no existen intereses en competencia
Introducción
el cáncer gástrico sigue siendo el cuarto cáncer más comúnmente diagnosticado y es la segunda causa principal de muertes relacionadas con el cáncer en todo el mundo [1]. Las galectinas son un grupo de proteínas que se unen beta-galactósidos través de elementos de secuencias evolutivamente conservadas del dominio de reconocimiento de carbohidratos (CRD) [2], [3]. La familia de galectina contribuye a la transformación neoplásica, la supervivencia de células tumorales, invasión de tejidos y la metástasis de varios tipos de cáncer, incluyendo el cáncer gástrico [4]. Estudios anteriores mostraron que el nivel de expresión de galectina-3 fue significativamente mayor en los carcinomas gástricos en comparación con el tejido normal adyacente. La galectina-3 y galectin-4 pueden ser marcadores tumorales útiles para los cánceres gástricos con respecto a la progresión del tumor y la potencialidad de metástasis de ganglios linfáticos, especialmente en ciertos tipos histológicos de cáncer gástrico [5], [6]. La galectina-9 (Gal-9) es un nuevo miembro de la familia de la proteína galectina [7]. En los últimos años, un papel importante ha surgido para el Gal-9 en la salud y la enfermedad [8]. En la fisiología normal, Gal-9 parece ser un modulador de pivotamiento de la inmunidad de células T mediante la inducción de la apoptosis en las subpoblaciones de células T específicas. Debido a que estas poblaciones de células T están asociados con autoinmunidad, enfermedad inflamatoria, y rechazo de injerto, se postuló que la aplicación de Gal-9 exógeno puede limitar la actividad de las células T patógenas [9], [10]. Además, Gal-9 se localiza en el citoplasma y en la superficie celular de las células y parece estar liberado de las células tumorales [11]. En tumores sólidos, los estudios disponibles sugerido que Gal-9 tiene una función de supresor de tumores, con pérdida de Gal-9 está estrechamente asociado con el aumento de la metástasis y alta recurrencia [12], [13], [14], [15]. Kadowaki et al también mostró que Gal-9 de señalización puede prolongar la supervivencia mediante la inducción de macrófagos de diferenciarse en macrófagos de células dendríticas plasmacitoides como en un modelo de cáncer de pulmón de ratón [16]. Estas datas más que presentan Gal 9 puede ser un posible factor pronóstico con un potencial anti-metastásico. Sin embargo, la expresión de Gal-9 aún no se ha investigado en el cáncer gástrico.
immunoglobulin- de células T y de mucina molécula que contiene el dominio-3-3 (Tim-3) es un tipo T helper 1 (Th1) específico de molécula de la superficie celular que parece regular las respuestas Th1 y la inducción de tolerancia periférica [17], [18]. Recientemente, se informó de la expresión aberrante Tim-3 en células de melanoma, lo que contribuye a la capacidad de adherencia baja de las células tumorales y promover la supervivencia del tumor [19]. Zhuang y otros también demostró el importante papel de Tim-3 en las células tumorales como un factor pronóstico independiente para pacientes con no pequeñas de cáncer de pulmón de células [20]. Zhu C et al demostraron que Gal-9 es el ligando Tim-3, y sugirió que la vía de Tim-3-Gal-9 puede haber evolucionado para garantizar la terminación efectiva del efector células Th1 [21]. Para investigar la relación entre Tim-3-Gal-9 vía y el progreso de cáncer gástrico, la expresión de la proteína Gal-9 y Tim-3 se investigó en 305 pacientes con cáncer gástrico, de los cuales 84 casos habían pareadas muestras de tejidos normales adyacentes. Asociaciones de la expresión de la proteína con características clínicas de los pacientes y el pronóstico también fueron explorados en este estudio.
Métodos
poblaciones de estudio
Trescientos cinco pacientes, incluyendo 231 hombres y 74 mujeres con cáncer gástrico que se sometieron a cirugía entre agosto de 2000 y diciembre de 2010 a primer hospital de la Universidad de Jilin se inscribieron en este estudio. Los pacientes no recibieron ningún tratamiento antes de la operación quirúrgica. El diagnóstico de cáncer gástrico se hizo sobre la base de los hallazgos morfológicos e inmunohistoquímicos evaluados por dos patólogos independientes (MSJ y YPW). Los cánceres gástricos se eliminaron mediante escisión quirúrgica; muestras epiteliales gástricas normales adyacentes también se obtuvieron de 84 pacientes para la comparación. edad de los pacientes osciló entre 32 y 87 años, con una edad media de 64 años. escrito el consentimiento informado se obtuvo de todos los pacientes y el protocolo de estudio fue aprobado por el comité de ética de la Primer Hospital de la Universidad de Jilin.
Cultivo de células
líneas celulares de cáncer gástrico humano SGC-7901 , BGC823, MGC803, MKN45 fueron adquiridos a Departamento de Cirugía gástrica y colorectal, primer hospital de la Universidad de Jilin. La línea inmortalizada de células mucosas gástrica humana GES-1 proporcionado por el Hospital del Cáncer de la Universidad de Beijing. Las células se cultivaron en medio RPMI-1640 que contiene 10% de suero bovino fetal inactivado por calor (FBS) y 100 ng /ml cada uno de penicilina y estreptomicina en una incubadora (50 ml /l de CO2) a 37 ° C. Medio en las células se cambió cada 2-3 días. Las células en fase de crecimiento logarítmico se recogieron para experimentos adicionales.
La inmunohistoquímica
En resumen, las secciones (4 micras de ancho) de la microarry tejido (TMA) bloquea fueron desparafinados y deshidratados, al calor recuperación del epítopo inducida se llevó a cabo mediante la inmersión en las diapositivas 10 mmol tampón citrato (pH 6,0) y la ebullición de la memoria intermedia de 10 millas en una olla a presión. Después de bloquear con 3% de H
2O
2, Todas las secciones se incubaron durante la noche a 4 ° C con anticuerpo humano galectina-9 policlonal anti (1:250 diluida, ab69630, Abcam, UK) y anti Tim-3 humana anticuerpo policlonal (8 g /ml, AF2365, R & amp; D Systems, Minneapolis, EE.UU.), 3,3-diaminobencidina (DAB) se utilizó como cromógeno, y las secciones se counterstained con hematoxilina. Para los controles negativos, diapositivas tumorales se trataron con los isotipos de IgG de conejo (IgG de conejo normal, sc-2027, Santacruz, EE.UU.) y de cabra (IgG de cabra normal, sc-2342, Santacruz, EE.UU.) a la sustitución del anticuerpo primario, todos negativos controles demostraron insignificante mancha de fondo. líneas celulares (SGC-7901, BGC-823, MGC-803, MKN45 y GES-1) fueron cultivadas de forma rutinaria, los pellets celulares de cáncer gástrico se incluyeron en parafina y se procesan en forma de diapositivas de tejidos. líneas celulares de cáncer gástrico se tiñeron con el mismo método.
Los portaobjetos teñidos fueron evaluados por dos patólogos independientes (MSJ y YPW), que fueron cegados a los datos clínicos y resultados, ampliamente aceptados El análisis semicuantitativo (HSCORE se utilizó el sistema) para evaluar la intensidad de la tinción y los porcentajes de las células teñidas con una magnitud específica de intensidad. El HSCORE se calculó usando la siguiente ecuación: HSCORE = ΣPi (i) (i = 0,1,2,3, Pi = 0~100%). i es la intensidad de la tinción, es decir, sin tinción = 0, débil tinción = 1, tinción moderada = 2 y fuerte tinción = 3. Pi representa porcentajes de células teñidas con intensidades que varían de 0 a 100. Por lo tanto, la HSCORE va de 0 a 300, HSCORE & gt; 0 se considera como la tinción positiva y HSCORE = 0 se considera como una tinción negativa completa. Los resultados discrepantes de intensidad de la tinción de dos patólogos se resolvieron mediante la revisión de los casos juntos y ponerse de acuerdo sobre los resultados, y los resultados discrepantes de porcentajes de células teñidas se resolvieron mediante el cálculo de las medias de las puntuaciones.
Western Blot
Para confirmar la exactitud de semi-cuantificación de inmuno-histología, el Western Blot se administraron en las células gástricas líneas de cáncer. Las células se lisaron con tampón de lisis frío y se centrifuga a 12.000 g durante 10 minutos, tampón de carga se mezclaron con lisados celulares y se hierve durante 5 minutos a 95 ° C. 10 g de proteína total se cargó en gel de poliacrilamida SDS discontinua 10% para la electroforesis y después se transfirió a membranas de fluoruro de polivinilideno. Las membranas se bloquearon en 5% de albúmina de suero bovino y se incubaron con anticuerpos primarios (anti-Gal 9 y anti Tim-3) durante la noche a 4 ° C en solución salina tamponada con Tris con Tween 20 al 0,1%. Después del lavado, las membranas se incubaron en anticuerpos conjugados con peroxidasa de rábano picante durante 1 hora a temperatura ambiente. Las membranas se incubaron a continuación y se tomaron y analizaron las imágenes de Western Blot. β-actina se utilizó como control interno y todos los valores densitométricos se normalizaron contra el valor relativo β-actina.
Determinación de
H.pylor
i infección
Entre 305 casos de cáncer gástrico, las muestras de sangre se obtuvieron de 104 pacientes para el examen de
H.pylor
i infección antes de la operación quirúrgica. se dejaron 4 ml de muestras de sangre en ayunas a temperatura ambiente durante 30 minutos y después se centrifugaron. El suero se extrae y se almacena a -80 ° C. inmunoglobulina de suero anticuerpos (Ig) G a
H. pylori
fueron detectados por
H.pylor
i-IgG ligado a enzimas (ELISA) kit (Biohit, Helsink, Finlandia). Los títulos de anticuerpos se definieron por la densidad óptica (DO) valora según el protocolo del fabricante y los títulos más alto que el valor de corte de 30EIU fueron considerados como positivos para
H. pylori
infección. Las muestras de control de calidad kit mostraron coeficiente de variación de 4,5% para
H
.
pylori
examen de la infección.
Análisis
Estadísticas
El HSCORE de Gal- 9 y Tim-3 de expresión se presentan como mediana (cuartiles). Los Wilcoxon de pares relacionados de prueba de rangos con signo y la prueba de Mann-Whitney o la prueba de Kruskal-Wallis H se utilizaron cuando se comparan grupos pareados y dos grupos independientes, respectivamente. El método de Kaplan-Meier se utilizó para estimar la tasa de supervivencia global, y se analizaron las diferencias de supervivencia mediante la prueba de log-rank. El modelo de riesgos proporcionales de Cox se utilizó para calcular los riesgos relativos (RR) y los intervalos de confianza del 95% (IC del 95%) después de ajustar por la edad (variable de escala), el sexo (variable nominal), invasión linfática-vascular (variable nominal) y estadificación TNM (variable de escala). Todas las pruebas estadísticas fueron de dos colas y
P
-valores inferior a 0,05 se consideraron estadísticamente significativos. Todos los análisis se realizaron con el paquete estadístico SPSS 18.0 (SPSS Inc., EE.UU.).
Resultados
Expresión de líneas celulares de cáncer gástrico Gal-9 y Tim-3 en el cáncer gástrico y
el análisis inmunohistoquímico demostró que Gal-9 y Tim-3 tiñeron positivo sobre las células tumorales en 86,2% (263/305), 60,0% (183/305) de los pacientes con cáncer gástrico, respectivamente. La mayoría de las células cancerosas en el tejido de cáncer gástrico mostraron potente citoplásmica Gal-9 inmunotinción, pero un pequeño número de células de cáncer gástrico mostraron inmunotinción negativa para Gal-9 (Figura. 1A, 1B, 1C). Las células tumorales gástricas mostraron una clara positividad citoplasmática y nuclear para Tim-3 inmunotinción (Figura. 1D, 1E, 1F, 1G).
células tumorales gástricas mostraron una clara citoplasmática (D), la positividad nuclear (E), o negativo para Tim-3 inmunotinción (G). (F) mostró una débil tinción positiva Tim-3 en mucusa normales gástrico. Las líneas celulares SGC-7901, BGC-823 y el MGC-803 y GES-1 mostró débil frente al citoplasma de Gal-9 inmunotinción (H, BCG-823), pero MKN45 mostraron inmunotinción negativa para Gal-9 (I). Cuatro líneas celulares de cáncer gástrico también mostraron una fuerte positividad citoplasmática y nuclear para Tim-3 tinción (línea celular J, BCG-823). Sin embargo, las células GES-1 mostró tinción negativa para Tim-3 (K). magnificaciones original, x200 y x400.
Entre 84 muestras pareadas, Gal-9 tinción positiva se encontró en 68/84 (81,0%) y el cáncer gástrico en las células basales de 51/84 (60,7%) mucosa normal, respectivamente (
P
= 0,004). A la inversa, Tim-3 tinción positiva se encontró 55/84 (65,5%) en el cáncer gástrico y 72/84 (82,7%) en mucosa normal, respectivamente (
P
= 0,002). Además, las líneas celulares SGC-7901, BGC-823and MGC-803 y GES-1 mostró débil citoplásmica Gal-9 inmunotinción (Figura. 1H), pero MKN45 mostraron inmunotinción negativa para Gal-9 (Figura. 1I). Cuatro líneas celulares de cáncer gástrico también mostraron una fuerte positividad citoplasmática y nuclear para Tim-3 tinción (Figura. 1J). Sin embargo, GES-1 en las células mostraron tinción negativa para Tim-3 (Figure.1K).
La detección de Gal-9 y la activación Tim-3 fue validado de las mismas células por Western Blot, que se muestra en Figura 2.
Tenga en cuenta que tanto Tim-3 y Gal-9 fueron detectados en líneas celulares de cáncer gástrico MGC803, SGC7901, y BGC823, ausencia de activación Gal-9 en células MKN45 y negativo de Tim-3 inmunotinción en GES-1 también fueron confirmados
Gal-9 expresión en lesiones de cáncer fue significativamente superiores a los de la mucosa normal (mediana de HSCORE:. 140 vs 20;
P Hotel & lt; 0,001 . Figura 3A). Tim-3 HSCORE en lesiones de cáncer fue significativamente más bajos que en la mucosa normal (mediana de HSCORE: 40 vs 170;
P Hotel & lt; 0,001 Figura 3B).
Sin embargo, no hay diferencias de Gal. -9 (3c) o Tim-3 expresiones (3d) se encontraron entre los pacientes con
H
.
pylori
infección (positiva) y sin
H. pylori
infección ( negativo).
Gal-9 y Tim-3 niveles de expresión y
H.pylor
i infección
a partir de 104 pacientes con cáncer gástrico probados para
H .pylor
i anticuerpos, la tasa total positivo de la infección por
H.pylor
yo era del 65,4%. En el análisis de subgrupos de edad, el
H.pylor
i tasa de infección fue mayor en el grupo de 45-65 años, en comparación con los menores de 45 años de edad, o grupos de más de 65 años de edad grupos. Los resultados no mostraron correlación entre el
H.pylor
i infección y la Gal-9 y Tim-3 de expresión (
P = 0,102
,
P = 0,565
). (Figura 3C, 3D).
Correlación de Gal-9 y Tim-3 de expresión con parámetros clínico
Como se muestra en la tabla 1, HSCORE de Tim-3 fue significativamente mayor en los pacientes masculinos que pacientes de sexo femenino (
P
= 0,010). los niveles de expresión de Tim-3 se correlacionaron positivamente con la edad (
P
= 0,004), sin embargo los niveles de expresión de Gal-9 se correlacionaron negativamente con la edad (
P = 0,049
). No hubo diferencias significativas en los niveles de expresión de Gal-9 y Tim-3 entre los subgrupos de la infiltración venosa, en pacientes con infiltración venosa, la HSCORE mediana de Gal-9 fue significativamente menor (
P = 0,034
) y Tim- 3 fue significativamente mayor (
P Hotel & lt; 0,001). De acuerdo con los estadios TNM, se observó una mayor HSCORE en pacientes de tumores en estadio I en comparación con otras etapas (
P = 0,043)
. La significativamente mayor HSCORE de Gal-9 fue encontrado en pacientes sin metástasis en los ganglios linfáticos (
P
= 0,009), y en pacientes sin metástasis a distancia (
P = 0,022
). También se analizó la expresión de Gal-9 y Tim-3 de acuerdo con la diferenciación del tumor (alta, media y baja) y la profundidad de la invasión (T1-T4), no se encontraron diferencias significativas. Las características clínicas de los sujetos se resumen en la tabla 1 en detalle.
High Gal-9 expresión y la expresión negativa Tim-3 se asociaron significativamente con la supervivencia global a largo
Información de seguimiento estaba disponible para todos los 305 pacientes, que abarca un período de 3 a 135 meses (mediana 40 meses). Ningún paciente falleció de complicaciones postoperatorias dentro de los 30 días del inicio del período de estudio, y 120 (39,3%) pacientes murieron durante el seguimiento. Kaplan-Meier de supervivencia se trazaron según la HSCORE (Negativo, HSCORE≤100, HSCORE≤200 y HSCORE & gt; 200). La tasa de supervivencia global fue significativamente mayor en Gal-9 HSCORE & gt; 200 grupo que otros grupos (log-rank test,
P = 0,011)
. Como las curvas de supervivencia de grupo negativo, el grupo y el grupo HSCORE≤100 HSCORE≤200 fueron similares, los combinamos para su posterior análisis, y la curva de supervivencia de Kaplan-Meier mostraron en Figure.4A (
P
= 0,002). Los pacientes con tumores Tim-3-negativos tuvieron una supervivencia global más larga. Los mismos resultados se obtuvieron cuando todos los pacientes positivos de expresión se combinaron (Figure.4B, log-rank test,
P
= 0,01). Kaplan-Meier de supervivencia también se representaron de acuerdo con el Gal-9 y Tim-3 co-expresión, la tasa de supervivencia global de los pacientes que estaban Gal-9 HSCORE & gt; 200 y Tim-3 negativo fue significativamente mayor, y los pacientes que fueron Gal -9 HSCORE≤200 y Tim-3 positivos fue significativamente menor (Figure.4C, log-rank test,
P Hotel & lt; 0,001).
Combinación de Gal-9 y Tim-3 de expresión era independiente marcador pronóstico
la Tabla 2 muestra el análisis multivariado de factores relacionados con el pronóstico del paciente. El análisis univariado mostró que los siguientes factores se relacionaron significativamente con la supervivencia postoperatoria: estadio TNM, la infiltración venosa y la combinación de Gal-9 y Tim-3 de expresión (
P Hotel & lt; 0,001,
P
= 0,001,
P Hotel & lt; 0,001, respectivamente). Después de ajustar por edad y género, análisis de regresión multivariante indicó que Gal-9 y Tim-3 co-expresión y el estadio TNM fueron factores pronósticos independientes, pero la invasión linfático vascular no era un factor pronóstico independiente.
Discusión
en este estudio, se encontraron mayores expresiones de Gal-9 en pacientes sin invasión linfático-vascular, metástasis en los ganglios linfáticos y metástasis a distancia. Por otra parte, las expresiones más altas de Gal-9 está estrechamente asociada con una mejor supervivencia. Estos resultados son consistentes con un informe anterior en el cáncer de mama, carcinoma hepatocelular, carcinoma cervical y el melanoma maligno [12], [13], [14], [15], [22]. expresión Gal-9 en las lesiones de cáncer gástrico fue significativamente mayor que en los tejidos normales adyacentes apareados gástricos epiteliales, este resultado nos llevó a formular la hipótesis de que la actividad de Gal-9 exhibición anti-tumor en los tejidos portadores de tumores a través de la agregación incresed de células tumorales [23] . Sin embargo, este hallazgo es diferente de las observaciones de la Liang. Encontraron que Gal-9 expresión en tejidos de cáncer de 38 de carcinoma de células escamosas (SCC cervical) pacientes invasivos fue significativamente menor que en epitelio escamoso cervical normal de 23 controles sanos. Pero Gal-9 expresiones en bien diferenciado SCC fueron significativas más alta en comparación con aquellos en las lesiones intrapiehelial escamosa de alto grado [14]. Por desgracia, no se puede comparar la expresión de Gal-9 en tejidos de cáncer a los tejidos normales adyacentes apareados. La discrepancia de diferentes estudios puede ser debido a la variación individual de estado inmune, las causas de la inflamación y el tejido especificidad de Gal-9 expresión. Además, varias enfermedades son sensibles a la eliminación apoptótica por Gal-9 recombinante. En consonancia con esta observación, lo que sugiere que gal-9 puede ser un candidato atractivo para el tratamiento del cáncer. El tratamiento con Gal-9 recombinante puede prevenir la propagación metastásica del cáncer [16], [24], [25].
Tim-3 es la molécula de superficie que puede identificar específicamente las células Th1 de las células Th2 en ratones y los seres humanos [26]. También se ha encontrado en las células T CD8 + citotóxicos, Th17, Treg, monocitos, células dendríticas, mastocitos, células asesinas naturales (NK), melanoma, SCC y cáncer de pulmón de células [19], [20], [27], [ ,,,0],28], [29], [30]. Aquí, por primera vez, hemos demostrado Tim-3 expresión en células de cáncer gástrico y líneas celulares. Además, se encontró una correlación significativa entre Tim-3 en las células cancerosas y los parámetros clínico-patológicas de invasión linfática-vascular. Por otra parte, se encontró que la tasa de supervivencia de los pacientes con positivos Tim-3 tumores de expresión fue significativamente menor que aquellos con la expresión negativa Tim-3. El univariable y multivariable también reveló que Tim-3 sobreexpresión en células tumorales asociados con un mal pronóstico del cáncer gástrico.
Tim-3 es una molécula de gran alcance inmunoinhibitoria involucrados en la tolerancia inmune, y las respuestas autoinmunes. Los mecanismos para la regulación de Tim-3 de expresión en las células tumorales todavía no se entienden completamente. Wiener et al informaron de que el TGF-β1 expresión elevada Tim-3, lo que resultó en inmunosupresión local [19]. Mientras tanto, los niveles de TGF-ß1 alta tumorales se asociaron significativamente con una menor supervivencia de los pacientes con cáncer gástrico. Estudios previos han identificado Tim-3 como un regulador negativo de T helper 1 células beta respuestas [26]. Recientemente, sin embargo, nuevas investigaciones muestran que Tim-3 también puede promover una respuesta pro-inflamatoria, lo que indica que Tim-3 tiene un doble papel en la inmunidad [31], [32]. Por lo tanto, los niveles de expresión de Tim-3 en células de cáncer pueden asociar con citoquina producir durante el proceso de la carcinogénesis gástrica. Por otra parte, estudios recientes han identificado que Tim-3 sobreexpresión se asocia con menor supervivencia global de los cánceres epiteliales incluyendo cáncer de pulmón y el cáncer de cuello de útero [20], [30], nuestros resultados son consistentes con estos informes. Más importante que todos estos hallazgos, Cao et al confirmó que la regulación negativa de la expresión de Tim-3 en células HeLa inhibió significativamente tanto la migración y la invasión de células Hela [30]. Estos resultados sugieren que Tim-3 no sólo suprimir la inmunidad anti-tumor, sino que también promueven directamente el progreso del cáncer.
Identificación de Gal-9 como un ligando para Tim-3 ahora se ha establecido firmemente la Tim-3-Gal -9 vía como un importante regulador de la inmunidad Th1, lo que resulta en la apoptosis de las células Th1 [21], [33]. En este estudio, se encontró que tanto la mayor expresión de Gal-9 y la expresión negativa Tim-3 se asociaron significativamente con una mejor supervivencia global (
P = 0,002
,
P
= 0,010, respectivamente); la combinación de Gal-9 y Tim-3 de expresión era marcador pronóstico independiente en el cáncer gástrico. Estos resultados indican que la vía de Tim-3-Gal-9 puede desempeñar un papel importante en la carcinogénesis gástrica.
Además,
H. pylori
es un carcinógeno del grupo 1 sobre la base de Organización Mundial de la Salud (OMS) y la Agencia Internacional para la Investigación sobre el cáncer (IARC) [34]. Se ha aceptado generalmente que el cáncer gástrico es un proceso de múltiples etapas que implica una serie de eventos, tales como la gastritis atrófica, la metaplasia intestinal, displasia y carcinoma. Los informes anteriores han observado que la interacción Tim-3-Gal-9 puede tener un efecto notable sobre inflamatoria [26], [35], [36], [37]. También se examinó si
H. pylori
la infección puede afectar los niveles de expresión de Gal-9 y Tim-3. Sin embargo, en el presente estudio, los niveles de Gal-9 y Tim-3 de expresión no fueron estadísticamente diferentes entre el grupo H. pylori
y (+) del H. pylori
- grupo () en el cáncer gástrico (
P = 0,101
,
P = 0,565
). Se necesitan más investigaciones con additionalsamples definir las funciones de Gal-9 y Tim-3 en
H. pylori
: infección.
En conclusión, este estudio ha demostrado la expresión de Gal-9 y Tim-3 en el cáncer gástrico. Es importante destacar que los análisis multivariados revelaron el importante papel de Gal-9 y Tim-3 como un factor pronóstico independiente para los pacientes con cáncer gástrico. Por lo tanto, el estado de Gal-9 y Tim-3 podría ser determinada en el examen clínico y puede tener un valor tratamiento en el futuro [38], [39].
Reconocimientos
Los autores sería agradecer al Dr. Jennifer S. Davis, Sr. Chang Song-Guo y la Sra Ying canción por su apoyo técnico.