Extracto
Las alteraciones de microsatélites elevados en Seleccionado Tetranucleotide repite (EMAST) es una firma genética que se encuentra en un máximo de 60% de los cánceres colorrectales (CRC) que es causada por una disfunción somática de la proteína de reparación de genes de ADN (MMR) hMSH3. Hemos demostrado anteriormente
in vitro
que el reconocimiento de 5-fluorouracilo (5-FU) en el ADN y la posterior citotoxicidad fue cuando los complejos MMR más eficaces tanto hMutSα (hMSH2-hMSH6 heterodímero) y hMutSβ (hMSH2-hMSH3 heterodímero) Estuvieron presentes, en comparación con hMutSα & gt; hMutSβ solo. Hemos probado la respuesta si los pacientes con CRC EMAST (hMutSβ defectuoso) habían disminuido a la quimioterapia adyuvante con 5-FU, en paralelo
in vitro
hallazgos.
Se analizaron 230 pacientes con estadio II /III cánceres colorrectales esporádicos para los que hemos tenido tratamiento y supervivencia a los datos 5-FU. ADN Archivo se analizó para EMAST (& gt; 2 de 5 marcadores mutados entre UT5037, D8S321, D9S242, D20S82, D20S85 loci tetranucleotide). las curvas de supervivencia de Kaplan-Meier se generaron y se utilizó un análisis multivariado para determinar la contribución al riesgo.
Se identificaron 102 (44%) de cáncer EMAST. Noventa y cuatro pacientes (41%) recibieron 5-FU adyuvante de la quimioterapia, y la mediana de seguimiento de todos los pacientes fue de 51 meses. Los pacientes con EMAST CRCs demostraron una mejor supervivencia con adyuvante 5FU en la misma medida que los pacientes con no EMAST CRCs (P & lt; 0,05). Se observó ninguna diferencia en la supervivencia entre los pacientes con estadio II /III supervivencia EMAST y cánceres no EMAST (P = 0,36).
Se ha mejorado para la fase II /III de la quimioterapia los pacientes después de CRC basada en 5-FU adyuvante independientemente de su estado EMAST. La pérdida de la contribución de hMSH3 para el 5-FU citotoxicidad no puede afectar negativamente a la evolución del paciente, lo que contrasta pacientes cuyos tumores carecen por completo la función del ADN MMR (MSI-H) guía
Visto:. Hamaya Y, Guarinos C, Tseng-Rogenski SS, Iwaizumi M, Das R, R Jover, et al. (2015) Eficacia de la terapia adyuvante 5-fluoruracilo, en pacientes con EMAST-positivo en estadio II /III de cáncer colorrectal. PLoS ONE 10 (5): e0127591. doi: 10.1371 /journal.pone.0127591
Editor Académico: Jian-Xin Gao, Shanghai Jiao Tong University School of Medicine, CHINA
Recibido: 22 Enero, 2015; Aceptado: April 16, 2015; Publicado: 21 de mayo de 2015
Derechos de Autor © 2015 Hamaya et al. Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos de la licencia Creative Commons Attribution License, que permite el uso ilimitado, distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que el autor original y la fuente se acreditan
Disponibilidad de datos: Todos los datos relevantes están dentro del apoyo de sus archivos de información en papel y
Financiación:. Este trabajo fue apoyado por el Servicio de Salud Pública de Estados Unidos (DK067287 y CA162147) y el Instituto A. Alfred Taubman de Investigación médica de la Universidad de Michigan. Los donantes no tenía papel en el diseño del estudio, la recogida y análisis de datos, decisión a publicar, o la preparación del manuscrito
Conflicto de intereses:.. Los autores han declarado que no existen intereses en competencia
Introducción
el cáncer colorrectal (CCR) es una de las causas más frecuentes de mortalidad relacionada con el cáncer en todo el mundo [1]. Sólo en los Estados Unidos, 50.000 personas morirán de CRC durante el 2014 [2]. Los pacientes que no tienen metástasis distante CRC están potencialmente curados a través de la cirugía, y de cinco años las tasas de supervivencia para los pacientes con estadio II y estadio III CRC aproximada del 75% y 55%, respectivamente [3, 4]. Para minimizar la recaída de la terapia quirúrgica, adyuvante 5-fluorouracilo (5-FU) se ha convertido en estándar para algunos pacientes de alto riesgo a la fase II CRC y todos los pacientes con estadio III CRC, ya que mejora las tasas de supervivencia en un 10-20% [ ,,,0],4, 5]. 5-FU ejerce varias acciones metabólicas que inducen citotoxicidad en células de cáncer, incluyendo (a) la inhibición de la timidilato sintetasa (que cataliza la conversión de monofosfato de desoxiuracilo (volcado) para desoxitimidina monofosfato (dTMP), lo que lleva a una deficiencia de nucleótidos de timina para la síntesis de DNA y la posterior sustitución de nucleótidos uracilo y 5-fluorouracilo para la síntesis de ADN, y (b) la incorporación en el ARN [5].
la incorporación de 5-FU en el ADN está en que el desajuste de reparación del ADN (MMR) sistema reconoce , se une, y ejecuta algunos de citotoxicidad del 5-FU, independiente de 5-FU en efecto de ARN [6-11]. los complejos de reconocimiento de ADN MMR, hMutSα y hMutSβ, se compone de heterodímeros de las proteínas MMR hMSH2-hMSH6 y hMSH2- hMSH3, respectivamente [12, 13]. hMutSα reconoce mispairs de una sola base después de la síntesis de ADN y la inserción de corto /bucles de deleción (lazo, I /D) en las secuencias de ADN microsatélite repetitivas, mientras que hMutSβ reconoce más grande de e /bucles D [12, 13]. Una vez un mispair o I /es reconocido bucle D, el hMutLα compleja ejecución (un heterodímero de las proteínas MMR hMLH1 y hPMS2) se une a hMutSα o hMutSβ para señalar otras proteínas para la escisión y la re-síntesis del ADN afectado, o cometa que la célula la muerte celular programada si la reparación es inútil [12, 13]. Con respecto al 5-FU, las células CRC completamente deficientes en el ADN MMR son & gt; 20 veces más resistentes a 5-FU citotóxico matanza [6]. Proteína-DNA ensayos de unión y los experimentos de resonancia de plasmón superficial demuestran que hMutSα es el principal complejo de reconocimiento para 5-FU en el ADN incorporado, ya que tiene la más alta afinidad por la unión y demuestra el mayor grado de citotoxicidad [8, 9]. El hMutSβ complejo, a pesar de su principio de funcionamiento en los bucles más grandes I /D de unión, también se puede unir 5-FU y una señal de citotoxicidad, pero en un grado menor que hMutSα [9, 10]. Cuando ambos hMutSα y hMutSβ están presentes, se consigue el máximo nivel de 5-FU citotoxicidad, lo que indica que ambos complejos de reconocimiento de ADN MMR sinergia para contribuir a 5-FU citotoxicidad, en comparación con hMutSα y hMutSβ solo [9, 10]. Por lo tanto, los complejos de reconocimiento de ADN MMR tienen un nivel jerárquico para quimiosensibilidad de 5-FU citotoxicidad. Ausencia de ambos hMutSα y hMutSβ evita los complejos de obligar a 5-FU en el ADN, y la falta de hMutLα (hMLH1-hPMS2 heterodímero) elimina el componente de ejecución de MMR, con ambos escenarios causando ausencia completa de ADN MMR y abortar 5-FU inducida citotoxicidad [8-10].
Estos resultados tienen implicaciones para el ~ 15% de los pacientes con CRC ADN MMR tumores deficientes que reciben terapia con 5-FU. Nosotros y otros han demostrado previamente que la fase II /III pacientes con CCR esporádicos cuyos tumores demostrar inestabilidad de microsatélites-alta (MSI-H) (es decir, son MMR deficiente) no tienen mejoría en la supervivencia con el uso de 5-FU adyuvante terapia, mientras que los pacientes cuyos tumores retener MMR mejorar su supervivencia [14-19]. Por lo tanto, en pacientes con CRC, competencia del tumor para el ADN MMR es importante para una respuesta de supervivencia a 5-FU.
alteraciones de microsatélites elevada a tetranucleotide repite seleccionados (EMAST) es una firma genética observada en hasta el 60% de los CCR [20-24]. La presencia de EMAST está fuertemente asociado con la inflamación intraepitelial, CRC etapa avanzada, la mala supervivencia, y la raza afroamericana [21, 22, 25]. EMAST CRC muestran una expresión heterogénea nuclear de hMSH3, [20, 22] y estudios recientes muestran que el estrés oxidativo de citoquinas impulsado induce un cambio de armas nucleares a citosólica de hMSH3, sacándolo de su sitio de la reparación del ADN funcional, y es la explicación más probable para la heterogeneidad observada nuclear [26, 27, 28]. Existe la teoría de que la inflamación y el estrés oxidativo gatillo hMSH3 mislocalization, causando hMutSβ función a fallar, al mismo tiempo conservar hMutSα función en el núcleo [26]. EMAST y la deslocalización de hMSH3 es el defecto más común de ADN MMR en el CCR humana
.
Nuestro objetivo fue examinar si la supervivencia de pacientes con CRC se vio afectada por el tratamiento con 5-FU si poseyeran tumores EMAST. Esta era una cuestión importante como adyuvante de la quimioterapia con 5-FU es la base de la terapia de primera necesidad para los pacientes con estadio II /III CRC, y el 60% de los pacientes que han adquirido la disfunción hMutSβ debido a hMSH3 mislocalization.
Materiales y Métodos
Las muestras de pacientes y la extracción de ADN
Se analizaron 230 pacientes con estadio II /III cánceres colorrectales esporádicos de la Universidad de California y la Administración de Veteranos centros médicos en San Diego, California (recogidos de 1982-1989) [14 ] y el hospital general Universitario de Alicante, Alicante, España (EPICOLON, recogidos de 2000-2001) [15, 16]. La Universidad de California en San Diego, San Diego VA, el Hospital General Universitario de Alicante y la Universidad de Michigan humano Temas Comités aprobaron la investigación de la utilización de estas muestras patológicas existentes. Los registros de pacientes /información fueron anónimos y sin identificación previa al análisis de los datos. Debido a este uso de muestras patológicas que se aplica el anonimato existente, las juntas de revisión institucional renunciar a la necesidad de paciente o del consentimiento familiares. Los pacientes sólo se incluyeron para este grupo de edad si el material patológico estaba disponible, su régimen quimioterapéutico conocido, y la información de la supervivencia estaba disponible. Todos los pacientes fueron sometidos a resección quirúrgica curativa. Los pacientes fueron asignados al tratamiento basado en 5-FU o ningún tratamiento por parte de sus equipos de atención antes de nuestro estudio, y el tumor estado de MSI se determinó anteriormente [14-16]. Tabla A en S1 Detalles del contenido todos los perfiles de paciente y del tumor en total. la localización del tumor, la edad del paciente, sexo del paciente, el estadio tumoral, el uso de la quimioterapia y la supervivencia se obtuvieron a partir del informe de patología quirúrgica, con datos de seguimiento obtenidos de los registros de tumores de las respectivas instituciones [14-16]. Fijado en formalina, se obtuvieron bloques incluidos en parafina para cada paciente, y las secciones de serie corta para H & amp; E y tinción microdisección. Se aisló el ADN de tumor colorrectal de cada paciente y el tejido normal adyacente. Cada área microdissected fue identificado en una referencia H & amp; E tinción de diapositivas. especímenes disecados se desparafinaron en un tubo de microcentrífuga con xileno, y se purificó el ADN con etanol y Kit QIAmp DNA Investigador (Qiagen, Valencia, CA) siguiendo un protocolo publicado anterior [22].
amplificación de ADN, la determinación EMAST, y análisis de fragmentos
estado EMAST se determinó usando 5 marcadores polimórficos tetranucleotide (
UT5037
,
D9S242
,
D20S85
,
D8S321
y
D20S82
) [22]. El ADN genómico extraído de los tumores y tejidos normales de contrapartida se amplificó por PCR mediante cebadores específicos para cada marcador tetranucleotide usando Platinum PCR Supermix (Invitrogen, EE.UU.) según el protocolo del fabricante. PCR se realizó utilizando 6-FAM o cebadores HEX etiquetado. Las condiciones de ciclación fueron las siguientes: 95 ° C durante 15 minutos para la activación de calor inicial; 40 ciclos de 94 ° C durante 1 minuto, 55 ° C -62C ° durante 1 minuto, y 72 ° C durante 30 segundos; y una extensión final a 72 ° C durante 10 minutos. fragmentos marcados con fluorescencia generados por PCR se analizaron en un Applied Biosystems 3730xl DNA Analyzer con el GeneMarker (SoftGenetic LLC, PA). Los productos de PCR se utilizaron para análisis de fragmentos de ADN para identificar la mutación de desplazamiento de marco en repeticiones tetranucleotide para cada locus. Cuando se observaron picos aberrantes +/- múltiplos de 4 nucleótidos en los electroforetogramas de tumor en comparación con la de la no tumoral emparejados, el marcador estaba en la lista positiva para la inestabilidad del marco de lectura. Los tumores que muestran desplazamientos del marco en al menos 2 marcadores tetranucleotide en comparación con el tejido normal emparejado se clasificaron como tumores EMAST-positivos, mientras que todos los demás se clasificaron como tumores EMAST-negativos.
El análisis estadístico
Los análisis estadísticos se realizado con el programa SPSS (versión 20, IBM) y por el Departamento de Bioestadística, Escuela de Salud Pública de la Universidad de Michigan. Se evaluaron las siguientes variables: edad, sexo, localización colónica de tumor, estadio, el uso de 5-FU adyuvante terapia, tiempo de seguimiento, y el estado vital (vivo o muerto). Localización del tumor se clasificó como proximal (derecha) si el tumor estaba en o proximal a la flexura esplénica, y distal (lado izquierdo) si distal a la flexura esplénica. etapa de la enfermedad se clasifica en el momento de la cirugía. El estado vital se clasificó como la supervivencia global. La asociación estadística entre EMAST y otras variables categóricas se evaluó mediante la prueba exacta de Fisher. Los análisis de supervivencia se realizaron después de los pacientes fueron clasificados en función de su estado EMAST y si recibieron quimioterapia adyuvante con 5-FU como parte de su tratamiento. Para examinar las diferencias en las tasas de supervivencia, las curvas de Kaplan-Meier y se representaron gráficamente la función de riesgo proporcional de Cox permite el cálculo de la tasa de riesgo de riesgo relativo. Todas las pruebas estadísticas fueron de dos caras, y
P
valores. & Lt; 0,05 se consideraron estadísticamente significativos
Resultados
Características de los pacientes y el estado EMAST
nos utilizaron 230 pacientes en estadio II /III CRC de EPICOLON [15, 16] y EE.UU. [14] fuentes para los que hemos tenido el resultado de supervivencia, la utilización de adyuvante con 5-FU, y el tejido disponible para el análisis genético. Para todos los 230 pacientes segregadas por fase, 64 de 118 etapas (54%) III pacientes recibieron terapia adyuvante con 5-FU, en comparación con 30 de 112 (27%) pacientes en estadio II (
P = 0.000023)
. De los 230 tipos de cáncer analizadas para EMAST, 102 (44,3%) eran EMAST-positivo, definido como 2 o más marcadores que muestran tetranucleotide mutación de desplazamiento de marco [22]. Se compararon los pacientes con cánceres EMAST con aquellos que tenían cánceres no EMAST, como se muestra en la Tabla A en S1 Archivo. No se encontraron diferencias significativas entre los pacientes y EMAST no EMAST CRC para el género, la ubicación del tumor intra y coma, o etapa. Sin embargo, los pacientes con cánceres no EMAST fueron más a menudo tratados con 5-FU (
P Hotel & lt; 0,05) (Tabla A en S1 Archivo). Esta observación para pacientes con cánceres no EMAST podría predecirse a favorecer una mayor supervivencia en comparación con los pacientes con cánceres EMAST, ya que este grupo de pacientes de cáncer de ADN posee MMR-dominio. Encontramos más tumores MSI-H entre los pacientes EMAST CRC (Tabla A en S1 Archivo). Este hallazgo es probablemente debido a la inactivación completa de ADN MMR (hipermetilación de
hMLH1
inactivación del complejo hMutLα en los tumores MSI-H esporádicos), que en sí mismo puede causar mutaciones de desplazamiento del marco en repeticiones tetranucleotide, y /o inactivación secundario de
hMSH3
través de mutación del marco de su microsatélite de codificación, como consecuencia de la pérdida de la función hMutLα [12].
la supervivencia global de los pacientes con EMAST y no EMAST CRC
comprobado si los pacientes con CRC EMAST (cuyo cáncer se presume función hMutSβ que falta) tendrían una disminución en la supervivencia en comparación con los pacientes con CCR cuyos tumores retener MMR-dominio (que conserva tanto hMutSα y función hMutSβ, así como la función hMutLα) después de 5-FU adyuvante la terapia.
de los 230 fase II /III de CRC pacientes, 94 (40,9%) pacientes murieron durante el período de seguimiento medio de 51,0 meses. Debido a que nuestra verdadera comparación era para la supervivencia de los pacientes con CRC presunta pérdida de la función hMSH3 (hMutSβ) en comparación con los pacientes con CCR que conservan hMutSα y función hMutSβ y hMutLα (completo dominio del ADN MMR), hemos analizado nuestros datos de supervivencia en ausencia de los 30 pacientes (13%) con MSI-H CRCs (todos con la disfunción hMutLα). Eliminación de los pacientes con MSI-H CRC también reduce los problemas de confusión con el resultado, ya que está bien demostrado que estos pacientes no responden favorablemente a 5-FU tratamiento adyuvante [14-19]. Además, la comparación de los pacientes 11 MSI-H CRC que recibieron 5-FU adyuvante a los 19 MSI-H CRC pacientes que no recibieron 5-FU adyuvante, no hubo diferencia en la supervivencia (
P Hotel & gt; 0,05 , datos no mostrados), consistente con múltiples informes anteriores [14-19]. Esto dejó un total de 200 pacientes (82 EMAST y 118 no EMAST) para el análisis, y sus características se presentan en la Tabla 1. Sin inclusión de los pacientes MSI-H CRC, la diferencia en la utilización de 5-FU entre EMAST y no EMAST pacientes desaparecieron.
Hemos construido las curvas de Kaplan-Meier para comparar la supervivencia global acumulada en los pacientes tratados con y sin adyuvante de la quimioterapia con 5-FU. Adyuvante con 5-FU adyuvante mejora la supervivencia global de los pacientes con estadio II /III CRC (
P = 0,004
, log-rank test) (Figura 1A), como se ha informado anteriormente [14,19]. A continuación, los datos segregados por el estado CRC EMAST. Como se muestra en la figura 1B, los pacientes cuyos cánceres demostraron EMAST (presume hMSH3 deficientes) había mejorado la supervivencia con adyuvante terapia 5-FU (
P
= 0,034) en la misma medida que los pacientes cuyos cánceres no demostraron EMAST ( MMR-competente) (
P = 0,043
) (figura 1C). Por lo tanto, a pesar de la falta de función hMSH3 en el cáncer, no se mejora la supervivencia en la fase II /III de CRC pacientes después de 5-FU adyuvante de la quimioterapia sin importar su estatus EMAST tumor.
(
Un
) La supervivencia acumulada en general de todos los pacientes sin MSI-H (
P = 0,004
, log-rank test). (
B Opiniones) la supervivencia global acumulada de pacientes con linfoma no-MSI-H tumores EMAST-positivos (deficientes en la función hMSH3) (
P = 0,034
, prueba de log-rank estratificada). (
C
) acumulativa de supervivencia global de pacientes con no-MSI-H, los tumores no EMAST (competencia plena en función de desajuste de reparación del ADN) (
P = 0,043
, prueba de log-rank estratificado ).
los factores de riesgo que afectan a la supervivencia global
Nuestra cohorte de pacientes con CRC no mostraron una supervivencia peor si el paciente tenía un cáncer EMAST en comparación con un cáncer no EMAST, independientemente de la presencia o ausencia de adyuvante tratamiento con 5-FU (Fig. a en S1 File). Este contraste con los informes anteriores de los pacientes con cánceres que muestran EMAST etapa avanzada y peor pronóstico sobre pacientes con cánceres no EMAST [21, 25] podría ser debido al alto número de pacientes en etapa II examinados en nuestro estudio. Para validar esta observación en nuestra cohorte de pacientes, se realizó un análisis multivariante de Cox de riesgo proporcional para la supervivencia global (Tabla 2). A partir del análisis, se observó ninguna diferencia en la supervivencia entre la fase II /III pacientes con CRC EMAST y cánceres no EMAST en nuestra cohorte (
P
= 0,36). También se observó ninguna diferencia por sexo, localización del tumor intra-colónica, y la fuente del paciente para nuestra cohorte. Sí observamos significativa la supervivencia peor para los pacientes mayores de 70 años de edad (
P = 0,015
), si el paciente tenía un tumor en estadio III en comparación con un tumor en estadio II en el momento de la cirugía (
P
= 0,0042), y si el paciente no recibió quimioterapia adyuvante con 5-FU (
P = 0,0004
).
Discusión
Nuestros datos para 230 Fase II /III CRC segregadas por el estado EMAST indica que el 5-FU sigue siendo beneficiosa para la supervivencia global de los pacientes con CRC EMAST. La pérdida de la función hMutSβ debido a la mislocalization de hMSH3 [26] en EMAST CRCs no parece ser lo suficientemente perjudicial para modificar el resultado del paciente en respuesta a la terapia adyuvante 5-FU. Anteriormente, hemos demostrado una fuerte correlación entre hMutSα y hMutSβ unión de 5-FU en el ADN y la citotoxicidad del 5-FU, y cuando la función del ADN MMR estaba ausente (ya sea con pérdida de hMutSα y hMutSβ o hMutLα), no había vinculante, y no posterior ejecución de la citotoxicidad [8-10]. Múltiples estudios muestran adyuvante del tratamiento con 5-FU de los pacientes con MSI-H CRC traducir el
in vitro
observación de la falta de citotoxicidad en una falta de mejoría en la supervivencia de pacientes con 5-FU tratamiento [14-19]. El reconocimiento de 5-FU en el ADN parece ser predominantemente por hMutSα, con afinidad para la unión de 5-FU más de dos veces la de hMutSβ en ensayos de resonancia de plasmón superficial [8, 9], en paralelo con papel más de hMutSα en 5-FU-inducida la muerte celular [9, 10]. Aunque hMutSβ puede unir 5-FU en el ADN [9, 10] y su presencia puede inducir un nivel moderado de citotoxicidad, individual y sinergismo con hMutSα después del tratamiento con 5-FU [9], su estado no funcional como determinado por EMAST dentro CRC pacientes que aún poseen la función hMutSα no parece ser del todo fundamental para el éxito del 5-FU citotoxicidad sobre la supervivencia del paciente.
ADN MMR tumores defectuosos pueden ocurrir en el entorno de los CCR esporádicos (hipermetilación de
hMLH1
), así como en el síndrome de Lynch, en el que se transmite de la línea germinal mutación de un gen de ADN MMR [12, 13, 29]. Los genes MMR
hMLH1
,
hPMS2
, y
hMSH2 gratis (y
EPCAM
, que se dirige en segundo lugar, la inactivación de
hMSH2
) cuando mutado en la línea germinal y el segundo alelo inactivado somáticamente en el tumor inactiva completamente la función de MMR de ADN, genera un cáncer de MSI-H [30], y los pacientes no obtienen un beneficio de adyuvante 5-FU tratamiento [17]. No ha habido ninguna descripción de pacientes con síndrome de Lynch con una línea germinal hMSH3 mutación hasta la fecha para probar el efecto de adyuvante de tratamiento 5-FU en el resultado para este grupo, y tal vez su resultado reflejaría pacientes con EMAST CRC tratados con 5-FU, debido a la complejo hMutSα restante y funcional. Sin embargo, nos predicen que los pacientes con síndrome de Lynch
hMSH6
mutaciones germinales tendrían una marcada reducción en los resultados de supervivencia con el tratamiento del CCR en comparación con los pacientes que conservan la función MMR en sus tumores debido a la pérdida de hMutSα. Desde
hMSH6
línea germinal pacientes Lynch conservan la función hMutSβ, se podría predecir una débil respuesta a 5-FU adyuvante que era mejor que los pacientes cuyos tumores carecen por completo la función MMR.
No observamos una diferencia en la supervivencia global entre los pacientes con EMAST y no EMAST-CRC al contrario de otros informes [25], por estadio y con independencia de la terapia adyuvante con 5-FU. Creemos que esto es en gran parte debido a la mayor proporción de pacientes en etapa II en nuestro estudio, en comparación con otros estudios, con casi el 50% de los CCR de pacientes en estadio II y que tienen un mejor pronóstico de supervivencia [3, 5]. Las fechas de recolección de nuestras CRC en nuestras cohortes pueden haber sesgado el escenario, así que el número de personas que reciben terapia adyuvante con 5-FU. Sólo se compararon los pacientes EMAST frente a no EMAST CRC, y no se combinaron los pacientes MSI-L CRC pacientes con CRC EMAST como otros estudios [25]. De hecho, el análisis de los pacientes EMAST frente a no EMAST CRC solo, sin pacientes MSI-L CRC, no muestran diferencias en la supervivencia [25]. Por último, se analizó la supervivencia global en comparación con la supervivencia libre de recurrencia [25]. Aunque EMAST sido parcialmente correlacionado con el estadio TNM [21], pero específicamente no se ha correlacionado con venosa, perineural, o invasión linfática, se correlaciona y tiene una frecuencia más alta con la progresión a través de la progresión de la morfología-adenoma a carcinoma, y en ulcerada carcinomas [22, 31]. También se realizó el análisis de los pacientes con EMAST CRC sin la influencia de los pacientes con MSI-H CRC, todos los cuales tienen una mejor supervivencia en comparación con los pacientes con linfoma no-MSI-H CRC [12, 13], incluso sin el uso de 5-FU la terapia.
Una limitación de nuestro estudio observacional es que no fuimos capaces de determinar la supervivencia libre de recurrencia o específica de la enfermedad debido a la falta de información completa para esta cohorte combinada. Sin embargo, estamos seguros en nuestra comparación EMAST frente a no EMAST para la supervivencia global como la prueba de log-rank estratificada confirma ninguna diferencia en el resultado de controlar por 5-FU estado de tratamiento (Tabla B en S1 de archivos), y una longitud alternativo de supervivencia el análisis muestra similitudes entre EMAST de distribución y grupos no EMAST (Fig. B en S1 archivo).
en conclusión, fase II /III de pacientes con CRC EMAST responder igual de bien a 5-FU adyuvante quimioterapia con una mejora en su supervivencia general al igual que los pacientes con tumores no EMAST. Esta era una cuestión importante para examinar que podría haber cambiado el enfoque a la quimioterapia adyuvante para el 60% de los pacientes con CCR. Esto está en contraste con los pacientes con MSI-H CRC, cuyos tumores tienen ineficaz hMutSα y hMutSβ o hMutLα complejos y que no mejoran su supervivencia con 5-FU adyuvante terapia [14-19]. La presencia de la función hMutSα intacta (junto con la función hMutLα) en EMAST CRC parece ser adecuada para contribuir a un resultado global mejorada para los pacientes tratados con 5-FU adyuvante.
Apoyo a la Información
S1 Archivo. Características clínicas de los pacientes con CCR segregadas por el estado EMAST, inclusiva de MSI-H pacientes (Tabla A).
log-rank test estratificado para comparar EMAST y el estado de 5-FU (Tabla B). De Kaplan-Meier parcelas de supervivencia global acumulada en pacientes segregadas por el estado EMAST (Fig. A). gráficos de supervivencia alternativas para EMAST y los pacientes no EMAST
doi (Fig. B): 10.1371. /journal.pone.0127591.s001 gratis (PDF)