Extracto
Antecedentes
La expresión alterada de los genes miARN expresión contribuye a la carcinogénesis humana. Este estudio fue diseñado para detectar expresiones aberrantes miARN como un biomarcador potencial para la detección temprana y la predicción del pronóstico de cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC).
Métodos
array miARN se utilizó para el perfil diferencialmente expresado miRNAs y ensayos de RT-PCR cuantitativa a base de Taqman se utilizaron para analizar los niveles de miR-29c, miR-93 y miR-429 expresión en muestras de tejido de NSCLC, correspondientes muestras de tejido normal, y las muestras de suero de 70 pacientes con CPNM, así como en muestras de suero de 48 controles sanos.
Resultados
Los niveles de miR-29c y miR-93 se upregulated expresión en los tejidos de NSCLC, mientras que los niveles séricos de miR-29c también se upregulated, pero los niveles de suero de miR-429 se redujeron en el CPNM. Por otra parte, los niveles de expresión de miR-429 en los tejidos de NSCLC se asociaron con los de las muestras de suero. Características operativas del receptor (ROC) análisis de la curva mostró que en el punto de corte óptimo, las áreas bajo la curva ROC para los niveles séricos de miR-29c y miR-429 fueron 0,723 y 0,727, respectivamente, niveles que son más altos que el del carcinoma antígeno embrionario (0,534) en el diagnóstico de la etapa I NSCLC. Además, los niveles séricos de miR-429 se asociaron con una pobre supervivencia global de los pacientes con CPNM. Ambos análisis univariados y multivariados mostraron que el suero de miR-429 de nivel fue un predictor pronóstico independiente para el NSCLC.
Conclusiones
Los resultados del presente estudio sugieren que la detección del suero de miR-29c y miR 429 expresión se debe evaluar exhaustivamente como un nuevo marcador biológico, no invasivo para la etapa temprana CPNM
Visto:. Zhu W, Él J, D Chen, Zhang B, Xu L, Ma H, et al. (2014) La expresión de miR-29c, miR-93 y miR-429 como potenciales biomarcadores para la detección precoz del cáncer de pulmón no pequeñas en estadio. PLoS ONE 9 (2): e87780. doi: 10.1371 /journal.pone.0087780
Editor: Canción Guo Zheng, Penn State University, Estados Unidos de América
Recibido: 12 Noviembre 2013; Aceptado: 1 Enero 2014; Publicado: 11 Febrero 2014
Derechos de Autor © 2014 Zhu et al. Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos de la licencia Creative Commons Attribution License, que permite el uso ilimitado, distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que el autor original y la fuente se acreditan
Financiación:. Este estudio fue apoyado en parte por subvenciones de la Fundación de Ciencias Naturales de la provincia de Zhejiang (Y2110960), la Oficina de Ciencia y Tecnología de Zhoushan (10137 y 2011C12039), y de la Oficina médica de la provincia de Zhejiang (2011KYB165). Los donantes no tenía papel en el diseño del estudio, la recogida y análisis de datos, decisión a publicar, o la preparación del manuscrito
Conflicto de intereses:.. Los autores han declarado que no existen intereses en competencia
Introducción
microARNs (miRNAs) son una clase de pequeños ARN no codificantes que pueden funcionar como interferencia de ARN endógeno para regular la expresión de los genes específicos [1] - [3]. Hasta la fecha, se han identificado un total de 1048 miRNAs humanos y reportado en la base de datos de ARN, y este número sigue en aumento. Algunos de estos miRNAs se ha informado que son útiles como biomarcadores potenciales para el diagnóstico, el pronóstico y la terapia personalizada de los cánceres humanos [1] - [6], porque la expresión alterada de estos miRNAs contribuye a la carcinogénesis humana. Por ejemplo, los genes miARN expresión aberrante ha sido reportado en el cáncer de pulmón. Un número de investigadores, entre nosotros, han informado de la posible aplicación clínica de miRNAs (como miR-1254, miR-142-3p, miR-24, miR-183, miR-21, miR-221 en circulación, miR-29c, miR-486, miR-30d, miR-1, miR-499 y miR-210) [7], [8]. Por lo tanto, la investigación adicional de los genes miARN expresión aberrante podría conducir al descubrimiento de nuevos biomarcadores miARN para el cáncer de pulmón.
El cáncer de pulmón es la principal causa de muerte por cáncer en todo el mundo [9]. A pesar de los avances en la detección y mejoras en las opciones de tratamiento precoz, los pacientes con enfermedad avanzada todavía frecuentemente desarrollan la enfermedad recurrente después de resecciones radicales extendidas, y la tasa de supervivencia global a los 5 años es todavía sólo el 5%. Por lo tanto, nuevos enfoques para la gestión eficaz de esta enfermedad a nivel molecular podría identificar a los pacientes que tienen un riesgo alto o más bajo de recaída después de la cirugía y proporcionar biomarcadores para la predicción de la supervivencia del paciente. A este respecto, se ha informado del uso de miRNAs séricos como posibles biomarcadores para el diagnóstico y la predicción de pronóstico de los cánceres de pulmón [7], [10]. De hecho, varios estudios han identificado genes miARN firmas que difieren entre los tejidos normales y cancerosas para la clasificación de los tipos de cáncer y para el diagnóstico del tumor y el pronóstico. También puede ser posible utilizar los genes miARN expresión como un biomarcador para monitorizar la eficacia del tratamiento o predecir la progresión del cáncer [11] - [12]. Sin embargo, hasta la fecha, la mayoría de los estudios se han centrado en el tejido tumoral, y los cambios en los niveles circulantes de miRNAs suero y la relación entre estos cambios y el tejido en inicio de la enfermedad siendo controvertida [7]. Por otra parte, la utilidad de muchos miRNAs circulantes se ha demostrado en el diagnóstico de NSCLC, pero pocos miRNAs circulantes mostró valor diagnóstico para la etapa temprana NSCLC [13], [14]. Sin embargo, es necesario realizar comprobaciones adicionales en diferentes poblaciones. Por lo tanto, en este estudio, se analizaron los niveles de tres miRNAs (miR-29c, miR-93 y miR-429) en el cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC) los tejidos y los comparó con los de las muestras de suero de pacientes con CPNM y saludable controles, en particular, sus niveles de expresión en pacientes con CPNM etapa temprana. Mientras tanto, se analizaron los datos por comparación con el carcinoma de antígeno embrionario (CEA), que es un marcador ampliamente utilizado en el diagnóstico de NSCLC [15]. A continuación, investigaron las asociaciones entre su expresión y los datos clínico-patológicos y supervivencia de los pacientes con CPNM.
Materiales y Métodos
Ética Declaración
Este estudio fue aprobado por el Comité de Ética de Zhoushan se obtuvieron Gobierno Municipal de China, y todas las muestras biológicas con el consentimiento informado por escrito de los pacientes.
las muestras de pacientes
En este estudio, se reclutaron 70 pacientes con NSCLC resecado quirúrgicamente y emparejaron los tejidos cancerosos distantes de hospital de Zhoushan, Zhejiang, china entre enero de 2008 y mayo de 2009. había 56 varones y 14 mujeres con CPNM, incluyendo 34 pacientes menores de 60 años y 36 mayores de 60 años. Mientras tanto, también se recogieron los sueros de todos los pacientes con CPNM y 48 voluntarios sanos emparejados por sexo y edad. Ninguno de los pacientes incluidos en este estudio había recibido cualquier quimioterapia o radioterapia antes de la cirugía. Para la recogida de muestra de tejido, después de la retirada de las muestras quirúrgicas, los tejidos fueron transportadas inmediatamente al laboratorio de patología, y las muestras se colocaron en un criovial, snap-congelado en nitrógeno líquido durante 30 min, y se almacenaron a -80 ° C hasta su uso . Todas las muestras de tejido fueron revisados por dos patólogos, y se determinó el diagnóstico según los criterios National Comprehensive Cancer Network (NCCN). Había 34 adenocarcinomas de pulmón y 36 de pulmón, carcinomas de células escamosas y 46 tumores fueron de moderada a altamente diferenciados, mientras que 24 fueron pobremente diferenciado. Por otra parte, 18 pacientes con CPNM tenían un tumor de menos de 3 cm de tamaño, mientras que 52 pacientes con un tumor de más de 3 cm. Metástasis en los ganglios linfáticos se encontró en 32 pacientes y 36 pacientes tenían CPCNP en estadio I y 34 pacientes en estadio II, III o IV NSCLC (Tabla 1). Además, los niveles séricos de CEA se midieron usando quimioluminiscencia como parte de las pruebas clínicas de rutina, y el valor de referencia fue adquirido de la base de datos clínicos en el Hospital de Zhoushan.
El aislamiento de ARN y RT-PCR cuantitativa
el ARN celular total fue aislado de 100 mg de tejido pulmonar o 600 muestras de suero l utilizando un kit de aislamiento de miRNAs o kit de aislamiento de ARN mirVana PARIS (Applied Biosystems, Foster City, CA, EE.UU.) de acuerdo con el protocolo del fabricante. La concentración de ARN se determinó usando un espectrofotómetro NanoDrop ND-1000 (NanoDrop Technologies, Wilmington, DE, USA), y se midió la calidad del ARN usando un gel de poliacrilamida desnaturalizante del 15%. La reacción de transcripción inversa se llevó a cabo usando el kit TaqMan MicroARN transcripción reversa (Applied Biosystems) de acuerdo con las instrucciones del fabricante en un volumen de reacción total de 7,5 l. qPCR se realizó por triplicado usando TaqMan 2 × PCR Universal Master Mix sin AmpErase UNG (Applied Biosystems) en un sistema de PCR ABI 7500 en tiempo real (Applied Biosystems) con las siguientes condiciones: 95 ° C durante 10 min, seguido de 40 ciclos de 95 ° C durante 15 s y 60ºC durante 1 min. Los valores de ciclo umbral (Ct) se calcularon usando el software SDS 2.0.1 (Applied Biosystems). controles en plantillas gratuitas para ambos RT y PCR se incluyeron en cada experimento para asegurar una amplificación específica de la diana.
Los niveles medios de expresión de miARN en los tejidos y sueros fueron normalizadas con respecto a las cantidades medias de U6 snRNA y U48 snRNA sirviéndose de los 2
-ΔΔCt método [16] - [17]. Los valores medios de Ct para estos cinco miRNAs se calculará sin valores atípicos (es decir, repeticiones con los valores de Ct se aparta más de un ciclo de la mediana). Además, si CtU6, ave y CtU48, ave cada uno no ocurrió dentro de 32 ciclos, se repitió el ensayo. Las muestras con bajos niveles o U6 snRNA U48 no fueron excluidos del análisis de datos.
El análisis estadístico
Todos los análisis estadísticos se realizaron utilizando el software GraphPad Prism 5.0 (GraphPad Software Inc, San Diego, CA, ESTADOS UNIDOS). Los datos se analizaron mediante la homogeneidad de la varianza. ANOVA de una vía o pruebas de Wilcoxon de dos muestras se utilizaron para probar las asociaciones entre los niveles de expresión de los genes miARN y características clínico-patológicas de los pacientes. Se utilizó una prueba t de muestras pareadas para comparar las diferencias en la expresión de los genes miARN entre el tejido pulmonar y las muestras de suero. (ROC) curvas características de funcionamiento del receptor se generaron para evaluar la precisión diagnóstica de cada parámetro. La supervivencia del paciente se estimó mediante el método de Kaplan-Meier, y se utilizó la prueba de log-rank para comparar la supervivencia entre los grupos. El modelo de regresión de riesgos de Cox se utilizó para analizar los factores de riesgo para el NSCLC. Todas las pruebas estadísticas fueron de dos caras, y un
P valor Red de 0,05 fue considerado estadísticamente significativo.
Resultados
expresión diferencial de los miRNAs en los tejidos y sueros de pacientes NSCLC
sobre la base de nuestra matriz miARN (Agilent) y los datos de validación, se seleccionaron tres miRNAs (miR-29c, miR-93 y miR-429) para su posterior estudio en muestras de NSCLC. Se realizó el análisis qRT-PCR para estos tres miRNAs en 70 pares de NSCLC y los correspondientes tejidos pulmonares cancerosos. Nuestros datos muestran que los niveles de miR-29c y miR-93 se upregulated expresión en los tejidos de NSCLC en comparación con los correspondientes tejidos pulmonares cancerosos (
P = 0,0408
y
P = 0,0444
, respectivamente), mientras que los niveles de miR-429 no fueron significativamente diferentes entre los CPNM y los tejidos pulmonares cancerosos (
P = 0,3903
, Figura 1A).
a, detección de QRT-PCR de tres miRNAs en 70 tumores de NSCLC y los correspondientes tejidos pulmonares normales.
P-valores
de miR-29c, miR-93 y miR-429 eran 0,0408, 0,0444, y 0,3903, respectivamente, usando una muestra emparejada
t-test
. B, QRT-PCR análisis de los niveles séricos de miARN en muestras de suero de 70 pacientes con CPNM vs. 48 controles sanos.
P-valores
de suero de miR-29c, miR-93 y miR-429 eran 0,0012, 0,9291, y 0,0001, respectivamente, usando una prueba t no pareada. C, D, E, Asociación de estos niveles miARN entre el tejido NSCLC y muestras de suero. prueba de correlación de Pearson mostró que la expresión de miR-429 en suero se asoció significativamente con la de tejidos de NSCLC (r = 0,3578,
P = 0,0024
), mientras que los niveles séricos de miR-29c y miR-93 no se asociaron con aquellos en los tejidos de NSCLC (r = -0,07877,
P = 0.5169
y r = 0.1515,
P = 0.2105
, respectivamente). *
P Hotel & lt; 0,05 entre los grupos
A continuación, investigamos si estas diferencias en la expresión de los genes miARN estaban presentes en muestras de suero de estos pacientes.. Hemos encontrado que la expresión de miR-93 en suero no fue diferente entre los pacientes con CPNM y controles sanos (
P = 0.3530)
. Sin embargo, la expresión de miR-29c se incrementó significativamente el suero de pacientes con CPNM (
P = 0,0012)
, y miR-429 expresión se redujo significativamente (
P
= 0,0001, Figura 1B). El nivel sérico de expresión de miR-429 se correlacionó significativamente con la de tejidos de NSCLC (r = 0,3578,
P = 0,0024
, Figura 1E), mientras que los niveles séricos de miR-29c y miR-93 expresión no se asociaron con los de los tejidos de NSCLC (r = -0,07877,
P = 0,5169
y r = 0,1515,
P = 0,2105
, respectivamente, la figura 1C y D).
Asociaciones entre la expresión de los genes miARN alterado y características clínicas de NSCLC
a continuación se investigó asociaciones entre los niveles alterados de expresión de los genes miARN (miR-29c y miR-93 en el CPNM y miR-29c y miR-429 en suero) con las características clínico-patológicas de los pacientes con CPNM. Se encontró que el aumento de la expresión de miR-93 se asocia fuertemente con la histología del CPNM (
P = 0,031
, Tabla 2), mientras que la expresión de miR-29c suero se asoció con niveles anormales de CEA (
P =
0,030, Tabla 2). En contraste, no se detectaron otras asociaciones entre los niveles de expresión de estos miRNAs. Por otra parte, se trazan los datos de expresión de miR-29c y miR-429 mediante curvas ROC para identificar un valor de corte que podría distinguir a los pacientes con cáncer de pulmón de los controles sanos. análisis de la curva ROC mostró que en el punto de corte óptimo, los niveles séricos de miR-29c tenían una sensibilidad del 65,7% y una especificidad del 74,1% para distinguir los pacientes con CPNM de los controles sanos con un área bajo la curva (AUC) de 0,676 (
P = 0,0004
, 95% intervalo de confianza [IC]: 0,584 a 0,759, Figura 2A). Además, los niveles séricos de miR-429 tenían una sensibilidad del 54,3% y una especificidad del 81,2% para distinguir los pacientes con CPNM de los controles sanos con una AUC de 0,713 (
P Hotel & lt; 0,0001 IC, 95%: 0,623 -0,793, la Figura 2B). Debido a que la prueba de CEA en la sangre es un marcador ampliamente utilizado para el NSCLC, se compararon los resultados de CEA con los niveles de expresión de los genes miARN y se encontró que el CEA tenía una AUC de 0,576 (
P = 0,1493
, IC del 95%: 0,482 a 0,666, Figura 2C). Sin embargo, para la combinación de la expresión de miR-29c y CEA, los datos mostraron una AUC de 0,712 (
P Hotel & lt; 0,0001, IC del 95%: 0,622 hasta 0,792); para la combinación de la expresión de miR-429 y CEA, el AUC fue 0,707 (
P = 0,0007
, IC del 95%: 0,616 hasta 0,787); y para la combinación de la expresión de miR-29c y miR-429 con el CEA, el AUC fue 0,797 (
P Hotel & lt; 0,0001, IC del 95%: 0,713-0,865).
A, MIR -29˚C; B, miR-429; C, CEA mostró curvas ROC y una AUC con el poder de diagnóstico para distinguir a los pacientes con CPNM de los controles sanos. D, miR-29c; E, miR-429; F, CEA mostró curvas ROC y una AUC con el poder de diagnóstico para distinguir los pacientes con CPNM en estadio I de los controles sanos.
Por otra parte, también se encontró que los niveles séricos de miR-29c tenían una sensibilidad de 50,0% y una especificidad del 95,8% para la etapa distintiva I NSCLC de los controles sanos con una AUC de 0,727 (
P
= 0,0001, IC 0,619-0,818 95%, Figura 2D). miR-429 tuvo una sensibilidad del 94,4% y una especificidad del 41,7% para la etapa I NSCLC distintiva pacientes de los controles sanos con una AUC de 0,723 (
P =
0.0001,95% IC 0,615 a 0,815, Figura 2E) . CEA tuvo una sensibilidad del 66,7% y una especificidad del 52,1% para distinguir pacientes con CPNM en estadio I de los controles sanos con una AUC de 0,534 (
P = 0,6040
; IC del 95%: 0,422-0,644, Figura 2F). Además, la combinación de la expresión de miR-29c y CEA tenía una AUC de 0,757 (
P Hotel & lt; 0,0001, IC del 95%: 0,651-0,844), la combinación de la expresión de miR-429 y CEA tenía una AUC de 0.659 (
P = 0,0128 IC
, 95%: 0,547 hasta 0,759), y la combinación de la expresión de miR-29c, miR-429 expresión, y CEA tuvieron un AUC de 0,833 (
P
& lt; 0,0001, IC del 95%: desde 0,736 hasta 0,906)
Asociación entre el suero de miR-429 y nivel de supervivencia de los pacientes NSCLC
Debido a que la expresión de los tres miRNAs ensayadas fue alterado en el CPNM muestras de tejidos y suero, se evaluó, además, si la detección de sus niveles podría predecir el pronóstico en pacientes con CPNM. Se encontró que el nivel sérico de expresión de miR-429 se asoció con la supervivencia global de los pacientes con CPNM (
P = 0,0030
mediante una prueba de log-rank, Figura 3). Sin embargo, la expresión de miR-29c, miR-93 y miR-429 en los tejidos de NSCLC y los niveles séricos de miR-29c y miR-93 no se asociaron con la supervivencia global de los pacientes con CPNM. El análisis de regresión de riesgos de Cox univariante demostró que los niveles séricos de miR-429 eran un indicador pronóstico significativo del NSCLC (IC razón de riesgo ajustada = 6.458, 95%: 1,409 a 29,593,
P = 0,016
). El análisis de regresión de riesgos proporcionales de Cox multivariado mostró que los niveles séricos de miR-429 eran un predictor pronóstico independiente para pacientes con CPNM (razón de riesgo = 12.875; IC del 95%: 2,295 a 72,230,
P = 0,004
, Tabla 3) .
P
-valor para la supervivencia de los pacientes con niveles altos y bajos de expresión de los genes miARN se calculó utilizando la prueba de log-rank. *
P
. & Lt; 0,05 entre los grupos
Discusión
En este estudio, hemos analizado la expresión de miRNAs tres, seleccionados en base a nuestra anterior matriz y validación de datos, miARN en muestras de tejidos y suero de NSCLC de asociación con los datos clínico-patológicos y supervivencia de los pacientes. Encontramos que el miR-29c y miR-93 se reguló la expresión en tejidos de NSCLC en comparación con los tejidos de los pulmones cancerosos correspondientes. Además, los niveles séricos de miR-29c se incrementaron significativamente y los niveles séricos de miR-429 se redujo significativamente en la etapa I NSCLC en comparación con los niveles en 48 controles sanos. Además, hemos encontrado que los niveles séricos más bajos de miR-429 niveles se asociaron con una baja supervivencia global de los pacientes con CPNM. Los análisis univariados y multivariados mostraron que el nivel sérico de miR-429 fue un predictor independiente de la supervivencia global de los pacientes con CPNM. Nuestros datos actuales indican que la detección del suero de miR-29c y la expresión de miR-429 se debe evaluar exhaustivamente como biomarcador no invasivo novedoso para la etapa inicial de NSCLC.
De hecho, hasta la fecha, un gran número de estudios han demostró que la expresión alterada de miRNAs específicos desempeña un papel importante en la tumorigénesis humana debido a las funciones de estos miRNAs como supresores de genes o oncogenes [17] - [19]. Por lo tanto, la detección de aberrantes niveles de expresión de genes miARN se podría usar para el diagnóstico precoz de los cánceres humanos o de predicción de pronóstico porque miRNAs son más estables y resistentes a la digestión con RNasa A y otras condiciones adversas que son marcadores de proteínas tradicionales [7], [10], [ ,,,0],17], [20]. Por ejemplo, Chen
et al
[10] mostró que miRNAs son estables en el suero en circulación y pueden servir como potenciales marcadores de diagnóstico para el cáncer de pulmón. Hu
et al
[7] informó de que cuatro miRNAs son predictores independientes de la supervivencia global en pacientes con cáncer de pulmón. Le et al [20] demostraron que los niveles séricos de miRNAs son diferentes en muestras pre y post-operatorio de cáncer de pulmón y que estos miRNAs potencialmente pueden ser utilizados como biomarcadores para la recurrencia de la enfermedad después de la cirugía. Sin embargo, sólo unos pocos estudios se han centrado en el papel de diagnóstico de miRNAs en la etapa temprana CPNM [13], [14]. En el presente estudio, se analizó la expresión de miRNAs en tres tejidos de NSCLC y muestras de suero por su valor potencial en el diagnóstico precoz y el pronóstico de los pacientes con CPNM. Nuestros datos muestran que los niveles de miR-29c y miR-93 se upregulated expresión en los tejidos de NSCLC en comparación con los tejidos de los pulmones cancerosos correspondientes. Además, los datos ROC, la AUC para miR-29c y miR-429 fueron 0,723 y 0,727, respectivamente, y estos valores fueron significativamente mayores que la de CEA (0.534), en la etapa I NSCLC pacientes, lo que sugiere estos miRNAs podría ser utilizado para el diagnóstico precoz del NSCLC. CEA es un biomarcador ampliamente utilizado en el diagnóstico de NSCLC y se eligió como control positivo [15]. De hecho, Heegaard
et al
[8] mostró que la expresión de miR-29c, fue significativamente superior en 220 pacientes con CPNM en fase inicial en comparación con 220 controles emparejados. En otros estudios, se encontró que miR-93 expresión para promover la angiogénesis tumoral y la metástasis mediante la supresión de gran supresor de tumor homología 2 expresión [21] - [22]. Sin embargo, el miR-429 es un miembro de la familia de miR-200 que se había demostrado que inhiben la transición epitelio-mesenquimal mediante la regulación de la E-cadherina, ZEB1, y SIP1 expresión [23] - [25]. Ningún estudio ha revelado aún su papel en el diagnóstico y pronóstico de NSCLC. En el presente estudio, que por primera vez puso de manifiesto que la expresión de miR-429 en suero se downregulated en pacientes con CPNM en comparación con los controles sanos y que una menor expresión de miR-429 se asoció con una pobre supervivencia global de los pacientes con CPNM, lo que sugiere el miR-429 expresión es un indicador pronóstico independiente para el NSCLC. Además, encontramos que los niveles séricos de miR-429 se asociaron significativamente con la expresión de miR-429 en los tejidos de NSCLC, que condujo a la hipótesis de que las células tumorales pueden utilizar miRNAs para transportar la información genética a las células circundantes o distantes y promover así el crecimiento del tumor y la progresión [26]. En nuestro estudio anterior, se informó de que los niveles séricos y tumorales de miR-96 se asociaron [18], que apoya la idea de que algunos miRNAs podrían ser secretados a partir de tejido tumoral y promueven la progresión del cáncer, que también es consistente con los informes de Mitchell
et al
[17] y Hu
et al
[7].
Varios estudios han demostrado que la detección de miRNAs suero podría ser particularmente útil para el diagnóstico precoz de los cánceres clínicamente asintomáticos [ ,,,0],27] - [29]. Por ejemplo, en estudios previos de cáncer de pulmón, los niveles de miR-1254, miR-574-5p, miR-486, miR-30d, miR-1 y miR-499 se dysregulated expresión significativa en el cáncer de pulmón en estadio temprano [7] , [30]. Chen
et al
[31] demostró que a través de perfiles de 10 miRNAs séricos pueden servir como nuevos biomarcadores no invasivos para el diagnóstico del cáncer de pulmón. Keller
et al
[32] sugirió también que el desarrollo de cáncer de pulmón podría ser detectables años antes del diagnóstico a través de una firma específica miARN y que esta firma cambios durante el desarrollo del tumor. Coincide en parte con los resultados de estos estudios, los resultados de nuestro estudio demuestran la utilidad de los tres miRNAs ensayadas, que eran más sensibles que el CEA para la detección de la etapa I NSCLC. Sin embargo, nuestros datos actuales son la prueba de principio, y más estudio prospectivo utilizando un tamaño de muestra más grande verificarán si la detección de estos miRNAs es útil para el diagnóstico precoz de CPCNP en estadio I y la predicción de la supervivencia en pacientes con CPNM.
Se encontraron diferencias en la expresión de tres miRNAs entre los tejidos de NSCLC y tejidos pulmonares cancerosos correspondientes. Es importante destacar que hemos identificado miR-29c y miR-429 como se desregula en la circulación de muestras de suero de pacientes con NSCLC etapa temprana, y la expresión de estos miRNAs fue más sensible que los niveles séricos de CEA en pacientes con CPNM distinguir de los controles sanos. Por otra parte, también identificado disminuimos suero expresión de miR-429 como un biomarcador pronóstico independiente para el NSCLC. El valor clínico de los tres miRNAs ensayadas en el diagnóstico y pronóstico de NSCLC garantiza un examen más profundo en las cohortes más grandes.