Extracto
Antecedentes
El objetivo de evaluar la importancia clínica de la densidad microvascular (MVD), la densidad de los vasos linfáticos (LVD), y fibroblastos asociados al cáncer (CAF) en relación con el tumor ubicación en el cáncer colorrectal avanzado (CRC).
Métodos
El uso de inmunohistoquímica, se examinaron 181 pacientes con CCR avanzado para CD31 y D2-40 para medir MVD y LVD, respectivamente, α-actina de músculo liso (SMA) y desmina para identificar los CAF, y PTEN para examinar los cambios genéticos de la CAF. Para evaluar la heterogeneidad regional de estas propiedades, se analizó el tejido de cuatro sitios (el centro y la periferia del cáncer primario, metástasis a distancia, y una metástasis de ganglios linfáticos) en cada paciente.
Resultados
MVD, LVD, y CAF mostraron heterogeneidad significativa con respecto a la ubicación del tumor. LVD fue el más grande en el centro de los cánceres primarios y la cantidad de CAF fue el más bajo de metástasis a distancia. En las metástasis a distancia, los de pulmón tenían mayor LVD y MVD, pero menos que los de los CAF el hígado, el peritoneo o el ovario. Los pacientes con baja MVD y LVD en el centro del cáncer primario tenido peores resultados y los pacientes con pocos CAF en metástasis a distancia y en el tumor primario tenían una tasa de supervivencia más baja. la expresión de PTEN en los CAF en metástasis a distancia se perdió en 11 de 181 pacientes con CCR (6,1%), que se asoció con un peor pronóstico.
Conclusiones
El microambiente, incluyendo microvasculatura asociada al cáncer y fibroblastos, es heterogénea con respecto a la localización del tumor en pacientes con CRC. Por lo tanto, la heterogeneidad de los microambientes debe ser tomado en cuenta en la gestión de pacientes con CRC
Visto:. Kwak Y, de Lee, Kim WH, Kim DW, SB Kang, Lee HS (2014) La implicación clínica de asociada a cáncer microvasculatura y fibroblastos en cáncer colorrectal avanzado pacientes con metástasis sincrónicas y metacrónicas. PLoS ONE 9 (3): e91811. doi: 10.1371 /journal.pone.0091811
Editor: Anthony W. I. Lo, la Universidad China de Hong Kong, Hong Kong
Recibido: 11 Enero, 2014; Aceptado: 14 Febrero 2014; Publicado: 18 Marzo 2014
Derechos de Autor © 2014 Kwak et al. Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos de la licencia Creative Commons Attribution License, que permite el uso ilimitado, distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que el autor original y la fuente se acreditan
Financiación:. Este estudio fue apoyada por la beca número 03-2011-012 del Bundang Fondo de Investigación Nacional de Seúl hospital Universitario. La fuente de financiación no tenía papel en el diseño del estudio, la recogida y análisis de datos, decisión a publicar, o la preparación del manuscrito
Conflicto de intereses:.. Los autores han declarado que no existen intereses en competencia
Introducción
a pesar de que las tasas de mortalidad de cáncer colorrectal (CCR) han disminuido en la mayoría de los países occidentales y en varios países en desarrollo de Asia, avanzó CRC pacientes que inicialmente presentan con enfermedad en estadio IV o aquellos que desarrollan metástasis a distancia después de varios meses diagnóstico aún tienen una tasa de supervivencia menor de cinco años [1], [2] ._ ENREF_4 Recientemente, el rango de la quimioterapia sistémica se ha expandido y la terapia dirigida, incluyendo el receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGFR) y factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF) inhibidor de terapias , se han utilizado en pacientes con CRC avanzado, el aumento de la supervivencia del paciente [3]. Sin embargo, algunos pacientes con CCR no responden bien a la terapia dirigida a pesar de presentar resultados positivos en estudios de mutación específica en terapias dirigidas [4]. Una posible explicación de este fracaso terapéutico es la heterogeneidad del tumor; varios estudios han informado de que los CRC poseen un genotipo o fenotipo heterogéneo, incluyendo
KRAS
, p53, y
BRAF
[5] - [7]. Por lo tanto, las diferentes características de la localización del tumor primario y la correspondiente necesidad orgánica con metástasis a aclararse para mejorar el manejo de pacientes con CRC enfermedades metastásicas. Por otra parte, la comprensión de las características clinicopatológicas de CCR avanzado es importante para el desarrollo y la mejora de las terapias sistémicas.
Desde Paget et al. en primer lugar se describe el microambiente del cáncer por la teoría de la "semilla y el suelo" [8], no ha habido cada vez más pruebas de que el estroma asociado al cáncer podría afectar a las células cancerosas a sí mismos y contribuir a la progresión del cáncer [9]. Los principales componentes del microambiente del cáncer son la microvasculatura (microvasos y los vasos linfáticos), células inflamatorias y fibroblastos asociados con el cáncer (CAF) [10] - [12]. El método actual de la verificación de la actividad angiogenetic y lymphangiogenetic en el tejido canceroso es para evaluar la densidad de microvasos (MVD) y la densidad de vasos linfático (LVD), respectivamente. MVD se ha propuesto como un marcador sustituto de la angiogénesis asociada a cáncer para identificar pacientes con un alto riesgo de recurrencia o aquellos con un mal pronóstico para diversos tipos de cáncer incluyendo CRC [13], [14]; Sin embargo, la correlación pronóstica de la angiogénesis en el CCR sigue siendo controvertida [15], [16]. Similar a la angiogénesis, LVD ha recibido interés como medio de metástasis linfática y la supervivencia [17], [18], pero su papel en la progresión tumoral todavía no está claro [19]. El otro componente importante del estroma, CAF, se activan de manera consistente y afecta a muchos aspectos de la iniciación del tumor, la invasión y la progresión [9]. Mientras que algunos estudios han sugerido que los CAF puede inhibir la progresión del tumor [20], [21], se han propuesto otros estudios que CAF puede promover la progresión en la próstata, mama y cánceres de piel [22] - [24]. En el contexto de CRC, Tsujino et al. han sugerido que α-actina de músculo liso (SMA) que expresan CAF podrían ser un indicador útil de mal pronóstico. Sin embargo, estos resultados se limitan a la etapa II y III CRC [25].
Además de las células del cáncer, alteraciones genéticas en los CAF han demostrado incluyendo la pérdida de heterocigosidad, inestabilidad de microsatélites y las mutaciones genéticas [26], [27]. Recientemente, se informó que la inactivación genética de PTEN en los CAF en pacientes con cáncer de mama [28]. Trimboli et al. identificó que la pérdida de PTEN en los fibroblastos del estroma resultó en extensa remodelación de la matriz extracelular y la angiogénesis que característico de la progresión del tumor [28]. Sin embargo, la pérdida de expresión de PTEN y su importancia clínica no se han investigado en pacientes con cáncer colorrectal.
El objetivo de este estudio fue investigar las características de los microambientes, incluyendo microvasculatures y CAF, en pacientes con CCR avanzado. Además, se evaluó la heterogeneidad intratumoral en el tumor primario y la discordancia entre el tumor primario y la metástasis a distancia microambientes.
Materiales y Métodos
Selección de pacientes
Un total de 181 avanzada CRC pacientes con metástasis sincrónicas o metacrónicas, que fueron tratados en el hospital de la Universidad Nacional de Seúl Bundang (Seongnam-si, Corea del Sur) entre 2003 y 2009, se inscribieron en este estudio. metástasis sincrónicas se definieron como metástasis a distancia que ocurren dentro de los seis meses del diagnóstico primario de la CRC y metástasis metacrónicas eran los que se producen después de ese punto del tiempo [29]. El tejido de cáncer utilizado en este estudio fue recibida de los pacientes que tenían la resección quirúrgica de tanto el tumor primario y la metástasis relacionados. Ninguno de los pacientes había recibido quimioterapia o radioterapia antes de la resección del tumor primario. historias clínicas y los informes de patología fueron revisados para registrar los datos clínicos y patológicos. Se revisaron los portaobjetos de vidrio para determinar el tipo histológico según la clasificación de la OMS [30]. Se recogió información de seguimiento que incluye la evolución del paciente y el intervalo de tiempo entre la fecha de la resección quirúrgica y la muerte. Los casos perdidos durante el seguimiento y las muertes por causas distintas de la CRC se consideraron datos censurados para el análisis de supervivencia. El período de seguimiento medio fue de 37,9 meses (rango, 0.8-104.6 meses).
declaración ética
Todos los especímenes humanos se obtuvieron de los archivos de los casos examinados resecado quirúrgicamente en el Departamento de Patología , hospital Bundang Universidad Nacional de Seúl para el diagnóstico patológico. El estudio retrospectivo se realizó con las muestras almacenadas después de que el diagnóstico patológico, y todas las muestras se anónima antes del estudio. Los participantes no proporcionaron consentimiento informado por escrito en este estudio. El estudio fue aprobado por el Consejo de Hospital Universitario Nacional de Seúl Bundang de Revisión Institucional bajo la condición de forma anónima. (Referencia: B-1109 /136-302)
métodos de matriz de tejido
Para evaluar la las diferencias regionales del estroma, se tomaron muestras de cada paciente a partir de cuatro áreas: el centro y la periferia del cáncer primario, metástasis a distancia, y metástasis en los ganglios linfáticos. Los sitios de metástasis distantes de las matrices tisulares fueron los siguientes: hígado en 83 casos (45,9%), de pulmón en 38 casos (21,0%), cabezas de serie en 38 casos (21,0%), los ganglios linfáticos distantes en 6 casos (3,3%), y ovario en 16 casos (8,3%). Las muestras de tejido de núcleo representativo (2 mm de diámetro) se tomaron de los bloques de parafina individuales y se han reorganizado en nuevos bloques de matriz de tejido usando un aparato de trépano (Superbiochips laboratorios, Seúl, Corea del Sur) [31].
La inmunohistoquímica
diapositivas de matriz se marcaron mediante inmunohistoquímica usando anticuerpos para CD31 (1:100, Dako, Glostrup, Dinamarca), D2-40 (1:100, Dako), SMA (1:1000, Neomarkers, Fremont, CA, EE.UU. ), desmina (1:300, Dako) y PTEN (1:80, Epitomics, Burlingame, CA, EE.UU.) después de un procedimiento de recuperación de antígeno microondas excepto SMA. sitios no reactivos se bloquearon con 1% de suero de caballo en solución salina tamponada con Tris (pH 6,0) durante 3 min. Los anticuerpos primarios se aplicaron y se detectó la unión del anticuerpo con diaminobencidina (DAB). Las secciones fueron contrastadas con hematoxilina. La reactividad de PTEN en cada sección de tejido se puntuó como negativa, débil o fuerte, y el porcentaje de fibroblastos PTEN-positiva se cuantificó. Para el análisis estadístico, la muestra se consideró positiva si PTEN-5% o más de los CAF se calificaron como positivos fuertes.
Cálculo de LVD, MVD y CAF utilizando la patología digital
Las láminas fueron evaluarse simultáneamente por dos patólogos (HEL y HSL), utilizando microscopía de luz para mejorar la precisión de los resultados (Fig. 1). células de CRC se consideraron como controles negativos internos. A medio y buques de gran tamaño fueron considerados como controles internos positivos para CD31 y D2-40. capa muscular intestinal o medio a los buques de gran tamaño fueron considerados como controles positivos internos para desmina y SMA. Las muestras que muestran tinción apropiado en los controles negativos o positivos internos se consideraron no informativo y fueron excluidos del análisis. Las láminas fueron escaneados utilizando un instrumento Aperio ScanScope® CS (Aperio Technologies, Inc., Vista, CA) a 20 × magnificación. Posteriormente, se analizaron en ImageScope ™ usando el algoritmo v1 Análisis de microvasos (Aperio Technologies), y MVD y LVD se calcularon. Debido desmina-positivo muscularis mucosa y propria son positivos para SMA inmunotinción, el área de los CAF (mm
2) se calculó restando las áreas de tinción de desmina de la de la tinción de SMA. (SMA - desmina)
El análisis estadístico
Una prueba de chi-cuadrado o la prueba exacta de Fisher (2 caras) para las variables no continuas y de Mann-Whitney o el análisis para las variables continuas de Kruskal-Wallis se utilizaron para comparar cada parámetro con respecto al sitio CRC y de acuerdo con sus características clínico-patológicas. La correlación entre las variables continuas se analizó mediante el coeficiente de correlación de Pearson. Para determinar los mejores puntos de corte de las variables continuas para predecir la supervivencia de los pacientes, el método de máxima chi-cuadrado se empleó el programa R (http://cran.r-project.org/). Las curvas de supervivencia global se representaron usando el método del producto límite de Kaplan-Meier y la significación de las diferencias entre estas curvas se determinó usando la prueba de log-rank. Un análisis de regresión univariante y multivariante se realizó mediante el modelo de riesgos proporcionales de Cox para determinar los cocientes de riesgos instantáneos (CRI).
P
-valores de menos de 0,05 se consideraron estadísticamente significativos. Todos los análisis estadísticos, con exclusión de la prueba máxima de ji cuadrado, se realizó con las estadísticas de IBM SPSS 20 (Armonk, NY, EE.UU.).
Resultados
1. La heterogeneidad del estroma asociado al cáncer según examinado localizaciones tumorales
Las características clínico-patológicas de los pacientes con CCR avanzado se describen en la Tabla 1. Los pacientes con CCR con metástasis sincrónicas tenían rasgos agresivos, incluyendo el tamaño del tumor más grande, más avanzado y pN pT etapa, y la presencia de perineural y la invasión venosa de los pacientes con metástasis metacrónico (p & lt; 0,05).
los valores heterogéneos para LVD, MVD, y el área de la CAF se muestran en la figura 2. LVD fue el más alto en el centro de los cánceres primarios (mediana, rango intercuartil (IQR); 37.00, 10,50-81,00) que cualquier otro sitio (5,00, 1,00 a 23,75 en la periferia; 2,50; 1,00 a 15,00 en las metástasis de ganglios linfáticos; 3.00, 1.00 -20,00 en metástasis a distancia). MVD fue menor en las metástasis a distancia (mediana, IQR; 641,50, 428,00 a 1006,75) que en la periferia del cáncer primario (731.00, 508,25 a 1049,75) y metástasis en los ganglios linfáticos (893.50, 520,25 a 1275,25). El área ocupada por los CAF fue la más baja de las metástasis a distancia (mediana, IQR; 0,91; 0,68 a 1,18) que cualquier otro sitio (1,12, 0,88 a 1,41 en el centro; 1,22; 0,96 a 1,54 en la periferia, 1.40, 1.00- 1,71 en las metástasis de ganglios linfáticos). Además, las características del estroma variaron en relación con el órgano metastásico examinados. MVD y LVD fueron los más altos en metástasis de pulmón que los del hígado, peritoneo o ganglios linfáticos (P & lt; 0,001; Fig. 3). Sin embargo, las cantidades de los CAF fueron consistentes entre los diferentes órganos de metástasis (p = 0,180).
El LVD (A), MVD (B) y el área de la CAF (C) fue significativamente diferente en función de cada ubicación del tumor.
las características del estroma asociado al cáncer diferían con respecto al lugar de la metástasis. LVD (A) y MVD (B) fueron mayores en las muestras tumorales metastásicas recogidas del pulmón que en las muestras obtenidas de otros sitios de metástasis (p & lt; 0,001). Sin embargo, la cantidad de CAF no fue significativamente diferente entre los sitios metastásicos (C).
A pesar de la heterogeneidad de las características del estroma, los casos de CCR con mayor LVD, MVD y CAF en el centro de los cánceres primarios tenían una tendencia a una mayor LVD, MVD y CAF en la periferia (p & lt; 0,05; Tabla S1). Sin embargo, LVD en el centro y la periferia del cáncer primario no se correlacionaron con LVD en la metástasis distante relacionado (Tabla S1). Además, la cantidad de microvasculatura se correlacionó significativamente con la cantidad de CAF (Tabla S2).
2. Significado clínico de la estroma asociado al cáncer en los CRC avanzada
El MVD, LVD, y la cantidad de CAF presentes en cada localización tumoral se compararon en función de sus características clínico (Tabla 2). CRC de alto grado se asociaron con los CAF inferiores en muestras tomadas del sitio del cáncer central (p = 0,041). Cuando se compara con metástasis sincrónicas, los pacientes con metástasis metacrónicas tuvieron mayor LVD en el centro y la periferia del cáncer primario y tenía mayor MVD en las metástasis de ganglios linfáticos. La mayoría de los pacientes con metástasis metacrónicas fueron tratados con quimioterapia adyuvante antes metastasectomıa. LVD y MVD en las metástasis a distancia fueron significativamente mayores en los pacientes que habían recibido quimioterapia antes metastasectomıa que los que no lo hicieron (p = 0,011 y 0,048, respectivamente).
3. la pérdida de la expresión de PTEN en CAF
PTEN se expresó en el citoplasma y algunas veces el núcleo de cáncer y células no neoplásicas cuando se examina mediante inmunohistoquímica. La expresión de PTEN se perdió en 8 casos en el centro, 2 casos en la periferia, en 4 casos de metástasis en los ganglios linfáticos, y 11 casos de metástasis a distancia (Tabla S3). En los 11 metástasis a distancia con pérdida de PTEN, PTEN expresión estaba intacto tanto en el centro y la periferia de cáncer primario (datos no mostrados). la pérdida de PTEN en metástasis a distancia se correlaciona con metástasis sincrónica (p = 0,018).
4. estroma asociado al cáncer y el pronóstico del paciente
Mediante el uso de los puntos de corte obtenidos, menor LVD, MVD y CAF en el centro, LVD y CAF en la periferia y MVD y CAF en metástasis a distancia se correlacionaron significativamente con todas menor la supervivencia (p & lt; 0.05; Fig. S1). Entre otras características clínico-patológicas, metástasis sincrónica, vejez, de mayor tamaño, de alto grado histológico, el estadio pT y pN avanzada y la presencia de invasión perineural se asociaron con un peor pronóstico (Tabla 3). Mediante análisis de regresión de Cox, el índice de riesgo de síncrono frente metacrónico fue la más alta (4.029) con el valor más bajo de p (p & lt; 0,001). CAF en metástasis a distancia, LVD y MVD en el centro, en la periferia de LVD, la edad y la invasión perineural también predijeron independientemente la supervivencia del paciente. Además, la pérdida de la expresión de PTEN en los CAF en metástasis a distancia se asoció con un peor pronóstico (p = 0,042; figura S2), pero no en el cáncer primario o metástasis en los ganglios linfáticos
Discusión
.
Carcinoma de células en diferentes áreas de tejido tienen características distintas [32]. En las zonas centrales del tumor, células de carcinoma de mantener un fenotipo de células epiteliales, pero las células de carcinoma en el frente invasivo adquieren un fenotipo más maligno y mesenquimales y se cree que tienen una mayor capacidad migratoria y contribuir a las enfermedades metastásicas. Estas células metastásicas pueden restaurar el fenotipo epitelial en los sitios metastásicos [33]. Además de las células de carcinoma de sí mismos, microambiente se sugiere a ser desigual dentro de un tumor dado, porque la formación de tumores y la progresión implican la co-evolución de las células de cáncer y microambientes [34]. El presente estudio demostró que el microambiente asociada al cáncer también tenía características distintas en diferentes áreas. De los sitios examinados, LVD fue más alta en el centro del cáncer primario. MVD fue ligeramente mayor en el centro que en la periferia del cáncer primario, pero esta diferencia no fue estadísticamente significativa. Curiosamente, la cantidad de CAF en metástasis a distancia fue significativamente menor que en el centro y la periferia del cáncer primario. Se demuestra que el microambiente del estroma tiene heterogeneidad regional tanto dentro del tumor primario y entre el sitio primario y sus metástasis relacionados. Por otra parte, nuestros datos sugieren que la heterogeneidad del estroma podría ser atribuible a la heterogeneidad del tumor. Por lo tanto, sería beneficioso tener en cuenta tanto del estroma tumoral y la heterogeneidad celular con el fin de mejorar la gestión de los pacientes con CCR.
Se evaluó el MVD, LVD, y la cantidad de CAF en los tejidos metastásicos de diversos órganos, como el hígado, el pulmón , siembra peritoneal, los ganglios linfáticos distantes, y el ovario. De los órganos metastásicos hemos examinado, tanto LVD y MVD fueron los más altos en el pulmón. En nuestro estudio anterior, el
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tasa de discordancia también fue significativamente mayor en las metástasis pulmonares coincidentes que en otros órganos emparejados metastásicos [35]. El mecanismo subyacente no se conoce. Podría ser que CRCs primarias con alta LVD y MVD tienen una tendencia a producir metástasis de pulmón; Sin embargo, nuestros resultados indican que LVD y MVD en el centro y en la periferia de los cánceres primarios fueron más bajos en los pacientes con metástasis de pulmón (datos no mostrados). Alternativamente, puede ser debido a las características fisiológicas de los órganos metastásicos, las interacciones entre las células cancerosas y microambiente dentro del órgano metastásico, o las características de los clones de células de cáncer con tendencia a la metástasis de pulmón. Sin embargo, los errores técnicos o de muestreo también puede ser posible, por lo tanto se les exigen más estudios a gran escala.
A pesar de que numerosos estudios han intentado demostrar una asociación entre las características del microambiente tumoral y supervivencia, los impactos de pronóstico de MVD y LVD son siendo controvertido. Algunos estudios se han presentado que la angiogénesis activa y linfagiogénesis representado por alto MVD y LVD se asocian con mal pronóstico y los factores clínico-agresivos [36], [37]. Metaanálisis reciente ha demostrado que LVD se asoció significativamente con la supervivencia libre de enfermedad, pero no la supervivencia global [38]. Otros estudios han informado de ninguna significación estadística de MVD y LVD en la supervivencia [39]. Prall et al. ha informado de que la alta MVD y LVD están relacionados con una mejor supervivencia en una serie de hígado y metástasis consecutivos [40]. Nuestros resultados se basaron en los pacientes con enfermedad avanzada con metástasis a distancia y nos indicaron que una alta MVD y LVD estaban relacionados con una mejor supervivencia. Esto podría ser debido a que todos los pacientes de este estudio habían confirmado que tienen metástasis a distancia y microvasculatures podría influir incluso el suministro del fármaco quimioterapéutico en el tumor. Sin embargo, nuestro estudio tiene algunas limitaciones en cuanto al análisis de supervivencia. Se incluyó a los pacientes con CRC disponibles tejidos de cáncer resecado quirúrgicamente de ambos tumores primarios y metastásicos correspondientes. No todos los pacientes con enfermedades avanzadas CRC metastásico y se incluyeron los casos avanzados hasta el momento no se inscribieron a causa de su inoperatividad. Por lo tanto, los prejuicios no reconocidos podrían haber influido en nuestros resultados de supervivencia.
Algunos estudios han demostrado un efecto anti-tumorigénico de fibroblastos [20], [21]. Sin embargo, ha quedado claro que los CAF contribuyen a la progresión del cáncer y su significado pronóstico en varios tipos de cáncer también se ha planteado [41], y las alteraciones genéticas Además, varios estudios han observado en los CAF [26], [27]. pérdida de PTEN de CAF se ha observado en cáncer de mama y de asociación pronóstico de que se ha sugerido [27], [28]. Hemos observado la pérdida de PTEN de CAF en pacientes con CRC y se observó con mayor frecuencia en las metástasis a distancia correspondientes. Se sugiere que los CAF, no sólo a las células cancerosas, han alterado la expresión génica. Por otra parte, la pérdida de expresión de PTEN de CAF en metástasis a distancia se correlacionó significativamente con la supervivencia de los pacientes. Hasta donde sabemos, estos son los primeros resultados que muestra la pérdida de PTEN en los CAF en pacientes con CCR. Aunque se requiere más investigación, esperamos que podría ser un factor pronóstico en pacientes con CCR.
En nuestro gran cohorte de pacientes de CRC avanzados con metástasis a distancia síncrona y metacrónico, hemos demostrado la heterogeneidad regional de los factores del estroma microambiente de acuerdo a la ubicación del tumor. La cantidad de microvasculatura medida por LVD y MVD también era heterogénea en relación con el órgano metastásico examinado. Mediante análisis de regresión de Cox, centro de LVD y MVD, LVD periferia y CAF en metástasis a distancia se asociaron independientemente con el pronóstico de los pacientes, además de la metástasis distante sincrónica, la edad y la invasión perineural. La heterogeneidad de microambiente, no sólo de las células cancerosas, se sugiere para contribuir a la heterogeneidad tumoral y la complejidad biológica, por lo que se debe considerar en la gestión de pacientes con CRC. Además, nuestros resultados mostraron que la expresión de PTEN se modificó en los CAF de CRC, lo que sugiere que los CAF podría haber alterado la expresión génica y desempeñar un papel activo en la progresión del cáncer.
Apoyo a la Información
Figura S1. Francia El pronóstico de la asociación de las características del estroma que se refiere a la localización del tumor. El análisis se realizó mediante el uso de valores de corte obtenidos por métodos máximas chi-cuadrado
doi:. 10.1371 /journal.pone.0091811.s001 gratis (TIF)
figura S2.
Representante PTEN tinciones de anticuerpos de las células del estroma y la asociación pronóstico de la expresión de PTEN. (A) la expresión de PTEN intacto en los CAF (× 400) y pérdida (B) de la expresión de PTEN en los CAF (× 400). (C-F) de Kaplan-Meier de supervivencia para el centro (C) y (D) periferia del tumor primario, metástasis de ganglios linfáticos (E), y metástasis a distancia (F) según el estado de la expresión de PTEN CAF.
Doi : 10.1371 /journal.pone.0091811.s002 gratis (TIF)
Tabla S1. los coeficientes de correlación de Pearson entre
centro, periferia, metástasis en los ganglios linfáticos y metástasis a distancia
doi: 10.1371. /journal.pone.0091811.s003 gratis (DOCX)
Tabla S2.
coeficientes de correlación entre los CAF y LVD o MVD
doi:. 10.1371 /journal.pone.0091811.s004 gratis (DOCX) sobre Table S3.
expresión de PTEN en los CAF y los factores clínico-
doi:. 10.1371 /journal.pone.0091811.s005 gratis (DOCX)