Extracto
Objetivo
El objetivo de este estudio fue evaluar sistemáticamente la terapéutica la eficacia de las células asesinas inducida por citoquinas (CIK) para el tratamiento del cáncer de pulmón de células no pequeñas.
Materiales y Métodos
Una búsqueda informatizada de los ensayos controlados aleatorios para la terapia basada en células CIK era realizado. La supervivencia global, la tasa de respuesta clínica, se evaluaron los efectos de evaluación inmunológica y secundarios.
Resultados
ensayos general, el 17 controlados aleatorios de cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC) con un total de 1.172 los pacientes se incluyeron en el presente análisis. Nuestro estudio demostró que la terapia de células CIK mejoró significativamente la tasa de respuesta objetiva y la supervivencia global en comparación con el grupo tratado con células no CIK. las células después de la terapia combinada CIK, se observó el aumento sustancialmente los porcentajes de células CD3
+, CD4
+, CD4
+ CD8
+, CD3
+ CD56
+ y NK, mientras significativa se observaron disminuciones en el porcentaje de células CD8
+ y subgrupos de células T reguladoras (Treg). Se observó un aumento significativo en Ag-NOR en el grupo de pacientes tratados con CIK (
p
= 0,00001), mientras que el antígeno carcinoembrionario (CEA) era más probable que se reduzca a un nivel normal después del tratamiento CIK (
p = 0,0008
). De los posibles efectos secundarios importantes, sólo la incidencia de la fiebre en el grupo CIK fue significativamente mayor en comparación con el grupo que recibió quimioterapia sola.
Conclusión
La célula CIK terapia combinada demostró una superioridad significativa en la supervivencia global, la tasa de respuesta clínica, y las respuestas de los linfocitos T y no presentaron ninguna evidencia de eventos adversos en pacientes con CPNM
Visto:. Wang M, Cao JX, Pan JH, Liu YS, Xu BL, Li D, et al. (2014) La inmunoterapia adoptiva de citoquinas inducida por la terapia de células asesinas en el tratamiento de células no pequeñas de cáncer de pulmón. PLoS ONE 9 (11): e112662. doi: 10.1371 /journal.pone.0112662
Editor: Nupur Gangopadhyay, Universidad de Pittsburgh, Estados Unidos de América
Recibido: 27 de mayo de 2014; Aceptado: September 23, 2014; Publicado: noviembre 20, 2014
Derechos de Autor © 2014 Wang et al. Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos de la licencia Creative Commons Attribution License, que permite el uso ilimitado, distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que el autor original y la fuente se acreditan
Disponibilidad de datos:. La autores confirman que todos los datos que se basan los resultados son totalmente disponible sin restricciones. Todos los co-autores del estudio hacen todos los datos subyacentes a los hallazgos descritos en nuestro manuscrito totalmente disponible sin restricciones y cumplir con la política de PLOS. Todos los datos subyacentes a los resultados descritos en nuestro manuscrito se pueden encontrar y son de libre disposición de otros investigadores en el cuerpo del manuscrito
Financiación:. Este trabajo de investigación fue apoyada por la Fundación Nacional de Ciencias Naturales de China (n . 31171427 y 30971651 a Zheng Xu-Wang), Beijing Municipal de Ciencia & amp; Proyecto de Tecnología; Características clínicas y de investigación Aplicación de capital (núm Z121107001012136 a Zheng Xu-Wang) y la Fundación postdoctoral de China (Nº 20060400775 para Jun-Xia Cao). Zheng Wang Xu-diseñó la investigación; Jun-Xia Cao es una de las personas que realizaron la investigación y escribió el documento. Los donantes no tenía papel en el diseño del estudio, la recogida y análisis de datos, decisión a publicar, o la preparación del manuscrito
Conflicto de intereses:.. Los autores han declarado que no existen intereses en competencia
Introducción
el cáncer de pulmón es la principal causa de muerte por cáncer en todo el mundo [1]. De acuerdo con el informe anual de 2012 registros de cáncer chino, más de 3 millones de nuevos casos de cáncer de pulmón se diagnostican cada año, y los aproximadamente 2,7 millones de muertes por cáncer de pulmón representarán el 13% de allmortalities. No hay duda de que la incidencia y la mortalidad del cáncer de pulmón son demasiado frecuentes [2]. En los pacientes con enfermedad pulmonar avanzada, las tasas de supervivencia a 1 año son típicamente 35%, y las tasas de supervivencia a 2 años, se mostró a acercarse al 15% -20% en los últimos estudios [3]. A lo sumo, la tasa de supervivencia global a los 5 años del cáncer localizado es del 15,9%, y sólo la mitad de los pacientes en estadio extendido tener la oportunidad de un 3,7% de sobrevivir 5 años [4]. La mayoría de los pacientes con CPNM localmente avanzado o han cáncer metastásico en estadio IIIB-IV en el momento del diagnóstico, dejando sólo paliativo opciones terapéuticas. Basándose en los datos clínicos existentes, la quimioterapia parece tener beneficios limitados y decepcionado pronósticos [5].
El nuevo enfoque de la inmunoterapia adoptiva de células se basa en la expansión ex vivo de las células efectoras específicas de tumor autólogo antes de su reinfusión en el huésped [6]. Desde el desarrollo de esta inmunoterapia, un número de células efectoras inmunológicas han sido empleados para tratar el cáncer y eliminar las células tumorales residuales después de la cirugía, como las células CIK, células asesinas activadas por linfocinas (Laks), linfocitos infiltrantes de tumor (TIL), naturales células asesinas (NKS), y células de linfocitos T citotóxicos (CTL) [7], [8]. Entre ellos, Laks que son una mezcla de activadas por linfoquinas CD3
+ linfocitos T y CD3
-CD56
+ CD16
+ NK células, se cultivaron con interleuquina-2 recombinante (rIL-2 ) durante 3 días, y los CTL se aislaron de los propios tejidos de un paciente, incluyendo las células mononucleares de sangre periférica (PBMCs), TIL, ganglios linfáticos de drenaje, o PBMCs después de la vacunación con células tumorales autólogas irradiadas (ATC) [7], [8]. Después de la inmunoterapia celular adoptiva hecho grandes avances debido a los esfuerzos de varias generaciones de investigadores, se encontraron células CIK poseer una mayor capacidad proliferativa y citolíticos que las células NK o LAK. células CIK son linfocitos citotóxicos MHC-sin restricciones que se pueden generar in vitro a partir de PBMCs y se cultivaron con la adición de IFN-γ, IL-2 y el anticuerpo monoclonal CD3 (CD3mAb). actividad citotóxica antitumoral está representado por los marcadores de superficie tanto para células T (TCR-α /β, CD3) y las células NKT (CD3
+ CD56
+) [9].
La primera ensayo clínico con terapia de células CIK para pacientes con cáncer se informó en 1999 [10]. Poco después, un creciente número de ensayos clínicos han sugerido que la terapia CIK rendimientos altamente convincentes respuestas clínicas objetivas en varios carcinomas sólidos en comparación con otros efectores inmunológicos. Un análisis conjunto de 792 pacientes con carcinomas sólidos indicó que el tratamiento con células CIK se asocia con una prolongación significativa de la tasa de control de tiempo medio de supervivencia y la enfermedad [11]. Recientemente, ambos ensayos clínicos con 563 pacientes chinos y los ensayos clínicos registrados internacionales con 426 casos de terapia celular CIK proporcionaron pruebas para una amplia aplicación clínica en base a una evaluación positiva de la inmunológicos y respuestas clínicas [12], [13]. Algunas revisiones sistemáticas han analizado la terapia con células CIK y demostrado que es seguro y eficaz para tratar el carcinoma de células renales, carcinoma hepatocelular y cáncer de colon [14] - [16]. Además, la terapia de células CIK se ha percibido de tener beneficios de supervivencia significativas en algunos ensayos clínicos de NSCLC [17] - [22]. Estos estudios mostraron que la inmunoterapia de los cánceres con células CIK puede mejorar las respuestas inmunológicas y clínicas, promover la calidad de vida (CV) de pacientes con cáncer, y extender su esperanza de vida bajo ciertas condiciones. Sin embargo, no existe una revisión sistemática para evaluar la eficacia terapéutica de las terapias con células CIK en combinación con quimioterapia en NSCLC; Por lo tanto, se realizó un metanálisis sistemático de la terapia celular CIK con ensayos controlados aleatorios sobre el NSCLC. Nuestros ensayos clínicos a gran escala de inmunoterapia celular CIK analizaron sistemáticamente la eficacia clínica y la seguridad teniendo en cuenta la supervivencia global, la respuesta clínica, evaluaciones inmunológicas y los efectos secundarios.
Métodos
Diseño del estudio, la estrategia de búsqueda y elegibilidad criterios
los estudios pertinentes se identificaron mediante búsquedas en PubMed, Cochrane Center Registro de ensayos controlados, Science Direct, Embase, y china National Infrastructure conocimiento para los ensayos controlados aleatorios (ECA) en las últimas décadas. La estrategia de búsqueda incluyó 'cáncer de células no pequeñas de pulmón, "las palabras clave' inmunoterapia adoptiva," y "brazos de inmunoterapia adoptiva de citoquinas inducida por células asesinas 'con ningún tratamiento adyuvante en pacientes con CPNM salvo aquellos que se habían sometido a la misma quimioterapia en comparación con los brazos de control . Además, se realizaron búsquedas de forma manual un sitio web de los ensayos clínicos de los ensayos en curso. Se realizaron búsquedas 'de células no pequeñas de cáncer de pulmón' 'y palabras clave de citoquinas inducida por las células asesinas' en el sitio web http://www.clinicaltrials.gov/. Los ensayos clínicos registrados con citas de publicaciones se muestran en la parte inferior de la pestaña Ver texto completo de un registro de estudios, bajo la dirección Más información. las listas de referencias de los ensayos previamente publicados y artículos de revisión relevantes fueron examinados por otros ensayos elegibles. No se aplicó ninguna restricción de idioma. También se examinaron los documentos de revisión y tesis de posgrado de los resultados publicados. Por otra parte, hemos realizado búsquedas manuales en las listas de referencias y resúmenes de congresos de la American Society of Clinical Oncology (ASCO) reuniones anuales y la Conferencia Europea del Cáncer (ECCO). Se excluyeron los resúmenes que nunca fueron posteriormente publicados como artículos completos y estudios con animales y líneas celulares.
criterios de selección de datos
La extracción de datos se llevó a cabo de forma independiente por dos revisores (Min Wang y Jun-Xia Cao ) utilizando un método estándar. El desacuerdo fue adjudicada por un tercer revisor (Zheng Xu-Wang) después de referirse de nuevo a las publicaciones originales. Los criterios de selección fueron los siguientes: (1) estudios de idioma Inglés en ensayos clínicos en humanos con los pacientes en todas las etapas de NSCLC fueron incluidos; (2) ECA con la inmunoterapia basada en células CIK combinada con quimioterapia versus quimioterapia sola para el tratamiento de NSCLC se incluyeron; (3) todos los ensayos aprobados por el comité de ética local y en el que todos los pacientes firmaron un consentimiento informado específico del estudio antes de la entrada en el estudio se incluyeron; Se excluyeron (4) estudios de casos, artículos de revisión y estudios con menos de 10 pacientes; (5) enfermedad metabólica no controlada, la función hepática inadecuada, disfunción renal, trastornos neurológicos y otras enfermedades infecciosas fueron excluidos del estudio; y (6) se excluyeron las muestras de sangre que reciben quimioterapia o radioterapia cualquier plazo de un mes antes del tratamiento.
La calidad general de cada incluido el papel se evaluó mediante la escala de Jadad [23]. Algunos de los criterios principales fueron empleados como un esquema de calificación: (1) la asignación al azar; (2) ocultamiento de la asignación; (3) cegamiento; (4) perdieron durante el seguimiento; (5) ITT (intención de tratar); y (6) la línea de base. También se utilizó un gráfico en embudo para evaluar el sesgo de publicación.
Definición de las medidas de resultado
Los criterios de valoración clínicos primarios en ECA para terapias contra el cáncer empleadas las medidas de tiempo medio de supervivencia (MST) y de progresión supervivencia libre (PFS). El tiempo hasta la progresión (TTP) puede no considerar aquellos pacientes que mueren por otras causas, pero se utiliza a menudo como equivalente a la SSP. Los criterios de valoración secundarios fueron la tasa de respuesta clínica, incluyendo la tasa de respuesta objetiva (ORR) y la tasa de control de la enfermedad (DCR). La ORR, se definió como la suma de las tasas parciales (RP) y las tasas de respuesta completa (CRS), y de la DCR se definió como la suma de la enfermedad estable (SD), PR y CR, de acuerdo con los criterios de la Organización Mundial de la Salud. Los efectos secundarios y la toxicidad fueron clasificados de acuerdo a los criterios del National Cancer Institute de toxicidad común. Los datos fueron obtenidos ya sea directamente de los artículos o calculados utilizando los datos graficados en artículos usando Photoshop y un explorador gráfico de software digitalizador.
El análisis estadístico
El análisis se realizó mediante Review Manager, versión 5.0 ( Centro Nórdico Cochran, Copenhague, Dinamarca). La heterogeneidad se evaluó para determinar qué modelo se debe usar. Para evaluar la heterogeneidad estadística entre los estudios, se realizó la prueba Q de Cochran utilizando un umbral de significación predefinido de 0,1. Los efectos del tratamiento son reflejadas por los odds ratios (OR), que se obtuvieron usando un método descrito por Mantel y Haenszel. Para evaluar si los resultados de los estudios eran homogéneos, se realizó la prueba Q de Cochran. También se calculó la cantidad I
2, que describe el porcentaje de variación entre los estudios que se debe a la heterogeneidad y no al azar. La O se obtuvo mediante un modelo de efectos fijos sin heterogeneidad estadísticamente significativa; de lo contrario, se empleó un modelo de efectos aleatorios. Los valores de p & lt; 0,05 se consideraron estadísticamente significativos. Todos los p-valores reportados fueron de dos caras.
Resultados
Selección de los ensayos
Las búsquedas de datos produjeron 167 referencias, de las cuales 91 fueron considerados elegibles por diferentes razones ( 44 inmunoterapia no CIK, 19 cáncer de múltiples análisis, 18 comentarios y 10 modelos animales). Los 76 artículos restantes fueron evaluados, y 59 ensayos fueron excluidos debido a la lengua, la falta de un ECA, y la escasez de datos. Los últimos 17 artículos fueron incluidos en el meta-análisis con el ECA de la terapia basada en células CIK para el tratamiento del NSCLC (Figura 1, ver también la lista de verificación S1).
La evaluación de la calidad de la 17 los estudios se resumen en la Tabla 1. también se utilizó un gráfico en embudo para evaluar el sesgo de publicación. En nuestro análisis, la supervivencia global, la tasa de respuesta clínica y los efectos secundarios sufridos publicadas bajo sesgo. Sin embargo, la evaluación inmunológica y subgrupos de células T observaron un alto sesgo de publicación (Figura 2), lo que demuestra que el nodo de la línea vertical no cumple con la horizontal en el punto medio mediante análisis con Review Manager Versión 5.0.
características de los CIK basada en células terapia
las características de los 17 ensayos se recogen en la Tabla 2. Nuestra seleccionaron 17 ensayos con un total de 1.172 pacientes con CPNM en estadio I-IV fueron incluidos en el presente análisis, y el 90% de ellos incluye metastásico o localmente avanzado NSCLC. Las edades estaban matriculados entre 28 y 82 años de edad, con una edad media mayor que 50.
En los 17 ensayos, el grupo de control fue la quimioterapia o cyberknife solo, mientras que el brazo de tratamiento fue la quimioterapia o cyberknife combina con la terapia de células CIK. En cada ensayo, todos los pacientes en el grupo CIK fueron tratados de forma idéntica a los del grupo de quimioterapia en términos de dosis y los ciclos de quimioterapia. En los 17 ensayos de la rama de tratamiento, la mayoría de los pacientes fueron tratados con células CIK más inmunoterapia CC combinado con la quimioterapia, aunque los pacientes en cuatro de los ensayos fueron inyectados con células CIK combinados con quimioterapia [6] [30], [38, ], [39]. La mayor parte de los grupos CIK utilizan los DC sin pulso, es decir, los países en desarrollo sólo eran inducidas a madurar antes de co-cultivo con células CIK. En 4 de cada 17 estudios, se inyectó a los países en desarrollo, mientras que siendo pulsadas con antígenos del cáncer de pulmón o lisado tumoral [17], [22], [33], [37]. Algunas de las citoquinas necesarias se suministraron en un cultivo de CIK, IL-2, IFN-γ, y CD3mAb en una variedad de medios de cultivo. Los pacientes recibieron infusiones de células de 1 x 10
9 a 2 × 10
12 células por supuesto, sobre todo en un orden de 10
9 de magnitud. La mayoría de los tratamientos con repetidas infusiones de células CIK se administraron durante al menos 2 semanas, y algunos de ellos duró más de 1 mes. La ruta para la inmunoterapia inyectada por vía intravenosa fue principalmente para las células CIK y por vía subcutánea para los países en desarrollo (Archivo S1 y S2 de archivos).
Supervivencia
Los pacientes en el grupo CIK habían prolongado significativamente comparados con MST aquellos en el grupo de no-CIK (IC del 95%: -7,45 a la -0,66;
p
= 0,02) (Tabla 3). Los resultados del análisis combinado mostraron que el brazo CIK extendió significativamente la supervivencia global al final del seguimiento, en comparación con el grupo no CIK (Tabla 4). Tres subgrupos de pacientes del grupo de terapia basada en células CIK en la supervivencia a 1 año, 2 años de supervivencia, y la supervivencia a 3 años presentan importantes beneficios de supervivencia en comparación con los pacientes en el grupo de no-CIK (o CI 0,64, 95%: 0,46 -0.91,
p = 0,01
; OR 0,36; IC del 95%: 0,22 a 0,59,
p Hotel & lt; 0,0001; OR 0,37; IC del 95%: 0,20-0,70,
p
= 0,002, respectivamente), que era consistente con la supervivencia global (OR 0,50; IC del 95%: 0,39 hasta 0,64,
p Hotel & lt; 0,0001). Con base en los resultados de nuestro análisis, el subgrupo supervivencia a corto plazo mostró una diferencia significativa en los años 1 y 2 años supervivencias. La supervivencia a 1 año de los 282 pacientes en el grupo de CIK fue del 56%, mientras que se encontró una tasa de supervivencia ligeramente inferior a 1 año para el grupo de no-CIK (45% de 278 pacientes). Una diferencia significativa también se demostró en el grupo de supervivencia a 2 años, que era 43,22% para 236 pacientes en el grupo CIK y 27,47% de los 233 pacientes sin el tratamiento con células CIK. A largo plazo, las tasas de supervivencia en el grupo de CIK mostraron una ligera disminución en comparación con la tasa de supervivencia a corto plazo; Sin embargo, se encontró una diferencia significativa en las tasas de supervivencia a largo plazo en comparación con el grupo de no-CIK (
p
= 0,002).
En cuanto a la mediana de la SLP, el grupo CIK no produjo ninguna mejora significativa en comparación con los grupos de control correspondientes (IC del 95%: -13,27 a 3,89
p = 0,28
), mientras que la mediana del THP claramente prolongado el tiempo medio hasta la progresión de la enfermedad en el CIK grupo (IC del 95% -2.70 -0.47, a
p
= 0,005) (Tabla 3).
índice de respuesta
El grupo de terapia basada en células CIK mostró resultados favorables cuando se somete a análisis tanto de la TRG (OR 0,58; IC del 95%: 0,44 a 0,78,
p = 0,00003
) y el DCR (OR 0,41; IC del 95% desde 0,29 hasta 0,58,
p
& lt; 0,0001), en comparación con los correspondientes brazos de control. Sin heterogeneidad significativa, se utilizó un modelo de efectos fijos en los análisis Orr y DCR (Tabla 4). prueba Q de Cochran dio lugar a un valor de p estadísticamente significativa, y la cantidad correspondiente de I
2 fue de 0% para ambos grupos, lo que indica que no hubo pruebas de heterogeneidad entre los estudios individuales.
evaluación inmunológica de subgrupos de células T
Cuando se observó heterogeneidad en los subgrupos de células T, se aplicó un modelo de efectos aleatorios para el análisis general y subgrupo de las evaluaciones inmunológicas de las células T (Tabla 5). Los resultados demostraron un aumento sustancial proporción de CD3
+ (MD 8,21; IC del 95%: 5,79 a 10,64,
p Hotel & lt; 0,00001), CD4
+ (MD 5,59; IC del 95%: 4.10- 7,07,
p Hotel & lt; 0,00001), CD4
+ CD8
+ (MD 0,49, IC del 95%: 0,37 a 0,61,
p Hotel & lt; 0,00001), CD3
+ CD56
+ (MD 7,80, IC del 95%: 2,61 a 12,98,
p
= 0,003) y las células NK (CD3
-CD16
+ CD56
+) (MD 6.21, 95% CI 02.25 a 10.17,
p
= 0,002), mientras que la proporción de células CD3
+ CD8
+ (MD 2,55, IC del 95%: -2,46 a 7,56,
p
= 0,32) generó ninguna mejoría después del tratamiento estadístico CIK. Además, el análisis agrupado mostró una disminución significativa en el porcentaje de CD8
+ (MD -2,75, IC del 95% -3,88 a -1,63,
p
& lt; 0,00001) y Treg (CD4
+ CD25
+ CD127
-) (DM -1,26; IC del 95% -1.94 a la 0,58, una
p = 0.0003)
subgrupos después del tratamiento con la terapia basada en células CIK
.
evaluación inmunológica de expresión Ag-NOR y CEA
Debido a los pocos datos que se presentan en los artículos publicados, sólo algunas de las evaluaciones inmunológicas, por ejemplo, Ag-NOR (regiones organizadoras del nucléolo argyrophilic) y NSCLC marcadores tumorales, por ejemplo, CEA, se sometieron a análisis. Se observó heterogeneidad, y por lo tanto un modelo de efectos aleatorios se aplicó para el análisis de los subgrupos y el análisis global. El análisis mostró que el grupo CIK mejoró significativamente la actividad inmune de los linfocitos T de los pacientes, mostrando una mejor Ag-NOR (DM -0,71; IC del 95%: -0,94 a -0,47,
p
= 0,00001) en comparación con la no -CIK grupo de terapia (Tabla 6). El nivel de expresión de CEA en el análisis se basó en dos ensayos [38], [39]. El CEA plasma se redujo notablemente en el grupo CIK en comparación con el grupo de no-CIK (DM 3,96; IC del 95%: 1,64 a 6,28,
p = 0,0008
) (Tabla 6).
toxicidad y reacciones adversas
los pacientes en el grupo CIK observaron menos efectos secundarios graves de la quimioterapia, tales como un menor número de casos de grado III y IV leucopenia, reacciones adversas gastrointestinales, anemia y disfunción hepática (Figura 3). Sin heterogeneidad significativa, se utilizó un modelo de efectos fijos (método de Mantel-Haenszel) para el análisis de efectos secundarios
.
Se observaron algunos efectos adversos graves frecuencia significativamente menor en el grupo de CIK. Debido a la falta de heterogeneidad, se utilizó el modelo de efectos fijos.
Después de la transfusión de células CIK, la mayoría de los pacientes desarrolló una fiebre ligera, entre 37.5 y 39 grados, pero los pacientes se recuperaron dentro de una pocos días sin efectos secundarios graves. Hay cuatro tipos de efectos secundarios de la quimioterapia graves podrían dar lugar a reacciones tóxicas en ambos grupos de pacientes. El análisis combinado mostró que los efectos adversos de las reacciones adversas gastrointestinales (OR 1.77, IC 95%: 1,20 a 2,59,
p
= 0,004) y la anemia (OR 2,80; IC del 95%: 1,37 a 5,73,
p
= 0,005) generaron una diferencia significativa, con un menor número de episodios en el grupo CIK. Leucopenia y disfunción hepática se observaron con menos frecuencia en los pacientes que recibieron el tratamiento CIK, pero ninguno de los conjuntos de datos muestran una diferencia significativa en comparación con el grupo de no-CIK (OR 1,59; IC del 95%: 0,93 a 2,72,
p
= 0,09; OR 1,11; IC del 95% 0,60 a 2,06,
p = 0,73
)
Discusión
la inmunoterapia se ha beneficiado de una mayor comprensión de la inmunología tumoral y la genética.. Un número de estudios han confirmado que la inmunoterapia es una opción de tratamiento seguro y factible para pacientes con cáncer [12] - [16]. Por lo tanto, la terapia convencional en combinación con inmunoterapia celular adoptiva está asociada con un pronóstico favorable en comparación con la quimioterapia sola [18]. Nuestro análisis se diseñó para dilucidar los efectos de la terapia de células CIK en la mejora de la eficacia terapéutica y el tratamiento seguro de los pacientes con CPNM basado en una variedad de índices de evaluación, incluyendo los resultados clínicos de supervivencia, tasas de respuesta clínica, inmunofenotipos y efectos adversos.
En nuestro estudio, se seleccionaron 17 ensayos para el análisis de la cultura de células CIK y regímenes de tratamiento. La mayoría de los ensayos no obtuvieron 50-100 ml de sangre periférica autóloga y se separaron las células mononucleares de inducción adicional. Algunas de las citoquinas necesarias fueron suministrados a los cultivos de células CIK, tales como IL-2, IFN-γ, y CD3mAb, en 1640 o medio libre de suero. Basado en nuestro estudio, la mayoría de los tratamientos con las infusiones repetidas de 1 × 10
9-2 × 10
se administraron 12 CIK células durante al menos 2 semanas en cada segundo día durante un mínimo de dos ciclos de tratamiento. Sin embargo, las diferentes dosis y ciclos de transfusiones de glóbulos CIK pueden conducir a diferentes resultados y las respuestas inmunes.
En el presente estudio, el grupo de terapia basada en células CIK se asoció con resultados favorables sobre la base de una evaluación tanto de la la supervivencia global y las respuestas clínicas (Tabla 4). La supervivencia a 1 año (OR 0,64; IC del 95%: 0,46 a 0,91,
p
= 0,01), supervivencia a 2 años (OR 0,36; IC del 95%: 0,22 a 0,59,
p & lt
; 0,0001), y 3 años de supervivencia (OR 0,37; IC del 95%: 0,20-0,70,
p = 0,002
) mostraron significativamente prolongada duración en el grupo de terapia celular CIK. Un DCR favorable y la ORR también se observaron en los pacientes que reciben terapia con células CIK (p & lt; 0,0001). El MTTP y el MST también mostraron mejoras significativas en el grupo CIK (
p = 0,005
,
p
= 0,02). células CIK, que también se conocen como células NKT, exhiben tanto las actividades de citotoxicidad de los linfocitos T y la actividad para destruir tumores restrictiva no MHC de las células NK, entre los cuales los principales efectores son CD3
+ CD56
células + [7]. En total, 4 de 17 ensayos utilizaron las DC pulsadas con antígenos del cáncer de pulmón o lisado tumoral, mientras que 9 ensayos utilizaron DC maduras co-cultivadas con células CIK (Tabla 2). DCs poseen actividades presentadoras de antígeno en la superficie extracelular y son capaces de activar la proliferación de células T y las células CIK. Por lo tanto, teniendo en cuenta la escasa inmunogenicidad de la infusión de NSCLC, CIK con un inmuno adyuvante o DC pulsados de antígenos específicos del tumor aumentó la respuesta inmune [24]. Por lo tanto, la terapia basada en células CIK incluso actuando a través de mecanismos completamente diferentes para la lucha contra las células cancerosas, puede conducir a una mejora en las respuestas objetivas clínicas basadas en la evaluación de los criterios RECIST tradicionales [40].
La respuesta inmune humana contra las células cancerosas es dependiente principalmente de la inmunidad celular. Estudios previos han encontrado que las relaciones numéricas de subconjuntos de linfocitos T en la sangre periférica son trastornos en los pacientes tumorales [17]. En el presente estudio, se observó un aumento sustancial porcentaje de CD3
+ y CD4
+ (
p Hotel & lt; 0,001), la proporción de CD4
+ CD8
+ y CD3
+ CD56
+ (
p
& lt; 0,001) y las células NK (
p
= 0,002), pero una disminución significativa en el porcentaje de la CD8
+ (
p Hotel & lt; 0,001) y Treg (
p = 0,0003
) después del tratamiento subgrupos DC-CIK por el meta-análisis. Muchos estudios han demostrado que las células CIK poseen una fuerte citotoxicidad contra una variedad de poblaciones de linfocitos T, entre los cuales CD3
+ CD56
+ es el principal responsable de la actividad antitumoral sin restricciones de MHC [8]. Además, el número de CD4
+ y CD8
+ células T juega un papel importante en afectar los resultados clínicos en NSCLC. La activación de las células CD4
+ T contribuye a la secreción de citoquinas reguladoras inmunes, incluyendo IL-2, IL-12 e IFN-γ, que a su vez facilita una elevación en el citolítica CD8
+ respuestas de células T , induciendo de este modo la muerte de células tumorales [25]. La activación de las células CD4
+ T también mejora la actividad destructora de las células NK y la actividad fagocítica de los macrófagos, lo que provocó una respuesta inmune humoral que conduce a la producción de anticuerpos, por lo tanto CD4
+ y CD8
+ tiene una relación sinérgica en la respuesta inmune. Nuestra meta-análisis demostró que CD3
+, CD4
+, CD4
+ CD8
+, CD3
+ CD56
+ y se aumentaron las células NK después del tratamiento DC-CIK, por lo tanto, lo que sugiere la mejora de la función inmune después de la inmunoterapia en los pacientes con CPNM.
Además, hay que señalar que CD8
+ células T no aumentaron significativamente después de la inmunoterapia, que también mostró la variedad de inmunofenotipos en comparación con los resultados de otras evaluaciones de las células T por el tratamiento CIK en diferentes carcinomas sólidos [11] - [13]. Naïve CD4
+ linfocitos T se someten a la diferenciación celular en la presencia del antígeno, las moléculas co-estimuladoras y citoquinas, y estas células se pueden dividir en varios grupos principales: Th1, Th2 y células Treg [26]. células cooperadoras Th1 son los efectores de la inmunidad del huésped frente a las bacterias intracelulares y protozoarios. Estos son activados por IL-12, IL-2 y el efector de citoquinas IFN-γ. Las principales células efectoras de la inmunidad Th1 son los macrófagos, las células CD8 T, células B, IgG y células T CD4. células auxiliares Th2 son los efectores de la inmunidad del huésped frente a helmintos multicelulares [26]. Las principales células efectoras son eosinófilos, basófilos y mastocitos, así como las células B IgE y IL-4 /IL-5 células T CD4 [27]. las células reguladoras T expresan FoxP3 y producen TGF-β y CD4
+ CD25
+ CD127
- T subgrupos para suprimir la respuesta inmune contra Th1 y Th2. Además, las células tumorales también expresan altos niveles de CD4
+ CD25
+ células T reguladoras, que ayudan citoquinas inmunosupresoras directas al microambiente tumoral [28], por lo que la disminución de la células Treg pueden ser útiles para eliminar el inmunosupresor del efecto para los pacientes con CPNM, y nuestros resultados también demostraron un menor número de células Treg. una mayor proporción de Treg y la proliferación de CD8
+ células T se asocian con pobre supervivencia en cáncer de tumores malignos de pulmón [41], lo que sugiere que DC-CIK inmunoterapia puede jugar un papel en la mejora de la función inmune de pacientes con NSCLC.
inmunoterapia ejerce su efecto sobre la respuesta inmune celular y requiere tiempo para citoquinas inmunes para cambiar el tiempo de la carga tumoral o la supervivencia. En nuestro estudio, también se evaluó la actividad inmune de los linfocitos T por Ag-NOR
in vivo
y el CEA marcador de tumor de NSCLC. El aumento significativo de Ag-NOR (
p
= 0,00001) y la reducción del contenido de CEA (
p = 0,0008
) observada en el grupo CIK contribuyeron a la prevención de la recurrencia a corto plazo y mejora de las respuestas clínicas. También se analizaron los resultados de supervivencia clínica, tasas de respuesta clínica, inmunofenotipos y marcadores tumorales, y la hipótesis de que las células CIK luchar con células tumorales de varias maneras diferentes, incluyendo las interacciones directas celulares (vía de Fas /FasL, la granzima B), la secreción de citoquinas (IFN-γ, TNF-α, IL-2) y los anticuerpos, y las regulaciones de la respuesta inmune (variaciones de linfocitos T) [29]. En total, nuestra meta-análisis evaluó una variedad de subgrupos de células T, y las diferencias en las citoquinas utilizadas para la inmunoterapia, y hemos encontrado que los resultados fueron consistentes con los resultados terapéuticos clínicos, tales como la supervivencia global y la respuesta clínica.
en nuestro análisis, la terapia basada en células CIK arrojó un resultado decepcionante en la fiebre no infecciosa (P & lt; 0,0001), y no se observó ningún otro efecto secundario importante. El análisis agrupado mostró que los efectos adversos de las reacciones adversas gastrointestinales (
p
= 0,004) y anemia (
p
= 0,005) generan diferencias significativas con un menor número de episodios en el grupo CIK. Por lo tanto, la inmunoterapia de células CIK con quimioterapia ha demostrado ser un método factible y eficaz para el tratamiento de NSCLC sin efectos secundarios graves.
limitación del estudio
Los 17 ensayos incluidos en esta meta- el análisis se seleccionaron con un ECA para mejorar la fiabilidad estadística. Para evitar sesgos en la identificación y selección de los ensayos, se reducen al mínimo la posibilidad de pasar por alto los trabajos publicados en la mayor medida. Aunque se seleccionaron utilizando ECA tanto como sea posible, hay algunos criterios importantes que no recibieron una buena calificación en la escala de Jadad, como la ocultación de la asignación y la intención de tratar, es decir, nuestro estudio puede tener un riesgo moderado de sesgo. También se utilizó un gráfico en embudo para evaluar el sesgo de publicación. En nuestro análisis, la supervivencia global, la tasa de respuesta clínica y los efectos secundarios sufrieron publicada bajo el sesgo; Sin embargo, la evaluación inmunológica y subgrupos de células T observaron un alto sesgo de publicación. Por lo tanto, hay algunas limitaciones en nuestro estudio. En primer lugar, la terapia basada en células CIK es una mayor preocupación por los estudiosos chinos; Por lo tanto, los 17 ensayos seleccionados eran de Asia, porque hay una escasez mundial de cualquier investigación clínica multicéntrico a gran muestra de la multinacional en relación con la terapia de células CIK para el NSCLC. En segundo lugar, algunos de los trabajos tuvieron que ser excluidos debido a la falta de un brazo de control durante el diseño experimental; Sin embargo, algunos de los documentos producidos incluso mejor pronóstico después del tratamiento CIK. En tercer lugar, se seleccionaron los datos analizados a partir de los trabajos publicados en lugar de dibujado de primera mano de los registros de pacientes, que puede causar una sobreestimación de los resultados analíticos.