Extracto
receptores de somatostatina (SST) mal se expresan en las células del cáncer de tiroides, pero su significado biológico no se entiende bien. El objetivo de este estudio fue evaluar la TSM en el cáncer de tiroides bien diferenciado (CMDT) y pobremente diferenciado (PDTC) por medio de imágenes y herramientas moleculares y su relación con la eficacia del tratamiento con análogos de la somatostatina. Se evaluaron treinta y nueve casos de carcinoma de tiroides (20 PDTC y 19 CTBD). Depreotida gammagrafía y niveles de ARNm de SST-subtipos, incluyendo la variante truncada sst5TMD4, se llevaron a cabo. exploraciones depreotida fueron positivos en el tumor recurrente en el cuello en 6 de las 11 (54%) PDTC, y en aquellos con metástasis pulmonares en 5/11 casos (45,4%); sst5TMD4 estaba presente en 18/20 (90%) de PDTC, siendo el sst-subtipo más expresado densamente, con un aumento de 20 veces en relación con sst2. En CTBD, sST2 fue el más representado, mientras que no se encontró sst5TMD4; sST2 fue significativamente mayor en comparación con PDTC en CTBD. Cinco depreotida PDTC positiva recibida octreotida durante 3-6 meses en un estudio piloto sin cambios en el tamaño de las lesiones en 3 de ellos, y un aumento significativo de la pulmonar y lesiones cervicales en los otros 2. Todos los pacientes tratados con octreotida PDTC mostraron alta expresión de sst5TMD4. análisis de la curva ROC demostró que sólo sst5TMD4 discrimina entre PDTC y CTBD. Llegamos a la conclusión de que sst5TMD4 se sobreexpresa en PDTC y puede estar implicado en la falta de respuesta al tratamiento con análogos de la somatostatina
Visto:.-Puig Domingo M, Luque RM, Reverter JL, López-Sánchez LM, Gahete MD, Culler MD, et al. (2014) La isoforma truncada de somatostatina Receptor5 (sst5TMD4) se asocia con mal diferenciado cáncer de tiroides. PLoS ONE 9 (1): e85527. doi: 10.1371 /journal.pone.0085527
Editor: Miguel López, Universidad de Santiago de Compostela Facultad de Medicina - CIMUS, España |
Recibido: 13 Septiembre, 2013; Aceptado: 28 Noviembre 2013; Publicado: 21 Enero 2014
Derechos de Autor © 2014 Puig-Domingo et al. Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos de la licencia Creative Commons Attribution License, que permite el uso ilimitado, distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que el autor original y la fuente se acreditan
Financiación:. M. Puig-Domingo, JP Castaño, RM I. Luque y Halperin han recibido honorarios por conferencias de Novartis y Ipsen. M. Puig-Domingo ha recibido honorarios por su participación en las juntas de asesoramiento de Genzyme. Este trabajo ha sido financiado por las siguientes subvenciones: BIO-0139, CTS-5051, PI-036-2012, BFU2010-19300, CIBERobn, (a R. M. Luque y J. P. Castaño); CD11 programa "Sara Borrell" /00276 (de M. D. Gahete) y el programa "Juan de la Cierva" JCI-2.009-05.675 (a L. M. López-Sánchez). Este trabajo fue parcialmente apoyado por Novartis Oncología España (M. Puig-Domingo y I. Halperin). Los donantes no tenía papel en el diseño del estudio, la recogida y análisis de datos, decisión a publicar, o la preparación del manuscrito
Conflicto de intereses:. M. Puig-Domingo, J. P. Castaño, R.M. I. Luque y Halperin han recibido honorarios por conferencias de Novartis y Ipsen. M. Puig-Domingo ha recibido honorarios por su participación en las juntas de asesoramiento de Genzyme. Este trabajo ha sido financiado por las siguientes subvenciones: BIO-0139, CTS-5051, PI-036-2012, BFU2010-19300, CIBERobn, (a R. M. Luque y J. P. Castaño); CD11 programa "Sara Borrell" /00276 (de M. D. Gahete) y el programa "Juan de la Cierva" JCI-2.009-05.675 (a L. M. López-Sánchez). Este trabajo fue parcialmente apoyado por Novartis Oncología España (M. Puig-Domingo y I. Halperin). Esto no altera la adhesión de los autores a todas las políticas de PLoS ONE sobre los datos y compartir materiales.
Introducción
El cáncer de tiroides en su papilar y folicular formas bien diferenciadas (CMDT) tiene un pronóstico excelente con muy altas tasas de curación después del tratamiento quirúrgico seguido de yodo radiactivo [1], [2]. Sin embargo, el tratamiento de pacientes con cáncer de tiroides -refractory pobremente diferenciado (PDTC) con yodo radioactivo (RAI) es controvertido y difícil, sin ningún tratamiento eficaz disponible hasta la reciente aparición de los inhibidores de la multi-objetivo de la tirosina quinasa [3]. Por lo general, se acepta que se produce ya sea PDTC
de novo o el progreso de una CTBD preexistente a través de un proceso de múltiples pasos de los cambios genéticos y epigenéticos. Nuevas vías moleculares y objetivos están bajo investigación para descubrir el proceso de desdiferenciación de las células del cáncer de tiroides [4].
La somatostatina es un péptido ubicua en el tracto gastrointestinal del sistema nervioso central que ejerce muchas funciones biológicas, tanto en endocrino y no tejidos -endocrine por la unión a sus cinco subtipos de receptores (sst1-5) [5]. La expresión de receptores de somatostatina (SST) en tumores que surgen de diferentes tejidos ha sido la base de la utilización de análogos de somatostatina como una opción de bio-terapéutica lo que conduce a la estabilización de crecimiento del tumor y aumentar el tiempo de supervivencia de los pacientes en algunos tipos de cáncer [6], [7 ]. Estudios recientes y viejos indican la presencia de TSM en muestras de diferentes estados patológicos de la glándula tiroides incluyendo cáncer de tiroides no medular [8], [9]
La familia de receptores sst se ha caracterizado completamente, y clásicamente, 5 subtipos han sido identificados con diferentes implicaciones biológicas en el ciclo celular [8]. subtipos sst 2 y 5 están involucrados en el control de la secreción de la hormona, así como el crecimiento celular, mientras que sst1, 3 y 4 están implicados principalmente en funciones no hormonales [10] - [12]. tratamientos análogos de la somatostatina utilizados en la práctica clínica implican la unión de sST2 y 5 con diferente afinidad [13], [14], con sST2 que tiene la afinidad de unión de los más utilizados actualmente compuestos, octreotida y lanreotida [15] máxima, mientras que pasireotida es un nuevo compuesto de direccionamiento sst5 con mayor afinidad [16], [17]. Recientemente, dos nuevas variantes funcionales sst5 humanos han sido identificados, los llamados sst5TMD4 y sst5TMD5, generada a través de empalme no canónicos, y que exhiben características moleculares únicas /funcionales [18], [19]. Curiosamente, sst5TMD4 se ha detectado en pacientes con GH secretoras de adenomas y cáncer de mama [19] - [21]. expresión sst5TMD4 se ha relacionado con mala respuesta al tratamiento octreotide en la acromegalia. Sin embargo, su significado funcional no está bien descrito en otro tipo de tumores.
A continuación, se realizó un estudio retrospectivo en el nivel molecular para explorar la posible asociación de los subtipos sst fenotipo, y en particular sst5TMD4, en CTBD y PDTC pacientes, su uso potencial como un marcador biológico y sus implicaciones terapéuticas.
Materiales y Métodos
el estudio se realizó de acuerdo a los principios de la Declaración de Helsinki, (revisión de Edimburgo 2000) y fue aprobado por el Comité de Ética de Investigación humana del hospital Clínico de Barcelona (Comité Ético de Investigación Clínica, CEIC), Barcelona, España. La naturaleza del estudio se explicó a los pacientes, y se obtuvo el consentimiento informado por escrito en cada caso.
Los pacientes
El grupo de estudio consistió en 39 pacientes (29 mujeres /10 hombres) de dos hospitales universitarios. Entre estos 39 sujetos, 20 pacientes tenían PDTC (tabla 1) con una edad media de 57 ± 13 años, (12 mujeres /hombres) 8; de esos 20 casos PDTC, 18 eran tumores papilares y 2 eran de origen folicular en. Todos tenían enfermedad activa (fase IV de la clasificación TNM), con un seguimiento que van desde 6 a 21 años y 9 de ellos murieron durante el seguimiento. Las concentraciones de tiroglobulina en estos pacientes osciló entre 4 y 29595 ng /ml. Todos los pacientes fueron tratados con un protocolo terapéutico similares siguiendo las recomendaciones internacionales de referencia [1], [2]. Aquellos pacientes cojinete PDTC requieren múltiples cirugías cuando esté indicado y más de una dosis de RAI; La terapia RAI ya no se utiliza cuando se convirtió en la captación de la RAI negativa a pesar de progresión de la enfermedad. pacientes PDTC fueron tratados con tiroxina en dosis supresoras mientras que los casos bien diferenciados recibieron tiroxina en una dosis de orientación TSH un valor normal bajo (& lt; 2 mUI /ml). Todos los casos PDTC mostró negativo capacidad de atrapar la RAI durante su evolución y todos tenían recurrencia cervical locorregional y /o metástasis extracervical, ya sea en el sistema nervioso central, hueso, pulmón o el mediastino detectada por diferentes procedimientos de imagen, incluyendo la ecografía, la tomografía axial computarizada, resonancia magnética, y scan
18 F-FDG-PET. Con el fin de participar en un estudio piloto en el que se administra octreotida análogo de la somatostatina, en 11 de estos 20 pacientes, un
99m Tc-depreotida gammagrafía se realizó para evaluar la presencia de SST en el tejido del tumor primario residual y las metástasis. Cinco de los 11 pacientes en los que el
99m Tc-depreotida gammagrafía mostró una imagen positiva del tumor primario residual y /o tejido metastásico y progresión de la enfermedad por criterios RECIST recibieron tratamiento con la octreotida análogo de la somatostatina de acción prolongada a dosis de 30 mg IM /mes durante un período de 3-6 meses durante 2007 y 2008 (Tabla 1)
los restantes 19 de los 39 pacientes incluidos en el estudio constituyó el grupo de control.; todos tenían tumores bien diferenciados, estar libre de enfermedad en el momento del estudio y aparentemente curado después de la primera y única tratamiento realizado en el momento del diagnóstico, que consiste en la tiroidectomía total seguida de 100 mCi de RAI dado 3 meses después de la cirugía. La edad media de este grupo fue de 48 ± 8 años (10 hombres y 10 mujeres).
Las técnicas de imagen
gammagrafía con 99mTc-depreotida se llevaron a cabo en 11 pacientes a cabo 20 que lleva un PDTC ( tabla 1). Depreotida es una unión a SSTR 2, 3, y 5 en las superficies celulares, de manera más eficiente que los compuestos radiomarcados octreotida análogo de la somatostatina. Todos los pacientes estaban en terapia de supresión hormonal con tiroxina cuando se realizaron los procedimientos de imagen.
99m Tc-depreotida se preparó a partir de un kit disponible comercialmente (NeoSpect®; Amersham Health, Buckinghamshire, Reino Unido). La dosis iv-inyectada por paciente fue de 740 MBq (50 g de péptido) de
99m Tc-depreotida. formación de imágenes escintigráficas fue adquirida con una cámara gamma de doble cabeza y un colimador de alta resolución.
imágenes de 99mTc-depreotida se obtuvieron a 1 hora y 3 horas después de la inyección. Se llevaron a cabo adquisiciones planas de cuerpo entero y de fotón único tomografía computarizada de emisión (SPECT) de la cabeza, el cuello, el tórax y el abdomen. Con el fin de evaluar la actividad tumoral hipermetabólico,
18 F-FDG-PET scans se obtuvieron, además, a 1 h después de la inyección intravenosa de 370 MBq de 18F-FDG utilizando un escáner PET-anillo completo dedicado, con un campo axial de vista de 15,2 cm y una resolución máxima de 3,8 mm y 4,0 mm transaxially axialmente.
expresión de TSM en el tejido de cáncer de tiroides y la glándula tiroidea normal
Determinación de la expresión de TSM por cuantitativa en tiempo real RT-PCR (qrtRT -PCR) se realizó en muestras tumorales incluidas en parafina de todos los pacientes y CTBD PDTC. En pacientes PDTC, las muestras se obtuvieron en el momento de la reintervención quirúrgica para el avance de estado de la enfermedad a partir de tejido tumoral de recurrencia cervical en todos los casos. Además, las muestras de glándula tiroides normal (n = 7) obtenida a partir del tumor Biobanco del Hospital Germans Trias y de un grupo de muestras de glándula tiroides normal, obtenido de la Universidad de Córdoba también se incluyeron en el estudio. En concreto, las muestras tumorales y normales de la tiroides (4 secciones de 5 m de espesor) se procesaron para una recuperación de ARN total usando el kit RNeasy FFPE, con el tratamiento con ADNasa (Qiagen, Barcelona, España). Los detalles de la cuantificación del ARN, la transcripción inversa (RT; 1 g de ARN total) y qrtRT-PCR para todos los SST-subtipos han sido reportados anteriormente en detalle 18,22. Cabe señalar que una curva patrón específico para cada transcripción se realizó con cada conjunto de muestras para estimar el número de copias. Total de muestras de ARN que no se transcribieron-inversa se realizaron en el control de la contaminación de ADN genómico y /o técnica (fondo). Para controlar las variaciones en la cantidad de ARN utilizado en la reacción de RT y la eficiencia de la reacción RT, el nivel de expresión (número de copia) de 3 genes de limpieza (gliceraldehído-3-fosfato deshidrogenasa - GAPDH, β-actina y 18S) era determinado para cada muestra como se informó anteriormente (19,20). Se utilizó GeNorm® 3.3 aplicación de Visual Basic para Microsoft Excel® (http://medgen.ugent.be/jvdesomp/genorm) [23] para evaluar la estabilidad de los genes de limpieza. Las medias geométricas de los números de copia para GAPDH y β-actina dentro de cada muestra se utilizaron como un factor de normalización final (NF). Resultados se informaron como el número de copias sst menos el fondo dividido por el correspondiente NF.
La respuesta al tratamiento octreotida
Un subgrupo de pacientes PDTP refractarios al tratamiento con yodo radiactivo, enfermedad progresiva según los criterios radiológicos y depreotida positivo exploraciones recibieron tratamiento octreotida durante 3-6 meses en un piloto protocolo compasivo aceptado por los pacientes y el comité de ética del hospital (Tabla 1). La eficacia se evaluó mediante los criterios RECIST (http://www.recist.com/index.html) y de acuerdo con TSM subtipos.
Análisis estadístico y (ROC) Curvas características de funcionamiento del receptor de expresión TSM
Los datos categóricos se describieron mediante frecuencias y porcentajes. Para las variables cuantitativas, medidas de tendencia central y dispersión (media y desviación estándar) se proporcionan.
El análisis bivariado de las principales variables se efectúa utilizando 2 × 2 tablas de contingencia con las pruebas de la X2 para evaluar las diferencias significativas en las frecuencias para categórica variables. Se utilizó la prueba t paramétrica para comparar los datos cuantitativos. En las variables cuantitativas no una distribución normal y se utilizó la prueba U de la no paramétrica de Mann-Whitney cuando esté indicado.
Todos los análisis se realizaron utilizando el paquete estadístico para Ciencias Sociales (SPSS), versión 17.0 (SPSS, Chicago, IL, EE.UU.). Se consideró que p & lt; 0,05 como estadísticamente significativa
ROC (Receiver Operating Characteristic) se llevó a cabo para la evaluación de la sensibilidad y especificidad de pruebas de diagnóstico.. Fue utilizado como una herramienta para medir qué tan bien la expresión de TSM puede distinguir entre los dos grupos de diagnóstico (pacientes con enfermedad libres de enfermedad activa /pacientes). El análisis estadístico de las curvas ROC se realizó mediante el cálculo del área bajo la curva (AUC) de cada receptor, y comparándolas con las AUC de la línea de referencia mediante la prueba de t de Student.
Resultados
identificación de las TSM en el cáncer de tiroides pobremente diferenciado por
imágenes 99mTc-depreotida
en los 11 pacientes (5 hombres y 6 mujeres) del grupo PDTC en las que se realizó un
99m Tc-depreotida, 9 mostraron recurrencia locorregional cervical y todas las metástasis presentados de tamaño de la diferencia en los pulmones o los huesos identificados ya sea por tomografía computarizada y /o resonancia magnética y /o gammagrafía ósea.
gammagrafía con 99mTc-depreotida fue positiva en el cuello en 6 de estos 11 pacientes (54%), y en el pulmón se encontraron imágenes positivas en 5/11 (45,4%) (Figura 1). Estos 6 casos con imágenes pulmonares negativos tenían micrometástasis, como se evidencia por TC. En el único paciente que tiene metástasis óseas en el que se realizó
99m Tc-depreotida gammagrafía, la imagen fue negativo.
18F-FDG-PET fue positiva en 8/11 en el pulmón y en el cuello en 5/11 (tabla 1).
La respuesta al tratamiento con somatostatina analógico
Cinco pacientes en los que
se encontraron 99mTc-depreotida gammagrafía imágenes positivas, ya sea en el cuello y /o del pulmón fueron tratados con la somatostatina de acción prolongada octreotida análogo a dosis de 30 mg durante un periodo de 3-6 meses en una estudio piloto. La respuesta al tratamiento se evaluó mediante el uso de tomografía computarizada de pulmón y de formación de imágenes ecografía cervical según los criterios RECIST. En 3 pacientes, se encontró ningún cambio en el tamaño de las lesiones. En los 2 pacientes restantes, hubo un aumento significativo en las lesiones pulmonares en una y en la otra un aumento importante en el tamaño de las lesiones cervicales con signos de necrosis intratumoral en una de las lesiones. El tratamiento fue bien tolerado en todos los casos, sin complicación metabólica en particular; si bien, un paciente presentó dolor abdominal que desapareció después de la disminución temporal de la dosis de octreotida. Todos los tratamientos se dejaron como se encontraron ninguna modificación aparente de la evolución de la enfermedad y en 2 pacientes evidencia de progresión parecía plausible. Debido a los resultados de esta primera serie de tratamientos, no hay nuevos casos PDTC se incluyeron en el estudio piloto.
Expresión de TSM en bien diferenciados, el tejido del cáncer de tiroides pobremente diferenciado y el tejido tiroideo normal
residuales de tejido de cáncer primarios y metástasis muestras del subgrupo de pacientes con estudios de imagen y
99mTc-depreotida gammagrafía más 9 pacientes adicionales (total = 20, Tabla 1) que llevan PDTC se recuperaron para los estudios de expresión TSM. Las muestras de 19 pacientes con CTBD libre de condición de la enfermedad durante el seguimiento también se incluyeron en el estudio y, además, muestras de 7 glándulas tiroideas normales y de un grupo de tiroides normales. Una cantidad variable de ARNm para cada uno de los cinco subtipos sst-fue encontrado con diferencias significativas entre las edades y sexo (datos no mostrados) dentro de la CTBD y grupos PDTC, así como entre el tejido de la tiroides normal. La media de contenido de mRNA de SST-subtipos en CTBD y PDTC se muestra en la Figura 2. En CTBD, sst2 fue el sst-subtipo dominante representado, seguido de sst1 & gt; sst5 & gt; sst3 = sst4, mientras que la expresión de sst5TMD4 y sst5TMD5 se no se encuentra en CTBD muestras. En el grupo de PDTC, el sst-subtipo más representado fue de lejos sst5TMD4, que se encontró para mostrar un pliegue-aumento 23 en la expresión en comparación con el siguiente sst-subtipo más expresado que era sst2, seguido de sst1 & gt; sst3 & gt; sst4 & gt ; sst5. Expresión de sst5TMD5 no se detectó en PDTC. En 2 de los 20 pacientes (10%) con PDTC, sst5TMD4 no se detectó. Al comparar los niveles de mRNA sst-subtipo entre CTBD y PDTC, se encontró que la expresión sst2 fue mayor en CTBD comparación con PDTC (317 ± 80
vs
158 ± 42, respectivamente;. P = 0,08). Además, la expresión de sst1 y sst5 tendió a incrementarse en el grupo PDTC en comparación con los pacientes CTBD (173 ± 98 vs 24 ± 4 para sst1 y 202 ± 62 vs 114 ± 18 para sst5; p = 0,16 y 0,12, respectivamente). No se encontraron diferencias o tendencia a la diferencia en los niveles de expresión de sst3 o sst4 entre PDTC y CTBD. Por último, los 5 pacientes en los que se realizó el tratamiento octreotida mostraron altos niveles de expresión de sst5TMD4 (media = 2.286 ± 896).
mRNA número de copias del canónica (sst1-5) y truncada (sst5TMD4) se midió receptores de somatostatina por qrtRT-PCR en una batería de los cánceres de tiroides bien diferenciados (CTBD) y cánceres de tiroides diferenciados mal (PDTC). los valores de nivel de ARNm absolutos fueron ajustados por un factor de normalización (NF) obtenido como las medias geométricas de los números de copias para GAPDH y β-actina. Los valores representan la media ± SEM (n = 19-20 pacientes). Los asteriscos (***, p & lt; 0,001) indican valores que difieren significativamente de CTBD
En cuanto al estudio realizado en el tejido tiroideo normal, los resultados indican claramente que los niveles de expresión de sst5TMD4 es bastante bajo en. esas muestras normales (20 ± 7 copias de sst5TMD4 /50 ng de ARN total), que apoya a los datos anteriores reportados por nuestro grupo [18].
curvas
ROC fueron utilizados para estimar el rendimiento de los diferentes niveles de expresión TSM para distinguir entre los dos grupos de diagnóstico (pacientes con enfermedad activa /pacientes libres de enfermedad; Figura 3). Cuanto más cerca de la curva ROC es la esquina superior izquierda de la gráfica (es decir, mayor sensibilidad y especificidad), mayor es la precisión global del marcador utilizado. Mientras que la expresión de la canónica sst1-sst5 tenía una menor capacidad para distinguir entre los dos grupos de diagnóstico (curvas ROC similares a la línea de referencia), la curva ROC de los niveles de expresión sst5TMD4 truncados fue significativamente diferente de la línea de referencia (área bajo la curva = 0,957; p & lt; 0,0001). De hecho, un punto de corte de 5 copias de la sst5TMD4, que coincidió aproximadamente con la media de la expresión de los pacientes libres de enfermedad, produjo una sensibilidad de 90% y una especificidad del 84%. Una puntuación óptima superior o igual a 8,5 copias tuvo una sensibilidad del 90% y especificidad. Por lo tanto, nuestros resultados indican claramente que la expresión de la variante sst5TMD4 truncado es el único marcador que podría ser utilizado de una manera sensible y específica.
Discusión
RAI-refractario PDTC se encuentra en aproximadamente el 5-10% de todos los cánceres de tiroides derivados de células foliculares [1], [2]. Estos pacientes tienen un mal pronóstico, ya que no hay tratamientos eficaces disponibles en la actualidad 24,25 y por lo tanto, la búsqueda de nuevas dianas terapéuticas, sobre todo para la etapa III y IV de los casos, es actualmente en curso [3], [4].
la somatostatina regula muchas funciones fisiológicas en la mayor parte de los órganos de las especies de mamíferos y no mamíferos a través de sus receptores sst1-5 [10]. Además, la somatostatina y sus análogos muestran acciones antiproliferativas, que los hacen útiles como tratamiento coadyuvante especialmente para los tumores neuroendocrinos [7], además de su utilidad en la acromegalia [26]. En la acromegalia, de acción prolongada análogos de la somatostatina se asocian con una disminución de aproximadamente el 20% en el tamaño de los adenomas después de 6-12 meses de tratamiento en un tercio de los casos [27]. Por otra parte, las terapias dirigidas receptor péptido radiomarcado son otra opción potencial para algunos tumores que llevan TSM [28]. La presencia de TSM se ha informado en el tejido normal de la tiroides y en el cáncer de tiroides [8]. Por otra parte, en líneas celulares de carcinoma de tiroides, la somatostatina es capaz de inhibir la proliferación de células incluso en líneas celulares de carcinoma anaplásico de tiroides [8]. La evaluación cuantitativa de la expresión de TSM en el cáncer de tiroides ha mostrado algunas discrepancias, con algunos autores informar de la expresión de sst1, 3 y 5 y otros exclusivamente sst5 mediante el uso de técnicas inmunocitoquímicas [8], [10]. Incluso con estas discrepancias, la expresión de TSM en tanto folicular de tiroides y tejido de cáncer de origen parafoliculares ha sido confirmada recientemente por otros laboratorios [9], [11], [12], [29] - [31].
durante la última década la presencia de TSM en el cáncer de tiroides también ha sido explorada por gammagrafía de tiroides, sobre todo el uso de octreótido radiomarcado y depreotida, sino también con otros compuestos diferentes [32], [33], lo que facilita la localización de tejido metastásico no detectada con la RAI escanear. Depreotida tiene una alta afinidad para sst2, 3 y 5, lo que permite una adquisición eficiente de imágenes en tejidos que expresan estos receptores. En nuestros pacientes PDTC, depreotida gammagrafía mostró imágenes positivas en aproximadamente un 40-50% de ellos en el tejido del cuello uterino recurrente y /o las metástasis extracervical, estos últimos principalmente en el pulmón. Por lo tanto, se decidió realizar un estudio piloto tratamiento de 5 PDTC depreotida pacientes positivos que tienen grandes metástasis con la octreotida análogo de la somatostatina, en un intento de estabilizar o reducir el crecimiento del tumor con el resultado de cualquiera de ninguna mejora o incluso una aparentemente rápido crecimiento en dos de la casos. Como consecuencia de ello, el tratamiento con octreotida fue retirado en todos los pacientes y los nuevos pacientes no fueron incluidos. En el único estudio piloto previo similar publicado hasta la fecha, Kolhfuerst
et al.
[13] encontraron resultados similares y llegó a la conclusión de que no había ninguna indicación de análogos de la somatostatina tratamiento en pacientes con avanzada PDTC.
Más tarde, en 2009, después de estos pacientes fueron estudiados y tratados, nuestro grupo [18] identificado dos nuevas variantes truncadas funcionales de sst5 con 5 y 4 dominios transmembrana. Es importante destacar que, utilizando el modelo de la acromegalia, hemos demostrado que la presencia de esas variantes sst se etiológicamente vinculada a una falta de respuesta a la inhibición de la hormona del crecimiento, así como a los efectos antiproliferativos de tratamiento con análogos de la somatostatina [20]. Basándose en estos resultados, la hipótesis de que los pacientes con PDTC podrían potencialmente expresan sst5TMD4 y, como resultado, podrían ser no responde al tratamiento octreotide. Por ello, investigó posteriormente de manera retrospectiva la presencia de tales variantes truncadas de sst5, y demostramos por primera vez su expresión exclusiva en el tejido PDTC como no presencia se encontró en las muestras CTBD y tejido tiroideo normal. Este hallazgo sugiere que sst5TMD4 podría aparecer en el cáncer de tiroides como el proceso de desdiferenciación progresa, aunque actualmente se desconoce el mecanismo último de su expresión anómala. Por lo tanto, la detección de sst5TMD4 puede ser utilizado como un marcador adicional de mal pronóstico. Este concepto se apoya en los análisis de curvas ROC que indica que sst5TMD4 identifica con precisión PDTC, con una sensibilidad del 90% y una especificidad del 84%. En este sentido, sst5TMD4 también se ha encontrado recientemente en el cáncer de mama poco diferenciado [21] en el que también se asocia con un mal pronóstico. Por otra parte, la expresión de sst5TMD4 en la línea celular de cáncer de mama MCF-7 aumenta características de malignidad tales como las capacidades de invasión y proliferación. Este comportamiento biológico maligno potenciada se cree que está relacionado con el aumento en la actividad de quinasas fosforiladas extracelulares reguladas por señales 1 y 2, los niveles de P-Akt, y ciclina D3 y Arp2 /3 expresión compleja [34]. Además, la expresión sst2, que se asocia a una buena respuesta a análogos de la somatostatina, se encontró que las reguladas en PDTC en comparación con CTBD. Curiosamente, sst5TDM4 se ha demostrado que interactuar físicamente con sst2, alterando sus mecanismos de transducción de señales y, como consecuencia, el bloqueo de sus efectos antiproliferativos mediada. Eliminación de la señalización de sst2 también da lugar a deterioro de un bucle autocrino inhibidor de retroalimentación, que puede modificar el fenotipo celular y aumentar la proliferación celular [23], [35]. Esto podría explicar en parte el aumento aparente en el tamaño del tumor en 2 de los pacientes tratados con octreotida, como su unión a sst5TMD4 tendría estimula aún más la supresión funcional de la actividad sst2
.
Aunque el diseño de la parte terapéutica de el presente estudio puede tener algunas limitaciones, sobre todo la ausencia de un grupo control, ya que era un estudio piloto, los hallazgos moleculares de muestras PDTC estudiado retrospectivamente parece explicar la aparente falta de respuesta del tratamiento octreotida y apoyado la decisión clínica de detener la inclusión de más pacientes en el estudio piloto. Por lo tanto, con respecto a las implicaciones terapéuticas de nuestros resultados, creemos que las conclusiones de Kolhfuerst
et al
. [13] siguen siendo válidas. Existe suficiente información clínica y ahora molecular de estado que avanzado cáncer de tiroides dediferenciado tiene características biológicas (es decir, alto sst5TMD4 y baja sST2) que podrían explicar la falta de efecto o incluso posibles efectos deletéreos de tratamiento con análogos de la somatostatina en este tipo de pacientes, o al menos en sst5TMD4 los que expresan en sus tumores. Como la heterogeneidad molecular de los tumores de tiroides es cada vez más evidente, más investigaciones sobre la variante sst5TMD4 puede allanar el camino para comprender mejor sus funciones moleculares y su uso potencial como una herramienta de diagnóstico o incluso terapéutica en el cáncer de tiroides.
Reconocimientos
Los autores gracias Montserrat Gilabert (Novartis Oncology, España), por su apoyo a este trabajo.