Extracto
Antecedentes
M2 piruvato quinasa (M2PK) es una oncoproteína secretada por cáncer colorrectal en las heces. Este es el primer informe sobre la exactitud de una prueba de heces rápida en la detección de cáncer colorrectal (CCR).
Objetivo
Para determinar la sensibilidad, especificidad y valor predictivo positivo y negativo de una rápida , punto de atención de prueba de heces M2 PK-la M2PK rápida.
Métodos
casos consecutivos de endoscopia diagnostica e histológica demostrado CRC fueron reclutados. Las heces se recogieron por los pacientes y probados con la prueba de inmunocromatografía M2PK rápida (Schebo Biotech AC, Giessen, Alemania). Los controles fueron elegidos de forma consecutiva de pacientes sin ninguna enfermedad colonoscopia someterse colorrectal o gastrointestinal significativo. CRC fue efectuado de acuerdo con la AJCC Staging Manual (7
ª edición) y la ubicación del tumor define como proximal o distal.
Resultados
La sensibilidad, especificidad, valor predictivo positivo y negativo valor predictivo y la precisión global fueron: 93%, 97,5%, 94,9%, 96,5% y 96,0%, respectivamente. El valor predictivo positivo para los tumores proximales fue significativamente menor en comparación con los tumores distales. No se observaron diferencias entre las diferentes etapas del tumor.
Conclusiones
El M2-PK rápida, rápida, prueba de punto de atención es una prueba de alta precisión en la detección de CCR. Es fácil y conveniente de realizar y una prueba de diagnóstico útil para la detección de CCR en un entorno práctica clínica
Visto:. Sithambaram S, Hilmi I, Goh KL (2015) La precisión diagnóstica de la M2 de piruvato-quinasa Prueba de Ensayo heces rápida de Exámenes Una Oficina rápida basada en la detección de cáncer colorrectal. PLoS ONE 10 (7): e0131616. doi: 10.1371 /journal.pone.0131616
Editor: Lanjing Zhang, Centro Médico de la Universidad de /Madera Escuela de Medicina de Rutgers Princeton, Robert Johnson, Estados Unidos |
Recibido: 17 Enero, 2015; Aceptado: June 3, 2015; Publicado: 9 Julio 2015
Derechos de Autor © 2015 Sithambaram et al. Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos de la licencia Creative Commons Attribution License, que permite el uso ilimitado, distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que el autor original y la fuente se acreditan
Disponibilidad de datos: Todos los datos relevantes están dentro del apoyo de sus archivos de información en papel y
Financiación:. el estudio fue financiado por la empresa Alere. Los donantes no tenía papel en el diseño del estudio, la recogida y análisis de datos, decisión a publicar, o la preparación del manuscrito
Conflicto de intereses:.. Los autores han declarado que no existen intereses en competencia
Introducción
exámenes de heces fecales que han sido ampliamente utilizadas para la selección detectionand de cáncer colorrectal (CCR) se basan en la prueba de sangre oculta en las heces. Las pruebas basadas guaic han estado en uso durante alongtime pero adolece de la desventaja de un alto resultdue de falsos positivos a la naturaleza inherente de la prueba que depende de la capacidad oxidativa del guaicsubstrate. En general, las pruebas basadas oculta en las heces guaic tienen limitedsensitivity y especificidad. En un estudio, la sensibilidad de la prueba basada en guayaco (HemoccultSensa) fue 79,4% y la especificidad del 86,7% [1]. La prueba guiac es inconveniente para llevar a cabo ya que los pacientes tienen que ir en una dieta restringida varios días antes de la prueba, que incluye evitar varios tipos de alimentos que pueden causar una reacción falsa peroxidasa o son antioxidantes y antiinflamatorios no esteroideos y aspirina. Estos problemas han sido superados por la nueva prueba inmunoquímica fecal (FIT) que detecta la porción globina de humanhemoglobin. Globina que surge de tracto gastrointestinal superior se degrada rápidamente por las enzimas digestivas. Por lo tanto estas pruebas selectivas para arehighly de hemorragia oculta colorrectal en origen. La sensibilidad de FIT para la detección de CRC es de aproximadamente 70-90% [2-6].
quinasa M2-piruvato (M2-PK) es una isoenzima de la piruvato quinasa, la cual es una enzima clave en la glucólisis donde que cataliza la conversión de fosfoenolpiruvato a piruvato. Esta isoenzima es generalmente una forma altamente activa, tetramérica. Sin embargo en el tejido tumoral, en la exposición a oncoproteínas, M2-PK se convierte en una forma dimérica menos activo, un cambio que es necesario para el metabolismo del tumor [7]. M2-PK no es específica para cualquier tumor y se ha informado de que se encuentra en varios tipos de cáncer, incluyendo riñón, esófago, gástrico, de páncreas, colorrectal, de pulmón, cáncer de ovario y de mama [8] .m2-PK se ha encontrado en la sangre y las heces en varios tipos de cáncer y por lo tanto ha utilizado en la detección del cáncer o la detección y seguimiento para detectar la recurrencia.
en el CRC, tumor M2-PK se elimina en la andtherefore luz del colon se puede detectar en las heces de los pacientes. Esto forma la base de la prueba de heces M2-PK. El uso de las heces prueba M2-PK se informó por primera vez por Hardt et al en 2003 whenthe autores informaron cuantificación de los niveles M2 PK en las heces y sugirieron que puede ser útil en la detección de CCR [9] Desde entonces, ahora se han realizado varios estudios de validación ; principalmente en pacientes occidentales y demostrado que tienen una bastante alta sensibilidad y especificidad.
Recientemente, una nueva versión del M2-PK TEST- la oficina rápida basada prueba cualitativa rápida M2PK se introdujo para su uso clínico. Este es el primer estudio para validar la M2PK rápida para la detección de CRC.The objetivo de este estudio es determinar la exactitud diagnóstica de la prueba de heces rápida M2-PK en la detección de CCR.
Este es un estudio de casos y controles que se llevó a cabo en la Universidad de Malaya Medical Centre (UMMC) fromJanuary de 2013 hasta diciembre de 2013. Aprobación para el estudio fue obtenida específicamente de la Junta de Revisión Institucional del hospital: el comité de ética el UMMC y el estudio se llevó a cabo de acuerdo con las directrices ICH-GCP. Un folleto de información del paciente y un formulario de consentimiento por escrito, que es política estándar, fueron aprobados por el comité. El objetivo del estudio y los procedimientos se explica en detalle a todos los participantes. El prospecto de información al paciente y consentimiento por escrito se les dio a todos los participantes. Todos los formularios de consentimiento por escrito obtenidos se mantienen en los archivos de historias clínicas de cada paciente
.
Pacientes consecutivos con CCR histológicamente confirmados en la colonoscopia y biopsia fueron reclutados para el estudio. El casesconsisted de pacientes sometidos a cribado de CCR (asintomática) o pacientes que se presentaron con síntomas y signos sugestivos de CRC (tenesmo, alteración del ritmo intestinal, sangrado PR y pérdida de peso). Los controles consistieron en pacientes consecutivos que se habían sometido a una colonoscopia de cribado sin evidencia de CRC, adenomasnor displasia y wereotherwise saludable. Los sujetos de control que tenían ninguna sospecha clínica de cualquier tumor gastrointestinal fueron relación de contratación excluded.The de casos y controles fue de 1: 2. El diagnóstico de CCR se confirmó en las biopsias y resección quirúrgica muestras enviadas para los pacientes histopathologicalexamination.CRC se subcategorized según la localización del tumor y puesta en escena. Para la estadificación, se utilizó el Comité Americano Conjunto sobre el Cáncer (AJCC) una clasificación basada en la TC y en los resultados operativos. la localización del tumor se clasifica como proximal (ciego, ascendingcolon, hepaticflexure, colon transverso y ángulo esplénico) o distal (colon descendente, sigmoidcolon, el recto y el canal anal).
Colección de muestra de heces y pruebas para M2-PK
las pruebas de heces para M2PK se llevó a cabo por un solo personal capacitado que desconocía los resultados de los colonoscopy.Stools fueron recogidos ya sea antes de la preparación de la colonoscopia y el intestino se llevó a cabo o al menos una semana después de la colonoscopia . "Fresco" muestras de heces fueron probados en cuanto recogido. Si la prueba no fuera posible, las muestras de heces se mantuvieron a 4
0 C en el refrigerador por no más de 24 horas.
Las pruebas para la proteína M2-PK en las heces de los pacientes se llevó a cabo mediante el uso de la rápida, punto de atención, M2-PKQuickTest (ScheBoBiotech AG, Giessen, Alemania) .Thetest se llevó a cabo de acuerdo con las instrucciones del fabricante. La interpretación basada en la aparición de bandas en la prueba (T) y áreas de control (C) de la tira de prueba cuando se coloca una muestra de heces solubilizado. La prueba rápida M2PK es una prueba rápida inmunocromatográfica. Cuando la proteína M2PK está presente en las heces, que reacciona con un anticuerpo monoclonal unido a partículas de oro y forma un complejo marcado con oro, llamado el complejo anticuerpo-M2PK. Este complejo se desplaza entonces a lo largo de la membrana y llegó a la línea de prueba (T) que tiene un segundo anticuerpo monoclonal se unirá a este complejo anticuerpo-M2PK, y posteriormente desarrollar una línea de color rosa en T.
STARD Directrices
el estudio se informó de acuerdo con las Normas para la Presentación de diagnóstico directrices estudios de precisión.
el análisis estadístico
el análisis estadístico se realizó con el programa SPSS versión 16 para Windows (SPSS Inc., Chicago , Illinois). Para la demografía basal, prueba t de Student y la prueba de Chi-cuadrado se utilizaron en su caso. La sensibilidad, especificidad y valores predictivos positivos y negativos de la prueba de serología rápida se calcularon con el estándar de oro para el diagnóstico de CCR en base a la confirmación histológica. intervalos de confianza del 95% (C.) se calcularon para proporciones de estos valores.
Resultados
Ciento quince pacientes fueron diagnosticados de haber CRCduring el período del estudio. Sin embargo heces samplescollected apropiadamente se obtuvieron de sólo 100 pacientes y la prueba de la proteína M2-PK. Del mismo modo, se pidió a 213 muestras de heces de sujetos con colonoscopia normal, pero sólo 200 casos fueron debidamente recogidas y analizadas para la proteína M2-PK (figura 1).
La demografía de línea de base de los casos de cáncer y de control se resumen en la Tabla 1.There eran más chinos en el grupo de cáncer en comparación con los otros dos principales razas étnicas en Malasia, los malayos y los indios. Esto está de acuerdo con los datos del Registro de Cáncer Nacional de Malasia, que muestra la mayor incidencia de CCR se encuentra entre la etnia china. No hubo diferencias significativas en la edad media y la distribución por sexos entre los casos y los controles.
La sensibilidad, especificidad, valor predictivo positivo, valor predictivo negativo y precisión global de la prueba M2-PK eran como sigue; 93%, 97,5%, 94,9%, 96,5% y 96,0% respectivamente (Tabla 2). En los 5 pacientes con una prueba positiva falsa M2-PK, una gastroscopia, colonoscopia y repita las pruebas básicas de laboratorio se llevaron a cabo todos los cuales resultaron ser negativos.
Sub-análisis basado en la localización del tumor y puesta en escena
La precisión diagnóstica de las pruebas de acuerdo con la localización del tumor. De los 100 pacientes, 87 eran tumores distales y proximales 13 eran. La sensibilidad, especificidad, valor predictivo positivo y valor predictivo negativo de la prueba M2-PK según la localización del tumor se resumen en la Tabla 3. No hubo diferencias nosignificant en términos de especificidad, valor predictivo negativo y precisión global de la prueba. Thesensitivity fue numéricamente inferior pero sólo el valor predictivo positivo fue significativamente menor para proximal en comparación con los tumores distales (p = 0,010).
La sensibilidad, especificidad, valor predictivo positivo y valor predictivo negativo de la M2- prueba de PK de acuerdo con el tumor de stagingis resume en la Tabla 4. No hubo diferencias nosignificant en términos de sensibilidad, especificidad, valores predictivos positivo y negativo y la precisión de la prueba M2-PK para las diferentes fases del tumor.
Discusión
la prueba fecal M2-PK es una novela de ensayo para la detección de CCR. A medida que las células proliferatingtumour arrojan M2-PK fácilmente de la superficie del tumor, esta prueba nos permitiría detectar con fiabilidad los cánceres del tracto gastrointestinal
Hay dos tipos de pruebas M2-PK fecal están disponibles:. Una prueba cuantitativa, prueba de laboratorio ELISAbased y aqualitativepoint de prueba inmunocromatográfica cuidado. Una basada en la oficina, punto de atención de prueba para la detección de materia fecal no es tan práctico como una prueba similar para las muestras de sangre como resultado que no estará disponible inmediatamente. Heces por lo general tienen que ser recogidos en una ocasión separada y por lo general en casa. Sin embargo, esta prueba permite al médico ocupado en la práctica clínica para realizar la prueba en su propia clínica con estar disponibles los resultados casi tan pronto como la muestra de heces se submitted.On otra parte, una prueba cuantitativa requiere el taburete sampleto ser enviado a un pozo bastante laboratorio equipado con un lector de ELISA y de personal withtrained, lo que requiere varias horas antes se pueden obtener resultados.
La prueba cuantitativa M2PK ha sido ampliamente probado y han demostrado una sensibilidad que oscila desde 73 hasta 97% y una especificidad 78,6-100,0 % [10-17]. (Tabla 5). Sin embargo, hasta la fecha no ha habido ninguna validación del punto rápido de la atención M2-PK análisis de materia fecal rápida y nuestro estudio informó isthefirst estudio. En nuestra experiencia, wehave conocer el rápido examen de heces M2-PK a ser una prueba de alta precisión con una precisión diagnóstica global de 96% con una sensibilidad del 93% y una especificidad del 97,5% .We encontró que la prueba es fácil y conveniente llevar a cabo con una mínima manipulación de las heces. La prueba se puede realizar muy rápidamente (en 10 minutos) y los resultados en función de los cambios colorimétricos con la aparición de bandas verticales, fácil de leer.
Nuestro estudio también ha demostrado que la prueba es muy precisa sin tener en cuenta de la etapa del tumor aunque esto está en contraste con otros estudios. Por ejemplo, Shastri y sus colegas encontraron una proporción significativamente mayor de pacientes con cáncer de Dukes C y D (89,5%) frente a los cánceres de Dukes y B (63,9%) tienen una prueba M2-PK cuantitativa positiva [17]. Esto se basa en un nivel de corte predefinido de 4 U /ml, que es el mismo valor de corte utilizado en nuestra prueba cualitativa rápida. En nuestro estudio, también parece que la prueba es muy precisa, independientemente de la localización del tumor, aunque la sensibilidad parece ser ligeramente menor en comparación con tumors.However proximal distal, los números de cada estadio tumoral en nuestro estudio son pequeñas, con amplios intervalos de confianza, y los resultados deben interpretarse con precaución.
¿Cómo se ha realizado la prueba M2PK en la detección del CRC? En nuestro estudio de casos y controles se han incluido pacientes con CRC abierta y no tienen los pacientes withvery CCR precoz confinado a la mucosa. Los casos con adenomas colorrectales no se incluyeron en el estudio. En una bastante grande estudio de cribado en una población alemana, utilizando el laboratorio de ensayo de EISA y mirando específicamente a los adenomas colorrectales basada, heces M2-PK mostró una baja sensibilidad de sólo el 22% y el 23% de avanzada y no advancedadenomas (fases inicial y final) respectivamente, aunque se informó de una especificidad del 82% [18]. Del mismo modo, en un estudio holandés por Mulder et al, con un tamaño de muestra más pequeño, los autores encontraron la sensibilidad de 27% y 29% para avanzada y no avanzada adenomasrespectively con una especificidad del 90% [15]. En otro estudio realizado en Alemania por Shastri y otros, la sensibilidad de la detección de adenomas grandes (definida como más de 1 cm) fue del 44,4% para las lesiones proximales y 50,0% para las lesiones distales [17] .Por lo tanto, M2-PK parece tener papel limitado en la detección de adenomas no avanzados y avanzados.
el otro punto a considerar es que tanto los pacientes sintomáticos y asintomáticos fueron reclutados en el estudio que se han encontrado de forma consecutiva a tener CRC. No está claro si es o no la prueba M2-PK tendrá una precisión diagnóstica similar en una población asintomática puramente como parte de un programa de cribado de CCR como uno podría argumentar que los pacientes sintomáticos requieren una colonoscopia de todos modos. Sin embargo, en un país en desarrollo como Malasia, donde los servicios endoscópicos siguen siendo limitados, la prueba M2-PK puede permitir la estratificación del riesgo en cuanto a la necesidad y el momento de la colonoscopia.
Otro factor de confusión en la práctica clínica sería la presencia de inflamación concomitante en el colon. Pruebas positivas también se han reportado en la enfermedad inflamatoria intestinal que constituye una prueba de "falsos positivos". En un pequeño grupo de pacientes, Mulder et al demostró que en los pacientes con EII, la prueba M2-PK fue positiva en 15 de 19 (78,9%) [15]. En un estudio realizado por Walkoniak y sus colegas, el nivel de M2-PK era bastante significativamente mayor en los pacientes con reservoritis después de anastomosis ileoanal para la colitis ulcerosa [19]. En otro estudio multicéntrico, hasta el 88% de los pacientes con colitis ulcerosa y enfermedad de Crohn tenían niveles elevados M2-PK [20]. En una población en la IBD no es poco común, estos resultados pueden anular contra el uso de esta prueba para la detección de CRC. En un estudio de la vecina Indonesia, los autores habían informado de la utilidad de las pruebas M2-PK positivos en la detección de cánceres en pacientes con EII, colitis infecciosa y colitis amebiana [21]. Sin embargo, no hubo ninguna mención del nivel M2-PK o el número de pruebas "falsos positivos" en estos pacientes, en ausencia de un estudio prospectivo cancer.A estudiar la exactitud de esta prueba en todo el espectro de la enfermedad del colon en la práctica clínica ser importante y que nos permitirá definir mejor su papel en la proyección de CRCs.Finally, la presencia de heces M2-PK no indica necesariamente la presencia de CRC solo y se debe tener cuidado para excluir la enfermedad en el tracto gastrointestinal superior y en el árbol pancreatobiliar.
el análisis de materia fecal más ampliamente utilizado para la detección de CRC siguen siendo las pruebas basadas oculta en las heces y no ha habido estudios que comparan la precisión de M2-PK en comparación con estas pruebas. Cuando se compara con guaic FOBT basada en la detección de adenomas CR, un meta-análisis realizado por Tonus et al amalgamar los resultados de 4 estudios mostró una mejor tasa de detección significativa con la prueba M2PK para los adenomas y tanto menos morethan1cm de tamaño [22]. La prueba M2-PK cuantitativa ha sido comparada con la prueba de sangre oculta en heces más reciente inmunoquímica. Shastri et al demostraron que la sensibilidad tanto de la iFOBT y la prueba M2-PK fueron muy similares para la etapa temprana, así como avanzada CRC [17]. En otro estudio, el análisis de materia fecal M2-PK se comparó con dos pruebas iFOBT para la detección de adenomas y mostró una precisión de diagnóstico de nuevo equivalentes con las 3 pruebas que muestran una baja sensibilidad de 28-40% [15] .Por lo tanto, la prueba M2-PK es una alternativa viable a las pruebas de sangre oculta en las heces disponibles en la actualidad.
Sin embargo, como la principal utilidad de las pruebas basadas en las heces es para la detección en una población asintomática, un estudio futuro debe ser planificada para mirar a la sensibilidad, la especificidad y la precisión global de la prueba ofcare M2-PK punto rápido en una población de cribado y compararlo con el punto de atención FIT (cualitativa) rápida. Otra posibilidad sería el uso de ambas pruebas en combinación, aunque el coste-efectividad de esta estrategia necesita ser determinado. Un estudio realizado por Leen et al [23] encontró que la adición de la prueba cuantitativa M2-PK a la Corte estándar detecta adenomas adicionales en una etapa anterior
Conclusiones
El M2-PKQuick, RAPIDPoint prueba de atención -de la que se ha demostrado ser una prueba de alta precisión en la detección de CRC. Es fácil y conveniente para llevar a cabo en el consultorio de un médico. Sin duda, es una prueba de diagnóstico útil para la detección de un entorno CRCin la práctica clínica.
Apoyo a la Información
S1 Lista de verificación. STARD lista de verificación para la publicación de los estudios de exactitud de diagnóstico de doi: 10.1371 /journal.pone.0131616.s001 gratis (DOCX)
Reconocimientos
Alere proporcionó apoyo financiero y el suministro de kits de prueba. Un agradecimiento especial para el Sr. Joachim Hevler, Director Médico Internacional, apoyo técnico y asesoramiento Alerefor general. Los donantes no tenía papel en el diseño del estudio, la recogida y análisis de datos, decisión a publicar, o la preparación del manuscrito. Queremos reconocer la ayuda de DrAusama de Cirugía Colorrectal con la ayuda en la recopilación de casos y la Sra SashikalaMayakrisnan (asistente de investigación) para la recolección de datos y las pruebas de heces.