Extracto
Objetivos
Para evaluar si los genes que codifican moléculas que interaccionan con CagA (
SRC
,
PTPN11
,
CRK
,
CRKL
,
CSK
,
c-MET
y
GRB2
) están asociados con el riesgo de cáncer gástrico y si una interacción entre estos genes y fitoestrógenos modifican el riesgo de cáncer gástrico.
Métodos
en la fase de descubrimiento, 137 SNPs candidatos en siete genes fueron analizados en los casos de cáncer gástrico 76 incidentes y 322 controles emparejados de la coreana Multi-Centro de cáncer de la cohorte . Cinco SNP significativas en tres genes (
SRC
,
c-MET
y
CRK
) fueron re-evaluados en 386 casos y 348 controles en la fase de extensión. La odds ratio (OR) para el riesgo de cáncer gástrico se estimaron ajustaron por edad, tabaquismo,
H. pylori CagA
seropositividad y positividad cepa. RUP resumen en la población total del estudio (462 casos y 670 controles) se presentaron utilizando pooled- y meta-análisis. Las concentraciones plasmáticas de fitoestrógenos (genisteína, daidzeína, equol y enterolactona) se midieron usando el fluoroimmunoassay resuelta en el tiempo.
Resultados
SRC
rs6122566, rs6124914,
c -MET
rs41739, y
CRK
rs7208768 mostró efectos genéticos importantes para el cáncer gástrico, tanto en el meta-análisis conjunto y sin heterogeneidad (OR combinado = 3,96 [IC del 95%: 2,05 a 7,65], 1,24 [95 % CI = 1,01-1,53]; IC 1,19 [95% = 1,01 a 1,41] y 1,37 [IC del 95% = 1,15 a 1,62], respectivamente; OR = 4,59 meta [95% CI 2,74-7,70], 1,36 [95% CI = 1,09-1,70], 1,20 [IC del 95% = 1,00 a 1,44] y 1,32 [95% CI = 1,10 a 1,57], respectivamente). alelo de riesgo de
CRK
rs7208768 tenido un aumento significativo del riesgo de cáncer gástrico a bajos niveles de fitoestrógenos (
p interacción Hotel & lt; 0,05).
Conclusiones
nuestros hallazgos sugieren que los
SRC
,
c-MET
y
CRK
desempeñar un papel clave en la carcinogénesis gástrica mediante la modulación de transducción de señal CagA y la interacción entre los
CRK
génica y fitoestrógenos modificar el riesgo de cáncer gástrico
Visto:. Yang JJ, Cho LY, Ko KP, Shin A, Ma SH, Choi A, et al. (2012) susceptibilidad genética en CagA de interacción con las moléculas y la interacción gen-ambiente con fitoestrógenos: un putativo factor de riesgo para el cáncer gástrico. PLoS ONE 7 (2): e31020. doi: 10.1371 /journal.pone.0031020
Editor: Deodutta Roy, Universidad Internacional de la Florida, Estados Unidos de América
Recibido: noviembre 30, 2011; Aceptado: December 29, 2011; Publicado: 24 Febrero 2012
Derechos de Autor © 2012 Yang et al. Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos de la licencia Creative Commons Attribution License, que permite el uso ilimitado, distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que el autor original y la fuente se acreditan
Financiación:. Este estudio fue apoyado por una subvención del Plan Nacional de I & amp; el programa Laboratorio de Investigación básica (BRL) a través de la Fundación Nacional de Investigación de Corea programa D para el control del cáncer, Ministerio de Salud y Bienestar Social, República de Corea (0.520.140), y financiado por el Ministerio de educación, Ciencia y Tecnología (2011-0001564). Los donantes no tenía papel en el diseño del estudio, la recogida y análisis de datos, decisión a publicar, o la preparación del manuscrito
Conflicto de intereses:.. Los autores han declarado que no existen intereses en competencia
Introducción
Helicobacter pylori gratis (
H. pylori
), un grupo que carcinógeno gástrico humano por la Agencia Internacional para la Investigación sobre el cáncer (IARC) [1], es el más fuerte factor de riesgo en el desarrollo del cáncer gástrico, y persistente
H. pylori
infección es el primer paso hacia la carcinogénesis gástrica [1] - [3]. A pesar de numerosas pruebas de que
H. pylori
juega un papel crucial en la carcinogénesis gástrica, sólo una pequeña parte de las personas infectadas desarrollan cáncer gástrico. Esto implica que otros factores que intervienen en el mecanismo patogénico de
H. pylori
puede modificar la susceptibilidad individual para el cáncer gástrico. Nuestros estudios previos demostraron
H. pylori
infección en sí no se asoció con el riesgo de cáncer gástrico, pero específicamente CagA positivo
H. pylori
infección aumenta significativamente el riesgo de cáncer gástrico por 3,57 veces [4], [5].
asociado a la citotoxina gen A (CagA), una proteína secretada por inmunodominante
H. pylori
, parece ser uno de los factores de modificación patógenos [6] - [8]. Después de infectar
H. pylori
en células epiteliales gástricas, CagA actúa como un importante componente cancerígeno y virulento través de la vía de transducción de señales CagA secuencial. La primera etapa comienza con la interacción entre CagA y diversas proteínas tales como SRC, SHP2, CRK, CRKL, y CSK después de la fosforilación y c-MET y GRB2 sin fosforilación [9] - [12]. Tirosina CagA fosforilada por quinasas de la familia SRC interactúa con fosfatasa SHP2 tirosina (codificada por el
PTPN11
oncogén), CRK, CRKL y CSK e induce dispersión celular, disociación y la mortalidad relacionada con el desarrollo del cáncer [8], [12] -[15]. Además, CagA no fosforilada interactúa con c-MET y GRB2 que promueve la respuesta oncogénica incluyendo la proliferación celular y cambios morfológicos tales como la formación Hummingbird [8], [16] - [19]. Esta translocación de CagA y su interacción con las proteínas celulares pueden ser un paso crucial en el inicio de la carcinogénesis gástrica [9] - [12].
alteración celular en el sentido positivo
H CagA. pylori
mecanismo patogénico parece explicar diferente susceptibilidad de cáncer gástrico entre los
H. Pylori
personas infectadas. Dado que las funciones celulares pueden ser reguladas por sus genes del huésped, las variantes genéticas relacionadas con las moléculas que interactúan CagA pueden ser la clave para la susceptibilidad al cáncer gástrico individual. Sobre la base de las diferencias genéticas putativos, la hipótesis de que los genes que codifican proteínas CagA de interacción pueden modificar el riesgo de cáncer gástrico. Por otra parte, nos centramos en los fitoestrógenos como un modificador del efecto en el proceso de transducción de señales CagA. Los estudios han informado de que los fitoestrógenos con propiedades anti-inflamatorias, anti-bacterianas y anti-oxidantes pueden inhibir
H. actividad y cáncer gástrico pylori
crecimiento y la proliferación [20] de células - [22]. Especialmente, la genisteína, uno de los fitoestrógenos y los inhibidores de la quinasa fosfotirosina, se informa que es un bloqueador eficaz para la fosforilación de CagA [23].
Para evaluar las hipótesis, un análisis genético de dos etapas que se centró en los genes que codifican directamente CagA moléculas de unión,
SRC
,
PTPN11
,
CRK
,
CRKL
,
CSK
,
c- MET
y
GRB2
, se llevó a cabo que incluye: 1) la fase de descubrimiento de que tamiza y se identificaron los polimorfismos de nucleótido único (SNPs) con una asociación genética significativa en el cáncer gástrico; 2) la fase de extensión que se volvieron a analizar los SNPs más significativos en la fase de descubrimiento. Además, en un subanálisis, se evaluó la interacción entre genes y medio ambiente para determinar si los niveles de fitoestrógenos modificar la asociación entre polimorfismos de genes que codifican moléculas de unión directamente CagA-y el riesgo de cáncer gástrico.
Métodos
Declaración de Ética
los protocolos de estudio fueron aprobados por la Junta del hospital de la Universidad Nacional de Seúl (H-0110-084-002 para el estudio KMCC y C-0910-049-297 Revisión Institucional para el caso actual anidada -control de estudio) y por la Junta de Revisión Institucional del hospital de la Universidad de Hanyang (2003-4). Por otra parte, todos los participantes firmaron un formulario de consentimiento informado antes de entrar en los estudios.
Estudio de la población
estudio de asociación genética de dos fases se lleva a cabo. La población de estudio de casos y controles fue de contratación de la Multi-Centro de Cáncer de la cohorte de Corea (KMCC). Información detallada sobre el KMCC se describe en otro lugar [24]. En pocas palabras, los participantes fueron reclutados de cuatro áreas urbanas como rurales (Haman, Chungju, Uljin, y Youngil) en Corea. La información sobre las características individuales incluyendo el estilo de vida en general y la exposición ambiental se recogió a través de cuestionarios estandarizados basados en entrevistas. También se recogieron muestras de sangre y orina punto. Todos los participantes fueron seguidos a través de enlaces informatizados de registro en el registro nacional de cáncer, el certificado de defunción nacional, y el seguro de salud registros médicos de forma pasiva. Se han notificado los métodos de seguimiento pasivo de la KMCC ser altamente eficaz y completo [25].
En diciembre de 2002, un total de 136 casos de cáncer gástrico define de acuerdo con la Clasificación Estadística Internacional de Enfermedades y Relacionados los problemas de salud 10ª Revisión (CIE-10, C16) fueron identificados en la fase de descubrimiento. Entre ellos, 84 casos excluidos los casos diagnosticados antes de reclutamiento (n = 36) y sin muestras de sangre (n = 16) fueron seleccionados inicialmente para la genotipificación. Cuatro controles sin cáncer (n = 336) fueron emparejados a cada caso de cáncer gástrico mediante la toma de muestras de densidad de incidencia basada en la edad (± 5 años), sexo, zona residencial, y el año de inscripción. Ocho casos y 14 controles fueron excluidos debido a los malos resultados de genotipado, y por lo tanto, 76 casos y 322 controles se incluyeron en la fase de descubrimiento.
En la fase de extensión, se seleccionaron 388 cáncer gástrico series de casos y controles de la siguiente : 1) 334 casos de cáncer gástrico, incluyendo 136 casos identificados el 31 de diciembre de 2002 se determinó a partir de la KMCC en el 31 de diciembre de 2008. Excluyendo los casos analizados en la fase de descubrimiento (N = 84) y sin muestras de sangre (N = 51), 199 casos de cáncer gástrico fueron comparados con los controles 1:01 acuerdo con la edad (± 5 años), sexo y año de inscripción. 2) Se reclutaron 189 nuevos diagnósticos de casos de cáncer gástrico en el Hospital de la Universidad de Chungnam y el Hospital de la Universidad de Hanyang GURI con el consentimiento informado partir de marzo de 2002 y septiembre de 2006. Se recogieron muestras de sangre en el momento del diagnóstico o antes de la cirugía de cáncer gástrico. Además, 189 controles basados en la comunidad emparejados por edad (± 5 años), sexo y año de inscripción (de 2001 en a 2005) fueron seleccionados al azar de la KMCC. De los 388 cáncer gástrico partidos de casos y controles, dos casos y 40 controles fueron eliminados debido a la mala genotipificación y muestra insuficiente y, por último, 386 casos y 348 controles fueron analizados en la fase de extensión.
Los genes candidatos y la selección SNP
En la ruta de transducción de señal de CagA, CagA se une directamente a siete proteínas que conducen a procesos secuenciales. los genes que codifican las anfitrionas siete proteínas fueron seleccionados de la siguiente manera: virus del sarcoma de v-Crk homólogo de oncogén CT10 (
CRK
); v-Crk sarcoma virus homólogo oncogén CT10 (aviar) -al igual que (
CRKL
); c-Src tirosina quinasa (
CSK
); factor de crecimiento de la proteína de unión al receptor 2 (
GRB2
); Met proto-oncogén (
c-MET); factor nuclear de células T activadas, proteína tirosina fosfatasa, tipo no receptor 11 (
PTPN11
) que codifica tirosina fosfatasa SHP2 y sarcoma v-Src (Schmidt-Ruppin A-2) viral homólogo de oncogén (
.
SRC)
fueron seleccionados
SNPs candidatos de acuerdo con los tres criterios: SNPs informó de que 1) la posible relevancia funcional para el cáncer en estudios previos; 2) alelo menor frecuencia (MAF) & gt; 0,05 en la población asiática en bases de datos públicas tales como SNP500Cancer o el proyecto HapMap internacional el uso de identificadores dbSNP (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/snp); y al mismo tiempo 3) MAF & gt; 0,05 en japonés (JET) en el proyecto HapMap internacional. Por último, 137 SNPs con una puntuación de diseño = 1.1 y r
2 & gt; 0,8 se genotipo para detectar los SNPs significativos para el riesgo de cáncer gástrico. 108 SNPs se encuentran en la región del intrón; 24 SNPs se encuentran en la región del promotor (región flanqueante o UTR); cinco SNPs se encuentran en la región de codificación.
Genotipado
En la fase de descubrimiento, 137 SNPs en siete genes candidatos que codifican proteínas que interactúan CagA se genotipo. Después de medir las concentraciones de ADN genómico para todos los sujetos del estudio mediante un espectrofotómetro (NanoDrop ND-1000, NanoDrop Technologies), se realizó el genotipado usando el ensayo de GoldenGate ™ (Illumina®, San Diego, CA, EE.UU.). Para asegurar el control de calidad y evaluar la tasa de concordancia intra-sujeto, 52 muestras duplicadas fueron distribuidos al azar en la placa de genotipificación. tasas de concordancia para todos los ensayos fueron mayores que 99%. De los 137 SNPs, 21 SNPs se abandonaron debido a la falta de determinación del genotipo (4 SNPs), tarifa de llamadas SNP & lt; 90% (7 SNPs), HWE & lt; 0,0001 (1 SNPs) y MAF ≤0.05 (9 SNPs). Ocho casos y 14 controles también fueron excluidos debido a la determinación del genotipo tasa de & lt llamada; 90%. Por último, se analizaron 116 SNPs en siete genes (tasa de genotipado del 99,6%) en 76 casos y 322 controles
En la fase de extensión, cinco SNPs con una prima
p-
valor. & Lt; 0.02, etiqueta SNPs o puntuaciones más altas de diseño (rs6122566 y rs6124914 en
SRC
; rs41739 rs41737 y en
c-MET
; rs7208768 en
CRK
) identificados en el análisis de descubrimiento se genotipo utilizando el ensayo Illumina GoldenGate VeraCode con BeadXpress de acuerdo con el protocolo del fabricante (Illumina®, EE.UU.) [26]. Para garantizar la fiabilidad de los métodos de genotipado en las dos fases, 188 muestras fueron genotipo dos veces por cada método. La tasa de concordancia era & gt; 98,4%. Se excluyeron 90% (n = 27), dos casos y 40 controles con ADN insuficiente (n = 15) o la tasa de llamada genotipado & lt. Por último, cinco SNPs en tres genes (tasa de genotipado del 99,6%) fueron analizados en 386 casos y 348 controles.
H. pylori CagA
infección y la seropositividad
H. infección y CagA pylori
seropositividad se evaluaron usando análisis de inmunotransferencia, Helico Blot 2.1 ™ (MP Biomedicals Asia y el Pacífico, Singapur). Helico Blot 2.1 ™ kits se ha informado que tienen una alta sensibilidad y especificidad (para la sensibilidad, 99% idéntica en ambos; para la especificidad, 98% y 90%, respectivamente). [27]
Las mediciones de biomarcadores Fitoestrógeno
Las concentraciones plasmáticas de cuatro biomarcadores de fitoestrógenos que eran 1) isoflavonas genisteína:, daidzeína y equol (daidzeína metabolitos) y 2) lignanos: enterolactona se midieron utilizando kits fluoroinmunoanálisis de resolución (LabMaster, Finlandia). Después de biomarcadores de fitoestrógenos libres se extraen de 200 l de muestra de plasma, la VICTOR3 ™ 1420 Multilabel Contador de fluorescencia resuelta en el tiempo medido (Perkin-Elmer). métodos de medición detallados de biomarcadores de fitoestrógenos se describen en otra parte [28]. De la población total del estudio, las concentraciones plasmáticas de los cuatro biomarcadores se midieron en 406 casos y 417 controles con el volumen de plasma suficiente (& gt; 200 l).
El análisis estadístico
Para comparar las características básicas entre los casos de cáncer gástrico y controles, la prueba de chi-cuadrado y Estudiante
t-
pruebas se llevaron a cabo.
P-valores para
diferencia en la proporción de sexo, edad,
H. pylori
infección, CagA y VacA seropositividad, fumar cigarrillos, beber alcohol, y la historia de la gastritis entre los casos y los controles fueron determinados.
Se evaluó Hardy-Weinberg (HWE) en el grupo de control utilizando el chi prueba de cuadrado o la prueba exacta de Fisher con un nivel de corte de HWE & lt; 0,0001. En la fase de descubrimiento, mínimo global
p-valores
(
p Hotel & lt; 0,05) en la prueba de razón de verosimilitud (LRT) con 1 grado de libertad (df) en el modelo aditivo y LRT con 2 df en el modelo genotípico se calcularon para seleccionar SNPs significativos. A partir de tres modelos genéticos, aditivos, modelos recesivos y dominantes, se analizó la asociación entre los SNPs seleccionados y el riesgo de cáncer gástrico. Permutado
p
-valores fueron estimados en 100.000 pruebas de permutación en el único análisis de SNP. Para evitar falsas asociaciones con resultados falsos positivos, el corregido permutado
p-valores
con la condición de múltiples SNPs y la tasa de falso descubrimiento (FDR), utilizando un método de Benjamini-Hochberg se calcularon [29]. el riesgo de cáncer gástrico se estimó como odds ratio (OR) y los intervalos de confianza del 95% (IC) utilizando incondicional modelo de regresión logística de ajustar por factores de riesgo que eran la edad, el tabaquismo (siempre
vs.
Nunca),
MARIDO. pylori
infección (positivo
vs.
negativo) y CagA seropositividad (positivo
vs.
negativo). Además, se realizó un análisis de haplotipos de los genes que contienen SNPs asociados significativamente a partir de un análisis de SNP, mediante programas Haploview 4.1 (www.broad.mit.edu/mpg/haploview/).
En la fase de extensión, los más significativos se volvió a evaluar los SNPs identificados en la fase de descubrimiento. Basado en el aditivo o modelos recesivos, el riesgo de cáncer gástrico se estimó como RUP y IC del 95% utilizando incondicional modelo de regresión logística ajustando por las mismas covariables mencionadas anteriormente. Para resumir los resultados del descubrimiento y las fases de extensión, pooled- y meta-análisis se llevaron a cabo. Usando el modelo de efectos fijos, que se resumen las RUP y IC del 95% se calcularon. Además, la heterogeneidad entre los estudios se evaluó mediante la estadística Cochran Q [30].
Utilizando el análisis de varianza y covarianza (ANCOVA) con la edad, el tabaquismo (siempre
vs.
Nunca),
H. pylori
infección (positivo
vs.
negativo) y la seropositividad CagA (positivo
vs.
negativo) como posibles factores de riesgo para el cáncer gástrico, las medias de los niveles de fitoestrógenos entre los casos y los biomarcadores se compararon los controles. El análisis estratificado por niveles altos y bajos de biomarcadores de fitoestrógenos (genisteína, daidzeína, equol y enterolactona), donde los niveles de corte se determinaron mediante el análisis Spline se llevó a cabo utilizando modelos de regresión logística incondicional. efectos de interacción entre las más importantes SNPs y biomarcadores de fitoestrógenos también se calcularon como RUP y IC del 95% ajustado por edad, tabaquismo (siempre
vs.
Nunca),
H. pylori
infección (positivo
vs.
negativo) y la seropositividad CagA (positivo
vs.
negativo).
Todos los análisis estadísticos se realizaron utilizando el software SAS versión 9.2 ( SAS Institute, Cary, Carolina del Norte), y PLINK versión de software 1.07 (http://pngu.mgh.harvard.edu/purcell/plink) [31]. Los meta-análisis se realizaron utilizando STATA versión 10 (Stata, College Station, TX).
Resultados
No hubo diferencia significativa entre los casos y controles en función del sexo,
H. pylori
infección, CagA /seropositividad VacA, tabaquismo /potable y la historia de úlcera gástrica en las fases de descubrimiento y de extensión (p & gt; 0,05). CagA /seropositividad VacA y la proporción de fumadores actuales fueron significativamente mayores entre los casos de cáncer gástrico en los datos agrupados (
p = 0,03
,
p Hotel & lt; 0,01,
p
= 0,02, respectivamente) (Tabla S1).
de los 116 SNPs en los siete genes candidatos que codifican proteínas que interactúan CagA analizados en la fase de descubrimiento, 22 SNPs en tres genes,
SRC
,
c-MET
, y
CRK
, se asociaron significativamente con el cáncer gástrico (
p
-lrt & lt; 0,05).
SRC
rs6122566 aumento significativo del riesgo de cáncer gástrico en los modelos recesivos (OR = 4,90, [IC del 95%: 1,19 a 14,2]). Trece SNPs que se rs41739, rs16945, rs41738, rs6566, rs10435378, rs41737, rs2023748, rs41736, rs41735, rs6951311, rs183642, rs2237717 y rs38859 en
c-MET
gen mostraron un efecto significativo de la dosis génica en los lineales las pruebas de tendencia (
p Hotel & lt; 0,05).
CRK
rs7208768 tuvieron un efecto marginalmente significativo de la dosis génica. 100.000 pruebas de permutación en el único análisis de SNP mostraron
SRC
rs6122566,
c-MET
rs41739 y
CRK
rs7208768 con los más significativos permutado
p CD - valor de cada gen (
p
permutación = 0,00284,
p
permutación = 0,00989,
p
permutación = 0,01392, respectivamente). La significación marginal de la
p-valor permutado corregido
se observó para
SRC
rs6122566 (
p = 0,0918
) pero todos FDR
p-valores
en todos los modelos genéticos no fueron significativas (
p Hotel & gt; 0,2). (Tabla S2)
bloques de haplotipos fueron identificados por la trama LD (Figura S1). El bloque más grande fue construido con las más importantes SNPs incluyendo rs41739, rs6566, y rs41738, pero el ómnibus
p-valor
no fue significativa (
p Hotel & gt; 0,05). Cuatro bloques definidos por
SRC Opiniones y un bloque definido por
CRK
no mostraron significación estadística en el ensayo ómnibus. Los resultados del análisis de haplotipos no lo hicieron presentes más allá de la información SNP resultados individuales (datos no mostrados).
En la fase de extensión, dos SNPs, rs6122566 y rs6124914, en
SRC
gen rs7208768 y en
CRK
se mantuvo significativamente asociada con un mayor riesgo de cáncer gástrico (OR = 4,01, [IC del 95%: 1,62 a 9,96]; OR = 1,30, [IC del 95%: 1,00 a 1,70]; OR = 1,33; [IC del 95%: 1,08 a 1,64], respectivamente). se atenuaron las asociaciones entre los SNPs en
c-MET
gen (rs41739 y rs41737) y el riesgo de cáncer gástrico. En el análisis combinado que incluía las fases de descubrimiento y de extensión, la estimación del riesgo de
SRC
rs6122566 en el modelo recesivo se asoció significativamente con el cáncer gástrico, tanto en el agruparon y meta-análisis (OR = 3,96, [95% IC: 2,05 a 7,65]; OR = 4,59 [IC del 95%: 2,74 a 7,70], respectivamente). Por otra parte,
SRC
rs6124914,
c-MET
rs41739 y
CRK
rs7208768 mostró efectos significativos de la dosis génica para el cáncer gástrico en ambos análisis. No hubo heterogeneidad entre los análisis (test de Cochran Q,
p Hotel & gt; 0,05). (Tabla S3)
Entre un total de 823 sujetos (406 casos y 417 controles), que se midieron los niveles plasmáticos de los cuatro biomarcadores de fitoestrógenos, las concentraciones globales de la genisteína, daidzeína y enterolactona en casos fueron significativamente inferiores a los de los controles (genisteína 167,6 nmol /L en los casos
vs.
200,2 nmol /L en los controles ,
p = 0,0004
; daidzeína 91,4 nmol /L en casos
vs
131,6 nmol /L en los controles,
p
. & lt; 0,0001; enterolactone 51,0 nmol /L en casos
vs
77,7 nmol /L en los controles,
p
. & lt; 0,0001). En general las concentraciones plasmáticas de equol, un metabolito de la daidzeína, fueron inferiores en los casos pero no estadísticamente significativa (50,3 nmol /l para los casos
vs
62,2 nmol /L para los controles;.
p = 0,0977
) . En el análisis estratificado de acuerdo a los biomarcadores de fitoestrógenos, se observó una interacción significativa gen-ambiente en
CRK
. alelo de riesgo de
CRK
rs7208768 tenían un riesgo significativamente mayor de cáncer gástrico a bajos niveles de fitoestrógenos. En concreto, el alelo A de rs7208768 se asoció con un mayor riesgo de cáncer gástrico en la genisteína baja, daidzeína, equol y enterolactona y estadísticamente significativa (OR = 1,91, [IC del 95%: 1,44 a 2,52] a baja genisteína, OR = 2,09; [IC del 95%: 1,46 a 3,01] a baja daidzeína, OR = 1,87 [IC del 95%: 1,26 a 2,78] a baja equol; OR = 1,77 [IC del 95%: 1,10 a 2,85] a baja enterolactone). El
p
Interacción no fue significativa (
p = 0,0001
,
p = 0,0013
,
p = 0,0147
,
p
= 0,0404, respectivamente) (Tabla S4).
Aunque análisis estratificados adicionales también se llevaron a cabo para detectar una interacción entre la seropositividad CagA y cada efecto gen para el riesgo de cáncer gástrico, las interacciones no fueron significativas en ninguno de los tres genes,
SRC
,
c-MET Opiniones y
CRK gratis (datos no mostrados).
Discusión
CagA secretoras
MARIDO. pylori
infección parece desempeñar un papel importante en la carcinogénesis gástrica a través de la vía de transducción de señales CagA secuencial. CagA se une inicialmente a siete componentes de la proteína para activar las respuestas celulares aberrantes que subyacen en el desarrollo de cáncer gástrico. Dado que la función de la proteína puede ser regulada por sus genes del huésped, los genes que codifican moléculas que interactúan CagA pueden ser capaces de modificar el riesgo de cáncer gástrico. Para evaluar esta hipótesis, genotipo 137 SNPs en siete genes candidatos y se demostró que las variantes genéticas de
SRC gratis (rs6122566 y rs6124914),
c-MET gratis (rs41739) y
CRK
(rs7208768) se asociaron significativamente con el riesgo de cáncer gástrico. Además, un efecto interactivo de
CRK
genética polimorfismo, rs7208768, y cuatro biomarcadores de fitoestrógenos, la genisteína, daidzeína, equol y enterolactona en el riesgo de cáncer gástrico se analizaron.
SRC, una proteína no receptor tirosina quinasa (TK), parece ser esencial en la carcinogénesis gástrica. Una vez que se inyecta en las células epiteliales gástricas, CagA se somete a la fosforilación de tirosina por las quinasas de la familia SRC [8], [12], [18]. La fosforilación de la tirosina de CagA es un paso integral en la determinación del mecanismo de señalización celular secuencial. Debido a que algunos CagA interactuar moléculas tales como SHP-2, CRK y CSK sólo son capaces de responder con CagA fosforilada, SRC puede ser más importante para influir en las funciones celulares de otros e inducir el desarrollo de cáncer gástrico. Además, SRC se ha informado a desempeñar un papel crucial en la progresión tumoral y mediar el desarrollo del cáncer y la metástasis [32]. La actividad celular de SRC parece estar alterado por el gen huésped y nuestros resultados indican que
SRC
rs6122566 y rs6124914 puede haber modificadores del riesgo en la carcinogénesis gástrica.
SRC
variaciones genéticas que influyen en la capacidad celular en las células epiteliales gástricas están asociados con el riesgo de cáncer gástrico.
A pesar de la importancia atenuada en el análisis de extensión,
c-MET, que
es sinónimo de
HGFR
(factor de crecimiento de hepatocitos receptor) puede ser un gen de riesgo independiente para el cáncer gástrico. Numerosos estudios anteriores informaron de que c-MET, una de las TK receptor, promueve el crecimiento invasivo del tumor, la invasión de células, y la mortalidad, y la amplificación y /o sobreexpresión de c-MET se asoció con varias carcinoma humano, incluyendo el cáncer gástrico [17], [ ,,,0],33] - [36]. En términos de mecanismo celular c-MET, CagA juega un papel como una proteína adaptadora, Gab, para mediar en la señalización de los conocimientos tradicionales receptor mediante el control de un grupo de componentes aguas abajo en el receptor activado tal como Grb2, PLCγ, y SHP-2 [37], [38]. Al imitar funcionalmente la proteína adaptadora Gab, CagA podría estimular la proliferación anormal y la mortalidad de las células gástricas epitherial [39]. En el presente estudio, un polimorfismo de
c-MET
gen (rs41739) se asoció significativamente con el riesgo de cáncer gástrico y un posible factor susceptibles genética en el cáncer gástrico. En consonancia con la importancia y la función celular,
c-MET
gen parece modificar el riesgo de carcinogénesis gástrica a través de la vía de señalización de transducción CagA.
CRK proteína adaptadora que tiene isoformas de empalme, CRK-I ( SH2-SH3) y CRK-II (SH2-SH3-SH3), se une a las TK y controla la transcripción y la reorganización del citoesqueleto modulación de las actividades celulares [40]. Además, esta proteína adaptador integra varias señales celulares y su desregulación está conectado al carcinoma humano [41]. Interacción entre CRK y CagA fosforilada se ha informado de que un requisito previo biológica que conduce a cambios morfológicos, la dispersión de células y la desregulación de la adhesión célula-célula en el epitelio gástrico [14]. Varios estudios han indicado que la sobreexpresión de CRK está asociada con varios tipos de cánceres humanos incluyendo pulmón, gástrico y de colon [42], [43]. Nuestros resultados también apoyan el potencial genético de
CRK
rs7208768 en el desarrollo de cáncer gástrico y tanto en magnitud genética y celular de la CRK.
Más interesante, interacciones significativas entre el
CRK
polimorfismo genético y cuatro biomarcadores de fitoestrógenos, la genisteína, daidzeína, equol y enterolactona, modificado el riesgo de cáncer gástrico. Los estudios indican efectos protectores de los fitoestrógenos sobre el cáncer gástrico [20], [28] y, en particular, la genisteína inhibió la cascada de transducción de señales ERK inducida por
H. pylori
infección jugar un papel como un inhibidor de la tirosina quinasa [44]. Considerando CRK es la molécula aguas arriba importante de la activación de ERK, las variantes genéticas de riesgo de
CRK
para activar la señalización de ERK puede ser bloqueado por fitoestrógenos, y mediar en el desarrollo de cáncer gástrico.
SRC, c-MET y CRK también están involucrados en la TK proteína que es una familia multigénica diversa que controla celular vía de transducción de señales que media una variedad de procesos celulares corriente abajo y juega un papel importante en el desarrollo de diversas enfermedades clínicas [45], [46]. TK también se conocen como oncogenes implicados en tumores malignos humanos. SRC pertenece a un conocimientos tradicionales no receptor y c-MET es un receptor conocimientos tradicionales, mientras que CRK es una proteína adaptadora que se une a las proteínas TK-fosforilados y fortalece las principales proteínas en la vía de transducción de señales [41]. Estas tres moléculas codificadas por
SRC
,
c-MET
, y
CRK
genes pueden inducir de forma independiente la diferenciación celular, la adhesión, la muerte y los cambios morfológicos transmitiendo señales de las células relacionadas con sus actividades sin tener en cuenta los conocimientos tradicionales de interacción con CagA. Futhermore, genes relacionados con la acción conocimientos tradicionales parecen jugar un papel crucial como factor susceptible para el cáncer gástrico teniendo en cuenta la genisteína que es un inhibidor de la tirosina quinasa puede reducir el riesgo de cáncer gástrico [28]. Esto indica que las susceptibilidades genéticas de
SRC
,
c-MET
, y
CRK
en la carcinogénesis gástrica deben ser tratados como factores de riesgo independientes que modifican la transducción de señales celulares en los conocimientos tradicionales modales dependientes, porque las personas no infectadas con CagA secretoras
H. Pylori
puede estar en riesgo de cáncer gástrico en función de las variantes genéticas individuales de los tres genes.
A pesar de
PTPN11
,
CRKL
,
CSK
y
GRB2
no mostró ninguna asociación significativa con el cáncer gástrico en el presente estudio, los efectos genéticos no debería pasarse por alto. A nivel celular, estas moléculas están significativamente relacionados con los efectos aberrantes que subyacen en la carcinogénesis gástrica [12]. Como uno de los proto-oncogenes humanos,
PTPN11
codifica tirosina fosfatasa citoplasmática con SHP2 y puede inducir la hiperactivación aberrante de la señalización de ERK [47]. Un estudio también ha informado de que un
PTPN11
variante genética aumenta el riesgo para la atrofia gástrica y cáncer entre CagA positivo
H. pylori
personas infectadas [48]. En la ruta de transducción de señal de CagA, CRKL funciona bastante similar a CRK; CSK frustra una actividad de la quinasa Src familia y la señalización de CagA-SHP2; y GRB2 actúa como un disparador para activar la vía RAS /MEK /ERK [14], [18], [49]. Se necesitan más estudios con un mayor número de casos de cáncer gástrico y una cobertura más amplia de los polimorfismos genéticos en estos genes.
carcinogénesis gástrica inducida por CagA positivo
H. Pylori
infección se puede infered de nuestros resultados del estudio y examen de los mecanismos celulares [16], [18], [47] (Figura S2). Una vez CagA se inyecta en las células gástricas ephithelial, SRC inicia la fosforilación de CagA que interactúa con la proteína adaptador CRK y SHP2 para promover la activación de ERK. a. a. segundo. do. re. mi. F. gramo.