Extracto
El /testículo (CT) de la familia de antígenos del cáncer de genes que son reprimidos transcripcionalmente en la mayoría de los tejidos humanos, pero se atípicamente re-expresa en muchos tipos de tumores malignos. Su perfil de expresión restringida hace CT antígenos objetivos ideales para la inmunoterapia del cáncer. Como se sabe poco acerca de si los antígenos CT pueden ser reguladas por el procesamiento posterior a la traducción, hemos investigado los mecanismos que regulan la degradación de NY-ESO-1 y MAGE-C1 en líneas celulares de cáncer seleccionados. Los inhibidores de la degradación mediada por el proteosoma indujeron la partición de NY-ESO-1 y MAGE-C1 en una fracción insoluble en detergente. Por otra parte, este tratamiento también produjo un aumento de localización de NY-ESO-1 y MAGE-C1 en el centrosoma. A pesar de su interacción, la reubicación de cualquiera de NY-ESO-1 o MAGE-C1 en el centrosoma podría ocurrir independientemente uno de otro. Utilizando una serie de fragmentos truncados, las regiones correspondientes a NY-ESO-1
91 a 150 y MAGE-C1
900 a 1116 se establecieron como importante para controlar la estabilidad y la localización de estos antígenos CT. Nuestros resultados demuestran que los niveles de estado estacionario de NY-ESO-1 y MAGE-C1 están reguladas por la degradación proteasomal y que ambos se comportan como proteínas de agregación propensos SOBRE LA ACUMULACIÓN. Con los inhibidores del proteasoma están utilizando cada vez más como tratamiento de primera línea en el cáncer, estos datos plantean cuestiones sobre el procesamiento de antígenos CT para la presentación antigénica y por lo tanto la inmunogenicidad en pacientes con cáncer
Visto:. Pagotto A, Caballero OL, Volkmar N, Devalle S, Simpson AJG, Lu X, et al. (2013) centrosomales Localización del cáncer /testículo (CT) antígenos NY-ESO-1 y MAGE-C1 está regulada por proteasoma actividad en las células tumorales. PLoS ONE 8 (12): e83212. doi: 10.1371 /journal.pone.0083212
Editor: Hiroshi Shiku, Mie University Graduate School of Medicine, Japón
Recibido: 8 Agosto, 2013; Aceptado: 31 Octubre 2013; Publicado: December 10, 2013
Derechos de Autor © 2013 Pagotto et al. Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos de la licencia Creative Commons Attribution License, que permite el uso ilimitado, distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que el autor original y la fuente se acreditan
Financiación:. Este trabajo fue apoyado por la financiación de la Investigación del cáncer Ludwig. Los donantes no tenía papel en el diseño del estudio, la recogida y análisis de datos, decisión a publicar, o la preparación del manuscrito
Conflicto de intereses:.. Los autores han declarado que no existen intereses en competencia
Introducción
la participación del sistema inmune para reconocer y eliminar las células tumores /cáncer sigue siendo una estrategia terapéutica prometedora para el tratamiento del cáncer. El enfoque se basa intrínsecamente en la identificación de las firmas moleculares capaces de diferenciar de manera efectiva y consistente la población maligno. El cáncer /testículo (CT) antígenos son una colección de más de 100 familias de genes con varios miembros y variantes de empalme [1-3] que han sido identificados a través de una amplia gama de técnicas que incluyen: la clonación epítopo de células T [4-7] ; El análisis serológico de las bibliotecas de expresión de ADNc (SEREX) [1], diferencial de análisis de expresión génica [8,9]; y métodos de bioinformática [10,11]. Su expresión se limita normalmente a las células germinales de testículo [12-15] y, ocasionalmente, de ovario [16] y [17] trofoblastos. Sin embargo, en una variedad de tipos de tumores (por ejemplo, melanoma, cáncer de células pequeñas de pulmón, sarcoma, etc ...) expresión atípica de uno o más antígenos CT se pueden observar [3,18,19]. Las consecuencias fisiológicas de la expresión de antígenos CT para la progresión del cáncer no se entienden completamente, pero varios antígenos CT se han demostrado ser moduladores de ubiquitinación a través de complejos formados con-tipo anillo ubiquitina ligasas [20].
El antígeno CT NY-ESO-1 /CTAG1 /CT6 fue identificada por primera vez por SEREX en el carcinoma esofágico de células escamosas [1,21]. exhibe una arquitectura relativamente única, con un dominio PCC-1 en el C-terminal (aa 89-164) homólogo a un factor de transcripción de levadura implicado en la progresión del ciclo celular y el crecimiento polarizado [22] 1 NY-ESO-, siendo su único conserva característica. Un papel biológico definitivo para NY-ESO-1 permanece indeterminado, pero se ha demostrado que interactúan específicamente con otro antígeno CT, MAGE-C1 [23]. MAGE-C1 es parte de la familia más grande
MAGE
(Genes Melanoma Antigen), que se compone de más de 50 genes en múltiples subfamilias (
MAGE-A a L
). La característica predominante de estas familias es el dominio de homología bien llamado MAGE (MHD), una gran región central conservada a través de sus miembros [24-26]. El MHD está presente en la mayoría de las proteínas MAGE metazoos, pero notablemente ausente en
C. elegans
, así como eucariotas unicelulares. Identificado por SEREX y análisis de diferencias representativas (RDA) [8], MAGE-C1 /CT7 es casi tres veces más grande que cualquier otro miembro de la familia MAGE (1142 aa). Su extendida N-terminal tiene poco o ningún dominio de la arquitectura predicho apreciable, además de múltiples secuencias repetidas de 14, 16 y 21 bis [8]. MAGE-C1 se expresa comúnmente en el mieloma múltiple (MM) [27], así como sarcoma, melanoma y cáncer de vejiga [3,18]. Una función de MAGE-C1 todavía no se ha determinado, pero varios estudios han relacionado con la apoptosis en MM [28,29].
Entre las familias de genes de antígenos de TC, por lo menos 19 miembros se han encontrado para provocar respuestas inmunitarias humorales y /o celulares en pacientes con cáncer [19,30]. proteínas de antígeno CT procesadas en péptidos por el proteasoma y presentados en la superficie celular por moléculas del MHC, son reconocidos por citotóxicos autólogos linfocitos T. Tumor-expresión restringida y alta inmunogenicidad ha hecho antígenos CT objetivos atractivos para las estrategias de inmunoterapia en el tratamiento de cánceres seleccionados [19,31-36]. NY-ESO-1 se considera que es uno de los antígenos CT más inmunogénicas y ha sido un foco de investigación para la formulación de vacunas terapéuticas [37]. A diferencia de otros antígenos, es común observar anticuerpo simultánea y respuesta de células T a NY-ESO-1, que es capaz de provocar una fuerte CD4 integrado
+ y CD8
+ T de células respuesta inmune [38-40] . El análisis sistemático ha identificado un epítopo "punto caliente" para la respuesta de células T en la porción central de la proteína NY-ESO-1 entre los aminoácidos 80-110 [41-44].
Si bien la regulación transcripcional de la expresión de antígenos CT se ha ganado mucha de la atención, la comprensión de su regulación post-traduccional y la función biológica también debe ser considerado para delinear su papel en el cáncer. Como objetivos de vacunas atractivos, la determinación de los mecanismos celulares que controlan los niveles de proteína en estado estacionario NY-ESO-1 y MAGE-C1 es importante, ya que puede dar una idea de los medios que podrían modular su expresión o de procesamiento para la presentación de antígenos y, en consecuencia, la respuesta inmune contra las células tumorales que expresan estos antígenos CT. Aquí, nos proporcionan pruebas de que los niveles de estado estacionario, la solubilidad y la localización de la CT antígenos NY-ESO-1 y MAGE-C1 están reguladas por la degradación a través del proteasoma. Los dominios específicos de cada proteína implicada en la regulación de estos aspectos también son identificadas y discutidas.
Resultados
induce la inhibición del proteosoma insolubilidad y enriquecimiento centrosómicas de NY-ESO-1