Extracto
Investigación sobre
hMLH1
y
hMSH2 mutaciones
tienden a centrarse en el síndrome de Lynch (LS) y el cáncer colorrectal LS-como (CRC). No hay estudios hasta la fecha han evaluado el papel de
hMLH1
y
hMSH2
genes en el CCR esporádicos de masas (sin preselección por MSI o la edad temprana de inicio). El objetivo fue identificar nuevos
hMLH1
y
hMSH2
variantes de ADN, para determinar las frecuencias de mutación y sitios en tanto esporádica y LS CDN y sus relaciones con las características clínico-patológicas de CRC en el noreste de China. 452 pacientes esporádicos y 21 LS CRC fueron seleccionados para la línea germinal mutaciones somáticas y en
hMLH1
y
hMSH2
genes con la secuenciación de PCR-SSCP. Se identificaron 11
hMLH1 Opiniones y siete
hMSH2
ADN variantes en nuestra cohorte de estudio. Seis de ellos eran nuevos: cuatro en
hMLH1
gen (IVS8-16 A & gt; T, c.644 GAT & gt; GTT, c.1529 CAG & gt; CGG y c.1831 ATT & gt; TTT) y dos en
hMSH2
gen (-39 C & gt; T, AACAACA inserción al c.1127 y supresión de AGA de c.1129). En CCR esporádico, y la línea germinal mutación somática frecuencias de
hMLH1
/
hMSH2
gen fueron 15.59% y 17.54%, respectivamente (
p = 0,52
). Germinal mutaciones presentes en
hMLH1
y
hMSH2
genes fueron del 5,28% y 10,78%, respectivamente (
p Hotel & lt; 0,01). Las mutaciones somáticas en
hMLH1
y
hMSH2
genes fueron 6,73% y 11,70%, respectivamente (
p = 0,02
). En LS CRC, tanto en la línea germinal y las frecuencias de mutación somática de
hMLH1
/
hMSH2
gen eran el 28,57%. El sitio de mutación germinal más frecuente en
hMSH2
gen se c.1168 CTT & gt; TTT (3,90%), un polimorfismo. frecuencia de mutación somática de
hMLH1
/
hMSH2
gen fue significativamente diferente en proximal, distal de colon y cáncer rectal (
p
= 0,03). Nuestros hallazgos aclaran la mutación del espectro y la frecuencia de
hMLH1
y
hMSH2 genes en
esporádica y LS CRC, y sus relaciones con las características clínico-patológicas de CRC
Visto:. Hu F , Li D, Wang Y, Yao X, Zhang W, Liang J, et al. (2013) novela de ADN variantes y Mutación frecuencias de
hMLH1
y
hMSH2
genes en el cáncer colorrectal en el noreste de China Población. PLoS ONE 8 (4): e60233. doi: 10.1371 /journal.pone.0060233
Editor: Anthony WI. He aquí, la Universidad China de Hong Kong, Hong Kong
Recibido: 4 Enero, 2013; Aceptado: February 23, 2013; Publicado: 3 Abril 2013
Derechos de Autor © 2013 Hu et al. Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos de la licencia Creative Commons Attribution License, que permite el uso ilimitado, distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que el autor original y la fuente se acreditan
Financiación:. Este trabajo recibió el apoyo de las becas de la Fundación Nacional de Ciencias Naturales de China (Nº 30671801 y 30371243) y la Fundación para los estudiosos de Devolución de Harbin (núm 2005AFLXJ017). Los donantes no tenía papel en el diseño del estudio, la recogida y análisis de datos, decisión a publicar, o la preparación del manuscrito
Conflicto de intereses:.. Los autores han declarado que no existen intereses en competencia
Introducción
el cáncer colorrectal (CCR) es una de las neoplasias más comunes a nivel mundial, y ocupa el quinto de todos los cánceres en china. Organización Mundial de la Salud estima que 220.000 nuevos casos de CCR se produjeron en China en 2008 (GLOBOCAN, 2008). La incidencia de CCR ha aumentado en un 5,73% sobre una base anual entre 1992 y 2005 (13.06 a la 23.54 /10.0000) en el distrito de Nangang, Harbin, China [1].
Una de las vías genéticas en el desarrollo de CRC es el fracaso del sistema de reparación del mal emparejamiento del DNA (MMR) [2], que contribuye al mantenimiento de la estabilidad genómica mediante el reconocimiento y la eliminación de mutaciones de inserción /deleción que se producen durante la replicación del ADN [3]. Los dos genes de reparación desajuste principal son
hMLH1
y
hMSH2, España qué mapa de cromosomas 3p21.3-23 [4] y 2p21-22 [5], respectivamente.
Desde el primer informe de
hMLH1
y
hMSH2
mutaciones genéticas en el síndrome de Lynch (LS) CRC [4], [5], los estudios sobre
hMLH1
y
hMSH2
mutaciones genéticas se han publicado. Sin embargo, la mayoría de los trabajos publicados se centró en LS LS-o como CRC. En 30 de tamaño pequeña muestra total (n = 5-61, a excepción de una de las 315 pacientes) se han publicado estudios que proyectará las mutaciones germinales en
hMLH1
y
hMSH2
genes en CCR esporádico . mutaciones patológicas de
hMLH1
y
hMSH2
genes eran más propensos a estar presente en los pacientes más jóvenes [6], y en aquellos con inestabilidad de microsatélites (MSI). En nuestro análisis de estos 30 estudios, MSI o inicio a edad temprana (menores de 40, 45, 50 o 55 años) se utilizó para preseleccionar pacientes de
hMLH1
y
hMSH2
gen mutaciones en CCR esporádico. Sin embargo, ningún estudio tuvo como objetivo detectar las frecuencias de mutación de
hMLH1
y
hMSH2
genes en el CCR esporádicos masa sin MSI o preselección de edad. En China, cuatro estudios (n = 26-58) examinaron la línea germinal o somática mutaciones de
hMLH1 Opiniones y
hMSH2
genes en CCR esporádico con la preselección de MSI [7], [8], [ ,,,0],9], [10]. Si las altas frecuencias de
hMLH1
y
hMSH2
mutaciones genéticas ocurren en CCR esporádico en China no se ha dilucidado. Por otra parte, una fuerte evidencia sugiere que las mutaciones raras de graves efectos son responsables de una parte sustancial de cáncer humano complejo [11]. Por ello, realizó este estudio para identificar novela
hMLH1
y
hMSH2
variantes de ADN, para determinar tanto las frecuencias de mutación y sitios en tanto esporádica y LS CRC, y para estimar las relaciones entre la línea germinal y somática mutaciones de
hMLH1 /hMSH2
gen y las características clinicopatológicas de CRC en el noreste de china.
Materiales y Métodos
Los sujetos
Después de obtener el consentimiento informado de los sujetos de estudio y la aprobación del Comité Institucional de Investigación de la Universidad médica de Harbin, se identificaron pacientes con CRC que se sometieron a cirugía en el hospital del cáncer y el Segundo hospital Afiliado de la Universidad médica de Harbin, sin preselección y en base a diagnóstico patológico solo. Los pacientes con carcinoma neuroendocrino, melanoma maligno, linfoma no Hodgkin, tumores del estroma gastrointestinal, y carcinoma colorrectal metastásico fueron excluidos del análisis. A partir de junio 1, 2004 a mayo 15, 2005, y el 15 mayo 2007 a 1 enero 2008, 473 pacientes primarios CRC (CRC 452 esporádica; 21 LS CRC) fueron reclutados. 457 muestras de sangre y 356 tejidos tumorales se recogieron para el análisis genético molecular.
Extracción de ADN
El ADN se extrajo con éxito de todas las 457 muestras de sangre (436 CCR esporádico y 21 LS CRC) y 356 tejidos tumorales (342 esporádica y 14 LS) mediante el procedimiento clásico de fenol-cloroformo [12].
En la recogida de muestras de sangre y tejidos y la extracción de ADN, no pudimos obtener el ADN de tejido tumoral de 117 pacientes con CCR (110 esporádica y 7 LS) debido a que los tejidos tumorales eran sólo lo suficientemente grande para el diagnóstico de la patología o que no se extrajeron ADN con éxito. Por lo tanto, sólo tenemos su ADN en la sangre. En los otros 16 pacientes con CCR esporádicos, se obtuvieron muestras pareadas de sangre y tejidos. Sin embargo, en la extracción de ADN, que no extraemos el ADN con éxito de la muestra de sangre. Finalmente, 340 pacientes con CCR (326 esporádica y 14 LS) han emparejado ADN de la sangre y los tejidos.
Proyección de la línea germinal y mutaciones somáticas de
hMLH1
y
hMSH2 genes
análisis de secuenciación de PCR-SSCP.
los cebadores para 20 pares de los 19 exones en el
hMLH1
gen y 17 pares de los 16 exones en el
hMSH2
gen (Tabla 1), incluyendo los límites exón-intrón, se sintetizaron para la PCR genómica. Las amplificaciones por PCR se realizaron usando el siguiente protocolo para 35 ciclos: desnaturalización durante 30 s a 95 ° C, recocido de 30 s a 54 ° C a 64 ° C, extensión durante 30 s a 72 ° C, seguido por una extensión final de 5 min a 72 ° C (ABI 9700). Los productos de PCR fueron identificados por electroforesis en agarosa al 1% (BioWest agarosa, Gene Company Ltd).
Los productos de PCR fueron desnaturalizados a 98 ° C durante 8 minutos y se colocaron en hielo. La electroforesis se realizó en 8% al 15% no desnaturalizante en geles de poliacrilamida. Después de la electroforesis, los geles se tiñeron con plata (planta química refinada, Shanghai, China). 15% de las muestras se replica en la detección de mutaciones de cada fragmento de PCR amplificado en el análisis de PCR-SSCP, con la tasa de concordancia que van desde 99,1% a 100% para diversos fragmentos de PCR amplificados.
productos de PCR que muestran la movilidad anormal bajo análisis SSCP fueron enviados a la secuencia utilizando ABI3730XL. Se analizaron los resultados de la secuenciación de mutaciones de genes con el software Chromas 2.22 (Technelysium Pty. Ltd., Queensland, Australia).
Evaluación de la patogenicidad de mutaciones
Para las mutaciones informó anteriormente, se utilizaron los resultados de la verificación de la función para determinar la patogenicidad. Si no se informó de verificación de la función, se utiliza la función de predicción por dos de los resultados PolyPhen /SIFT /MAPP-MMR para determinar su patogenicidad.
Para las nuevas variantes de ADN, la patogenicidad de sustitución de bases en los exones se predijo por el programa PolyPhen [13] y la MAPP-MMR [14]. inserción Base, deleción y sustitución en el promotor, intrones o 3'UTR se evaluaron por criterios para determinar el potencial de patogenicidad [15]. También se detectaron las nuevas variantes de ADN en 100 controles sanos para determinar el potencial de patogenicidad.
Análisis estadístico
Categoría y las variables continuas se analizaron mediante la prueba de chi-cuadrado y
t
probar, respectivamente. Todos los análisis estadísticos se realizaron por SAS 9.1 (SAS Institute, Cary, NC, EE.UU.).
Resultados
Las mutaciones
Las mutaciones en
hMLH1
gen .
Hemos identificado 11 variantes de ADN en el gen
hMLH1
. IVS8-16 A & gt; T, c.1831 ATT & gt; TTT y c.1845_1847 eliminación GAA eran variantes de ADN somáticas, otras ocho variantes de ADN eran tanto de la línea germinal y variantes somáticas. Cuatro (IVS8-16 A & gt; T, c.704 GAT & gt; GTT, CAG c.1529 & gt; CGG, c.1831 ATT & gt; TTT) eran de ADN nuevas variantes identificado en pacientes con CRC esporádicos (Figura 1 y Tabla 2). Todas las cuatro nuevas variantes de ADN no se detectaron en 100 controles sanos. c.1529 CAG & gt; CGG se prevé que tenga ninguna patogenicidad, la patogenicidad de las otras tres nuevas variantes de ADN no estaban seguros. Siete mutaciones (-28 A & gt; G, c.927 CCC & gt; CCT, IVS13 + 14 G & gt; A, IVS14-19 A & gt; G, c.1742 CCG & gt;. CTG, c.1845_1847 eliminación GAA y c * 35_ * 37 deleción CTT) fueron reportados previamente en la base de datos Insight [10], [16], [17], [18], [19], [20], [21]. c.1742 CCG & gt; CTG y la supresión c.1845_1847 GAA se comunicaron a ser mutaciones patológicas [21], [22]
También identificado dos polimorfismos.. c.655 ATC & gt; GTC se informó de que un polimorfismo común en los caucásicos [23], [24], [25], mientras c.1151 GTT & gt; GAT se informó a ser más común en la población asiática [26]. Por lo tanto, no nos clasificamos como mutaciones en nuestro estudio.
Las mutaciones en
hMSH2
gen.
Se identificaron siete
hMSH2
variantes de ADN. AACAACA de inserción en c.1127 y supresión de AGA de c.1129 era variantes de ADN somáticas, otras seis variantes de ADN fueron tanto de la línea germinal y las variantes somáticas. Dos variantes de ADN (-39 C & gt; T, AACAACA inserción al c.1127 y supresión de AGA de c.1129) fueron recientemente detectado en este estudio (Figura 2 y Tabla 2). En el cribado de las dos nuevas variantes de ADN en 100 controles sanos, no se detectaron variantes. La patogenicidad de las dos variantes de ADN era incierto. Otros cinco mutaciones (c.23 ACG & gt; ATG, c.471 GGC & gt; GGA, c.505 ATA & gt; GTA, c.1168 CTT & gt; TTT y ca. 1886 CAA & gt; CGA) fueron reportados previamente en la base de datos Insight [14], [27].
Dos pacientes del sexo masculino lleva a mutaciones somáticas en ambos
hMLH1 Opiniones y
hMSH2
genes. Otro paciente de sexo masculino lleva el c.1831 ATT & gt; TTT mutación del
hMLH1
gen y el c.23 ACG & gt;. ATG mutación del
hMSH2
gen en ambos tejidos tumorales y la sangre
mutación frecuencias
frecuencias de mutación en pacientes con CCR esporádicos.
Entre los 436 pacientes con CCR esporádicos con el ADN de la sangre disponible, las frecuencias de mutación en la línea germinal de
hMLH1
y
hMSH2
genes fueron 5,28% (23/436) y 10,78% (47/436), respectivamente (
p
& lt; 0,01) (Tabla 3). Excluyendo las mutaciones sinónimas (CCC c.927 & gt; CCT en
hMLH1 Opiniones y c.471 GGC & gt; GGA en
hMSH2
), las frecuencias de mutación en
hMLH1
y
hMSH2
genes eran 4,59% (20/436) y 8,72% (38/436), respectivamente (
p = 0,01
). Si el paciente que lleva dos mutaciones en la línea germinal solamente se cuenta una sola vez (un paciente albergaba tanto -39 C & gt; T y c.23 ACG & gt; mutaciones ATG en
hMSH2
y la IVS13 + 14 G & gt; Una mutación de
hMLH1
, y el otro de los pacientes realizado tanto c.1831 ATT & gt; TTT mutación en
hMLH1 Opiniones y c.23 ACG & gt; ATG en
hMSH2
); a continuación, 15.59% (68/436) de los pacientes mostró mutaciones en línea germinal
hMLH1
/
hMSH2
gen. las frecuencias de mutación patológica de
hMLH1
y
hMSH2
genes eran 0,23% (1/436) y 0%, respectivamente.
Entre los 342 pacientes con CCR esporádicos con la disposición ADN en los tejidos tumorales, las frecuencias de mutación somática en
hMLH1
y
hMSH2
genes eran 6,73% (23/342) y 11,70% (40/342), respectivamente (
p =
0,02) (Tabla 3). Excluyendo las mutaciones sinónimas (CCC c.927 & gt; CCT en
hMLH1 Opiniones y c.471 GGC & gt; GGA en
hMSH2
), las frecuencias de mutación de
hMLH1
y
hMSH2
genes eran 5,85% (20/342) y 9,94% (34/342), respectivamente (
p = 0,03
). Si las mutaciones fueron contados por los pacientes en lugar del número real de mutaciones (tres pacientes llevan mutaciones somáticas de ambos
hMLH1
y
hMSH2
genes), a continuación, 17,54% (60/342) de los pacientes exhibieron somática mutaciones del gen
hMLH1
/
hMSH2
. las frecuencias de mutación patológica de
hMLH1
y
hMSH2
genes eran 0,58% (2/342) y 0%, respectivamente.
frecuencia de mutación de la línea germinal no fue significativamente diferente de la de frecuencia de mutación somática en
hMLH1
y
hMSH2
genes, respectivamente (
p = 0,49
y
p = 0,69
, respectivamente).
frecuencias de mutación en pacientes LS CRC.
Entre 21 muestras de ADN de sangre de pacientes LS CRC, uno (4,76%) paciente lleva una mutación germinal de
hMLH1
y cinco (23,81%) pacientes llevado a mutaciones germinales en
hMSH2
. En general, seis (28,57%) pacientes presentaron mutaciones en la línea germinal del
hMLH1
/
hMSH2
gen.
Los tejidos tumorales sólo estaban disponibles en 14 pacientes con CRC LS, uno (7,14 %) paciente lleva una mutación somática en
hMLH1 Opiniones y tres (21,43%) pacientes llevan una mutación somática en
hMSH2
. En total, cuatro (28,57%) pacientes presentaron mutaciones somáticas en
hMLH1
/
hMSH2
gen.
No se detectaron mutaciones patológicas en pacientes LS CRC.
La distribución de mutaciones en diferentes exones
La prevalencia más alta mutación germinal de
Hoteles en hMSH2 CCR esporádico se detectó en el exón 7 (3,90%), seguido por el exón 12 (2,52%), el exón 1 (1,38%), y el exón 3 (0,46%). Las mutaciones en estos cuatro exones representaron el 76,6% del total de mutaciones en
hMSH2
. En cuanto a la
hMLH1
, las frecuencias de mutación eran generalmente más bajos que en el
hMSH2
; las prevalencias más altas de mutación estaban en el exón 16, el exón 9, el exón 13 y el exón 19 (0,23%) (Tabla 3).
Las relaciones entre la línea germinal y mutaciones somáticas de
hMLH1 /hMSH2
genes y Clinicopathological Características de CRC
frecuencia de mutación somática de
hMLH1
/
hMSH2
gen fue del 22,7% (15/66) en el cáncer de colon proximal, el 17,7% (11 /62) en el cáncer de colon distal y 10,5% (22/209) en el cáncer rectal (
p
= 0,03). Considerando que, con frecuencia de mutación de la línea germinal de
hMLH1
/
hMSH2
gen no fue significativamente diferente en el cáncer de colon proximal (17,3%, 14/81), el cáncer de colon distal (17,8%, 13/73) y el cáncer de recto (10,1%, 28/276) (
p = 0,09
). (Tabla 4 y 5).
de la línea germinal y la frecuencia de mutación somática de
hMLH1
/
hMSH2
gen no fue significativamente diferente en otras características clinicopatológicas ( edad, sexo, índice de masa corporal, el estadio de Dukes, histotypes, tipos patológicos, grado diferenciado y el tamaño del tumor) de CCR.
Debido a la menor LS pacientes con CRC, no hemos analizar las relaciones entre la línea germinal y somática
hMLH1 /hMSH2
mutaciones genéticas y las características clinicopatológicas de LS CRC.
Discusión
Bajo el supuesto modelo de la variante común de enfermedad rara [28], [29], se seleccionaron las variantes raras de
hMLH1
y
hMSH2 genes en
esporádica y LS CRC. Se identificaron 18 tipos de variantes de ADN en nuestro estudio. Seis eran nuevas variantes de ADN y 12 se han reportado previamente. De las seis variantes de ADN novedosas, cuatro estaban en
hMLH1
y dos en
hMSH2
.
Dos de los cuatro novela
hMLH1
variantes de ADN, p .Asp235 Val (c.644 GAT & gt; GTT) y p.Gln510Arg (CAG c.1529 & gt; CGG), ambos conducen a los amino ácidos cambios de polaridad, lo que puede afectar a la estructura del dominio
hMSH2
unión y
hPMS2 /hPMS1
dominio de la
hMLH1
unión, respectivamente, y causar la disfunción del sistema de ADN MMR. Otra variación del ADN, p.Ile611Phe (c.1831 ATT & gt; TTT), conducen a ningún cambio de polaridad de aminoácidos en la
hPMS2 /hPMS1
dominio de unión a la
hMLH1
producto del gen, pueden tener ningún efecto sobre la función del ADN sistema MMR [30]. IVS8-16 A & gt; T se prevé que tenga ningún efecto sobre el empalme en el exón 9.
Uno de los dos novela
hMSH2
variantes de ADN, -39 C & gt; T, era una variación en 5 'UTR, que puede afectar la transcripción del mRNA. La otra variación, ins c.1127 AACAACA y c.1129 del AAG, fue una mutación de desplazamiento, lo que puede afectar a la
hMSH6
dominio de unión y
hMutL
homólogo de la interacción de la
hMSH2
producto del gen y causar la disfunción en el sistema de ADN MMR [30].
Aunque el fallo de sistema de MMR de ADN es una de las vías genéticas en el desarrollo de CRC [2]. De acuerdo con los criterios de evaluación mutación patogenicidad, una nueva variante de ADN, CAG c.1529 & gt; CGG, se predice que tienen no patogenicidad, la patogenicidad de otros cinco nuevas variantes de ADN fueron incierto. Por lo tanto, no podemos dilucidar el papel de estas variantes de ADN de la novela
hMLH1
y
hMSH2
genes en la aparición y desarrollo de CCR
c.1742 CCG & gt;. CTG
hMLH1
y CAA ca. 1886 & gt; CGA de
hMSH2
eran mutaciones fundadoras en la población asiática [31]. Otros tres mutaciones de
hMSH2
, c.23 ACG & gt; ATG, c.505 ATA & gt; GTA y c.1168 CTT & gt; TTT, eran de mayor prevalencia en los asiáticos (2,44%, 1,74% y 6,97%, respectivamente) en comparación con los caucásicos (0,05%, 0,05% y 0,53%, respectivamente) [31]. Se puede explicar la diferencia racial de los pacientes con CCR. Además, puede ser más eficiente para detectar estas mutaciones en las poblaciones asiáticas
Desde que hemos detectado una mayor prevalencia de c.1168 CTT & gt;. TTT de
hMSH2 Hoteles en ambos LS (14,29%, 3/21) y esporádico (3,90%, 17/436) CRC, se proyectó para la mutación en los controles sanos. La frecuencia de mutación en los controles sanos fue de 4,16% (21/505), que no fue significativamente diferente en comparación con CRC (
p
= 0,84). Esta mutación particular, también se informó de que un polimorfismo en Corea por Kim et al, que no detectó una diferencia significativa entre los casos y los controles [26].
Asociación significativa se observó sólo entre somática
hMLH1 /hMSH2
mutaciones genéticas y la localización del tumor de CCR esporádico (
p = 0,03
). La frecuencia de mutación somática de
hMLH1 /hMSH2
gen fue más alta en el cáncer de recto, la siguiente fue en el cáncer de colon proximal, y la más baja fue en el cáncer de colon distal. La no patogenicidad o patogenicidad incierta pueden explicar la asociación no significativa entre los
hMLH1 /hMSH2
mutaciones genéticas y otras características clinicopatológicas de CCR esporádico.
En nuestro meta-análisis previos basados en la línea germinal mutaciones de
hMLH1
y
hMSH2 genes (
aceptó el papel, 10.1371 /journal.pone.0051240), la frecuencia de mutación patológica agrupado de
hMLH1
fue 8,72% (95% IC: 6,12% -12,29%) en el CCR esporádico. Era 10,28% (IC del 95%: 4,28 a 22,70%) en los estudios americanos, 7,47% (IC del 95%: 4,06 a 13,34%) en los estudios europeos, y el 3,21% (IC del 95%: 0,88 a 11,03%) en estudios de Asia (
p = 0,65
). En nuestra cohorte, fue sólo 0,23%. La frecuencia de mutación patológica agrupado de
hMSH2
fue 7,28% (IC del 95%: 5,12% -10,26%) en el CCR esporádico. Fue 5,89% (IC del 95%: 2,08 a 15,61%) en los estudios americanos, 7,58% (IC del 95%: 4,05 a 13,76%) en los estudios europeos, y 3,64% (IC del 95%: 1,96 a 6,65%) en estudios de Asia (
p = 0,85
). Sin embargo, ninguna mutación patológica de
hMSH2
se detectó en nuestro estudio.
Ocho [7], [9], [32], [33], [34], [35], [36], [37] y nueve estudios [7], [9], [32], [33], [34], [35], [36], [37], [38] en Asia detectaron mutaciones somáticas de
hMLH1
y los genes
hMSH2
en CCR esporádico. La prevalencia combinada de mutaciones patológicas fue 11,86% (IC del 95%: 7,62 a 18,01%) y 7,90% (IC del 95%: 4,72 a 12,94%), respectivamente, en el meta-análisis, que es más alta que en nuestro estudio (0,58% y 0%).
Todos los estudios publicados detectaron mutaciones germinales o somáticas en CCR esporádico con preselección (MSI, la edad de aparición temprana, o mutación RII TGF-ß) [36], lo que podría explicar la frecuencia de mutación más alta en los estudios individuales publicados y meta-análisis de estudios publicados anteriormente. Además, el tamaño pequeño de la muestra en los estudios publicados también puede contribuir a los resultados inconsistentes.
Sólo un estudio en Asia detectado mutaciones somáticas de
hMLH1
y
hMSH2 genes
en 31 pacientes con CCR esporádicos sin preselección [37]. El estudio más amplio para detectar mutaciones en la línea germinal fue de 315 pacientes Europea BG-CRC menores de 55; la frecuencia de mutación de
hMSH2
se encontró que era 0,32% (1/325, patogenicidad incierta), mientras que ninguna mutación en
hMLH1
se detectó [39].
nuestra anterior metaanálisis, las frecuencias de mutación en la línea germinal agrupados de
hMLH1
y
hMSH2
genes fueron 28,55% (IC del 95%: 26,04% -31,19%) CI y 19,41% (95%: 15,88% -23,51%) en Amsterdam-LS criterios positivos CRC. En Amsterdam-criterio negativo LS CRC, estas frecuencias de mutación agrupados fueron 16,70% (IC del 95%: 14,53 a 19,13%) y 11,13% (IC del 95%: 9,49 a 13,42%) para
hMLH1
y
hMSH2
genes, respectivamente. En nuestro estudio, ninguna mutación en la línea germinal se encontró
hMLH1
exones, similar a un estudio en Japón [40]. La frecuencia de mutación germinal de
hMSH2
fue 9,52% (2/21) (con exclusión de la mutación polimórfica c.1168 CTT & gt; TTT), que fue relativamente menor que en el meta-análisis (11,13%, 95% IC:. 9,49-13,42%)
Cinco estudios asiáticos detectaron la mutación somática de
hMLH1
o
Hoteles en hMSH2 LS CRC [7], [41], [42 ], [43], [44]. Las frecuencias de mutación somática agrupados en
hMLH1
y
hMSH2
genes eran 9,57% (IC del 95%: 1,36 a 44,73%) y 25,65% (IC del 95%: 10,30 a 50,89%), respectivamente en el metanálisis. En nuestro estudio, la frecuencia de mutación somática de
Hoteles en hMSH2 LS CRC fue 14,29% (2/14) (con exclusión de la mutación polimórfica, c.1168 CTT & gt; TTT). Sin embargo, no hay mutaciones somáticas en
hMLH1
exones se encontraron en LS CRC, similar a los dos estudios japoneses [41], [43]. La frecuencia de mutación somática de
Hoteles en hMSH2 LS CRC varió de 5.88% a 58.33% en los cinco estudios publicados asiáticos. Un tamaño de muestra pequeño puede explicar las variaciones de la frecuencia de mutaciones en el LS CRC.
En conclusión, se identificaron seis nuevas variantes de ADN (cuatro en
hMLH1
y dos en
hMSH2
). En CCR esporádico, y la línea germinal mutación somática frecuencias de
hMLH1 /hMSH2
gen fueron 15.59% y 17.54%, respectivamente. La prevalencia de mutaciones en la línea germinal fue de 5,28% en
hMLH1 Opiniones y 10,78% en
hMSH2
. Las frecuencias de mutación somática en
hMLH1
y
hMSH2
genes fueron 6,43% y 11,70%, respectivamente. En LS CRC, tanto en la línea germinal y las frecuencias de mutación somática de
hMLH1
/
hMSH2
gen eran el 28,57%. El sitio de mutación germinal más frecuente en
hMSH2
gen se c.1168 CTT & gt; TTT (3,90%), un polimorfismo. frecuencia de mutación somática de
hMLH1
/
hMSH2
gen fue significativamente diferente en el cáncer de colon proximal, el cáncer de colon distal y del recto.
Nuestros hallazgos podrían ayudar a dilucidar la variante de ADN espectro y la frecuencia de la
hMLH1
y
hMSH2
genes en pacientes con CRC, especialmente los pacientes con CCR esporádicos en china, y sus relaciones con las características clínico-patológicas de CCR esporádico. Los estudios funcionales para determinar cómo estas nuevas variantes de ADN afectan la función de la proteína son obligatorios.
Reconocimientos
Gracias por la edición nativa de la Edición Internacional de Ciencia.