Extracto
Aplicaciones
cáncer de ovario
epitelial tiene la mayor tasa de mortalidad de todos los tumores malignos ginecológicos. Hemos demostrado que la expresión de alto RAN se correlaciona fuertemente con alto grado y pobre supervivencia del paciente en cáncer de ovario epitelial. Sin embargo, como RAN es una pequeña GTPasa involucrado en dos principales funciones biológicas, el transporte núcleo-citoplasma y la mitosis, todavía no se sabe cuál de estas funciones se asocian con mal pronóstico.
Métodos
Para examinar el valor de biomarcadores de componentes de red RAN en el cáncer epitelial de ovario seroso, la expresión de proteínas de seis socios RAN específicos se analizó mediante inmunohistoquímica utilizando un microarray de tejido que representa 143 pacientes asociadas a los parámetros clínicos. El ciclo de GDP /GTP RAN se evaluó la expresión de RanBP1 y RCC1, la función mitótica por TPX2 y IMPβ, y la función de tráfico de núcleo-citoplasma por XPO7, XPOT y IMPβ.
Resultados
sobre la base de los análisis de Kaplan-Meier, RAN, XPO7 citoplasmática y TPX2 se asociaron significativamente con la supervivencia general de los pacientes pobres, y corrió, y TPX2 se asociaron con una menor supervivencia libre de enfermedad en pacientes con carcinoma seroso de alto grado. El análisis de regresión de Cox reveló que la RAN y la expresión TPX2 fueron factores pronósticos independientes tanto para la supervivencia libre de enfermedad y global, y que la expresión citoplasmática XPO7 fue un factor pronóstico de supervivencia global del paciente.
Conclusiones
En este estudio sistemático, nos muestran que la RAN y dos proteínas asociados que participan en sus funciones de núcleo-citoplasma y mitosis (XPO7 y TPX2, respectivamente) pueden ser utilizados como biomarcadores para estratificar a los pacientes basándose en el pronóstico. En particular, se informó por primera vez la relevancia clínica de la XPO7 exportin y demostró que la expresión TPX2 tenía el valor pronóstico más fuerte. Estos hallazgos sugieren que los compañeros de la proteína en cada una de las funciones de RAN pueden discriminar entre diferentes resultados en los pacientes de alto grado serosas epiteliales de cáncer de ovario. Por otra parte, estas proteínas apuntan a los procesos celulares que en última instancia pueden tenerse en cuenta para mejorar la supervivencia en el cáncer epitelial de ovario seroso
Visto:.-Cáceres Gorriti KY, Carmona E, V Barrès, Rahimi K, Létourneau IJ, Tonin PN , et al. (2014) RAN núcleo-citoplasma Transporte y huso mitótico Asamblea Socios XPO7 y TPX2 son nuevas pronósticos biomarcadores en la serosa cáncer ovárico epitelial. PLoS ONE 9 (3): e91000. doi: 10.1371 /journal.pone.0091000
Editor: Eric Asselin, Universidad de Quebec a Trois-Rivières, Canada |
Recibido: 26 Julio, 2013; Aceptado: 6 Febrero 2014; Publicado: 13 Marzo 2014
Derechos de Autor © 2014 Cáceres-Gorriti y col. Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos de la licencia Creative Commons Attribution License, que permite el uso ilimitado, distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que el autor original y la fuente se acreditan
Financiación:. Este trabajo fue apoyado por una beca (MOP#36056) de los Institutos canadienses de Investigación en Salud (CIHR) a a-MM-M, PNT y DP. banca tumor fue apoyado por el Banco de tissus et données del Réseau de Recherche sur le cáncer de Fond de recherche du Québec - Santé (FRQS), asociado con el tumor canadiense Repositorio de red (CTRNet). CSC-G fue apoyado en parte por becas de la Fundación Carole Epstein y el fondo de Canderel del Instituto del cáncer de Montreal. IJL fue apoyado por un premio de formación postdoctoral FRQS. A-MM-M y DMP son investigadores del Centre de recherche du Centro Hospitalario de la Universidad de Montreal (CRCHUM) y PNT es un investigador en el Instituto de Investigación de la McGill University Health Centre (MUHC), ambos de los cuales reciben apoyo a partir de los FRQS. Los donantes no tenía papel en el diseño del estudio, la recogida y análisis de datos, decisión a publicar, o la preparación del manuscrito
Conflicto de intereses:.. Los autores han declarado que no existen intereses en competencia
Introducción cáncer de ovario
epitelial (EOC) es el más letal de todos los tumores malignos ginecológicos en América del Norte [1] y en todo el mundo. Esto se atribuye a la naturaleza asintomática de la enfermedad que implica un diagnóstico tardío, con una tasa de supervivencia de cinco años en un 30% [2], [3]. En los últimos 30 años, los avances en la cirugía y la quimioterapia han tenido poco impacto sobre la supervivencia global de los pacientes [4], [5] y la corriente de tratamiento conduce a la recaída en la mayoría de los pacientes. Aproximadamente el 80% de los pacientes EOC presenta una histotype serosa [6], [7] que se clasifica de acuerdo con el grado del tumor y el estadio clínico, que representa el grado de la diferenciación celular y la propagación de la enfermedad [8], respectivamente. evidencia molecular es compatible con una clasificación que separa a los pacientes con carcinomas serosos de estos dos tipos: los pacientes con tumores de bajo grado (LG, bien diferenciados) y con tumores de alto grado (HG, pobremente diferenciado) [9], [10]. Los pacientes con tumores serosos LG típicamente tienen un buen pronóstico, pero representan el 5% de todos los EOC serosas. Los pacientes con carcinoma seroso HG tienen un mal pronóstico con una supervivencia a los cinco años de menos del 40% [11]. La investigación en estas dos enfermedades distintas, LG y HG EOC serosa, por tanto, proporcionaría una mejor comprensión de la biología del cáncer de ovario y ayudar a mejorar los resultados clínicos. Por otra parte, el descubrimiento de biomarcadores discriminar HG pacientes EOC serosas que tienen buen o mal pronóstico puede contribuir a paciente estratificación terapéutica y puede aumentar la supervivencia global.
En estudios anteriores, hemos demostrado que la RAN (Ras relacionados con la proteína nuclear), en EOC, es sobreexpresado a medida que aumenta el grado del tumor y está fuertemente asociada a la mala supervivencia de los pacientes [12], [13]. funciones, por lo tanto, pueden ser corrió desregulados en los carcinomas de ovario y corrió patrones de expresión pueden ser utilizados como una herramienta de pronóstico en pacientes con EOC avanzada.
in vitro
, el uso de un ARN corto horquilla (shRNA) expresión de orientación RAN impide la proliferación de células EOC, lo que sugiere RAN como potencial diana terapéutica susceptibles para el tratamiento de esta enfermedad [14]. Por otra parte, la disminución de la expresión de la RAN
in vivo
experimentos de xenoinjertos de ratón resultó en la detención del crecimiento tumoral EOC [14]. Estas observaciones indican que RAN está implicado en la progresión del cáncer de ovario y podría estar implicada en la tumorigénesis y /o la supervivencia celular. Estos resultados se correlacionan bien con estudios similares en diferentes tipos de cáncer [15] - [19].
A nivel celular, RAN realiza dos funciones principales y distintas. En la interfase, RAN regula el transporte núcleo-citoplasma de las moléculas a través del complejo de poro nuclear [20], [21]. En la mitosis, RAN realiza una función diferente y controla la progresión del ciclo celular a través de la regulación de la formación del huso mitótico [22]
El ciclo RAN-GTP está regulada por tres proteínas.; RCC1, RAN-GAP1 y RanBP1 [23], [24]. intercambios RCC1 GDP por GTP, la conversión de RAN-PIB de RAN-GTP [23]. Por el contrario, RanBP1 y el trabajo RAN-GAP1 para aumentar la hidrólisis de GTP [24] y con ello llenar la piscina RAN-PIB [25], [26]. RAN utiliza el mismo ciclo /PIB GTP para regular tanto de sus funciones fisiológicas. Sin embargo, el gradiente de GTP /PIB alcanzado por estos reguladores es única para cada función de la RAN. Para el transporte nuclear, el gradiente se establece a través de la membrana nuclear por la distribución asimétrica de las proteínas reguladoras [27]. Durante la mitosis, aunque no membrana separa los reguladores, un gradiente se consigue en la proximidad del cromosoma con RCC1 estando unido a los cromosomas [27].
Aunque RAN utiliza los mismos reguladores para el intercambio de GTP /GDP, utiliza único proteínas asociadas durante la interfase y la mitosis para llevar a cabo diferentes funciones fisiológicas (transporte vs. conjunto del husillo). Durante la interfase, el enriquecimiento de la RAN-GTP en el núcleo está acoplado a exportinas como exportin-t (XPOT) [28], [29] y exportin-7 (XPO7 también denominado RANBP16) [30], [31], que servir como adaptadores uniendo tRNAs y proteínas, respectivamente, para permitir la exportación nuclear de sus cargas. Por el contrario, RAN-PIB en el citoplasma se une a importins, como importin β (IMPβ) [32], [33], que reconocen la secuencia de localización nuclear (NLS) de las proteínas para facilitar su movimiento a través de la envoltura nuclear. Durante la mitosis, RAN-GTP promueve conjunto de husillo de una manera que es independiente del transporte nuclear [34]. IMP se une beta e inhibe los factores de ensamblaje del huso, como TPX2 (proteína de direccionamiento para Xklp2). En las proximidades de los cromosomas, TPX2 se libera posteriormente facilitar la regulación de la organización y la dinámica de los microtúbulos [35].
El objetivo del presente estudio fue investigar la cual la función de RAN sería más relevante implicado en HG serosa malignidad EOC y pobre supervivencia del paciente. Para verificar el impacto de una función
frente al otro, la expresión de socios moleculares, específica para el transporte núcleo-citoplasma y la mitosis, se analizaron por inmunohistoquímica en un microarray de tejido de 143 carcinomas serosos que comprende 131 casos de HG y 12 de los tumores de LG. Se evaluó la expresión de proteínas individuales en correlación con parámetros clínicos y determinamos su asociación con la progresión del COE y el resultado. Se obtuvieron resultados prometedores para los dos socios de la RAN, XPO7 y TPX2, con potencial para ser clínicamente relevante en la estratificación de los pacientes HG EOC serosas.
Métodos
Declaración de Ética
El CHUM institucional comité de ética (comité d'éthique de En busca del Centro Hospitalario de la Universidad de Montreal) aprobó este estudio y el consentimiento por escrito se obtuvo de los pacientes antes de la recogida de muestras.
pacientes y muestras de tejido
las muestras tumorales fueron obtenidas de pacientes que se sometieron a cirugía para el cáncer de ovario en el Departamento de Oncología Ginecológica - Centro Hospitalario de la Universidad de Montreal (CHUM). Un estadio de la enfermedad determinada ginecólogo-oncólogo como se define por la Federación Internacional de Ginecología y Obstetricia (FIGO). Un patólogo independiente examinó la histopatología y el grado tumoral. criterios de selección de tejidos para este estudio se basan en una confirmación independiente de la histopatología seroso en muestras de pacientes sin quimioterapia previa. Se recogieron muestras entre 1