Extracto
Introducción
El cáncer colorrectal (CCR) es uno de los tres tipos de cáncer más comunes en el mundo y su incidencia va en aumento . Para identificar a los pacientes que se benefician de la terapia adyuvante requiere nuevos biomarcadores. El gen derivado de los islotes de regeneración (REG) 4 pertenece a un grupo de pequeñas proteínas de secreción implicados en la proliferación celular y la regeneración. Su expresión en marcha regulada ocurre en las enfermedades inflamatorias del intestino también en cánceres gastrointestinales. Los informes sobre la asociación de la expresión REG4 con el CRC pronóstico han sido mixtos. Nuestro objetivo fue investigar la expresión REG4 tumor en pacientes con CCR y su co-expresión con otros marcadores intestinales.
Métodos
expresión tumoral de REG4 se evaluó por inmunohistoquímica en 840 pacientes tratados quirúrgicamente consecutiva CRC de la Universidad de Helsinki hospital central. La expresión de MUC1, MUC2, MUC5AC, synapthophysin, y cromogranina se evaluó en un subgrupo de 220 pacientes con CCR operados en forma consecutiva. Se evaluó la expresión REG4 con los parámetros clínico-patológicos, otros marcadores intestinales, y el impacto de expresión REG4 en la supervivencia.
Resultados
expresión REG4 asociado con parámetros clínico favorables y con una supervivencia global más elevado de no mucinoso CRC (p = 0,019). Para este tipo de pacientes menores de 65 años, su expresión era un marcador independiente de menor riesgo de muerte dentro de los 5 años que el cáncer; razón de riesgo univariable (HR) = 0,57; 95% intervalo de confianza (IC) (0,34 a 0,94); multivariable HR = 0,55; CI 95% (0,33 a 0,92). En no mucinoso CRC, REG4 asocia con MUC2 positivo, MUC4 y MUC5AC expresión.
Conclusión
Se demuestra, a nuestro conocimiento por primera vez, que la expresión REG4 IHC para ser una organización independiente marcador de pronóstico favorable en no mucinoso CRC. Nuestros resultados contradicen los de estudios basados en la cuantificación de los niveles de mRNA REG4, una discrepancia que justifica más estudios
Visto:. Kaprio T, Hagström J, H Mustonen, Koskensalo S, Andersson LC, Haglund C (2014) Independientemente REG4 predice un mejor pronóstico en mucinoso no cáncer colorrectal. PLoS ONE 9 (10): e109600. doi: 10.1371 /journal.pone.0109600
Editor: Anthony WI. He aquí, el Queen Mary Hospital, Hong Kong
Recibido: 21 de julio de 2014; Aceptado: September 11, 2014; Publicado: 8 Octubre 2014
Derechos de Autor © 2014 Kaprio et al. Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos de la licencia Creative Commons Attribution License, que permite el uso ilimitado, distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que el autor original y la fuente se acreditan
Disponibilidad de datos:. La autores confirman que todos los datos que se basan los resultados son totalmente disponible sin restricciones. Todos los datos relevantes se encuentran dentro del apoyo de sus archivos de información en papel y
Financiación:. Este estudio fue apoyado por becas de Finska Läkaresällskapet, la Fundación Kurt och Doris Palander, la Fundación Sigrid Jusélius, y Medicinska understödsföreningen Liv och Hälsa, K. Fundación Johansson Albin, y un subsidio especial gubernamental para la investigación y la formación. Los donantes no tenía papel en el diseño del estudio, la recogida y análisis de datos, decisión a publicar, o la preparación del manuscrito
Conflicto de intereses:.. Los autores han declarado que no existen intereses en competencia
Introducción
tercer cáncer más común del mundo, con una incidencia anual de más de un millón de casos nuevos, es el cáncer colorrectal (CCR) [1]. Su curación se basa en el diagnóstico precoz, la cirugía radical, y la posible terapia adyuvante. Dicha terapia es rutina para los pacientes en estadio III. En la etapa II, la ventaja de la terapia adyuvante es, sin embargo no está claro, ya que aproximadamente el 80% de los pacientes en estadio II tratados quirúrgicamente sobrevivir sin quimioterapia. Aunque sabemos que muchos factores de alto riesgo; T4-etapa, bajo la diferenciación, invasión vascular, obstrucción tumoral, perforación intestinal, e inadecuada la resección de los ganglios linfáticos, no siempre podemos identificar a los pacientes que se beneficiarán de la terapia adyuvante. Sería beneficioso para encontrar nuevos biomarcadores para ayudar en las decisiones de tratamiento
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Regeneración gen derivadas de islotes (REG) proteínas representan un grupo de pequeñas proteínas secretoras implicadas en la proliferación celular y la regeneración, que también participan en la formación de la sistema inmunológico [2], [3]. Pertenecen a la lectina dependiente de calcio (C-lectina) superfamilia y se dividen en cuatro familias, REG I a IV, basándose en su estructura primaria. En desacuerdo con las otras proteínas REG, REG4 se une de forma independiente polisacáridos de calcio [4]. Los genes que codifican REG I a III genes están localizados en el cromosoma 2p12, mientras que la de REG4 está en 1p12-13. REG4 se clonó primero y se identifica por Hartupee et [5] Al y por Kämäräinen et al [6]. Que contiene 158 aminoácidos y con un peso molecular de 18 kDA de, se expresa fisiológicamente en el colon y el intestino delgado, con alta expresión en células enteroendocrinas. [6], [7]. En el epitelio gastrointestinal, REG4 se activa durante fases específicas de la diferenciación y maduración, su expresión es espacialmente específico, y se ha sugerido para apoyar la diferenciación mucinosa y neuroendocrino o [8], [9]. la expresión regulada hasta REG4 ocurre en las enfermedades inflamatorias del intestino (IBD) [6] y también se da en muchos tumores malignos: colorrectal, gástrico y cáncer de páncreas [10] - [12]. Se sugiere REG4 para participar en la carcinogénesis y la regeneración del tejido, para actuar como un factor antiapoptótico, y para promover la proliferación y la invasión [13]. Las últimas funciones fisiológicas y patológicas de REG4 sigue siendo difícil de alcanzar, sin embargo. La expresión de REG4 en los cánceres del tracto digestivo tiene en varios estudios parecían ser de valor predictivo y pronóstico [10], [11], [14], [15]. Los hallazgos en el CCR han, sin embargo, ha sido controvertido: el aumento de expresión es un signo de mal pronóstico según Numata et al [16], pero ninguna asociación con el pronóstico ha surgido en otros estudios [17], [18]
Este estudio tuvo como objetivo evaluar en el CCR el papel de REG4 como marcador pronóstico y su asociación con los parámetros clínico-patológicos en una cohorte de 840 pacientes. Por otra parte, en un subgrupo de 220 pacientes, nos centramos en asociación de la expresión REG4 con otros marcadores: marcadores de diferenciación mucinosa MUC1, MUC2, MUC4 y MUC5AC, así como marcadores de fenotipo neuroendocrino:. Sinaptofisina y cromogranina
métodos
los pacientes
la población de estudio comprendió 840 pacientes con cáncer colorrectal consecutivos sometidos a cirugía en 1983-2001 en el Departamento de cirugía, hospital central Universitario de Helsinki. Un subgrupo de 240 pacientes operados consecutivamente comprendido entre 1998-2001. REG4 se estudió en toda la serie de pacientes, y los otros marcadores estudiados en el subgrupo. El finlandés de Registro de Población Centro proporcionó los datos en el estado vital de seguimiento necesarios para calcular las estadísticas de supervivencia, y Estadística Finlandia proporcionó causa de muerte para todos los fallecidos. La mediana de edad al diagnóstico fue de 66 años, con una mediana de seguimiento de 5,1 años (rango 0-25,8). La tasa de supervivencia específica de la enfermedad a los 5 años fue del 58,9% (IC del 95% 55,0-62,8%). Para el subgrupo, la edad media al diagnóstico fue de 67 con una mediana de seguimiento de 6,0 años (rango 0-13,2). La tasa de supervivencia específica de la enfermedad a los 5 años fue del 64,8% (IC del 95% 58,1-71,5%). características clinicopatológicas de ambos grupos están en S1.
Este estudio cumple con la Declaración de Helsinki y fue aprobado por el Comité de Ética Quirúrgica del Hospital Central Universitario de Helsinki (ONR SUH 226 /E6 /06, la extensión TMK02 §66 17,4 0,2013) y la Autoridad Nacional de Supervisión del Bienestar y la Salud dio el permiso para utilizar muestras de tejido sin el consentimiento informado individual en este estudio retrospectivo (Valvira DNRO 10041 /06.01.03.01 /2012).
microarrays de tejidos
fijados con formalina y muestras tumorales incluidas en parafina provienen de los archivos del Departamento de Patología, hospital central Universitario de Helsinki. áreas representativas de las muestras tumorales en hematoxilina y eosina diapositivas fueron marcados por un patólogo experimentado. Tres golpes de 1,0 mm de diámetro tomadas de cada muestra se montaron en cada bloque de parafina receptor con un instrumento de microarrays de tejidos semiautomática (TMA) (Instrumentos Beecher, Silver Spring, MD) como se describe [19].
La inmunohistoquímica
TMA- y tejidos bloques estaban recién cortadas en secciones de 4 micras. Después de la desparafinación en xileno y la rehidratación a través de una concentración decreciente gradual de etanol a agua destilada, los portaobjetos se trataron en un módulo de pretratamiento (Lab Vision Corp., Fremont, CA) en tampón de pre-tratamiento durante 20 minutos a 98 ° C para la recuperación de antígeno . El procedimiento de tinción por el sistema Dako EnVision VERDADERO detección, peroxidasa /DAB +, Conejo /ratón (Dako, Glostrup, Dinamarca) utiliza un Autostainer 480 (Lab Vision). Los tejidos se incubaron con anticuerpos primarios durante una hora a temperatura ambiente. El anticuerpo REG4 es como se describe en [20], otros eran de fuentes comerciales. Los anticuerpos y sus diluciones están en la Tabla 1.
La puntuación de muestras
REG4 expresión citoplasmática se anotó en las células tumorales, ya sea negativo del positivo. MUC1 y MUC2 expresiones eran citoplasmática en las células tumorales y se calificaron como negativos de baja moderada-alta según la intensidad. Para más análisis estadístico que se agruparon en: baja (negativa a menor) y alta (de moderado a alto). expresiones citoplasmáticos MUC4 y MUC5AC se anotó ya sea negativo o positivo. la diferenciación Neuroendocrinic (negativo vs positivo) fue evaluada por synapthophysin citoplasmática y la positividad cromogranina. Tinciones se puntuaron independientemente por T.K. y J. H., que fueron cegados a los datos clínicos y resultados. Las diferencias en la puntuación se discutió hasta consenso. Imágenes representativas de la expresión son en la Figura 1. Expresión REG4 se comparó con el índice de proliferación Ki-67 por tinción, que hemos publicado anteriormente [21]
Imágenes representativas de tinciones de anticuerpos en el cáncer colorrectal.; REG4-negativo y -positivo (A & amp; B), MUC1- negativo y -positivo (C & amp; D); MUC2-negativo y -positivo (E & amp; M), MUC4-negativo y -positivo (G & amp; H), MUC5AC-negativo y -positivo (I & amp; J), synapthophysin-negativo y -positivo (K & amp; L ), cromogranina-negativo y -positivo (M & amp; N) Aumento original era x 20.
los análisis estadísticos
la evaluación de la asociación entre la expresión REG4 y parámetros clínico o expresiones MUC se hizo mediante la prueba de chi-cuadrado de Pearson o la prueba exacta exacta asociación lineal por lineal para los parámetros solicitados. la supervivencia global específica de la enfermedad fue contado desde la fecha de la cirugía hasta la fecha de muerte por cáncer colorrectal, o hasta el final del seguimiento. El análisis de supervivencia mediante el método de Kaplan-Meier se comparó mediante la prueba de log-rank. El modelo de riesgo proporcional de Cox de regresión sirve para el análisis de supervivencia uni y multivariable, ajustado por sexo, edad, clasificación de Dukes, y la diferenciación. Prueba del modelo de Cox suposición de las proporciones de riesgo constante en el tiempo implicado la inclusión de una covariable dependiente del tiempo por separado para cada variable comprobable. La razón de riesgo de la diferenciación se analizó en dos períodos (de 0 a 1,25 y 1,25 a 5 años) con el fin de cumplir con los supuestos del modelo de Cox, con el modelo de Cox dependiente del tiempo. Los términos de interacción fueron considerados y una interacción entre la expresión y la edad REG4 surgieron. Por lo tanto, se calculó el papel pronóstico de REG4 separado para los pacientes menores y mayores de 65. Todas las pruebas fueron de dos caras. Un valor de p de 0,05 fue considerado significativo. Todos los análisis estadísticos se realizaron con SPSS versión 20.0 (SPSS Statistics IBM, versión 20.0 para Mac; SPSS, Inc., Chicago, IL)
Resultados
La inmunohistoquímica
REG4. expresión en las células tumorales era citoplásmica y ligeramente granular. Cuando está presente, la expresión fue evidente en la gran mayoría de las células tumorales, pero sin expresión nuclear. En secciones de tejido integrales, no hay distinción clara en la expresión apareció entre el frente invasivo y el resto del tumor. Por otra parte, en las secciones enteras, REG4 expresión apareció en algunos casos en el epitelio normal, pero se había reducido regulado en las células tumorales. La expresión de mucinas, synapthopysin y cromogranina fue citoplasmática, sin expresión nuclear
De los 840 tumores representados en el TMA, tinción REG4 podría ser evaluado en 793.; 580 (73,1%) se obtuvo como negativo y 213 (28,9%) obtuvo resultados positivos. En un subgrupo de 220 tumores, MUC 1 expresión fue evaluada en 206 (baja 83,5% y alto 17.5%), la expresión MUC2 en 210 (baja 17,1% y alto 82.9%), la expresión MUC4 en 208 (negativo 51,0% y positivo 49,0% ), y MUC5AC expresión en 205 (93,2% negativo y positivo 6,8%). positividad Neuroendocrinic (o /y cromogranina tanto synaptohysin--positivo) podría ser evaluado en 212 (92,9% negativo y positivo del 7,1%).
REG4 en la metástasis de los ganglios linfáticos
Sobre la base de los resultados de TMA , elegimos 10 pacientes con enfermedad de Dukes C, 5 con tumores REG4-positiva y 5 con tumores negativos. Ninguno de los tumores negativos REG4 de los pacientes mostró positividad en sus metástasis en nódulos linfáticos, mientras que de los 5 pacientes con REG4-positivo tumores, 2 mostraron positividad también en sus metástasis de ganglios linfáticos (Figura 2).
REG4- expresión negativa en el tumor y -positivo en el epitelio adyacente (a). REG4 expresión positiva en el tumor primario (B) y negativo en su correspondiente metástasis en ganglios linfáticos expresión REG4 (C) .Positive en el tumor primario (D) y positivo en su metástasis en los ganglios linfáticos correspondiente (E). aumento original x 4 en la figura A y en B x 20-E. parámetros
REG4 y clinicopatológicas
REG4 expresión citoplasmática asociado con la etapa menos avanzada (p = 0,014), la ubicación en el hemicolon derecha (p = 0,035), y la histología mucinosa (p & lt; 0,0001). No vimos ninguna asociación con la edad, el género, la diferenciación, o la ubicación (colon vs recto) (Tabla 2). Como REG4 asociado fuertemente con la histología del tumor, se analizaron CRC mucinoso y no mucinoso por separado. En no mucinoso CRC, la expresión REG4 asocia con la etapa menos avanzada (p = 0,005) y mayor differentiaton (p = 0,023). No se encontró asociación apareció con la edad, sexo, localización del tumor, ni la parte del tumor. (Tabla 3) En mucinoso CRC, la expresión REG4 no se asoció con ningún parámetro clinocopathological (datos no mostrados). No se encontró asociación entre REG4 y Ki-67 fue visto en el CCR ni en ninguno de los subgrupos analizados (datos no mostrados).
REG4 y otros marcadores intestinales
En el subgrupo de 220 tumores, se encontró que la expresión REG4 asociado significativamente con una mayor expresión de MUC2, MUC4 y MUC5AC, pero no con la expresión de MUC1. Tampoco REG4 expresión asociada con marcadores de diferenciación neuroendocrina. Lo mismo se mantuvo cierto cuando no mucinoso CRC se analizó solo (Tabla 4). En mucinoso CRC, la expresión REG4 asociado con ningún otro marcadores estudiados (datos no mostrados).
Análisis de supervivencia
no mucinoso, CRC REG4 positividad era un signo de pronóstico favorable ( p = 0,019, prueba de log-rank); DSS 5 años para los pacientes con tumor expresión citoplasmática REG4 positivo fue del 67,9% (IC del 95%: 60,5 a 75,3) en comparación con el 57,8% (IC del 95%: 53,5 a 62,1) para los que no tienen expresión citoplásmica (Figura 3). En mucinoso CRC, no hay diferencia apareció (datos no mostrados). Cuando se estratificó no mucinoso CRC para pacientes menores o mayores de 65, la expresión REG4 era un signo de pronóstico favorable en pacientes menores de 65 años (p = 0,049, test log-rank.), Sin diferencia para los mayores (p = 0,195, registro -rank-test). (S2 & amp; S3)..
análisis de supervivencia específica de la enfermedad de acuerdo con el método de Kaplan-Meier para la expresión REG4 en el cáncer colorrectal no mucinoso por la prueba de log-rank
regresión de Cox análisis univariable confirmaron estos resultados, con la expresión REG4 ser un signo de un menor riesgo de muerte en un plazo de 5 años para los no mucinosos CRC. Una diferencia significativa surgió también para los pacientes menores de 65 años (HR 0,57, IC del 95% desde 0,34 hasta 0,94, p = 0,029), pero no para las personas de más edad (HR 0,83, IC del 95%: 0,57 a 1,22; p = 0,34). El análisis multivariable de regresión de Cox para pacientes con CRC no mucinosos menores de 65 años, ajustado por sexo, etapa, y la diferenciación, mostró que REG4 fue un factor independiente de pronóstico favorable (HR 0,55, IC del 95%: 0,33-0,92, p = 0,022) (Tabla 5 ).
Discusión
Aquí nos muestran que la expresión mediante inmunohistoquímica en REG4 no mucinosos asociados con cáncer colorrectal con parámetros clínico favorable y que REG4 es un marcador independiente de pronóstico favorable en pacientes menores 65. REG4 de expresión se asocia con la expresión de otros marcadores intestinales:. MUC1, MUC2 y MUC5AC
REG4 expresión fue mayor en los tumores en estadio bajo y en aquellos con una histología mucinosa. Con tumores mucinosos excluidos, la expresión REG4 asoció significativamente con una mayor diferenciación y el bajo escenario. REG4 expresión también se asocia con MUC1, MUC2 y MUC5AC, lo que apoya la conclusión de que los tumores REG4-positivas son más altamente diferenciadas que son aquellos que son REG4 negativo. Estos resultados están de acuerdo con los hallazgos de Li et al [17], que mostró en que para REG4, inmunohistoquímica (IHC) expresión en asociadas CRC significativamente con una mayor diferenciación y con ausencia de invasión venosa. Por otra parte, la expresión REG4 mostró una tendencia al igual que la asociación con baja T-etapa, ausencia de metástasis en los ganglios linfáticos y enfermedad local (Dukes A-B vs. C-D). Resultados similares aparecen para el cáncer de la vesícula biliar, donde la expresión positiva REG4 IHC, se asocia con mayor Differention tumor [22]. resultados controvertidos de CRC en Numata et al. demostrar que el aumento de expresión de ARNm asociados REG4 con una mayor diferenciación, invasión profunda (estadio T), invasión linfática, la presencia de metástasis hepáticas, y la etapa más avanzada [16]. Ellos, sin embargo midieron los niveles de mRNA por PCR, no como lo hicimos expresión de la proteína real.
Asociación entre los niveles REG4 y el carcinoma ha sido objeto de estudio tanto en el suero y en los tejidos. concentración sérica elevada de REG4 en pacientes con carcinoma en comparación con los controles sanos ha sido un hallazgo en el cáncer de páncreas [12], cáncer gástrico [11] y el cáncer de la vesícula biliar [22], lo que indica que REG4 suero podría servir como un biomarcador de diagnóstico. El aumento de expresión REG4 IHC se ha sugerido como un marcador de mal pronóstico en el cáncer gástrico [23], y los niveles elevados de tejido REG4 mRNA puede ser un marcador de mal pronóstico en el CCR [16]. REG4 IHC expresión ha demostrado, sin embargo, ningún efecto sobre el pronóstico en el CCR [17], [18]. Una razón para esto podría ser que los cánceres mucinosos y no mucinosos no se analizaron por separado. También las diferencias en los anticuerpos, procedimientos de tinción y análisis de coloraciones pueden ser muy diferentes de nuestro estudio. En el cáncer de la vesícula biliar, la expresión REG4 IHC se ha asociado con mejor pronóstico [22].
Nuestros resultados muestran que la expresión REG4 IHC es un marcador de pronóstico favorable en no mucinoso CRC, mientras que no hay diferencia surgió en mucinoso CRC. REG4 expresión es constitutivamente alta en los tumores mucinosos (es decir Pseudomixoma peritoneal, y cistoadenomas mucinosos y cáncer gástrico mucocellular) Esto puede explicar por qué no hay una clara variación en la expresión REG4 fue encontrado por IHC en el grupo de los tumores mucinosos CRC. Las diferencias en la expresión REG4 fue, por otra parte evidente en no mucinoso CRC. En nuestros pacientes menores de 65 años, elevado REG4 fue un factor independiente de pronóstico mejor en no mucinoso CRC. Por lo tanto, parece plausible que los niveles de ARNm de REG4 pueden ser elevados en pacientes con CRC con mal pronóstico, pero esto no se traduce a proteína. Otros estudios están garantizados por tanto, para comparar los niveles de mRNA con REG4 caso REG4 IHC por caso.
Nuestros resultados en relación con cinco pares de tumores primarios REG4-positivas y sus correspondientes metástasis de ganglios linfáticos mostraron que cinco de los ganglios linfáticos, sólo dos mostró la expresión REG4; Esto puede implicar que una subpoblación REG4-negativo de las células tumorales es más propensos a sufrir metástasis de células positivas REG4
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REG4, se expresa en enfermedades inflamatorias del intestino y también en los márgenes de las úlceras pépticas, se considera un marcador de la inflamación [6]. En algunos de nuestros de todo el tejido tejido secciones teñidas tumor negativo para REG4, pero el epitelio benigno adyacente expresaron REG4 fuertemente, al parecer representa una reacción inflamatoria contra el tumor.
Es de destacar que la expresión REG4 confiere un pronóstico más favorable sólo en CRC sin diferenciación mucinosa. De hecho, la alta expresión de REG4 ha aparecido en las formas agresivas de cáncer gastrointestinal que muestran (de células en anillo de sello) carcinoma mucinoso fenotipo similar mucocellular del estómago [9]. Por otro lado, también es REG4 abundantemente presente en cistoadenomas mucina ricos del apéndice y en su, forma diseminada maligno, pseudomixoma peritoneal, que es notablemente resistente terapia.
La mayoría de las células entero-endocrinas en la normalidad mucosa intestinal muestran alta expresión fisiológica de REG4 con la co-expresión de sinaptofisina y cromogranina. tumores neuroendocrinos intestinal tanto de bajo y alto grado también muestran positividad REG4, con frecuencia con una distribución anatómica peculiar con la expresión más fuerte en una sola capa de células en la periferia del tumor que están en contacto íntimo con el estroma circundante [6] Teniendo en cuenta esto, era algo intrigante que los tumores synaptophysin- y cromogranina positivo CRC en este estudio se mantuvieron negativos para REG4.
Varios informes sugieren el papel oncogénico de REG4 en el desarrollo de cáncer en el tracto gastrointestinal. Los mecanismos moleculares finales han, sin embargo, siendo difícil de alcanzar. Bishnupari et al [24] informaron de que el tratamiento de células de adenocarcinoma de colon cultivadas con la fosforilación inducida por la proteína REG4 recombinante del receptor de EGF y Akt. Sugirieron que REG4 es un transactivador de la vía de señalización de EGFR /Akt. A elucidación adicional de la función de REG4 exógeno como un regulador de potencial de crecimiento celular es, sin embargo, a la espera de la identificación del receptor REG4 putativo. No hay evidencia muestra que el aumento de expresión de REG4 por sí misma induce el crecimiento canceroso, sin embargo. Nuestras observaciones en ratones transgénicos para cDNA REG4 humano bajo el promotor vellosidades que conduce a la sobreexpresión mundial de REG4 en la mucosa intestinal no indujo aumentaron la formación de tumores o hiperplasia de la mucosa (datos no publicados).
Regulación de la expresión REG4 es todavía mal entendido. Hemos informado originalmente fuertemente regulado hasta la expresión de REG4 también en la mucosa inflamada EII de focos EII-como de metaplasia intestinal inducida por la gastritis en el estómago [6]. Esto sugiere que las citoquinas inflamatorias pueden influir en la expresión REG4. La diferenciación neuroendocrina, por otra parte, como se ve en las células enteroendocrinas, parece conferir la expresión constitutiva de REG4. Recientemente hemos informado de co-expresión de REG4 con el factor de transcripción neuronal Hath-1 (Matemáticas, atonal-1) en tumores neuroendocrinos [9]. Lo que queda por establecer si es un regulador de la expresión REG4 es Hath-1.
En comparación con las secciones de tejidos enteros, la técnica TMA permite el análisis de grandes cohortes de pacientes, pero con una menor proporción de los tumores evaluados. Esto no plantea ningún problema aquí, sin embargo, como el patrón de tinción REG4 en nuestra sección de tinción entera fue homogénea. Por razones técnicas, hasta el 5% de las muestras se perdieron en el TMA-producción y el proceso de -staining. La fuerza de este estudio es una cohorte de pacientes de CRC-grande, bien caracterizado con nuestro largo tiempo de seguimiento.
Aquí nos muestran, a nuestro conocimiento por primera vez, que la expresión REG4 IHC es un marcador independiente de pronóstico favorable en el cáncer colorrectal no mucinoso en pacientes menores de 65. Estos resultados están en desacuerdo con los obtenidos mediante la evaluación de los niveles de ARNm; nuestras discrepancias con los hallazgos de otros justifican más estudios.
Información de Apoyo
figura S1.
características clínico-patológicas de la población población de estudio y subgrupos
doi:. 10.1371 /journal.pone.0109600.s001 gratis (DOCX)
figura S2.
expresión REG4 indica un mejor pronóstico en el cáncer colorrectal no mucinoso para los pacientes más jóvenes. análisis de supervivencia específica de la enfermedad de acuerdo con el método de Kaplan-Meier para la expresión REG4 en el cáncer colorrectal no mucinoso en pacientes menores de 65 años por la prueba de log-rank
doi:. 10.1371 /journal.pone.0109600.s002 gratis ( TIFF)
Figura S3.
expresión REG4 que no muestran diferencias en la supervivencia en el cáncer colorrectal no mucinoso para los pacientes de mayor edad. análisis de supervivencia específica de la enfermedad de acuerdo con el método de Kaplan-Meier para la expresión REG4 en el cáncer colorrectal no mucinoso en pacientes mayores de 65 años mediante la prueba de log-rank
doi:. 10.1371 /journal.pone.0109600.s003
(TIFF)
Reconocimientos
agradecemos Päivi Peltokangas, Gynel Arifdshan, y Elina Aspiala por su excelente asistencia técnica.