Extracto
Objetivo
Los biomarcadores capaces de discriminar los pacientes que se encuentran probabilidades de responder a ciertos agentes quimioterapéuticos podría mejorar la eficiencia clínica. Los sulfatasas (SULFs) desempeñan un papel crítico en la patogénesis de una variedad de cánceres humanos. Aquí, nos centramos nuestra investigación sobre el impacto pronóstico y predictivo de
SULF2
metilación en cáncer gástrico.
Métodos
Promotor de la isla CpG metilación de
SULF2
se analizó en 100 muestras de cáncer gástrico. El
in vitro
sensibilidad a cisplatino, docetaxel, gemcitabina, irinotecán y pemetrexed se determinó mediante un ensayo de respuesta a los fármacos histocultivo (HDRA). Además, 56 pacientes con cáncer gástrico tratados con un régimen FOLFOX modificado (oxaliplatino cada dos semanas más 5-FU y ácido folínico) fueron analizados retrospectivamente para evaluar mejor el impacto pronóstico y predictivo de
SULF2
metilación en cáncer gástrico.
resultados
metilado
SULF2 gratis (
SULF2M
) se detectó en 28 pacientes, mientras que los 72 pacientes restantes mostraron metilado
SULF2 gratis (
SULF2U
, tasa de metilación: 28%). Las muestras con
SULF2U
eran más sensibles a cisplatino que aquellos con
SULF2M gratis (tasa de inhibición: 48.80% contra 38.15%,
P
= 0,02), mientras que las muestras con
SULF2M
eran más sensibles a irinotecán que
SULF2U gratis (tasa de inhibición: 53,61% frente a 40,92%,
P
= 0,01). No hubo asociación entre el
SULF2
metilación y
in vitro
sensibilidad a docetaxel, gemcitabina y pemetrexed.
fue encontrado SULF2
metilación de tener una asociación significativa con la eficacia del cisplatino (
SULF2M
: 57,14%,
SULF2U
: 80,56%,
P = 0,02
) y la eficacia de irinotecan (
SULF2M
: 89.29%,
SULF2U
: 62,50%,
P
= 0,01). Entre los 56 pacientes que recibieron el régimen FOLFOX modificado, se observó una asociación significativa entre la supervivencia y
SULF2
estado de metilación (
SULF2M:
309 días, 95% CI = 236 a 382 días;
SULF2U:
481 días, IC del 95% = 418 a 490 días;
P
= 0,02). El análisis multivariado reveló que
SULF2
metilación fue un factor pronóstico independiente de la supervivencia global en pacientes con cáncer gástrico tratados con quimioterapia basada en platino.
Conclusión
SULF2
metilación se asocia negativamente con la sensibilidad a cisplatino
in vitro
.
SULF2
metilación puede ser un biomarcador pronóstico novedosa para los pacientes con cáncer gástrico tratados con quimioterapia basada en platino
Visto:. Shen J, J Wei, Wang H, Yang Y, G Yue, Wang L , et al. (2013)
SULF2
La metilación se asocia con
in vitro
cisplatino sensibilidad y la eficacia clínica de pacientes con cáncer gástrico tratados con un régimen FOLFOX Modificado. PLoS ONE 8 (10): e75564. doi: 10.1371 /journal.pone.0075564
Editor: Zhang Dong, Universidad de Medicina de Nanjing, China
Recibido: 12 Junio, 2013; Aceptado: August 14, 2013; Publicado: 4 de octubre 2013
Derechos de Autor © 2013 Shen et al. Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos de la licencia Creative Commons Attribution License, que permite el uso ilimitado, distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que el autor original y la fuente se acreditan
Financiación:. Este trabajo fue financiado por subvenciones de la Fundación Nacional de Ciencias Naturales de China (subvención Nº 81220108023 y 81172094) y los seis mejores talentos del proyecto de la provincia de Jiangsu (Grant No. 2011ws005). Los donantes no tenía papel en el diseño del estudio, la recogida y análisis de datos, decisión a publicar, o la preparación del manuscrito
Conflicto de intereses:.. Los autores han declarado que no existen intereses en competencia
Introducción
el cáncer gástrico es una de las causas más frecuentes de muerte relacionada con el cáncer en todo el mundo [1], [2]. protocolos de tratamiento multimodales, basados principalmente en platino y 5-fluorouracilo (5-FU), han demostrado prolongar la supervivencia del paciente; sin embargo, con cualquier combinación de agentes quimioterapéuticos, la tasa de respuesta es sólo aproximadamente el 30% -50% [3], [4]. En un intento de mejorar la eficacia clínica, es importante y necesario para identificar biomarcadores capaces de discriminar los pacientes que son propensos a responder a ciertos agentes quimioterapéuticos [4] - [9].
proteoglicanos heparán sulfato (HSPGs ) son correceptores para factores de crecimiento de unión a heparina y citoquinas distribuidos en la superficie celular y en la matriz extracelular. Dos isoformas de las extracelulares heparán sulfato 6-O-endosulfatases (SULFs), SULF1 y SULF2, se han descubierto en los mamíferos. Ambas proteínas se secretan a la superficie celular para modular la sulfatación de HSPG [10]. Aunque los informes anteriores de manera inequívoca han destacado el papel fundamental que desempeñan SULFs en la patogénesis de una variedad de cánceres humanos, las opiniones sobre el papel de SULFs en el desarrollo del cáncer han sido un tanto polarizada. Varias evidencias indican que SULFs son reguladores negativos de crecimiento de células tumorales, y que la sobreexpresión de SULFs en las células tumorales inhibe el crecimiento celular por la desregulación de varios factores, incluyendo FGF-2, HB-EGF y HGF [11] - [13]. Otros estudios sostienen la opinión de que SULFs son reguladores positivos de las vías de señalización oncogenéticas, incluidos Wnt, BMP, Hedgehog y GDNF [14] - [16], y el aumento de expresión de SULFs es frecuente en varios tipos de cáncer, incluyendo gástrico, hepatocelular, pancreático y de mama cánceres, el cáncer no microcítico de pulmón no microcítico (CPNM) y los tumores de cabeza y cuello [10], [13], [17] - [20]. Alta expresión de SULF2 se ha relacionado con una baja supervivencia en pacientes con carcinoma hepatocelular y NSCLC [18], [20]. La evidencia disponible sobre el estado y la expresión de los niveles de metilación de
SULFs
en el cáncer gástrico, sin embargo, no son concluyentes, y el valor pronóstico o predictivo de
SULFs
para la predicción de la quimiosensibilidad sigue siendo desconocido.
en este estudio, hemos analizado el promotor isla CpG metilación de
SULF2
, el gen que codifica la endosulfatase SULF2, y su asociación con
in vitro
sensibilidad a cisplatino, docetaxel , gemcitabina, irinotecán y pemetrexed en 100 muestras de cáncer gástrico humano. Con este fin, hemos realizado una serie de
in vitro
pruebas de sensibilidad en los tejidos tumorales en gástrica recién removida y evaluado el posible uso de
SULF2
estado de metilación para predecir la eficacia de la quimioterapia de agentes allí. Luego, retrospectivamente analizado la
SULF2
metilación en una cohorte de 56 pacientes con cáncer gástrico tratados con un régimen FOLFOX modificado y llegó a la conclusión de que
SULF2U
sirve como un biomarcador pronóstico independiente en pacientes con cáncer gástrico tratados con un régimen FOLFOX modificado.
Materiales y Métodos
Ética Declaración
Todas las investigaciones con seres humanos han sido aprobados por el Comité de protección de investigación humana de la Torre del tambor hospital afiliado a la Facultad de Medicina de la Universidad de Nanjing y el consentimiento informado por escrito se obtuvo de todos los pacientes.
pacientes y muestras de tejidos
los pacientes reclutados eran aquellos sometidos a la gastrectomía en el Departamento de Cirugía general del hospital Torre del tambor de Nanjing, China durante el período comprendido entre agosto de 2010 y octubre de 2011. los criterios de elegibilidad para la inscripción en el estudio incluyó los siguientes parámetros: (1) la edad & gt; 18 años; (2) histológicamente confirmado adenocarcinoma gástrico, adenocarcinoma mucinoso o de células en anillo de sello; (3) no hay enfermedades malignas previas o concomitantes distintos de cáncer gástrico; (4) sin antecedentes previos de quimioterapia o radioterapia, ya sea adyuvante o paliativo; y (5) la función adecuada de todos los órganos principales. Las muestras de tejido fueron extraídos de 100 tumores gástricos recién extraídos. Cada tejido tumoral se divide en dos partes: (1) una parte se mantuvo en solución salina equilibrada de 4 ° C de Hanks con 1% de penicilina /estreptomicina después de la recogida, y luego se envían al laboratorio dentro de 15 min en 4 ° C, para
in vitro
evaluación de quimiosensibilidad mediante el ensayo de respuesta a los fármacos histocultivo (HDRA) [21], [22]; (2) la parte restante se hizo en bloques (FFPE) tumorales fijado en formol e parafina embebido para la observación patológica y la detección de metilación. Se revisaron retrospectivamente los registros médicos de los pacientes de cirugía e informes para identificar los datos clínicos e histopatológicos, incluyendo el sexo, la histología, localización tumoral, estadio, grado histológico y la metástasis de los ganglios linfáticos. Los tumores se clasifican de acuerdo a la clasificación TNM de la Unión Internacional Contra el Cáncer (UICC). escrito el consentimiento informado se obtuvo de todos los pacientes y los protocolos para este estudio fueron aprobados por el Comité de Protección de Investigación Humana del Hospital Torre del Tambor.
HDRA
HDRA procedimientos se realizaron como se informó anteriormente por Furukawa y sus colegas [21], [22]. En resumen, los tejidos tumorales frescos se lavaron dos veces con solución salina equilibrada de Hanks y picado en trozos pequeños de aproximadamente 10 mg en peso y 0,5 mm de diámetro, que después se colocan en colágeno preparada (Diseño de la Salud, Rochester, NY) a la superficie en 24 -Bueno microplacas. Las concentraciones óptimas de los medicamentos que se usan para distinguir
in vitro
sensibilidad y resistencia fueron 20 ug /ml de cisplatino [23], 100 ug /ml de docetaxel [22], 50 ug /ml de gemcitabina [23], 20 ug /ml para irinotecan [23], y 400 ug /ml de pemetrexed [5], de acuerdo con su concentración plasmática máxima en los pacientes. Cisplatino, docetaxel, irinotecan y se obtuvieron de Jiangsu Hengrui Medicine Company (Jiangsu, China), mientras que pemetrexed y gemcitabina se obtuvieron de Eli Lilly and Company (Shanghai, China). 8 pocillos de cultivo paralelas se utilizaron para cada concentración de fármaco, así como para el control. Las placas se incubaron durante 7 días a 37 ° C en presencia de los fármacos disueltos en RPMI suero de ternera fetal al 20% que contenía 1640 y se dejan en una atmósfera humidificada que contiene 95% de aire 5% de CO
2. Después de histocultivo, 100 l de colagenasa tipo I (0,1 mg /ml, Sigma, Shanghai, China) y 100 l de 3- (4,5-dimetil-2-thiazotyl) -2,5-difenil-2H-tetrazolio bromuro de ( MTT) solución (/ml, Sigma, Shanghai, china) se añadieron 5 mg a cada pocillo de cultivo y se incubó durante otras 16 horas. Después de la extracción con sulfóxido de dimetilo, la absorbancia de la solución en cada pocillo se leyó a 540 nm.
Evaluación de la sensibilidad a los agentes anti-cáncer en HDRA
La absorbancia por gramo de tejido tumorales cultivadas se calcula a partir de la absorbancia media de tejido de 8 pocillos de cultivo paralelas, y el peso del tejido tumoral se determinó antes del cultivo. La tasa de inhibición de cada agente anti-cáncer se calculó utilizando la siguiente fórmula: Tasa de inhibición (%) = (1-T /C) x 100, donde T es la absorbancia media de tratados tumor /Peso y C es la absorbancia media de control del tumor /peso. Las tasas de inhibición de corte utilizados para diferenciar el sensible y los casos resistentes fueron adoptadas en el 30%, 40%, 50% y 60% para cada fármaco ensayado. El
in vitro
tasa de eficacia también se estima con base en la tasa de inhibición de corte de la siguiente manera en:. Tasa de eficacia (%) = número de casos delicados /número total de casos
La quimioterapia de los pacientes
de todos los pacientes, 56 con Eastern Cooperative Oncology Group (ECOG) estado funcional (PS) ≤2 recibido una FOLFOX modificado (una combinación de 5-FU y platino) régimen de quimioterapia después de la resección de tumores primarios de la siguiente manera: oxaliplatino 85 mgm
-2, más ácido folínico 200 mgm
-2 como una infusión de 2 horas en el día 1, seguido de una infusión de 22 h de 5-FU 2000 mgm
-2 en los días 1 y 2, cada dos semanas. Estos 56 pacientes fueron seguidos más arriba y su tiempo de supervivencia se calculó a partir de la fecha de diagnóstico de la fecha de la última visita de seguimiento o muerte por cualquier causa.
Extracción de ADN y modificación
Tres secciones 7-micras fueron preparadas a partir de bloques tumorales primarias que contenían las células tumorales al menos 80%. Después de la tinción con hematoxilina-eosina, las partes cancerosas se microdissected y se transfirieron a un tubo de microcentrífuga. Se aisló el ADN de forma rutinaria y luego se modificó químicamente por bisulfito de sodio para convertir todas las citosinas no metiladas a uracilos, dejando inalterada methylcytosines [18]. A continuación, se almacenaron a -20 ° C para su posterior análisis.
La metilación específica de Reacción en Cadena de Polimerasa (MSP)
MSP se realizó para determinar el estado de metilación de
SULF2
utilizando el sistema de ABI Prism 7300HT de detección de secuencias (Applied Biosystems). Cada reacción de PCR contenía ADN genómico 2 l, SYBR Green PCR Mix (Takara, Japón) 10 l, agua 7,7 l, y los cebadores de 0,15 l (10 mmol /l). Las condiciones de PCR fueron 95 ° C durante 10 min, seguido de 45 ciclos a 59 ° C durante 30 s, 72 ° C durante 30 s y 95 ° C durante 30 s. Cebadores para
SULF2
metilado PCR (Takara, Japón) fueron los siguientes: delantero 5 'TAAGTGTTTTTTTTATAGCGGC 3', inversa 5'TACCGTAATTTCCGCTATC 3 '. Cebadores para
SULF2
no metilado PCR (Takara, Japón) fueron los siguientes: delantero 5 'GTTTATAAGTGTTTTTTTATAGTGGT3', revertir 5'TACCATAATTTCCACTATCCCT 3 '. Cada lote de reacción incluyó un control positivo de metiltransferasa (M.SssI) tratados con ADN humano genómico (totalmente metilado), un control negativo a partir de muestras de ADN que había sido confirmados como no metilado y otro control negativo sin ADN. Todas las pruebas se realizaron por duplicado. Los resultados fueron validados para muestras seleccionadas a través de modificación con bisulfito combinado y secuenciación de bisulfito.
Análisis estadístico
Los valores se expresan como media ± desviación estándar. Las diferencias en las tasas de inhibición entre los grupos se evaluaron utilizando la prueba t. Las posibles asociaciones de metilación SULF2 con características clínicas y
in vitro
eficacia en la quimiosensibilidad se analizaron mediante la prueba de probabilidad exacta de Fisher. Todas las pruebas estadísticas fueron de dos caras, y un valor de p inferior a 0,05 se consideró como significación estadística. El análisis estadístico se realizó mediante el programa SPSS, versión 16.0.
Resultados
Características de los pacientes
Las características de los pacientes se muestran en la Tabla 1. La mayoría de los pacientes eran de sexo masculino (73%), y la histología predominante fue el adenocarcinoma (79%). En 35 (35%) pacientes, el tumor se encuentra en el estómago distal, en 38 (38%) en el estómago proximal, y en 27 (27%) en todo el estómago. Sesenta y tres (63%) pacientes tenían enfermedad en estadio III o IV. Metástasis en los ganglios linfáticos estaban presentes en 75 (75%) pacientes. Metilado
SULF2 gratis (
SULF2M
) se detectó en 28 pacientes, mientras que los 72 pacientes restantes mostraron
SULF2 gratis (
SULF2U
, tasa de metilación no metilado: 28 %). Las curvas de amplificación de RT-PCR de
SULF2M
y
SULF2U
se muestra en la Figura S1. No hubo asociación entre el
SULF2
metilación y cualquiera de las características de los pacientes, incluyendo el sexo, la histología, localización tumoral, estadio, grado histológico y la metástasis de los ganglios linfáticos.
eficacia in vitro
Tasa de fármacos probados
in vitro
sensibilidad a cisplatino, docetaxel, gemcitabina, irinotecán y pemetrexed fue probado con éxito en todas las muestras. Las tasas de inhibición de medias para cada fármaco ensayado se enumeran en la Tabla 2. Las muestras con
SULF2U
eran más sensibles a cisplatino que aquellos con
SULF2M gratis (48,80% frente a 38,15%,
P
= 0,02), mientras que las muestras con
SULF2M
eran más sensibles a irinotecán que
SULF2U gratis (53,61% frente a 40,92%,
P
= 0,01, Tabla 2 y la Figura 1). No hubo asociación entre el
SULF2
metilación y
in vitro
sensibilidad a docetaxel, gemcitabina o pemetrexed (Tabla 2). Como se muestra en la Tabla 3, no hubo asociación entre las tasas de inhibición observados para los agentes contra el cáncer y cualquiera de las características clínicas.
La mediana es la línea central de cada caja.
a fin de investigar la posible relación entre los
SULF2
metilación y cisplatino o irinotecán sensibilidad, el
in vitro se examinó
tasa de eficacia en cada concentración de fármaco de la creación de diferentes tasas de inhibición de corte (Tabla 4). Se adoptaron cuatro puntos de corte diferentes: 30%, 40%, 50% y 60%. En el corte de tasa de inhibición del 30%,
SULF2
metilación se encontró que tenía una asociación significativa con la eficacia del cisplatino (
SULF2M
: 57,14%,
SULF2U
: 80.56 %,
P
= 0,02) y la eficacia de irinotecan (
SULF2M
: 89.29%,
SULF2U
: 62,50%,
P
= 0,01, Figura 2 y en la Tabla 4). En el punto de corte de 40%, 50% y la tasa de inhibición del 60%, hubo una tendencia a que el
SULF2M
muestras mostraron una mayor eficacia de irinotecan, pero menor eficacia del cisplatino que el
SULF2U
muestras (Tabla 4).
Asociación de
SULF2
la metilación con la respuesta clínica a la quimioterapia
Entre los 56 pacientes que recibieron el régimen FOLFOX modificado, la mediana el tiempo de supervivencia fue de 434 días (rango: 111-641 días). Se observó una asociación significativa entre la supervivencia y la localización del tumor (
P
= 0,01). Ninguna otra asociación entre las características clínicas y la supervivencia se encontró (Tabla 5 y Figura 3).
SULF2M
se detectó en 19 pacientes, mientras que
SULF2U
se encontró en 37 pacientes (
SULF2
tasa de metilación: 34%). Se observó una asociación significativa entre la supervivencia y
SULF2
estado de metilación. La mediana de supervivencia global fue de 309 días (IC del 95% = 236 a 382 días) para los pacientes con
SULF2M
y 481 días (IC del 95% = 418 a 490 días) para aquellos con
SULF2U
(
P = 0,02
, Figura 3). Utilizando tanto el análisis de riesgos proporcionales de Cox univariante y multivariante que tuvo en cuenta la edad, sexo, localización tumoral, estadio, grado histológico, la metástasis de los ganglios linfáticos y
SULF2
metilación como covariables, sitio del tumor y
SULF2
metilación se mantuvo marcadores significativos de la supervivencia global en pacientes con cáncer gástrico tratados con quimioterapia basada en platino (Tabla 6).
Discusión
Aunque estudios previos han demostrado la participación de SULF2 en la patogénesis del cáncer, su valor para la predicción de la quimiosensibilidad sigue sin estar clara. Este estudio se centra en el promotor de la isla CpG metilación de
SULF2
como un biomarcador potencial en el cáncer gástrico. Los principales resultados del presente estudio demuestran que: (i) la tasa de
SULF2M
en el cáncer gástrico humano es de alrededor de 30%; (Ii) la primera evidencia de la
SULF2U
se asocia con sensibilidad a cisplatino en el cáncer; (Iii) evidencia de la
SULF2M
está asociada con la sensibilidad irinotecan en el cáncer gástrico; (Iv) un estudio retrospectivo y validación de
SULF2
metilación en una cohorte de 56 pacientes con cáncer gástrico, lo que nos permitió descubrir que
SULF2U
es un biomarcador pronóstico independiente en pacientes con cáncer gástrico tratados con un régimen FOLFOX modificado.
En estudios previos de cáncer gástrico, las conclusiones sobre el estado de metilación y de expresión de los niveles de
SULFs
no fueron concluyentes. En un estudio, sólo 13 mamarios y gástricos cáncer en estadio temprano, la mayoría de las cuales estaban en estadio I, fueron analizados por semi-cuantitativos RT-PCR para
SULF1
expresión [24]. Se demostró que la baja expresión de
SULF1
era frecuente en estos dos tipos de cáncer. En otro estudio, la expresión de ambos
SULF1
y
SULF2
ARNm se determinó por tiempo real de RT-PCR para una gran cohorte de tejidos de cáncer gástrico, hallazgo que
SULFs
se expresaron a niveles más altos en el cáncer gástrico en comparación con los tejidos normales. En el presente estudio hemos encontrado mediante el examen de la
SULF2
metilación en 100 muestras de cáncer gástrico, que la tasa de
SULF2M
fue de aproximadamente 30%, lo que indica que predominan cáncer gástrico fueron
SULF2U
. Estudios recientes realizados por el análisis genómico integradas revelaron que
SULF2
actúa como un efector aguas abajo de p53, y que la activación de p53 podría conducir a la
SULF2U
y sobre regulación de
SULF2
. La posible relación entre p53 y SULF2 en la vía de señalización del factor de crecimiento sugiere un posible papel de SULF2 en el desarrollo del cáncer y los resultados los pacientes con cáncer [25]. La relación entre el
SULF2
no metilación y
tiene que ser probado aún en estas muestras SULF2
regulación. Los diferentes niveles de expresión y la metilación del estado de
SULF2
entre el tumor y el tejido normal también tienen que ser verificada aún más.
Los estudios sobre
SULF2
metilación como predictor quimiosensibilidad son escasos. La metilación del
SULF2
promotor se ha asociado con una mejor supervivencia de los pacientes con adenocarcinoma de pulmón resecado, y también con una mejora marginal en la supervivencia de los pacientes con CPNM avanzado que reciben quimioterapia estándar (razón de riesgo = 0,63,
P
= 0.07) [18]. Estudios posteriores demostraron que las líneas celulares de cáncer con
SULF2M
eran 134 veces más sensibles a inhibidor de topoisomerasa I que aquellos con
SULF2U
. En el presente estudio, hemos demostrado que los tumores gástricos con
SULF2M ¿Cuáles son más sensibles a irinotecán que aquellos con
SULF2U
. Además, hemos demostrado por primera vez que
SULF2
metilación es también un biomarcador predictivo potencial de la eficacia del cisplatino. Los tumores gástricos con
SULF2U
eran más sensibles a cisplatino que aquellos con
SULF2M
, y cáncer gástrico pacientes con
SULF2U
mostraron menor mortalidad cuando se reciben quimioterapia basada en platino. Aunque varios biomarcadores predictivos se han identificado para el cisplatino, como ERCC1 [7], BRCA1 [4], [26], [27] y XRCC1 [28] - [30], teniendo en cuenta las tasas de respuesta relativamente bajos de platino utilizado comúnmente , se necesita con urgencia protocolo de tratamiento neoadyuvante /basada en 5-FU para los pacientes con carcinoma gástrico avanzado la identificación de biomarcadores para predecir la respuesta. El descubrimiento de un biomarcador predictivo novedoso que puede ser examinada por el análisis de metilación es intrigante y suplementario. La razón por la
SULF2
no metilación aumenta la sensibilidad del tumor a cisplatino puede residir en la conjugación de ubiquitina enzimas (UBE). Se ha informado de que
SULF2
metilación resultados en el aumento de expresión de UBE [18]. UBE añadió ubiquitina a ciertos residuos de lisina y participó en la reparación del ADN, la mutagénesis y la proliferación celular. La sobreexpresión de ciertas UBE, como RAD6B, podría resultar en una resistencia significativa al cisplatino [31]. Nuevos estudios deben llevarse a cabo para investigar el mecanismo molecular de
SULF2M
inducida por la resistencia a cisplatino.
Un efecto sinérgico significativo de cisplatino y ADN metiltransferasa (DNMT) inhibidores de la 5-aza-DC (DAC) sobre la viabilidad celular se observó en la línea celular AGS resistentes al cisplatino, pero no en la línea de células MKN28 cisplatino sensibles [32]. Los datos de análisis de la capacidad de formación de colonias mostraron que desmontables de DNMT1 provocó un aumento en la sensibilidad a cisplatino [32]. El mecanismo molecular sigue siendo poco clara. Sin embargo, la relación entre el
SULF2
metilación y cisplatino sensibilidad puede explicar en parte este fenómeno. El tratamiento del cáncer gástrico con inhibidores de DNMT podría resultar en la desmetilación de
SULF2
y en consecuencia aumentar la sensibilidad al cisplatino. Por lo tanto, además de los efectos de predicción, nuestros datos también apoya la inclusión de un inhibidor de DNMT en los protocolos de tratamiento actuales para al menos un subgrupo de pacientes con cáncer gástrico.
En conclusión, nuestro estudio proporciona nuevas evidencias de que
SULF2
metilación se asocia negativamente con la sensibilidad a cisplatino
in vitro
.
SULF2
metilación es un biomarcador pronóstico potencial para los pacientes con cáncer gástrico tratados con quimioterapia basada en platino.
Apoyo a la Información
Figura S1. Empresas El RT-PCR curvas de amplificación de SULF2M y SULF2U. La curva roja representa la amplificación de SULF2M, y la curva azul representa la amplificación de SULF2U. Figura S1a muestra las curvas de amplificación de muestra con SULF2M; Figura S1b muestra las curvas de amplificación de la muestra con SULF2U
doi:. 10.1371 /journal.pone.0075564.s001 gratis (TIF)