Extracto
La nucleolina está implicado a desempeñar un papel en la angiogénesis, un proceso vital en el tumor el crecimiento y la metástasis. Sin embargo, sigue siendo en gran parte desconocida la presencia y relevancia clínica de nucleolina en cáncer de pulmón de células no humanas (NSCLC). En este estudio, hemos explorado la expresión y la implicación pronóstica de nucleolina en pacientes con CPNM resecado quirúrgicamente. Una cohorte de 146 pacientes con CPNM que fueron sometidos a resección quirúrgica fue seleccionado para microarrays de tejidos. En este microarrays de tejidos, la expresión de nucleolina se midió por inmunofluorescencia. La tinción para CD31, un marcador de las células endoteliales, se llevó a cabo para marcar los vasos sanguíneos. Un modelo de riesgos proporcionales de Cox se utilizó para evaluar la importancia pronóstica de la nucleolina. Se observó la expresión de nucleolina en el 34,2% de todos los pacientes, y el 64,1% en los pacientes de alto expresión de CD31. La supervivencia libre de enfermedad (DFS) fue significativamente menor en los pacientes con alta nucleolina (CD31
hiNCL
hi) en comparación con los pacientes con vasos sanguíneos bajo tumorales (CD31
loNCL
Lo) (5 ys de DFS 24% vs 64%,
p
= 0,002). Tal diferencia se demostró en los siguientes análisis estratificados: la etapa I (
p Hotel & lt; 0,001), el carcinoma de células escamosas y carcinoma de células adenoescamosa (
p = 0,028
), tumor pequeño (& lt; 5 cm,
p
= 0,008), y la cirugía sola (
p = 0,015
). El análisis multivariado reveló además que la expresión de nucleolina predijo de forma independiente para peor supervivencia (
p
= 0,003). Este estudio demuestra que la nucleolina se asocia con los resultados clínicos en pacientes con CPNM postoperatorias. Por lo tanto, los niveles de expresión de nucleolina pueden proporcionar un nuevo marcador pronóstico para identificar a los pacientes en mayor riesgo de fracaso del tratamiento, especialmente en algunos subgrupos
Visto:. Zhao H, Huang Y, Xue C, Chen Y, X Hou , Guo Y, et al. (2013) Significado pronóstico de la puntuación combinada de expresión endotelial de nucleolina y CD31 en resecado quirúrgicamente de células no pequeñas cáncer de pulmón. PLoS ONE 8 (1): e54674. doi: 10.1371 /journal.pone.0054674
Editor: R. Mitsunobu Kano, Universidad de Okayama, Japón
Recibido: 16 Julio, 2012; Aceptado: 17 de diciembre de 2012; Publicado: 31 Enero 2013
Derechos de Autor © 2013 Zhao et al. Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos de la licencia Creative Commons Attribution License, que permite el uso ilimitado, distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que el autor original y la fuente se acreditan
Financiación:. Los autores no tienen el apoyo o la financiación para reportar
Conflicto de intereses:. los autores han declarado que no existen intereses en competencia
Introducción
cáncer
pulmón es la principal causa de muerte por cáncer en. los hombres y las mujeres [1]. Cáncer de pulmón no microcítico (CPNM) representa aproximadamente el 85% de todos los cánceres de pulmón, y que por lo general se asocia con resultados pobres. La tasa de recurrencia del NSCLC es considerablemente más alta en pacientes con resección completa del tumor primario, que representa la mayor mortalidad relacionada con el cáncer en todo el mundo. Para la fase I /II NSCLC, la tasa de recaída es de alrededor de 35-67% y los intervalos de porcentajes de supervivencia a 5 años de 33-63% [2], [3]. De hecho, la mayoría de los fracasos del tratamiento son en gran parte debido a las recurrencias a distancia.
La angiogénesis es un proceso crítico durante el desarrollo tumoral y la metástasis [4], [5]. Se ha demostrado que la neoangiogénesis es un factor pronóstico significativo tanto para la supervivencia global y la supervivencia libre de enfermedad en el cáncer de pulmón [6] - [12]. Numerosos estudios han medido la densidad de microvasos tumor (MVD) por tinción con CD31. Sin embargo, la asociación entre MVD y la supervivencia en pacientes con cáncer de pulmón sigue sin resolverse [13].
La nucleolina es una proteína ubicua no histonas que se aisló inicialmente del nucleolo [14]. Como una proteína multifuncional, nucleolina desempeña papeles fundamentales en muchos procesos importantes, incluyendo la proliferación celular, el montaje ribosoma, rDNA transcripción, el embalaje de pre-ARN, y la organización de la cromatina nucleolar [15], [16]. Sin embargo, la evidencia acumulada indica que lanzadera puede nucleolina al citoplasma y la membrana de la nucleolo [17] - [20]. Aunque la nucleolina se localiza predominantemente en el nucleolo, también se ha encontrado en la superficie celular de diversos tipos de células en una forma fosforilada [21]. Recientemente, se observó la expresión de nucleolina en la superficie de las células endoteliales en los vasos sanguíneos del tumor nacientes [22], [23]. En ausencia de la nucleolina de la superficie celular, las células endoteliales pierden parcialmente su motilidad y no lograron formar estructuras tubulares [24]. Además, como un receptor funcional novedoso para endostain, la nucleolina es responsable de las potentes actividades antiangiogénicas y antitumorales de endostain [25], [26]. Estudios previos han encontrado expresión de nucleolina localizada en la mayoría de los vasos sanguíneos de los tumores de xenoinjertos, lo que sugiere la posible participación de nucleolina en la angiogénesis tumoral [23], [26]. Sin embargo, hasta el momento, en la actualidad hay pocos informes que estudian los efectos de la nucleolina en NSCLC humano.
A partir de los estudios previos de los biomarcadores de pronóstico en pacientes con NSCLC [27], [28] y la participación de nucleolina en angiogénesis tumoral, la hipótesis de que la nucleolina puede servir como un marcador importante para la neoangiogénesis tumoral y se asocia con un mal pronóstico a principios de CPCNP después de la cirugía radical. En este estudio, hemos examinado la relación entre la expresión de nucleolina y las variables clinicopathogical en 146 pacientes con CPNM operables.
Materiales y Métodos
Los pacientes
Un total de 146 pacientes con CPNM tratados consecutivos con cirugía radical entre agosto de 2000 noviembre de 2004 a el Centro de cáncer de la Universidad Sun Yat-Sen se inscribieron en este estudio. El estudio fue aprobado por el Comité de Ética Médica de la Universidad Sun Yat-Sen. Se excluyeron los pacientes con antecedentes de enfermedades malignas. muestras de tejidos tumorales y los datos de seguimiento estaban disponibles para todos los casos incluidos. Demografía de los pacientes se enumeran en la Tabla 1. El grado de diferenciación del tumor se determinó de acuerdo con los criterios de la Organización Mundial de la Salud. El estado patológico del tumor-nódulo-metástasis (TNM) se evaluó mediante la clasificación TNM de la Unión Internacional contra el Cáncer (UICC, 2002). la supervivencia libre de enfermedad se define como el período comprendido entre la fecha de la cirugía a la fecha de progresión de la enfermedad o la muerte. Si no se observó progresión de la enfermedad o la muerte al final del seguimiento, la supervivencia libre de enfermedad se define a partir de la fecha de la cirugía para el último momento de la evaluación del tumor. La supervivencia global se define como el período comprendido entre la fecha de la cirugía a la fecha de la muerte o el último seguimiento. tiempo de la metástasis ósea se define a partir de la fecha de la cirugía a la fecha de la metástasis ósea. Si hay metástasis ósea se observó en el último seguimiento, tiempo de metástasis ósea se calculó como el intervalo desde la fecha de la cirugía para el último momento de la evaluación del tumor. La fecha de inicio de la quimioterapia neoadyuvante fue ignorada. La fecha final del estudio de seguimiento fue de 3 de marzo de 2010. La mediana de seguimiento fue de 70,8 meses. (Rango: 10.4-114 meses)
Construcción de microarrays de tejidos (TMA)
El TMA se construyó de acuerdo con un método descrito anteriormente [29]. En pocas palabras, el bloque individual tejido de donante y la correspondiente hematoxilina y eosina (H & amp; E) teñidas portaobjetos se superponen para el muestreo TMA tejido. Se tomaron muestras de tejido usando un instrumento de poner en orden los tejidos (Beecher Instruments, Silver Spring, MD, EE.UU.). Un núcleo de diámetro 0,6 mm de los tejidos fue removido y re-incrustado en una posición predeterminada en un bloque de parafina receptor. Tres muestras de núcleo fueron seleccionados de cada tumor primario. Varias secciones (5 m de espesor) se cortaron a partir del bloque TMA y se montaron en portaobjetos recubiertos de adhesivo de la cinta utilizando el Sistema de Transferencia de parafina (Instrumedics, Hackensack, NJ, EE.UU.).
La inmunohistoquímica
De acuerdo con los métodos descritos anteriormente [23], [26], los cortes desparafinados se incubaron a 4 ° C durante la noche con el ratón anti-humano CD31 mAb (Santa Cruz biotecnologías, Santa Cruz, CA, EE.UU.) y de conejo anti-humana nucleolina pab (Protgen , Beijing, China). Después de enjuagar con TBS-T (0,1% de Tween 20 en TBS), las muestras se incubaron con anticuerpos secundarios de cabra anti-ratón conjugado con FITC y TRITC conjugado de cabra anti-conejo (Jackson Immuno-Research Laboratories, West Grove, PA, EE.UU.) durante 1 hora a temperatura ambiente. Los núcleos se tiñeron con DAPI. imágenes de fluorescencia confocal fueron capturadas a partir de al menos 4 campos al azar por sección en 100 × magnificación utilizando un escaneo láser confocal Nikon sistema de imágenes A1 (Nikon, Japón). Las imágenes fueron obtenidas y evaluadas con múltiples tubos fotomultiplicadores regulados por el software Nikon NIS-Elements. Todas las diapositivas fueron revisados por dos patólogos independientes que fueron cegados a la información clínica y patológica.
Análisis estadístico
software SPSS16.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, EE.UU.) se utilizó para los datos el análisis.
supervivencia libre de enfermedad y la supervivencia global se calcula utilizando el método de Kaplan-Meier y se analizaron mediante la prueba de log-rank. La asociación de la expresión de nucleolina con características clínicas y patológicas se evaluó mediante la prueba de Chi-cuadrado. Estadísticamente se analizaron variables significativas usando un modelo de riesgos proporcionales de Cox univariante. análisis de supervivencia multivariante se realizó en todos los parámetros para la prueba de los valores pronósticos independientes. Los resultados se consideraron significativas a P & lt;. 0.05
Resultados
Descripción de cohortes y predictores clínicos
Las características clínicas y patológicas de cada paciente se enumeran en la Tabla 1. La media del tumor tamaño era de 4,25 cm (rango, 1-12 cm). Sesenta de 146 pacientes (41%) que se sometieron a cirugía también recibieron quimioterapia o radioterapia. La progresión tumoral se observó en 71 pacientes (49%), con recurrencia a distancia en 62 pacientes y la recurrencia local en 9 pacientes. Cincuenta y tres pacientes (36%) murieron durante el período de seguimiento. La tasa de supervivencia libre de enfermedad que se estima 5 años fue del 47% (IC del 95%, 40,7% -59,3%), y la tasa de supervivencia global a los 5 años fue del 69% (IC del 95%, 63,2% -78,7%) de los 146 pacientes. Como era de esperar, el análisis univariado reveló una asociación significativa de diferenciación del cáncer, el tamaño del tumor, el estadio N, y el estadio patológico tanto con la supervivencia libre de enfermedad y la supervivencia global. Sin embargo, la modalidad de tratamiento sólo se asoció con la supervivencia libre de enfermedad pero no la supervivencia global (Tabla 1).
La nucleolina Expresión en CPNM
La nucleolina se detectó en 50 pacientes de la cohorte total de pacientes (34,2%). Un análisis más detallado de los factores patológicos reveló que la expresión de nucleolina se asoció significativamente con tumores grandes (≥5 cm) (grandes versus pequeños: 44,4% frente a 28,3%,
P = 0,047
). No hubo relaciones significativas entre la nucleolina y otros factores, como la edad, el sexo, subtipo histológico, la diferenciación y el cáncer en estadios patológicos.
En particular, la expresión de alto CD31 se observó en el 53,2% de toda la cohorte (n = 78 ). Nucleolina se colocalized con el marcador CD31 pan-endotelial en los 50 pacientes con expresión de nucleolina (64,1%). Sin embargo, la nucleolina estuvo ausente en los otros 28 pacientes con expresión de CD31. Estos hallazgos sugieren un posible papel de la nucleolina en el desarrollo de la angiogénesis tumoral. Los pacientes se dividieron en tres grupos en función de la situación de la nucleolina y la expresión de CD31 (Figura 1). Esto incluyó alta ocurrencia de los vasos sanguíneos del tumor con expresión de nucleolina (CD31
hiNCL
hi), un número medio de vasos sanguíneos de más de 10 /campo, y la morfología típica de los vasos sanguíneos debe ser aparente. Además, el nivel de expresión de NCL en esos vasos sanguíneos del tumor es significativamente mayor (al menos 2 veces mayor intensidad de fluorescencia media, medida por Nikon NIS-elementos de software) que el nivel basal NCL dentro de toda la región del tumor. También se observó aumento de la co-localización entre las estructuras tubulares positiva CD31 y áreas NCL positivos. Los pacientes también se dividen a su vez por la alta incidencia de los vasos sanguíneos del tumor y sin expresión de nucleolina (CD31
hiNCL
LO). Estos criterios incluyen una densidad de vasos sanguíneos alta similar a los de la CD31
hiNCL
grupo hi, nivel de expresión de NCL en los vasos sanguíneos del tumor no fue significativamente mayor (& lt; 2 veces, la intensidad de fluorescencia media) que el basal NCL nivel dentro de todo el tejido tumoral. Por otra parte, no se observaron diferencias significativas entre la co-localización de estructuras tubulares positivos CD31 y áreas NCL positivos.
El tumor vasos sanguíneos y la nucleolina se tiñeron con anti-CD31 (verde) y anti-nucleolina (rojo) , respectivamente. Los núcleos se tiñeron con DAPI (azul). Imágenes representativas de los tres grupos se muestran aquí. (A) CD31
hiNCL
hola, (B) CD31
hiNCL
lo, (C) CD31
loNCL
lo. Barra de escala, 50 micras.
En cuanto a los vasos sanguíneos tumorales baja (CD31
loNCL
LO), el número medio de los vasos sanguíneos con estructura tubular típica debe ser inferior a 10 /campo. Estos vasos sanguíneos del tumor ni deben expresar nucleolina alta ni co-localizar con vasos CD31 positivas. Apenas se observaron sección de baja expresión de los vasos sanguíneos de densidad alta nucleolina entre las secciones de NSCLC.
Análisis de supervivencia univariante
Se utilizó el análisis univariado para determinar el impacto de la expresión de nucleolina en la supervivencia de los pacientes con CPNM con tumores resecables. Los datos de supervivencia se presenta en la Tabla 2. La nucleolina expresión se asoció significativamente con una menor supervivencia libre de enfermedad (
P = 0,002
, figura 2), pero no afectó la supervivencia global (
P = 0,841
). El análisis estratificado reveló una asociación significativa de la expresión de nucleolina con la supervivencia libre de enfermedad en pacientes con carcinoma de células escamosas o adenoescamosa (
P = 0,028
, figura 3), pero no en pacientes con adenocarcinoma (
P =
0,061). expresión de nucleolina también se asoció con la supervivencia libre de enfermedad cuando se estratificó por otras características del tumor, como la baja diferenciación cáncer (
P = 0,038
, figura 3), la diferenciación del cáncer de alta /media (
P =
0,01), el tratamiento quirúrgico solo (
P = 0,015
), y el menor tamaño del tumor (
P = 0,008
, figura 3). Más importante aún, la nucleolina tuvo un impacto significativo en la supervivencia libre de enfermedad en pacientes en estadio I (
P Hotel & lt; 0,0001, Figura 3), pero no en pacientes con enfermedad en estadio II a III A (
P =
0,374). Sin embargo, no hubo diferencias significativas en la supervivencia general entre los tres grupos de nucleolina en relación con las variables clínicas y patológicas del tumor
HH:. CD31
hiNCL
hola, HL: CD31
hiNCL
lo, y LL: CD31
loNCL
lo
HH:. CD31hiNCLhi, HL: CD31hiNCLlo, y LL:. CD31loNCLlo
peligros Uniltivariate análisis de la relación se utilizó para evaluar la asociación significativa entre la nucleolina y la supervivencia libre de enfermedad. En general, los pacientes con expresión de nucleolina (CD31
hiNCL
hi) tenían un mayor riesgo de recurrencia en comparación con pacientes con vasos baja tumorales (CD31
loNCL
LO) CI (HR = 2,768, 95% 1.544 ~4.964,
P
= 0,001). En comparación con el CD31
hiNCL
grupo hi, el CD31
hiNCL
grupo lo tenía un menor riesgo de recurrencia (HR = 0,568, IC del 95% 0.325~0.991,
P
= 0,046). Un análisis posterior mostró que el CD31
hiNCL
hi grupo también tenía un alto riesgo de recurrencia en los siguientes subgrupos: el carcinoma de células escamosas y carcinoma de células adenoescamosa (HR = 3,907; IC del 95% 1.285~7.462,
P =
0,012), baja y media alta diferenciación /(HR = 2,363; IC del 95% 1.129~4.949,
P = 0,023
y HR = 4,201, IC del 95% 1.568~11.253,
P =
0,004, respectivamente), tumor pequeño (& lt; 5 cm) (HR = 3,382; IC del 95% 1.505~7.603,
P
= 0,003), la etapa I (HR = CI 11.371, el 95% 3.003~43.059,
P Hotel & lt; 0,001), y la cirugía sola (IC HR = 3,012, 95% 1.345~6.747,
P = 0,007
). En estos análisis de subgrupos, en comparación con el CD31
loNCL
grupo he aquí que el CD31
hiNCL
grupo Mín no se asoció con un mayor riesgo de recurrencia excepto en pacientes con mediana o alta diferenciación del cáncer (HR = 2,826, IC del 95% 1.081~7.386,
P = 0,034
). Por lo tanto, la nucleolina puede convertirse en un valioso marcador para identificar el riesgo de recurrencia en pacientes con NSCLC etapa temprana.
multivariantes cociente de riesgos Análisis
Un análisis de supervivencia multivariante mediante un modelo de riesgos proporcionales de Cox para la selección de los factores pronósticos de la supervivencia libre de enfermedad, incluyendo los parámetros clínico-patológicos mencionados anteriormente y los resultados de inmunofluorescencia costaining de la densidad de los vasos sanguíneos y el nivel de expresión de nucleolina, indicaron que tanto la expresión de nucleolina en los vasos del tumor y el estadio clínico III son factores independientes de mal pronóstico para la enfermedad libre la supervivencia (
P = 0,003
y
P Hotel & lt; 0,0001, respectivamente, Tabla 3). Sin embargo, la etapa avanzada, pero no la expresión de nucleolina fue un factor pronóstico independiente de la supervivencia global (
P Hotel & lt; 0,001 para la fase II /III).
La metástasis ósea es una complicación común de NSCLC. Las tasas de supervivencia a los 5 años de los pacientes 'con metástasis ósea, y CD31
hiNCL
hola, CD31
hiNCL
lo, CD3l
Lonc
lo are72%, 81%, y 82%, respectivamente. Sin embargo, ni CD31
hiNCL
hola ni CD31
hiNCL
grupos de Lo muestran un mayor riesgo de metástasis ósea en comparación con CD31
loNCL
lo (
P =
0,556 y
P = 0,338
, respectivamente). Alto riesgo de metástasis en los huesos sólo se observó en los pacientes con CPCNP en estadio avanzado (
P = 0,014
) (datos no mostrados).
Discusión
En este estudio, se encontró se detectó que la expresión de nucleolina en el 34,2% de los pacientes con CPNM con tumores resecados. Esto podría estar asociado con la co-localización de la nucleolina y CD31, lo cual es consistente con observaciones anteriores de la nucleolina sobre las células endoteliales tumorales [23]. La nucleolina también se expresa condicionalmente en la superficie de las células endoteliales sólo durante la angiogénesis del tumor [23]. Una posibilidad de la heterogeneidad de la expresión de nucleolina en la superficie celular es la variación local de la proliferación de células endoteliales en las lesiones angiogénicos in vivo [24]. Por otra parte, el factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF), matriz extracelular, y de la proteína intracelular motor son esenciales para la expresión de nucleolina en la superficie de las células endoteliales durante la angiogénesis [24]. Estos estudios podrían explicar por qué nucleolina no es fácilmente detectable en los tejidos tumorales que carecen de expresión de CD31 en nuestro estudio. Sin embargo, los estudios sobre la relación de MVD y la expresión de nucleolina son pocos, especialmente en el cáncer de pulmón no microcítico. El tamaño de la muestra no era lo suficientemente grande como para detectar pacientes con bajo y alto CD31 nucleolina, y se necesita un tamaño de muestra más grande para confirmar esta relación. Se necesitan más investigaciones con marcadores de los vasos sanguíneos más sensibles. Asimismo, se observó que un subgrupo de pacientes con CPNM expresa CD31 en ausencia de nucleolina. Para determinar si CD31 por sí solo podría servir como un marcador pronóstico en CPNM, se dividió a los pacientes en tres grupos: CD31
hiNCL
hola, CD31
hiNCL
Lo y CD31
loNCL
he aquí
.
Hemos encontrado que la expresión de nucleolina solamente se asoció con tumores grandes (≥ 5 cm), pero no con otros factores patológicos tales como el género, la edad o el grado histológico. Una explicación podría ser que los tumores más grandes tienen suficiente oxígeno y nutrición suministrada por la angiogénesis tumoral. En particular, la nucleolina se ha demostrado que se correlaciona positivamente con la tasa de crecimiento del tumor [24]. En varios estudios recientes, los antagonistas específicos de nucleolina exhiben actividad antitumoral mediante la inhibición de la angiogénesis del tumor [23], [26], [30], [31].
Este es el primer estudio para investigar el valor pronóstico de la expresión de nucleolina en pacientes con CPNM. En el análisis de regresión de Cox, la expresión de nucleolina se evaluó como un factor independiente de supervivencia libre de enfermedad en pacientes con CPNM (HR = 2,414), lo que sugiere que la nucleolina podría desempeñar un papel importante en el proceso de recaída del tumor de NSCLC. La angiogénesis es un evento esencial para la invasión tumoral y la metástasis. Después de la extirpación del tumor, el medio ambiente pro-angiogénicos fue capaz de desencadenar tumores latentes a crecer rápidamente [32] - [34]. Esto es probablemente debido a un aumento de la expresión del factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF) o disminución de la expresión de la cirugía de la endostatina y angiostatina poste, lo que puede alterar el interruptor de pro-angiogénico [34], [35]. La angiogénesis mejorada, junto con la entrada de más células tumorales en circulación de este modo facilita la metástasis del tumor [6], [36], [37]. Ha sido bien documentado que la aparición de la neoangiogénesis es un indicador importante de mal pronóstico tanto para la supervivencia libre de enfermedad y la supervivencia global en el cáncer de pulmón [6], [7], [9], [11], [38], [ ,,,0],39]. En nuestro estudio, la razón principal para la recaída es la metástasis a distancia (87,3%) que está estrechamente relacionado con la angiogénesis. Por otra parte, pero no hemos podido encontrar que la nucleolina es un factor pronóstico de supervivencia global. Una posible explicación es que los pacientes recibirían diferentes estrategias de tratamiento (como endostain, bevacizumab) después de la progresión de la enfermedad, lo que podría afectar el pronóstico de supervivencia.
En los análisis aún más la supervivencia, se encontró que la expresión de nucleolina se asoció significativamente con una disminución supervivencia libre de enfermedad y un alto riesgo de recurrencia, sobre todo en los subgrupos con estadio I, el tumor más pequeño (& lt; 5 cm) y la cirugía sola. Clínicamente, una pequeña fracción de neoplasia son bastante agresivos, incluso en las primeras etapas, que podría ser fatal [40]. En algunos casos, la eliminación del tumor primario podría acelerar la recurrencia del tumor local o sistémicamente [34], [41], [42]. Por lo tanto, la nucleolina puede servir como marcador útil para identificar a los pacientes con un mal resultado y para guiar el tratamiento postoperatorio en la etapa inicial de NSCLC.
La metástasis ósea es una complicación frecuente de cáncer de pulmón. Las observaciones experimentales sugieren que las células tumorales metastásicas óseas tienen la capacidad de inducir la proliferación de células endoteliales, la migración, así como la diferenciación [43]. Sin embargo, en este estudio, pero no hemos podido identificar una asociación de la expresión de nucleolina con un alto riesgo de metástasis en los huesos. Una cohorte más grande puede ser útil para confirmar aún más la relación de la expresión de nucleolina y la metástasis ósea en el CPNM.
En conclusión, se evalúa por primera vez la expresión de nucleolina en CPNM. Nuestros resultados proporcionan pruebas de que la nucleolina se localiza con CD31 en tejido tumoral de NSCLC, lo que sugiere la nucleolina se encuentra también en la superficie de las células endoteliales del tumor. También demuestran que la expresión de nucleolina podría ser el uso como factor pronóstico negativo de la supervivencia libre de enfermedad para pacientes con CPNM tratados con cirugía radical. El indicador de pronóstico de nucleolina también podría ser utilizado especialmente en pacientes con SCC + ADSCC, la etapa I, tumor pequeño, y la cirugía sola, lo que indica que la administración de fármacos anti-NL perioperatorias, tales como endostatina, podría ser útil.