Extracto
La adrenomedulina (AM) es un péptido de 52 amino ácidos inicialmente aislado de feocromocitoma humano. AM se expresa en una variedad de tejidos malignos y líneas celulares de cáncer y se demostró que era un factor mitógeno capaz de estimular el crecimiento de varios tipos de células cancerosas. Además, AM es un factor de supervivencia para ciertas células cancerosas. Algunos datos sugieren que la AM pudieran estar implicados en la progresión de la metástasis del cáncer a través de la angiogénesis y la migración celular y la invasión de control. El TRPV2 canal de potencial transitorio del receptor es conocido por promover en la migración de células de cáncer de próstata y el fenotipo invasivo y se correlaciona con el estadio y el grado del cáncer de vejiga. En este trabajo se muestra que la AM induce la migración celular de próstata y cáncer urotelial y la invasión a través de TRPV2 translocación a la membrana plasmática y el subsiguiente aumento de la concentración de calcio en reposo
Visto:. Oulidi A, Bokhobza A, D Gkika, Vanden Abeele F, Lehen'kyi V, Ouafik L, et al. (2013) TRPV2 media la adrenomedulina La estimulación de la próstata y la adhesión celular cáncer urotelial, migración e invasión. PLoS ONE 8 (5): e64885. doi: 10.1371 /journal.pone.0064885
Editor: Natasha Kyprianou, Universidad de Kentucky College of Medicine, Estados Unidos de América
Recibido: 21 Enero, 2013; Aceptado: April 19, 2013; Publicado: 31 de mayo de 2013
Derechos de Autor © 2013 Oulidi et al. Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos de la licencia Creative Commons Attribution License, que permite el uso ilimitado, distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que el autor original y la fuente se acreditan
Financiación:. Este trabajo fue apoyada por las subvenciones del Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM), la Ligue Nationale Contre le Cancer, Región Norte-Paso de Calais y Université Catholique de Lille. Los donantes no tenía papel en el diseño del estudio, la recogida y análisis de datos, decisión a publicar, o la preparación del manuscrito
Conflicto de intereses:.. Los autores han declarado que no existen intereses en competencia
Introducción
la adrenomedulina (AM) es un péptido de 52 aminoácidos aislado originalmente de un feocromocitoma humana [1] que lleva propiedades reguladoras multifactoriales que van desde la inducción de vasodilatación a modular el crecimiento celular [2]. Las funciones de AM son mediados a través de receptores específicos que comprenden similar al receptor de receptor de calcitonina (CLR) y una proteína de la actividad del receptor de modificadores (RAMP); Cuando se co-expresó con RAMP2 o RAMP3, funciones CLR como un receptor específico AM [3]. AM y sus receptores son altamente expresado en diversas líneas celulares de cáncer y en los cánceres de páncreas, pulmón, riñón, mama, ovario y próstata. Un número de estudios han implicado AM (secretada endógena o exógena administrada) en el crecimiento tumoral, la progresión y la metástasis a través de efectos sobre la angiogénesis, la proliferación celular, la apoptosis y la migración [4] - [6]. Sin embargo, los mecanismos moleculares subyacentes a estos efectos de la AM en el crecimiento de células de cáncer y la metástasis permanecen contradictoria y poco conocidos.
La migración celular desempeña un papel fundamental en la invasión del cáncer y la metástasis. Muchos de los componentes de la maquinaria de la migración celular están regulados por el calcio intracelular (Ca
2 +) la concentración [7]. Una parte esencial de la señal intracelular de Ca
2 + es generada por el flujo transmembrana extracelular de Ca
2 + que ocurre principalmente a través de los canales catiónicos con distintivo Ca
2 + selectividad. En células no excitables, Ca
entrada 2+ es proporcionado por los canales iónicos que se activan por diversos estímulos químicos y físicos. Algunos de estos Ca
2 + canales de entrada son miembros de la (PRT) de la familia "receptor de potencial transitorio" de canales catiónicos [8]. se ha informado de canales TRP estar implicados en la carcinogénesis [9] - [11], y entre ellos canal TRPV2, se ha demostrado estar implicado específicamente en la progresión de los cánceres de próstata y la vejiga para el fenotipo más agresivo. De hecho, estudios recientes de nuestro laboratorio han demostrado muestran que TRPV2 se expresa en las células de cáncer de próstata más agresivos y estimula la migración y el fenotipo invasivo de estas células [12], [13]. Curiosamente, la expresión TRPV2 en la vejiga también se muestra que se correlaciona con el grado y estadio del cáncer [14], pero nada se sabe acerca de su posible papel en el cáncer de vejiga migración celular /invasión.
En el presente trabajo se investigó el participación de TRPV2 en el efecto de la AM en el proceso de múltiples etapas de la invasión en dos líneas celulares altamente invasivos: el CaP (cáncer de próstata) células las UC (carcinoma urotelial) células T24 /83 PC-3 y. Nuestros datos indican que la AM puede aumentar la adhesión, la migración y la invasión a través de Quinasa de Adhesión Focal (FAK) y activación de la integrina β1, y la estimulación de la translocación TRPV2 a la membrana plasmática. Por lo tanto, nuestros resultados proporcionan nuevos conocimientos sobre el papel de la mañana y TRPV2 en tumores malignos de próstata y vejiga.
Materiales y Métodos
Cell Cultura y
El CaP línea celular humana PC- 3 se obtuvo de la ATCC y se mantuvieron en cultivo en RPMI 1640 (Life Technologies) suplementado con 10% de FCS y 5 mM L-glutamina (Sigma). La línea celular de cáncer urotelial T24 /83 se obtuvo de la ECACC y se mantuvo en cultivo en Glutamax® 5A de McCoy (Life Technologies) suplementado con 10% de FCS.
transcripción inversa-PCR
El ARNm total se aisló a partir de células como se describe anteriormente [12]. condiciones de amplificación de ADN incluyen una etapa de desnaturalización inicial de 7 min a 95 ° C; 35 ciclos de 30 segundos a 95 ° C, 30 seg a 60 ° C y 30 seg a 72 ° C; y finalmente 7 min a 72 ° C. Primers secuencias y tamaños de los fragmentos fueron para RAMP2: adelante 5'-CTCAGCCTCTTCCCACCAC-3 ', 5'-reversa TTCCAGCAAAATTGGACAGC-3', 84 pb; para RAMP3 5'-ATCTCGGTGCAGTTGGTGA-3 'y 5'-AAGGTGGACGTCTGGAAGTG-3', 77 pb; para CLR 5'-CATGGACAAATTATACCCAGTGT-3 'y 5'-TCCAATTATGGTCAGGTAAAACAA3', 86 pb; para la actina 5'-CAGAGCAAGAGAGGCATCCT-3 'y 5'-GTTGAAGGTCTCAAACATGATC-3', 209 pb.
La transfección de ARN interferente pequeño
células PC-3 y T24 /83 fueron transfectadas con 50 nM pequeños ARN de interferencia (siRNA) contra TRPV2 (secuencia siTRPV2: 5'-UAAGAGUCAACCUCAACUAdT-3 ', sintetizado por Eurogentec). usando reactivo de transfección HiPerFect (Qiagen) siguiendo las instrucciones del fabricante
ensayo de adhesión celular
se recogieron las células y se sembraron a 3 * 10
4 y 1,5 * 10
4 células /pocillo para PC3 y T24 /83, respectivamente, en medio basal suplementado o no con AM (200 nM) en fibronectina (10 mg /ml) previamente recubierta placas de 96 pocillos. Después de 45 minutos de incubación a 37 ° C, las células adheridas se fijaron 15 minutos en baño de metanol y se tiñeron con Hoechst (5 mg /ml en PBS), las fotos fueron tomadas en un microscopio Leica DMIRE2 (x 5) y las células se contaron usando la imagen NIH El software de análisis (ImageJ).
La migración celular y la invasión de ensayo
La migración celular y la invasión se determinó mediante ensayo transwell. Brevemente, las células se sembraron en la parte superior de cultivo celular Transwell inserciones con 8 micras de tamaño de poro (Falcon) a una densidad de 60.000 por pocillo para PC-3 y 30.000 para T24 /83 (formato de 24 pocillos) en medio de cultivo libre de suero. Después de 1 h se añadió la molécula de interés en ambos lados del filtro Transwell. Para el ensayo de invasión, el compartimento superior se revistió con 50 g de Matrigel (BD Biosciences) para formar una barrera de matriz. El compartimento inferior se llenó con medio que contiene FCS al 10% como quimioatrayente. Después de 8 h para el ensayo de migración y 24 h para la invasión, las células no migratorias se retiraron del filtro superior por raspado, mientras que las células que habían migrado a través de los poros del filtro a la cara inferior de los insertos se fijaron en 4% de paraformaldehído en PBS y teñidas con Hoechst (5 mg /ml en PBS) y se contaron usando un microscopio Leica DMIRB (× 200).
Ca
2 + mediciones con Fura-2 a.m.
Antes de las mediciones de fluorescencia, las células se tripsinizaron y se sembraron sobre cubreobjetos de vidrio. El medio se reemplazó cada 48 h. Las células se utilizaron 3 días después del tratamiento con tripsina. El medio de cultivo fue reemplazado por una solución de HBSS que contenía 142 mmol /L de NaCl, 5,6 mmol /L de KCl, 1 mmol /L de MgCl2, 2 mmol /L CaCl2, 0.34 mmol /L Na2HPO4, 0,44 mmol /L de KH2PO4, 10 mmol /L HEPES, y 5,6 mmol /L de glucosa. La osmolaridad y el pH de esta solución se ajustaron a 310 mOsm /L y 7,4, respectivamente. Colorante de carga se logró mediante la transferencia de las células en una solución HBSS estándar que contiene 1 mmol /L Fura-2 acetoximetil éster (Calbiochem) cargado (45 min) durante 40 min a 37 ° C. Posteriormente, las células se lavaron tres veces con la misma solución libre de tinte. A continuación, el cubreobjetos se transfirió a una cámara de perfusión en un microscopio Olympus IX70 equipado para fluorescencia. La fluorescencia fue alternativamente excitado a 340 y 380 nm con un monocromador y fue capturado después de la filtración a través de un filtro de paso largo (510 nm) por una cámara CCD 5 MHz MicroMax (Princeton Instruments, Evry, Francia). Adquisición y análisis se realizó con el software MetaFluor 7.7.4.0 (Universal Imaging Corp., West Chester, PA). La concentración de calcio intracelular se deriva de la relación de las intensidades de fluorescencia para cada una de las longitudes de onda de excitación (F340 /F380) y de la ecuación de Grynkiewicz. Las células se perfundieron de forma continua con una solución de HBSS a través de un sistema de perfusión de todo el cámara y se añadieron los productos químicos a través del sistema de perfusión. La velocidad de flujo de todo el sistema cámara de perfusión se ajustó a 1 ml /min y el volumen de la cámara era de 500 l. Todas las grabaciones se realizaron a 37 ° C.
biotinilación y Western Blot
Los experimentos se llevaron a cabo como se describe anteriormente [15]. Los anticuerpos utilizados fueron policlonal de conejo anti-VRL-1 (por TRPV2, 1/200, Santa Cruz), anti-FAK (1/500, Abcam), anti-FAK Y397 de fósforo (1/1000, Abcam), beta anti-integrina 1 fosfo T788 + T789 (1/1000, Abcam) y beta anti-integrina 1 (1/200, Santa Cruz), y anticuerpo monoclonal de ratón anti-beta-actina (1/2000, Sigma-Aldrich).
Análisis de datos
Los resultados se expresaron como media ± sE. Las parcelas se producen usando Excel. Cada experimento se repitió al menos 3 veces. n indica el número de células por experimento. N indica el número de experimentos realizados. Se utilizó la prueba de Tukey-Kramer para la comparación estadística entre los medios y las diferencias, y P & lt;. 0,05 fue considerado significativo
Resultados
adrenomedulina Aumenta PC-3 y T24 /83 adhesión celular, la migración y invasión
Nos registramos por primera vez por RT-PCR la expresión de receptores de AM en la próstata y líneas celulares de cáncer urotelial PC3 y T24 /83. Como se muestra en la figura 1A, PC-3 expresa los dos receptores de AM, CLR /RAMP2 y CLR /RAMP3, mientras que T24 /83 sólo expresa CLR /RAMP3.
(A) RT-PCR experimento que muestra RAMP2, RAMP3 y la expresión de CLR en PC-3 y las células T24 /83. (B) PC-3 (panel izquierdo) y /83 de células T24 (panel derecho) de adhesión se examinó mediante la siembra de 3 * 10
4 y 1,5 * 10
4 células por pocillo, respectivamente, en placas de 96 pocillos pre recubiertas con fibronectina, y se incubaron durante 45 min con o sin AM (200 nM) (N = 3, * P & lt; 0,05 en comparación con células de control). β1 fosforilación de la integrina se estudió mediante transferencia de Western de las proteínas totales extraídas de PC-3 y /83 células T24 sembrados en placas recubiertas de fibronectina y tratados con o sin AM. (C) PC-3 y la migración celular T24 /83 se estudió por el ensayo Transwell después de 8 h de tratamiento (N = 3, * P & lt; 0,05 en comparación con células de control). la fosforilación de FAK se estudió por transferencia de western de las proteínas totales extraídas de PC-3 y T24 /83 células tratadas con o sin AM. (D) Para el ensayo de invasión, transwell membrana fue pre-recubierto con 50 mg Matrigel, y PC-3 y T24 /83 células se permiten invadir durante 24 h (n = 3, * P & lt; 0,05 en comparación con células de control).
a continuación, se investigó la adhesión celular a un componente principal de la membrana basal, la fibronectina. La adición de 200 nM AM aumentó tanto células T24 /83 PC-3 y un 26% y 34%, respectivamente (Fig. 1B). Uno de los principales actores moleculares de adhesión celular-sustrato de modificación es la superfamilia de los receptores de la integrina, que consisten en heterodímeros de subunidades ß-alfa- y que reconocen diferentes proteínas de la matriz extracelular (ECM). Curiosamente, β1-integrina es la subunidad más abundante expresada en células de CaP y es capaz de formar heterodímeros de unión a la fibronectina [16], mientras que el aumento de expresión β1-integrina se correlaciona con el cáncer de vejiga más invasivo y metastásico [17]. La activación de la integrina β1-conduce a su fosforilación, que puede ser examinado por el Western Blot. Por lo tanto, si la prueba AM podría activar β1-integrina mediante el estudio de su fosforilación en Thr-788 a 789 con un fosfato de anticuerpos específicos. Hemos observado que el tratamiento AM aumentó significativamente el nivel de la fosforilado β1-integrina sin afectar a la expresión de la forma de proteína total (Fig 1B, panel inferior).
Modificación de adhesión podría promover la migración y la invasión:. Dos importantes fenotipos relacionados con malignidades. Por lo tanto, hemos examinado el efecto del tratamiento con AM en estos fenotipos usando ensayos transwell. La adición de 200 nM AM aumentó la migración de PC-3 en un 45% y las células T24 /83 por 40% (Fig. 1C). Varios estudios mostraron que tras el acoplamiento con componentes de la ECM, integrinas agrupados que conduce a la activación de la quinasa de adhesión focal (FAK) por autofosforilación en Tyr397. La activación de FAK controla la forma celular y la motilidad [18]. Se estudiaron por lo tanto la actividad de FAK por transferencia de Western con un anticuerpo específico contra fosfo-Tyr397 FAK. Como se muestra en la Fig. 1C (panel inferior), la FAK fosforilada se ha incrementado de manera significativa por el tratamiento AM total de FAK mientras que la expresión total de FAK se mantuvo sin cambios.
Además, se estudió el efecto de la AM en el potencial de invasión de las dos células líneas por transwell ensayo para la que el filtro transwell se recubrió con Matrigel. AM tratamiento aumentó la capacidad de invasión de las células a través de la membrana recubierta con Matrigel en un 54% en las células PC-3 y un 61% en las células T24 /83 (Fig. 1D).
TRPV2 media la Promoción de Migración y adrenomedulina invasión en PC-3 y T24 /83 células
Dado que hemos demostrado anteriormente que TRPV2 estuvo implicado en la migración celular y la invasión CaP [12], [13] y ya que este canal también fue implicado en la carcinogénesis de vejiga [ ,,,0],14], hemos probado si TRPV2 está implicada en el aumento de la migración celular y la invasión por AM. Nos registramos por primera vez la expresión TRPV2 en las dos líneas celulares y su downrerulation de siRNA. análisis Western-blot con anticuerpo-TRPV2 específico ha demostrado que la proteína TRPV2 se expresa en PC3 y las células T24 /83 y que la expresión de proteínas se puede inhibir de manera efectiva mediante el tratamiento de células con siRNA-TRPV2 (50 nM, 48 h, Fig. 2A). El silenciamiento de TRPV2 con siRNA-TRPV2 no sólo disminuye la adherencia de PC-3 y las células T24 /83 por 35% y 29%, respectivamente, pero también abolió efectos estimulantes sobre la adhesión por tratamiento AM (200 nM). AM Además de las células tratadas con ARNsi de control fue capaz de mejorar su adhesión a la fibronectina por 29% para PC-3 y 25% para las células T24 /83 (Fig. 2B)
.
(A) Western-Blot análisis de nivel de proteína TRPV2 en PC-3 y T24 /83 células tratadas con cualquiera de siCTL o siTRPV2 (50 nM, 48 h). Efecto del silenciamiento TRPV2 (siTRPV2, 50 nM, 48 h) (B) sobre la adhesión celular T24 /83 PC-3 y para fibroncectin incubaron o no con AM (200 nM, 45 min) (N = 3, * P & lt; 0,05 comparado con células de control;
#P & lt; 0,05 en comparación con células de control tratadas con AM); (C) en PC-3 y la migración celular T24 /83 examinado por transwell ensayo después de 8 h de incubación con o sin AM (N = 3 *, P & lt; 0,05 en comparación con células de control;
#P & lt; 0,05 en comparación con células de control tratados con AM); (D) en PC-3 y T24 /83 invasión celular a través de matrigel (AM 200 nM, 24 h) (N = 3. *, P & lt; 0,05 en comparación con células de control;
#P & lt; 0,05 en comparación con células de control tratadas con AM).
a continuación se investigó el efecto del golpe abajo de TRPV2 sobre la migración celular por transwell ensayo. Regulación a la baja de la expresión TRPV2 disminuye no sólo la migración de células PC-3, pero también T24 /83, por 55% y 60%, respectivamente. Como se ha demostrado para la adhesión, el tratamiento de AM en las células tratadas con siRNA-TRPV2 ya no era capaz de promover la migración (Fig. 2C).
Por último, se analizó la invasión de las células PC-3 y T24 /83 a través de la membrana recubierta con Matrigel y como se observa para la adhesión y la migración, siRNA-TRPV2 indujo una disminución tanto de PC-3 y T24 /83 invasión, por 52% y 67%. La adición de AM no pudo aumentar la invasión de las células PC-3 y T24 /83 tratados por siTRPV2 (Fig. 2D).
AM induce la translocación TRPV2 en la membrana plasmática a través de una vía PI3K
en vista de la implicación TRPV2 en efecto AM sobre la migración celular, el próximo examinó por imágenes de calcio si podría activar AM TRPV2. aplicación aguda de AM a PC-3 y T24 /83 no causó elevación de Ca intracelular
2 + concentración ([Ca
2 +]
i) en una corta escala de tiempo (es decir, en cuestión de minutos ), como cabría esperar de Ca mediada por TRPV2 mejorada
2 + entrada (datos no mostrados). Sin embargo, prolongó 45 minutos de largo tratamiento de las dos líneas celulares con AM indujo un aumento de la basal [Ca
2 +] i Nivel (PC-3: de valor de control de 100 nm a 140 nm en presencia de AM; T24 /83:139 nM a 200 nM; Fig. 3A). El silenciamiento de TRPV2 de siRNA (50 nM, 48 h) disminuyó la basal [Ca
2 +]
i (PC-3: de 70 nM; T24 /83: a 86 nM) lo que sugiere que el estado estacionario TRPV2 mediada por Ca
2 + afluencia contribuye a la descansando Ca citosólico
2 + concentración. Por otra parte, el silenciamiento TRPV2 también previno el aumento de la basal [Ca
2 +]
I en respuesta al tratamiento AM (Fig. 3A), coherente con la noción de que la incubación prolongada de PC-3 y las células T24 /83 provoca la activación indirecta de TRPV2 por AM a través de vía que requiere un poco de tiempo para producir sus efectos de señalización.
(a) El efecto de AM (200 nM, 45 min) y el silenciamiento TRPV2 (siTRPV2, 50 nM, 48 h ) en el calcio citosólico basal de PC-3 y T24-83 células se estudió por imágenes de calcio. (N = 120 células, n = 4, *, P & lt; 0,05 en comparación con células de control;
#P & lt; 0,05 en comparación con células de control tratadas con AM). (B) la presencia TRPV2 en la membrana plasmática fue examinado por biotinilación en células T24 /83 control o ya sea tratada con AM (200 nM, 45 min) o AM y el inhibidor de PI3K LY294.002 (10 M, añadido 5 min antes de AM). (C) Efecto de LY294.002 en PC-3 y la migración celular T24 /83 examinado por transwell ensayo después de 8 h de incubación con o sin AM (N = 3. *, P & lt; 0,05 en comparación con células de control;
#P & lt ; 0,05 en comparación con células de control tratadas con AM). (D) Efecto de la LY294.002 sobre la migración inducida por AM de /83 células TRPV2-silenciado T24 PC-3 y examinados por transwell ensayo después de 8 h de incubación con o sin AM (N = 3. *, P & lt; 0,05 comparado con el control células;
#P & lt;. 0,05 en comparación con células de control tratadas con AM)
se sabe que AM puede activar PI3K [19] y que la activación de PI3K puede lleva a la translocación TRPV2 al plasma de membrana [12]. Así, se examinó a continuación si la presencia de TRPV2 en la membrana plasmática es dependiente de AM y de la integridad de la vía de señalización de PI3K. Para ello, las células T24 /83 fueron tratados con AM (200 nM durante 45 min) o AM más inhibidor de PI3K LY294.002 (10 M, añadido 5 min antes de la mañana), y localización de la membrana de plasma se ensayó por biotinilación. Como se muestra en la figura 3B, AM aumento de la presencia TRPV2 en la membrana, y este efecto puede ser inhibida por LY294.002, lo que sugiere la implicación de PI3K señalización en efecto AM en TRPV2.
Por lo tanto, estudiamos por transwell ensayo si LY294.002 podría poner en peligro la PC-3 y la migración celular T24 /83. Hemos demostrado que LY294.002 (10 M) impidió el efecto estimulante de la AM tanto en PC-3 y las células T24 /83 mientras que no modificó la migración basal de estas células (Fig. 3C). Por otra parte la migración inducida por la mañana en la presencia de siTRPV2 no se vio afectada por la aplicación LY294.002 tanto en células PC-3 y T24 /83 apoyando la especificidad de la participación en el efecto PIK3 AM en el canal TRPV2.
discusión
AM actividad en la estimulación de la progresión tumoral se ha demostrado en numerosos tipos de cáncer, incluido el de próstata, pero no en el carcinoma de vejiga. Hasta la fecha, se han postulado dos posibles mecanismos por los cuales AM apoya el crecimiento del tumor. La primera posibilidad es que AM promueve el crecimiento tumoral mediante la estimulación de la angiogénesis [5], [6]. El segundo mecanismo posible es que la AM promueve directamente la proliferación tumoral y la supervivencia. Un informe reciente ha demostrado que la AM antagonista inhibe la proliferación y la invasión de células de cáncer pancreático que expresan receptores de AM en vitro [20]; sin embargo ningún efecto nunca ha sido descrito en la migración de células de cáncer de próstata /invasión y ninguno en absoluto sobre el carcinoma de vejiga.
En este estudio se reporta por primera vez que la línea celular UC T24 /83 también expresan un receptor de AM (CLR /RAMP3) y que la AM puede aumentar no sólo la línea celular PC-3, sino también la línea de células UC T24 /83 fenotipo invasivo CaP de la misma manera, mediante la estimulación de la adhesión celular y la migración a través β1-integrina y la activación de FAK, respectivamente.
el calcio es un factor importante en el proceso de migración [7]; Estudios de nuestro laboratorio muestran que la TRPV2 canal de potencial transitorio del receptor se expresa en las líneas celulares de CaP metastásico, incluyendo las células PC-3, y los niveles de TRPV2 transcripción son 12 veces más altos en los pacientes con cáncer metastásico (estadio M1) en comparación con tumores sólidos primarios ( etapas T2a y T2b). La actividad basal de este canal, así como inducida, promueve la migración celular y la PCa fenotipo invasivo [12], [13]. Además, la expresión TRPV2 también se incrementa en mayor etapa del cáncer de vejiga [14]. Aquí demostramos que el silenciamiento de este canal también reduce drásticamente la migración y la invasión de la línea celular UC T24 /83. Pero el hallazgo más importante es que TRPV2 modula la estimulación AM de la motilidad celular y la invasión, como se muestra por la ausencia de efecto de AM en la adhesión, migración e invasión cuando la expresión TRPV2 es derribado. AM, actuando sobre TRPV2 translocación a la membrana de plasma, aumenta el nivel de calcio en reposo de las dos líneas celulares, lo que contribuyó a su efecto sobre PC-3 y la migración celular T24 /83.
Estos datos sugieren que la AM y TRPV2 correlación de expresión puede contribuir a crear las condiciones ideales para la propagación metastásica en pacientes con cáncer de próstata o cáncer de vejiga y podría constituir un marcador pronóstico potencial y una posible diana terapéutica para aumentar la esperanza de vida de los pacientes.