Extracto
Antecedentes
Tafazzin (TAZ), una proteína transmembrana contribuye en modificaciones estructurales y funcionales mitocondriales a través de la remodelación cardiolipina. TAZ mutaciones están asociadas con varias enfermedades, pero los estudios sobre el papel de la proteína TAZ en la carcinogénesis y la radioterapia (RT) se carece de respuesta. Por lo tanto, se determinó la expresión TAZ en el cáncer de recto, y su correlación con RT, las variables clinicopatológicas y biológicos en los pacientes que participan en un ensayo clínico de RT preoperatoria.
Métodos
140 pacientes con cáncer rectal fueron incluidos en este estudio, de los cuales 65 recibieron RT antes de la cirugía y el resto se sometió a la cirugía sola. TAZ expresión se determinó por inmunohistoquímica en el cáncer primario, la mucosa normal distante, adyacente y la metástasis de los ganglios linfáticos.
in silico,
análisis de la interacción proteína-proteína se realizó para estudiar la interacción funcional de predicción de TAZ con otras oncoproteínas.
Resultados
TAZ mostró más fuerte expresión en el cáncer primario y linfático metástasis en los ganglios en comparación con la mucosa normal adyacente distante o en ambos pacientes no-RT y RT. Fuerte expresión TAZ fue significativamente mayor en las etapas del cáncer no mucinious de pacientes no-RT I-III y. En los pacientes con TR, fuerte expresión en TAZ biopsia se relaciona con la recurrencia distante, independiente del género, la edad, las etapas y grado (p = 0,043, HR, 6.160, IC del 95%, 1,063 a 35,704).
in silico
estudio de interacción proteína-proteína demostraron que la TAZ se relaciona positivamente con las oncoproteínas, livin, MAC30 y FXYD-3.
Conclusiones
Fuerte expresión de la proteína parece TAZ estar relacionada con el desarrollo del cáncer rectal y la respuesta RT, puede ser un biomarcador predictivo de la recurrencia distante en pacientes con RT preoperatoria
Visto:. Pathak S, Meng WJ, Zhang H, Gnosa S, Nandy SK, Adell G , et al. (2014) Tafazzin expresión de la proteína se asocia con Tumorigénesis y Radiación de respuesta en cáncer de recto: un estudio de ensayo clínico sueca sobre preoperatoria radioterapia. PLoS ONE 9 (5): e98317. doi: 10.1371 /journal.pone.0098317
Editor: Anthony W. I. Lo, la Universidad China de Hong Kong, Hong Kong
Recibido: 11 Febrero, 2014; Aceptado: 30 de abril de 2014; Publicado: 23 de mayo de 2014
Derechos de Autor © 2014 Pathak et al. Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos de la licencia Creative Commons Attribution License, que permite el uso ilimitado, distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que el autor original y la fuente se acreditan
Financiación:. Este estudio fue financiado por subvenciones de la Fundación de cáncer de Suecia, Consejo Sueco de Investigación y el Consejo de Investigación de la Salud en el sureste de Suecia. Los donantes no tenía papel en el diseño del estudio, la recogida y análisis de datos, decisión a publicar, o la preparación del manuscrito
Conflicto de intereses:.. Los autores han declarado que no existen intereses en competencia
Introducción
proteína Tafazzin (TAZ) está codificada por el funciones de genes TAZ como una transacilasa fosfolípido-lisofosfolípido. mutaciones TAZ están asociados con una serie de trastornos clínicos incluyendo el síndrome de Barth, miocardiopatía dilatada y fibroelastosis endocardial [1], [2]. TAZ es responsable de la remodelación de la cardiolipina [3], que estabiliza el ensamblaje de complejos de la cadena respiratoria y media pasos clave en la apoptosis en las mitocondrias. Un enlace causal entre la disfunción mitocondrial y trastornos patológicos se ha observado en diferentes modelos de enfermedad. Por ejemplo, se ha demostrado que la disfunción mitocondrial también juega un papel importante en el desarrollo de la inflamación. Acehan D
et. Al
. [4], señaló que la expresión anormal TAZ relacionados con la disfunción mitocondrial promueve la inflamación. Wilson LD
et. al.
[5] informó de que la expresión anormal TAZ se relaciona con una mayor expresión de IL-6 y el aumento de las respuestas inflamatorias. Comúnmente la inflamación considerada como un factor de predisposición para el cáncer, especialmente el cáncer colorrectal (CCR). Sin embargo, el papel de la expresión TAZ en los procesos oncogénicos sigue siendo poco clara. La disfunción mitocondrial resulta en alteraciones de la transducción de señales celulares podría considerarse como vías objetivo eventuales en avanzar en el tratamiento del cáncer de futuro. CRC es el tercer tipo más común [6] y la segunda más muerte por cáncer en el mundo occidental [7]. Apesar de la cirugía sigue siendo la modalidad curativa para la CDN, y la radioterapia preoperatoria (RT) ha mostrado una ventaja en la supervivencia en comparación con la cirugía sola, siendo el valor de RT preoperatoria sigue siendo controvertida [8], [9], [10]. Estos resultados plantean aún más la cuestión de si la RT preoperatoria tiene que ser dada de manera más selectiva o no. Ahora, el principal objetivo clínico es la búsqueda de indicadores predictivos con el fin de identificar a los pacientes más adecuados para la RT preoperatoria. Generalmente, los potenciales biomarcadores predictivos incluyen, por ejemplo, la expresión de oncogenes y genes supresores de tumor, marcadores de proliferación, angiogénesis, inflamación y la adhesión celular, así como la regulación de genes implicados en la respuesta a la RT y la quimioterapia. Se están realizando estudios extensos para mejorar el método predictivo, incluyendo la identificación de nuevos marcadores biológicos y moleculares. Para identificar nuevas moléculas predictivos de RT preoperatoria y dilucidar el papel de la participación de la proteína TAZ en pacientes con cáncer de recto, se investigó por primera vez, la expresión de la proteína TAZ en el cáncer rectal y su relación con la respuesta de la temperatura ambiente y con las variables clinicopatológicas o biológicos en el los pacientes que participan en un ensayo clínico de RT preoperatoria. Por otra parte, presentan aspectos más destacados de investigación por primera vez la interacción funcional de TAZ con otras oncoproteínas por
in silico
análisis de la interacción proteína-proteína.
Materiales y Métodos
pacientes con cáncer rectal "selección
el presente estudio se incluyeron secciones de tejido de 140 pacientes con cáncer de recto primarias, 119 muestras de mucosa normales distantes (109 especímenes coincidir con el cáncer rectal primario), 79 muestras de mucosa normal adyacente (70 especímenes coincidir con el primario de recto cáncer), 48 metástasis de los ganglios de nodo (44 especímenes coincidir con el cáncer rectal primario), y 101 biopsias de los pacientes con cáncer rectal primarios (91 biopsias coincidir con el cáncer rectal primario quirúrgico) (Figura S1).
Todo pacientes con cáncer rectal eran de la región de Cuidado de la Salud del sureste de Suecia, incluyendo hospitales en Linköping, Norrköping, Jönköping, Motala, Eksjö, Varnamo y Västervik, y participaron en el ensayo clínico sueca del cáncer rectal de radioterapia preoperatoria entre 1987 y 1990. Inicialmente había 171 cáncer pacientes. Sin embargo, cuatro pacientes fueron excluidos debido a (enfermedad avanzada) no resecable quirúrgicamente, y 27 pacientes tenían ninguna muestra de tejido disponibles para este estudio. mucosa normal Distant fue tomada de proximal o margen distal (4-35 cm desde el tumor primario) del recto resecado, y mucosa normal adyacente fue tomado de la mucosa adyacente al tumor primario, el que ambos eran histológicamente libres de tumor. Localmente la resección curativa se realizó en todos los pacientes.
Diseño experimental
Entre los 140 pacientes con cáncer rectal primario, 75 pacientes recibieron cirugía sola, y 65 recibieron RT preoperatoria seguida de cirugía. RT se administró a un total de 25Gy en 5 fracciones antes de la cirugía durante una mediana de 6 días (5-12 días) entregados con 6-10 MV de fotones. La cirugía se llevó a cabo a continuación, en una mediana de 3 días (rango, 1-13 días) después de RT. Ninguno de los pacientes recibieron quimioterapia adyuvante antes o después de la cirugía y todos los pacientes tenían adenocarcinoma de recto localmente resecable. la edad media de los pacientes al momento del diagnóstico fue de 67 años (rango 36-86 años). No hubo diferencia estadística entre el grupo de no-RT y RT respecto de las características de los pacientes y tumores incluyendo el género, la edad, el estadio, la diferenciación, el tipo de cirugía y el margen de resección (p & gt; 0,05; Tabla 1)
declaración ética
Todos los pacientes eran de la región sudeste de Cuidado de la Salud de Suecia y participaron en un ensayo sueco cáncer rectal aleatorio de RT preoperatoria entre 1987 y 1990. a cada paciente se le proporciona información detallada sobre el estudio tiene como objetivo y el protocolo, y dieron su consentimiento informado por escrito antes de la inscripción. El seguimiento se llevó a cabo hasta 2004. El período medio de seguimiento fue de 75 meses (rango, 0-193 meses). El estudio fue aprobado por la Junta de Revisión Institucional de la Universidad de Linköping, Suecia.
Tejido preparación de micromatrices de diapositivas
Todos los especímenes, incluyendo la mucosa normal, cánceres primarios y metástasis en los ganglios linfáticos fueron incluidos en parafina para microarrays de tejidos. Tres regiones morfológicamente representativas fueron seleccionados en cada bloque y 3 muestras de tejido núcleo cilíndrico (0,6 mm de diámetro) se tomaron de estas áreas, se inserta en un bloque de parafina receptor.
La inmunohistoquímica
secciones de microarrays de tejidos se incubaron a 60 ° C durante toda la noche, deparaffinized e hidratada. La actividad de la peroxidasa endógena fue bloqueada en el 3% H
2O
2 en metanol. secciones tinción de fondo no específica se sumergieron en PBS que contenía 1% de BSA y se incubaron con solución de bloqueo de proteína (primavera Bioscience, Pleasanton, CA) durante 10 minutos. Las secciones fueron incubadas con el anti-TAZ anticuerpo policlonal de conejo primario (HPA039557, Sigma-Aldrich Co, St. Louis, MO) a una dilución de 1:10 en diluyente de anticuerpos (DAKO, Cytomation; Glostrup, Dinamarca) y se incubaron a 4 ° C durante toda la noche. Después de lavar con PBS, un anticuerpo secundario anti-conejo secundario biotinilado (DAKO, lote 00082892) en una dilución de 1:2000 se añadió. Después de 30 minutos, las secciones se enjuagaron con PBS y se incubaron en reactivo de enzima AB (Sistema de tinción ABC, Santa Cruz Biotechnology, CA) que contiene avidina y peroxidasa de rábano picante biotinilada. Los portaobjetos se enjuagaron en PBS y se incubaron durante 10 minutos en sustrato de peroxidasa que contiene 3, 3-diaminobencidina cromógeno (DAB) y de contraste con hematoxilina. En todos los ensayos, se incluyeron controles negativos.
inmunohistoquímico de puntuación
La inmunotinción fue marcado por dos observadores independientes en base a la intensidad de la expresión de la proteína sin el conocimiento de la información clínico-patológico y biológica. En el caso de discrepancia en las puntuaciones individuales, ambos investigadores reevaluaron las diapositivas juntos y llegaron a un consenso antes de la combinación de las puntuaciones individuales. Para evitar un efecto artificial, no se contaron las células en los márgenes de las secciones y de las zonas con mala morfología. La intensidad de la tinción se clasificó como tinción negativa, débil, moderada y fuerte. Para los análisis estadísticos, casos manchadas negativos, débiles o moderadas fueron considerados como grupo de baja expresión, mientras que los casos fuertes constituyeron el grupo expresión tan alto. La expresión de meningioma activa la proteína (MAC30) [11], FXYD-3 [12] y de Livin [13] en los cánceres rectales determinados por inmunohistoquímica fueron tomados de los estudios previos de nuestro laboratorio realizados con el mismo material del paciente utilizado en el presente estudio.
in silico
estudios de interacción proteína-proteína
Las secuencias de aminoácidos, con excepción de la región del péptido señal, de TAZ, de livin (isoforma 1 & amp; 2), FXYD-3 ( isoforma 1) y MAC30 [ID de UniProt: Q16635, Q96CA5, Q14802 y Q5BJF2 respectivamente] y su secuencia y generales, anotaciones se obtuvieron de UNIPROT
selección de plantilla y la construcción de modelos
Todas las secuencias de aminoácidos. fueron sometidos a NCBI PSI-BLAST (Posición iteración-Basic local Alignment Tool específico de búsqueda) (http://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi) contra el PDB (Protein Data Bank) (http: //www proteínas .rcsb.org /AP /home /home.do) con los parámetros por defecto para seleccionar la proteína molde y luego las plantillas fueron descargados de AP. modelos de homología tridimensionales refinados se generaron utilizando un programa de modelado comparativo Modeller [14] de Descubrimiento Studio (DS), en base a la alineación de la plantilla-diana dada y estructura de la plantilla seleccionada. Cinco estructuras fueron generados por la proteína y el modelo con el valor más bajo de la energía de la proteína optimizado discreto normalizado fue elegido como el mejor modelo. Debido a la falta de estructura de la plantilla con E-valor mejor que el umbral, Taz y MAC30 fue modelado por el método de reconocimiento veces desde el servidor de I-TASSER [15]. Todos los modelos se sometieron a minimización de energía 2000 paso en DS inteligente Minimizer con el fin de aliviar los choques estéricos. Además, la estereoquímica y conformaciones de las estructuras modeladas fueron validados a través de análisis estructural y comprobación del servidor (guarda) en http://nihserver.mbi.ucla.edu/SAVES/y también con la Evaluación Atómica no local para el Medio Ambiente (ANOLEA) [16], pROSA [17] y MolProbity [18] servidores.
estudios de acoplamiento molecular
Para considerar la interacción proteína-proteína de livin, FXYD-3 y MAC30 con TAZ, las tres proteínas se acoplan con TAZ de cuerpo rígido usando el algoritmo de acoplamiento ZDOCK [19] en DS 2.5. Sólo las regiones citoplasmáticas de FXYD-3 y MAC30 se consideraron para los estudios de interacción. Un total de 2000 atracó poses se generaron para cada uno de los complejos TAZ que fueron clasificados según la puntuación ZDOCK acuerdo con su forma de complementariedad, la electrostática y la energía eliminación de disolvente y, además, las poses fueron re-calificados por ZRANK [19], el método de listas de hipótesis empleando una energía ponderada función. Las 30 mejores poses de acuerdo con la puntuación ZRANK fueron sometidos a RDOCK [19] - un CHARMm (http://www.charmm.org/) procedimiento basado en el refinamiento y la puntuación. optimizaciones de posición de estos 30 poses, se llevaron a cabo con el campo de fuerza CHARMm, Momany-Rone [20] cargas parciales utilizando DS inteligente Minimizer. porcentaje relativo de disolvente accesibilidad, enlace de hidrógeno (HB) y energías libres de complejos de unión TAZ También se determinaron a fuerza iónica fisiológica usando Generalizado Nacido aproximación con la integración volumen molecular [21] en DS 2.5.
El análisis estadístico
Chi-cuadrado o se aplicó la prueba de McNemar para examinar la significación de las diferencias en la expresión de TAZ en mucosa normal distante o adyacente, cáncer primario y la metástasis de los ganglios linfáticos, así como la correlación de expresión TAZ con variables clinicopatológicas o biológicos. TAZ expresión con la supervivencia libre de enfermedad o la supervivencia global y la recurrencia a distancia se puso a prueba mediante el análisis de Kaplan-Meier y el análisis de regresión de riesgos proporcionales de Cox. Las curvas de supervivencia se calcularon según el método de Kaplan-Meier. Todas las pruebas fueron de dos caras y el valor p & lt; 0,05 fue considerado estadísticamente significativo
Resultados
TAZ mostraron una mayor expresión en el cáncer primario y metástasis en los ganglios linfáticos
expresión TAZ. se analizó mediante inmunohistoquímica (Figura 1, a-C) en la mucosa normal distante, mucosa normal adyacente, cáncer primario y la metástasis de los ganglios linfáticos a partir de muestras de resección quirúrgica y en la biopsia (correspondiente a cáncer primario quirúrgica). En no RT grupo (Figura 1D), TAZ mostró una mayor expresión en el cáncer primario (p & lt; 0,001 y p & lt; 0,001, respectivamente) y la metástasis de los ganglios linfáticos (p & lt; 0,001 y p = 0,006, respectivamente) en comparación con lejano y normal adyacente mucosa. Como se muestra en la Figura 1D, sólo el 2% de los 63 distantes muestras de mucosa normal, y el 7% de las 42 muestras de mucosa normal adyacente tenían una fuerte expresión TAZ, mientras que el 73% de los 75 cánceres primarios y el 37% de los 27 metástasis mostraron una fuerte expresión TAZ. En el grupo de RT (Figura 1E), la expresión TAZ se incrementó en cáncer primario (p & lt; 0,001, p & lt; 0,001) y metástasis de ganglios linfáticos (p = 0,130, p = 0,220) en comparación con mucosa normal distante y adyacente. Como se muestra en la Figura 1E, la fuerte expresión TAZ se encontró en 7% de las 56 muestras de mucosa normal distantes, en el 8% de 37 muestras de mucosa normal adyacente, en 43% de los 65 cánceres primarios y en el 19% de 21 metástasis. Sin embargo, la fuerte expresión TAZ marginalmente disminuyó de cáncer primario a metástasis (p = 0,003, p = 0,040), tanto en no-RT y el grupo de RT. En la biopsia, el patrón de expresión TAZ estaba en línea con el cáncer primario quirúrgico.
TAZ expresión de la proteína se muestra en (A) de la mucosa rectal normal (expresión negativa), (B) cáncer primario (fuerte expresión) y (C) la metástasis de los ganglios linfáticos (una expresión débil) (A-C, 400X). En el grupo no RT expresión (D) TAZ fue significativamente mayor en cáncer primario en comparación con la mucosa distante normal (p & lt; 0,001), la mucosa adyacente (p & lt; 0,001). La expresión en la expresión TAZ ganglios linfáticos metástasis también fue significativamente mayor en comparación con la expresión en mucosa normal distante (p & lt; 0,001), la mucosa adyacente (p = 0,006). Sin embargo, en comparación con cáncer primario expresión TAZ en metástasis de ganglios linfáticos fue significativamente menor (p = 0,003). El grupo RT (E) mostraron significativamente mayor expresión TAZ en el cáncer primario en comparación con la mucosa normal adyacente y distante (p & lt; 0,001 y p & lt; 0,001 respectivamente). En la metástasis de los ganglios linfáticos fuerte expresión TAZ fue significativamente menor en comparación con la expresión en el cáncer primario (p = 0,040). Solamente los valores de p & lt; 0,05 se presentan. En el cáncer primario fuerte expresión TAZ fue significativamente menor (p = 0,001) en comparación con los no-RT grupo (F).
TAZ expresión disminuyó en el cáncer de recto después de la RT
En comparación con grupo sin RT, la expresión TAZ en muestras de cáncer primarios sometidos a RT se redujo significativamente (p = 0,001). TAZ expresión mostró una frecuencia más alta en 73% de los pacientes en el grupo de no-RT, mientras que en el grupo de RT se redujo a 43% (Figura 1F). TAZ expresión fuerte en la metástasis también disminuyó en el grupo RT comparación con el grupo no RT aunque la diferencia no fue estadísticamente significativa (p = 0,173).
TAZ expresión en relación con variables clínico en los pacientes
En el grupo no-RT, la expresión TAZ fue significativamente relacionados con la etapa (p = 0,031) y el tipo histológico no mucinoso (p = 0,004). Se ha demostrado que el 75% de los pacientes con una fuerte expresión TAZ eran estadios I-III, mientras que el 25% de estadio IV. Además 79% de los pacientes con una fuerte expresión TAZ eran carcinomas no mucinosos mientras que el 21% eran carcinoma mucinoso (tabla 2). En el grupo de RT, no existía tal relación (Tabla 2). la recurrencia a distancia se encontró en 57 pacientes (41%) de un total de 140 pacientes con cáncer de recto.
TAZ expresión en relación con las variables biológicas en Destinia.com los pacientes
En los tumores primarios, la expresión TAZ se correlacionó positivamente con la expresión de MAC30 (p = 0,022) en el grupo de RT (Tabla 3). Además, tanto en grupo expresión fuerte TAZ no RT y RT se correlacionó positivamente con FXYD-3 (p = 0,003 y p = 0,008, respectivamente), así como con la expresión de Livin (p = 0,041 y p = 0,013, respectivamente, Tabla 3).
importancia predictiva de expresión TAZ en el cáncer rectal en busca de RT preoperatoria
en las biopsias, fuerte expresión TAZ se relaciona con la recurrencia a distancia en el grupo de RT,
es decir,
fuerte expresión TAZ aumentó la probabilidad de recurrencia a distancia (p = 0,010, Figura 2A). Además el análisis multivariante confirmó la correlación fue independiente del sexo, la edad, el estadio y la diferenciación (Tabla 4). En el grupo de no-RT, dicha relación no se observó (Figura 2B). Sin embargo, la expresión TAZ no se relacionó significativamente con la supervivencia libre de enfermedad y la supervivencia global en los pacientes, ya sea en TR o no RT grupo (Figura S2).
En el grupo de RT, los pacientes con una fuerte expresión TAZ tuvieron una riesgo significativamente mayor de desarrollar la recurrencia a distancia (A) (p = 0,010). En el grupo de no-RT, la expresión TAZ no se relacionó significativamente con la probabilidad de recurrencia a distancia (B). Solamente los valores de p & lt; 0,05 se presentó
in silico
estudios de interacción proteína-proteína
Selección de plantilla
A excepción.. FXYD-3, PSI-BLAST no reconoció ninguna plantilla con una cobertura del 100% consulta tanto de forma individual o en combinación; y fue modelado por homología utilizando la estructura de RMN solución AP ID 2JO1 [Modelo 1, la cadena A, el 37,7% de identidad, cubriendo longitud de la secuencia 22-87]. Por otra parte, los dominios funcionales de de Livin, que pertenecen a la superfamilia de BIR y RING, estaban bien representados por las estructuras cristalográficas PDB ID 3F7G [Cadena B, Resolución 2,30 Å, cubriendo longitud de la secuencia 71-169 de la isoforma 2] y PDB ID 4AUQ [cadena B, Resolución 2.18 Å, cubriendo longitud de la secuencia 242-298 de la isoforma 1]. El mejor modelo de servidor de I-TASSER fue tomada por TAZ (C-score = -0.28, TM-score = 0,68 ± 0,12) y MAC30 (C-score = -2.93, TM-score = 0,38 ± 0,13).
estudios de acoplamiento molecular.
las propiedades físicas de proteína-proteína interfaz de todos los complejos atracados (Figura 3A-D) se analizaron y se enumeran en la Tabla 5. los complejos se caracterizan principalmente por las interfaces polares, los cuales indicar hacia la posible naturaleza no obligatoria de los complejos. Espacio adecuado de unión de la superficie, la energía libre reconocible y sus correspondientes estabilización mediante interacciones no-consolidado, dicen los enlaces de hidrógeno e interacciones hidrofóbicas indican hacia una posible interacción entre TAZ y las proteínas de nuestro interés.
TAZ se representa en verde, otro proteínas en cian. R: TAZ-livin (TAZ-BIR) compleja; B: TAZ-livin (TAZ-RING) compleja; C: TAZ-FXYD-3 compleja; D:. Compleja TAZ-MAC30
Discusión
TAZ proteína está implicada en el mantenimiento de los niveles de cardiolipina que es esencial para la producción de energía en la mitocondria. Las mutaciones en el gen TAZ cambiar la estructura de la proteína TAZ y evitan que el desempeño de su función normal en las mitocondrias. Se propuso por primera vez por Otto Heinrich Warburg [22] que el cáncer se originó de una lesión irreversible en la respiración mitocondrial, pero la base estructural de esta lesión ha sido difícil de alcanzar. Recientemente, un estudio [23] muestra las principales anormalidades en el contenido de cardiolipina en todos los tumores y la sobreexpresión de gen TAZ en el carcinoma de tiroides [24]. Sin embargo, la anomalía en la expresión TAZ en el cáncer no se ha investigado a fondo hasta la fecha. En el presente estudio, hemos demostrado por primera vez que la expresión TAZ en el cáncer primario aumentó en comparación con la mucosa normal adyacente o distante, y luego disminuyó en metástasis en los ganglios linfáticos. También se encontró que en el grupo no-RT, la expresión TAZ fue significativamente mayor en las etapas de tumores I-III en comparación con tumores en etapa IV, y en tumores no mucinosos comparación con los tumores mucinosos. Desde la etapa IV se considera como tumor metastásico distante, y el cáncer mucinoso es más propenso a desarrollar metástasis y la agresividad, con lo que sugiere que la expresión TAZ puede desempeñar un papel importante en el desarrollo de diferentes etapas y tipos histológicos de cáncer rectal.
por otra parte, la fuerte expresión TAZ se correlacionó positivamente con FXYD-3 y de livin expresión en el grupo de no-RT. Se sugiere que FXYD-3 es upregulated temprano en el proceso de transformación maligna [25]. Del mismo modo, la expresión upregulated de livin se ha implicado en la tumorigénesis y la metástasis en tumores epiteliales tales como el cáncer de colon [26]. Dado que se encontraron correlaciones significativas entre la expresión TAZ con el programa Livin, MAC30 y FXYD-3 en la misma cohorte de pacientes, lo hicimos
in silico
análisis de las interacciones proteína-proteína entre TAZ-viviendo, TAZ-MAC30 y TAZ-FXYD -3. estudios de acoplamiento molecular, a saber. predijo la energía libre de unión, área de superficie de unión, etc., de las mejores poses, así como sus valores promedio para todos los treinta superiores plantea de cada complejo también apunta hacia la posible interacción funcional con TAZ las oncoproteínas mencionados. Por otra parte, Makaryan
et. Al
., [27] observó aumento en la respuesta apoptótica después de TAZ knock-down. Así TAZ sobreexpresión posiblemente está relacionado con la lucha contra la apoptosis y el crecimiento celular anormal. Durante el ciclo celular, los genes de enzimas glicolíticas se sobreexpresa en el momento de la síntesis de ADN activa [28]. Asimismo, varios oncogenes (c-myc, HIF1α, Akt) o supresores tumorales (p53) están implicadas en la transactivación de enzimas glucolíticas [29]. La activación de estos genes en correlación con TAZ sobreexpresión también puede implicar la desregulación mitocondrial. Por lo tanto, nuestros resultados indican que la expresión fuerte TAZ en asociación con otras oncoproteínas podría estar directamente relacionado con el proceso de desarrollo de cáncer de recto. Más estudios para dilucidar la relación entre estas oncoproteínas TAZ y mejoraría nuestra comprensión de la función TAZ en la carcinogénesis rectal.
A pesar de la radioterapia junto con la cirugía han mejorado la supervivencia, todavía hay una gran proporción de los pacientes que recibieron RT sin cualquier beneficio, pero experimentar efectos secundarios. Los avances en biología molecular han proporcionado una oportunidad para seleccionar los pacientes adecuados para la terapia y determinar el pronóstico. Sin embargo, hasta el momento, ningún método ha llegado a su uso clínico en este contexto,
es decir
., Todavía existe una gran brecha entre los descubrimientos de laboratorio y la práctica clínica. Interesadamente, se encontró que la expresión fuerte TAZ en biopsias de grupo de RT preoperatoria se correlacionó significativamente con la recurrencia distante, independiente del sexo, la edad, las fases del tumor y el grado. Por lo tanto, la presente investigación sugiere que, TAZ, puede ser considerado como un factor para la selección de grupos de pacientes con cáncer rectal para RT preoperatoria.
Dado que la expresión TAZ estaba relacionado con la progresión del tumor, se investigó además si TAZ estaba relacionada con la respuesta a RT. Curiosamente, encontramos que la RT redujo significativamente la expresión TAZ en el cáncer de recto. En metástasis de ganglios linfáticos, el efecto de la RT no fue significativa. Estos resultados sugieren que el efecto de la RT TAZ disminuye la expresión de los cánceres rectales solamente se limita a los pacientes con cáncer no metastásico rectal localmente avanzado, pero no los cánceres metastásicos. Nuestros resultados indican que la expresión fuerte TAZ en los pacientes quienes se sometieron a RT preoperatoria se correlacionó positivamente con FXYD-3, de Livin y expresión MAC30, y aún más TAZ funcionalmente interactuado con estas proteínas lo que indica que TAZ puede actuar junto con FXYD-3, de Livin y MAC30 en respuesta de la radiación.
en conclusión, la fuerte expresión de TAZ estuvo involucrado en el desarrollo del cáncer de recto y la radiación parecía disminuir la expresión TAZ de los cánceres rectales primarios. Por otra parte, TAZ era un marcador predictivo independiente de recurrencia a distancia en pacientes con cáncer rectal con RT preoperatoria, por lo tanto, la selección de pacientes para la RT preoperatoria y también la orientación de proteínas TAZ utilizando antagonista de la TAZ, junto con RT preoperatoria puede ser una mejor opción de tratamiento para el cáncer rectal.
Apoyo a la Información
Figura S1.
perfiles de los pacientes con cáncer rectal incluyendo biopsias (tomadas antes de la cirugía) y muestras quirúrgicas de distancia normal (DN), adyacente normal (AN), el tumor primario (PT) y de los ganglios linfáticos del tumor metastásico (MT).
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figura S2.
Relación entre la expresión y en general TAZ (A, C) o supervivencia libre de enfermedad (B, C) en pacientes de cáncer de recto. A y C representa el grupo RT, B y D el grupo de no-RT
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Reconocimientos
los autores también agradecen al Dr. Veronika Brodin Patcha (Departamento de Oncología, Universidad de Linköping, Suecia) por su ayuda para la revisión lingüística del manuscrito.