Extracto
Hemos informado anteriormente de una tecnología antisentido, 'vectores' snoMEN, para bajar ronda selectiva de ARNm que codifica la proteína utilizando snoRNAs humanas manipuladas para contener regiones cortas de secuencia de complementariedad con el ARNm diana. A continuación se caracteriza el uso de vectores snoMEN para apuntar el derribo de las transcripciones de ARN micro primarias. Documentamos el knock-down específico de miR21 en células HeLa utilizando vectores plásmidos que expresan los ARNs dirigidas snoMEN-miR21 y mostrar esto induce la apoptosis. Knock-down depende de la presencia de secuencias complementarias en el vector snoMEN y la inducción de apoptosis puede ser suprimida por la sobre expresión de miR21. Además, también hemos desarrollado vectores lentivirales para la entrega de snoMEN ARN y mostrar esto aumenta la eficiencia de la transducción de vector en muchas líneas celulares humanas que son difíciles de transfectar con vectores plasmídicos. La transducción de vectores lentivirales que expresan snoMEN dirigido a pri-miR21 induce la apoptosis en células de adenocarcinoma de pulmón humano, que expresan altos niveles de miR21, pero no en células primarias humanas. Se demuestra que la supresión mediada por snoMEN de expresión de los genes miARN se evita mediante siRNA knock-down de Ago2, pero no por knock-down de Ago1 o Upf1. snoMEN ARN colocalise con Ago2 en el núcleo celular y nucleolos y pueden ser co-inmunoprecipitó a partir de extractos nucleares por parte de anticuerpos específicos para Ago2
Visto:. Ono H, K Yamada, Avolio F, V Afzal, Bensaddek D, Lamond AI (2015) dirigida knock-down de miR21 transcritos primarios Usando Vectores snoMEN induce la apoptosis en líneas celulares de cáncer humano. PLoS ONE 10 (9): e0138668. doi: 10.1371 /journal.pone.0138668
Editor: Christophe Antoniewski, CNRS UMR7622 & amp; Universidad de París 6 Pierre-et-Marie-Curie, Francia