Extracto
Antecedentes
metabolismo de un carbono parece jugar un papel importante en la reacción de metilación de ADN. La evidencia sugiere que una baja ingesta de vitaminas del complejo B o un alto consumo de alcohol aumenta el riesgo de cáncer colorrectal. Cómo los nutrientes de un carbono afectan el fenotipo isla CpG methylator (CIMP) o
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estado de la mutación en el cáncer de colon sigue siendo incierto.
Métodos
Uso de los cánceres de colon incidente en un gran prospectivo cohorte de mujeres (el Nurses 'Health Study), que determina
BRAF
estado (N = 386) y el estado CIMP (N = 375) de 8 marcadores CIMP-específicos [
CACNA1G
,
CDKN2A gratis (p16),
CRABP1
,
IGF2
,
MLH1
,
Neurog1
,
RUNX3
y
otros 8 islas CpG (SOCS1
], y
CHFR
,
HIC1
,
IGFBP3
,
MGMT
, menta -1, menta-31, p14, y
WRN
). Se examinó la relación entre la ingesta de nutrientes de un carbono y el alcohol y el riesgo de cáncer de colon, por
BRAF
estado de la mutación o CIMP.
Resultados
Una mayor ingesta de folato se asoció con una tendencia a la baja riesgo de CIMP-bajo /0 tumores [total de la ingesta de folato ≥400 mg /día vs. & lt; 200 mg /día; el riesgo relativo multivariante = 0,73; 95% CI = 0,53-1,02], mientras que la ingesta total de folato no tenía ninguna influencia sobre los riesgos CIMP-alta de tumores (P
heterogeneidad = 0,73). Ni la vitamina B
6, metionina o la ingesta de alcohol aparecieron diferencialmente influencia corre el riesgo de CIMP-alta y baja CIMP-0 /tumores. Uso del panel de CIMP 16-marcador no alteró sustancialmente nuestros resultados. Vitaminas del complejo B, metionina o la ingesta de alcohol no afectó el riesgo de cáncer de colon diferencialmente por
BRAF
de estado.
Conclusiones
Este estudio de epidemiología molecular patológica sugiere que el consumo de bajo nivel de folato puede estar asociado con un mayor riesgo de tumores CIMP /0-bajos de colon, pero no el de CIMP-alta tumores. Sin embargo, la diferencia entre CIMP-alta y baja CIMP-0 /riesgos de cáncer no fue estadísticamente significativa, y son necesarios para confirmar estas observaciones estudios adicionales
Visto:. Schernhammer ES, Giovannucci E, Baba Y, Fuchs CS , Ogino S (2011) Vitaminas B, metionina y la ingesta de alcohol y el riesgo de cáncer de colon en relación con
BRAF
La mutación y la isla CpG methylator fenotipo (CIMP). PLoS ONE 6 (6): e21102. doi: 10.1371 /journal.pone.0021102
Editor: Qian Tao, la Universidad China de Hong Kong, Hong Kong
Recibido: 10 Enero, 2011; Aceptado: 20-may de 2011; Publicado: 27 Junio 2011
Derechos de Autor © 2011 Schernhammer et al. Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos de la licencia Creative Commons Attribution License, que permite el uso ilimitado, distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que el autor original y la fuente se acreditan
Financiación:. Este trabajo fue apoyado por el Instituto Nacional de Estados Unidos de Salud (NIH) [CA87969 P01 (a S. Hankinson), CA55075 P01 (a W. Willett), CA127003 P50 (al CSF), K07 CA122826 (SO), R01 CA151993 (para SO)], el Fondo de la Familia Bennett para terapias dirigidas Investigación; y la Fundación de la Industria del Entretenimiento través colorrectal Alianza Nacional de Investigación del Cáncer. El contenido es responsabilidad exclusiva de los autores y no representa necesariamente la opinión oficial del NCI o NIH. Los donantes no tenía papel en el diseño del estudio, la recogida y análisis de datos, decisión a publicar, o la preparación del manuscrito
Conflicto de intereses:.. Los autores han declarado que no existen intereses en competencia
Introducción
metilación del ADN es un mecanismo epigenético importante en el silenciamiento de genes y imprinting [1], [2], [3]. Aberrante silenciamiento epigenético de supresores tumorales por la isla CpG hipermetilación se observa con frecuencia en tumores malignos humanos. El fenotipo isla methylator CpG (CIMP) se caracteriza por propensión a generalizada hipermetilación isla CpG [4], [5]. Alto grado de CIMP (CIMP-alta) es un fenotipo distinto en el cáncer colorrectal, asociada con la edad avanzada, el sexo femenino, la localización del tumor proximal, la inestabilidad de microsatélites,
BRAF
mutación, y el tumor de alto nivel LINE-1 metilación [6], [7], [8], [9]. Sin embargo, los factores etiológicos de la CIMP-alta permanecen en gran parte especulativa. A pesar de una fuerte asociación entre CIMP y
BRAF
mutación en el cáncer colorrectal [5], [6], [7], [8], la hipótesis de que
BRAF
mutación hace que la metilación aberrante de islas CpG [10] ha sido muy controvertida [11]. Recientemente, DNMT3B ha emergido como una de las causas de la isla CpG metilación en tumores [12], [13], [14]; Sin embargo, la asociación entre DNMT3B y CIMP en el cáncer colorrectal es a lo más modesto [13] y la metilación isla CpG del tumor parece estar influenciada por factores adicionales.
El ácido fólico y vitaminas B relacionados
2, B
6 y B
12, son esenciales para la metilación del ADN y la producción de nucleótidos de purina y pirimidina requeridos para la síntesis de ADN. evidencia epidemiológica considerable sugiere que una dieta baja en folato se asocia con un mayor riesgo de cáncer de colon [15], [16], [17]. Del mismo modo, el consumo de alcohol aumenta el riesgo de cáncer colorrectal [18], probablemente a través de sus efectos anti-folato [19]. Recientemente hemos demostrado que la ingesta de folato adecuado y bajo consumo de alcohol tienen un efecto protector contra LINE-1 hypomethylated cáncer de colon, pero no contra LINE-1 hypermethylated cáncer de colon [20]. Mientras que un estudio reciente ha demostrado una asociación entre el folato y la isla CpG metilación en el tejido colorrectal normal [21], la forma de folato o de otra ingesta de vitamina B influye en la metilación isla CpG o
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mutación en el tumor sigue siendo menos bien entendida, y la datos de la literatura son algo limitadas [22], [23], [24], [25].
por lo tanto, evaluaron si la influencia de folato sobre el riesgo de cáncer de colon fue distinto según el CIMP y
BRAF
estado. Para este fin, hemos utilizado muestras de tumor de un estudio de cohorte prospectivo que ha demostrado previamente que la ingesta de ácido fólico se asoció inversamente con el riesgo de cáncer de colon [26]. La disponibilidad de información detallada y actualizada sobre las muestras de admisión y tumorales de folato dentro de esta cohorte permite un examen más exhaustivo de los efectos de la ingesta de folato sobre el riesgo de desarrollar cánceres CIMP-alta y no CIMP-alta de colon, así como por
BRAF
estado mutacional. La especificidad de la asociación entre el folato y el cáncer de colon a fenotipos tumorales particulares mejoraría aún más en el caso de la causalidad y proporcionaría importantes conocimientos sobre los mecanismos cancerígenos de la deficiencia de folato.
Materiales y Métodos
Sujetos de estudio
Estudio de Salud de enfermeras (NHS) se estableció en 1976, cuando 121,701 enfermeras registradas femenina de Estados Unidos, 30 a 55 años de edad, completaron un cuestionario enviado por correo [27]. Seguimiento dentro de la cohorte actualmente supera el 92%. Hemos enviado cuestionarios bienales para actualizar la información e identificar nuevos casos diagnosticados de cáncer. En 1980, el cuestionario NHS se amplió para incluir una evaluación validada de la dieta, y evaluaciones dietéticas actualizadas han llevado a cabo cada cuatro años [28]. Las juntas de revisión institucional en Brigham y Hospital de Mujeres y la Escuela de Harvard de Salud Pública aprobó este estudio y el procedimiento de consentimiento.
Evaluación de nutrientes
La ingesta dietética de varios nutrientes, incluyendo ácido fólico, vitamina B
6, B
12, y la metionina se evaluaron mediante cuestionarios de frecuencia alimentaria semicuantitativa autoadministrados (SFFQ), que se completaron en 1980, 1984, 1986, 1990, 1994, y 1998. las ingestas de nutrientes se calcularon multiplicando el frecuencia de consumo de cada alimento se especifique lo informado por el contenido de nutrientes del tamaño de la porción especificada y luego sumando estos productos para todos los productos alimenticios. También se recogió información sobre el uso de multivitaminas y el uso de otros suplementos, incluyendo detalles sobre qué marcas y tipos. A continuación, se realizará una extensa base de datos de formulación de suplemento para calcular las contribuciones específicas de nutrientes procedentes de estas fuentes suplementarias. Estos aportes de nutrientes fueron añadidos posteriormente a la ingesta de nutrientes de los alimentos específicos para calcular una ingesta diaria para cada mujer. Este método de evaluación de la dieta ha sido ampliamente validado y su fiabilidad evaluado [28]. El coeficiente de correlación fue de 0,55 para la correlación entre la ingesta total de folato calculada a partir de la década de 1980 cuestionario y las concentraciones de folato de eritrocitos medidos en 1987 en esta cohorte [29]. Por otra parte, la vitamina B
6 de admisión según la evaluación de 1980, 1984, y 1986 SFFQs se ha demostrado que se correlaciona con los registros de la dieta de una semana, con correlaciones que van desde 0,54 a 0.58 [28], [30].
Evaluación de las otras covariables
el alcohol fue la suma de los valores para los tres tipos de bebidas: cerveza, vino y bebidas espirituosas. Asumimos un contenido de etanol de 13,1 g para una lata de 12 onzas (38-dl) lata o botella de cerveza, 11,0 g de un vaso de 4 onzas (12-dl) de vino, y 14,0 g de una porción estándar de los espíritus. En los estudios de validación, el coeficiente de correlación para la correlación entre el consumo de alcohol procedente de la década de 1980 SFFQ y el promedio de cuatro registros de la dieta de una semana fue de 0,90 [31]. Otros factores de riesgo para el cáncer de colon, como el ejercicio físico y el índice de masa corporal en general, han sido evaluados cada dos años en los principales cuestionarios.
verificación de los casos de cáncer de colon y tejido tumoral de adquisiciones
Se incluyeron los cánceres de colon informó en los cuestionarios bienales entre el retorno de la década de 1980 cuestionario y 1 de junio de 2004. Con el permiso de los participantes del estudio, el cáncer de colon se confirmó a través de "revisión de las enfermeras registros de los médicos. Si se le negó el permiso, se intentó confirmar el cáncer de auto-reporte con una letra adicional o una llamada telefónica. También se buscó en el Índice Nacional de Muerte para identificar las muertes entre los que no respondieron a cada cuestionario de dos años. El Índice Nacional de Muerte computarizado es un método altamente sensible para identificar las muertes en esta cohorte [32]. Para todas las muertes atribuibles al cáncer de colon, se solicitó el permiso de miembros de la familia (sujeto a la regulación estatal) para revisar los registros médicos. Se obtuvieron muestras de éxito el 58% de los casos (n = 527) de más de 22 años de seguimiento en el NHS. No hubo diferencias significativas en las variables demográficas o de exposición entre los casos con tejido disponible y los que no tienen tejido disponible [33].
extracción de ADN genómico y la secuencia de
BRAF
Genómica se extrajo el ADN a partir de tejido incluido en parafina, y la amplificación de todo el genoma se realizó por PCR usando cebadores al azar 15-mer [34]. PCR y secuenciación apuntada
BRAF
codón 600 se realizaron como se describe anteriormente [35].
-PCR en tiempo real (MethyLight) para la metilación del ADN cuantitativa
Para determinar el estado de CIMP , cuantificamos la metilación del ADN en ocho promotores CIMP-específicas. tratamiento con bisulfito en el ADN genómico y la posterior PCR (MethyLight) en tiempo real [36] fueron validados y realizó como se describió anteriormente [37]. Los ocho promotores CIMP-específicas que se cuantificó (
CACNA1G
,
CDKN2A gratis (p16),
CRABP1
,
IGF2
,
,
Neurog1
,
RUNX3
, y
SOCS1
) [5], [38] fueron seleccionados a partir del examen de 195 islas CpG [5], [39] . CIMP-alta se definió como ≥6 /8 marcadores metilados utilizando el panel de CIMP ocho marcador y CIMP-bajo /0 se definió como 0/8 a 5/8 marcadores metilados, de acuerdo con los criterios previamente establecidos [38]. En los análisis secundarios, hemos añadido ocho marcadores más (
CHFR
,
MGMT
,
P14
,
WRN
,
HTC1
,
MINT1
,
MINT31
,
IGFBP3
) [7] para un panel de 16 marcadores. El uso de este panel de 16 marcadores, hemos creado dos categorías de CIMP (CIMP-alta definidos como ≥11 /16 marcadores metilados, y CIMP-bajo /0 como 0/16 a 10/16 marcadores metilados). Concordancia de CIMP-alta de diagnóstico entre los paneles de 8 marcadores y 16 marcadores fue alta. (0,97; k = 0,89) [7]
Análisis estadístico
Se excluyeron las mujeres que no completaron datos de la dieta inverosímiles del 1980 al cuestionario de la dieta basal o grabadas (n = 29.279), reportaron una historia de referencia de cáncer (excepto cáncer de piel no melanoma; n = 3.627), enfermedad inflamatoria intestinal, cáncer de colon hereditario sin poliposis, o un síndrome de poliposis familiar ( n = 103), o habían muerto antes de la línea de base (n = 1). Después de estas exclusiones, 88,691 mujeres fueron elegibles para el análisis y devengan tiempo de seguimiento que comienza en el mes de regreso de su cuestionario inicial y final en el mes de diagnóstico de cáncer de colon, la muerte por otras causas, o el 1 de junio de 2002 lo que ocurriera primero. En un análisis previo de esta cohorte, la ingesta de ácido fólico se asoció significativamente con el riesgo de cáncer de colon, pero no tenía ninguna influencia sobre el riesgo de cáncer de recto [26]; como resultado, no se consideró el cáncer de recto incidente entre los participantes del estudio en este análisis. Al igual que los casos de cáncer de recto, los casos de cáncer de colon para los que no hemos podido cuantificarse la metilación del ADN fueron censurados de los análisis a su fecha de diagnóstico y no se incluyeron como criterios de valoración.
Las tasas de incidencia de cáncer de colon calculados para los participantes en una categoría específica de la ingesta de folato dividiendo el número de casos incidentes por el número de años-persona. Hemos calculado los riesgos relativos (RR) dividiendo la tasa de incidencia en una sola categoría, la tasa de incidencia en la categoría de referencia y utilizamos riesgos proporcionales de Cox para controlar el modelado de múltiples variables simultáneamente y para calcular los intervalos de confianza del 95% (IC). Con la excepción del ácido fólico, vitamina B
6, metionina, y el alcohol, para lo cual se utilizó la información de línea de base en los análisis primarios, se utilizó la información más actualizada para todas las covariables antes de cada intervalo de dos años.
para comparar el efecto específico de la ingesta de ácido fólico y otros nutrientes en el riesgo de cáncer de colon acuerdo con CIMP y
BRAF
estado, que emplea un método descrito previamente de competir análisis de riesgos utilizando la duplicación método de regresión de Cox [40], [41]. Esta metodología permite la estimación de los coeficientes de regresión separados para la ingesta de nutrientes estratificada por el tipo de resultado [por ejemplo, CIMP-alta del cáncer vs-CIMP baja /0 del cáncer;
BRAF mutación
(+) frente a (-)]. Se evaluó la significación estadística de la interacción entre las estimaciones de riesgo según el tipo de tumor usando una prueba de razón de verosimilitud, que comparó el modelo que permitió a las asociaciones independientes de ácido fólico y otros nutrientes de acuerdo con CIMP /
BRAF
de estado con un modelo que supone una asociación común. Nosotros interpretamos de forma conservadora significación estadística de los resultados debido a múltiples pruebas de hipótesis. Para tener en cuenta múltiples pruebas (cinco nutrientes de un carbono se examinaron) ajustamos nuestro nivel de significación de p = 0,01 (= 0,05 /5). Se utilizó SAS versión 9.1.3 (Cary, NC) para todos los análisis. Todos los valores de p son de doble cara.
Resultados
Entre 88,691 mujeres incluidas en estos análisis, los que tienen una ingesta inicial de folato de menos de 200 mg /día eran ligeramente más propensos a fumar ya ser sedentarios, en comparación con las mujeres con 400 g ingesta de folato al día o más (Tabla 1). También era menos probable que el uso de aspirina o postmenopáusicas hormonas con regularidad. Además, sólo el 8% de las mujeres con menos de 200 mg /día de ingesta de folato multivitaminas utilizados, mientras que entre los que tienen 400 mg de ácido fólico todos los días o más, el 84% reportó el uso de multivitaminas actual. Más detalles se han reportado en otras partes [42].
documentó 375 casos incidentes de cáncer de colon accesible para la cuantificación de la metilación del ADN durante 1,861,934 personas-año. El uso de ensayos de metilación del ADN en estos 375 cánceres de colon, se encontró que 87 (23%) tumores de ser CIMP-alta. Del mismo modo,
BRAF
estado mutacional del gen de 386 casos incidentes de cáncer de colon accesibles documentados durante años 1,861,927 personas, de las cuales 86 (22%) fueron
BRAF mutado
.
en nuestros estudios anteriores [18], [26], [43], [44], se observó una asociación inversa entre el folato y vitamina B
6 de admisión y de riesgo de cáncer de colon entre todos los casos en nuestra cohorte (Tablas 1 y 2 ).
además, evaluó la influencia de los nutrientes de un carbono en el riesgo de cáncer de colon en función del estado CIMP en el cáncer de colon. En general, ninguna de las asociaciones examinados alcanzó significación estadística al nivel de significación conservadora (p = 0,01). Para la ingesta de folatos totales (Tabla 2), el beneficio del consumo más allá de 200 mg por día parecía estar restringido a CIMP-bajo /0 cánceres. En comparación con las mujeres con menos de 200 mg de ácido fólico por día, el RR multivariado para el desarrollo de /0 del cáncer de colon CIMP-bajo entre los que se informa de 400 mg o más de la ingesta de ácido fólico por día fue de 0,73 (IC del 95%, 0,53 a 1,02; P para la tendencia = 0,15), aunque la significación estadística no se alcanzó. Por el contrario, la ingesta de folatos totales no tuvo influencia en el riesgo de tumores CIMP-alta (RR, 0,98; IC del 95%, 0,54-1,77).
Además, examinó la influencia de la vitamina B
6 y B
12 de admisión de acuerdo con el estado CIMP (Tabla 2). El beneficio de la vitamina B
6 ingesta también apareció confinado a CIMP-bajo /0 del cáncer (RR multivariable 0,77; IC del 95%, 0,48 a 1.23 comparando quintiles extremos), mientras que B
6 de admisión no tuvo influencia en el riesgo de CIMP-alta tumores. Sin embargo, no hubo efecto diferencial de la vitamina B
12 sobre el riesgo de cáncer de colon en un estado de CIMP tumoral y ninguna de las asociaciones observadas alcanzó significación estadística.
También examinamos la influencia de la ingesta de metionina y la ingesta de alcohol según al estado CIMP (Tabla 2). Hay que parecía ser una modesta reducción mayor en el riesgo de cáncer CIMP-alta con el aumento de la ingesta de metionina. No se observó una influencia significativa de la ingesta de alcohol en el riesgo de cáncer de colon, y el efecto no parece diferir según el estado CIMP.
Al utilizar nuestro panel de 16 marcadores, en general, los resultados se mantuvo sin cambios (datos no se muestra).
del mismo modo, para
BRAF
estado de mutación, ninguno de los nutrientes examinados muestran un efecto significativo en general, o por el estado mutacional (Tabla 3).
Discusión
Nuestro estudio es un estudio prototipo en "
Molecular Patológica Epidemiología
", el concepto de lo que ha sido descrito recientemente y consolidado por Ogino et al. [45]. Representa un campo relativamente nuevo, especializado de la epidemiología en base a la clasificación molecular del cáncer. En epidemiología molecular patológica, un factor etiológico conocido o sospechoso es examinado en relación con un cambio molecular somática específica, con el fin de llegar a comprender bien el mecanismo carcinogénico [45]. Suponga, un factor etiológico determinado (estilo de vida, la dieta, ambiental o genético) es la hipótesis de causar un cierto cambio molecular somática. Si somos capaces de demostrar una relación específica entre el factor etiológico y el cambio molecular, puede proporcionar evidencia de causalidad. Además, para una persona que tiene una susceptibilidad a un cambio molecular somática específica que conduce al cáncer, que puede ser capaz de desarrollar una medida preventiva personalizada, que se dirige a moléculas o vías específicas [45]. Por lo tanto, la investigación epidemiológica patológica molecular puede contribuir a descifrar el proceso carcinogénico, así como la optimización de las estrategias de prevención [45].
En este estudio de cohorte prospectivo, hubo sugerencias para tanto bajo folato y vitamina B
6 ingestas que se asocia con un mayor riesgo de los cánceres de colon /0 CIMP-bajos, pero no con el de CIMP-altos tumores. La elevación en el riesgo se limita principalmente a los participantes con los niveles más bajos de ácido fólico y vitamina B
6 de admisión. Además, se observó que el efecto de una ingesta de metionina más alto en el riesgo de cáncer de colon moderadamente diferenciado por el estado CIMP tumoral, con el efecto beneficioso de la metionina que se limita principalmente a CIMP-alta cáncer. No hubo diferencias en los efectos del ácido fólico o vitaminas del grupo B en los cánceres de colon estratificados por
BRAF
de estado. Por otra parte, ninguna de las asociaciones observadas alcanzó significación estadística.
Mecánica, parece plausible que la deficiencia de folato crónica puede estar implicado en la isla CpG metilación [46]. En una población japonesa, la reducción de la actividad de la enzima metilentetrahidrofolato reductasa (MTHFR) debido a la
MTHFR
codón 429 variante (rs1801131), perjudicando de este modo el metabolismo del folato, se ha asociado con tumores CIMP-alta en el colon proximal [ ,,,0],47]. En una población caucásica, la variación genética en el
MTHFR
variante rs1801131 parece aumentar el riesgo de tumores CIMP-alta de colon [48], [49] aunque esto no ha sido confirmado por los datos de un estudio de cohorte Países Bajos [22] , [50]. La relación entre el
MTHFR
SNP y CIMP en el cáncer de colon es fuerte en combinación con una baja ingesta de folato y metionina, así como el consumo elevado de alcohol [49], [51]. Un estudio más reciente sugiere que la baja expresión de gamma glutamil hidrolasa (GGH) está fuertemente asociado con CIMP-alta tumores, con un mayor apoyo para un papel del metabolismo de un carbono en este fenotipo [52].
estudio de caso-control previo de 1.154 tumores de colon evaluó la influencia de la ingesta de nutrientes de un carbono en la CIMP, así como
BRAF
estado en estos tumores y los encontró no esté asociado con alguna CIMP-alta o
BRAF
mutación [51]. Sin embargo, en comparación con nuestro estudio actual, no cuantitativo PCR específica de metilación en un panel diferente de la isla CpG, y una definición menos estricta de CIMP-alta (2 o más de 5 marcadores metilados) se utilizaron en este estudio. Curiosamente, los autores también observaron que la obesidad se asocia con un riesgo dos veces mayor de tener un tumor no CIMP-alta [51]. En nuestro estudio, ajustando cuidadosamente después de la obesidad, folato y vitamina B
6 (la ingesta de los cuales está altamente correlacionado en nuestra población) se asociaron con riesgo de CIMP-bajo /0 tumores.
otro estudio de caso a caso en el estudio de cohortes Países bajos, los pacientes con cáncer colorrectal en el grupo de baja ingesta de folato /alta de alcohol son más propensos a tener la hipermetilación del promotor que los pacientes en el grupo de alto folato /bajo contenido de alcohol [53]. Cabe destacar que el estudio de cohortes Países Bajos han demostrado una posible asociación entre la vitamina B
6 y
MLH1
metilación [22] y una asociación inversa entre el
MTR
rs1805087 polimorfismo y CIMP en los hombres [22 ].
En uno de los estudios más recientes para evaluar las asociaciones entre el metabolismo de un carbono y el cáncer de colon en un CIMP /
BRAF
estado, hasta la fecha, utilizando un enfoque de casos y controles anidados dentro de la norte de Suecia Salud y Enfermedad de estudio (190 casos y controles emparejados 1:2) [24], van Guelpen et al. mostrar un menor riesgo de /n CIMP-alta-n CIMP tumores colorrectales bajas con muy bajos niveles de folato. En conjunto, se está acumulando evidencia para la hipótesis de que un equilibrio entre diversos intermedios metabólicos de metil-grupo influye en la reacción de metilación isla CpG específica del locus. Utilizando datos de un ensayo de prevención de adenoma de ácido fólico y ácido acetilsalicílico, por último, los mayores niveles de folato RBC, pero no mayor consumo de folato en la dieta, se asoció con mayores niveles de metilación [21].
Además de la influencia de los nutrientes de un carbono , la evidencia sugiere que el contexto de la secuencia de ADN local puede influir en el montaje del equipo de reacción de metilación y la metilación del ADN específica de locus. Los estudios han demostrado que
cis-actuando elementos
causa metilación alelo-específicas en el genoma de mamíferos [54], [55], [56]. Por lo tanto, las variaciones en la línea germinal
cis
elementos pueden influir en el estado epigenético incluyendo la metilación del ADN-actuando. El
MLH1 promotor
rs1800734 SNP se ha asociado con
MLH1
la metilación del promotor [57], [58] y MSI [59] en el cáncer colorrectal. Otro estudio ha demostrado que
MGMT promotor
rs16906252 SNP está fuertemente asociada con
MGMT
la metilación del promotor y la pérdida de expresión en el cáncer colorrectal [60], y con
MGMT metilación en
células de sangre periférica y la mucosa colónica normal en individuos sin cáncer colorrectal [61], [62]. Queda por investigar si estos u otros
cis-actuando
germinal variantes interactúan con otros factores relacionados con un carbono-para modificar la susceptibilidad a la metilación aberrante del ADN.
Nuestro estudio tiene varias fortalezas importantes. En primer lugar, porque se recopiló información detallada y actualizada sobre una serie de covariables en la dieta y estilo de vida pertinentes a la carcinogénesis de colon más de 22 años de seguimiento y con altas tasas de seguimiento, hemos sido capaces de examinar la exposición a largo plazo a los nutrientes de un carbono y tener en cuenta los factores de confusión importantes. En segundo lugar, nuestro estudio es prospectivo, eliminando las preocupaciones sobre el sesgo de recuerdo diferencial, particularmente con respecto a nuestras evaluaciones dietéticas. Cualquier sesgo restante de exposición errores de clasificación eran tanto, es probable no diferencial por naturaleza, sesgar nuestros resultados sólo hacia el valor nulo. Además, hemos logrado vincular estos nutrientes-evaluados a través de un cuestionario de frecuencia alimentaria semicuantitativa (SFFQ): para otras variables relevantes en los análisis anteriores, lo que indica que el error de medición no es lo suficientemente grande como para ocultar cualquier asociaciones reales.
Limitaciones de la nota se refieren a la fortificación de folato, que se hizo obligatorio en 1998 [63]. Tenemos múltiples evaluaciones de la ingesta de nutrientes de un carbono antes de la fortificación. Además, nuestros resultados se mantuvo sin cambios cuando se está restringido a los casos que se presentaron antes de la fortificación de folato (1998), que también se ha demostrado en los análisis anteriores [20], [42], [64]. Otras limitaciones y advertencias específicas para la epidemiología molecular patológica, en general, se han discutido en otra parte [45]
No podemos excluir la posibilidad de confusión residual como una posible explicación de nuestros hallazgos.; Sin embargo, en nuestros análisis multivariante que incluía muchos factores de riesgo conocidos o sospechosos de cáncer de colon, las estimaciones de riesgo multivariado no difirieron significativamente de los resultados ajustados a la edad. Además, no hemos podido obtener tejido tumoral de todos los casos de cáncer de colon confirmado detectado en la cohorte Estudio de Salud de Enfermeras, pero los factores de riesgo en estos casos no diferían considerablemente de las que en los casos con tejido tumoral disponible. Por último, incluso antes de la fortificación obligatoria en 1998 [63], nuestros participantes aún tenían relativamente alta de ácido fólico y vitamina B niveles
6. Por lo tanto, es posible que podríamos haber encontrado asociaciones más fuertes en el presente estudio si nuestros niveles de folato habrían incluido una gama aún más baja
.
En resumen, hemos demostrado que la reducción del riesgo de cáncer de colon asociado con folato repleta el estado es un poco limitado a CIMP-bajo /0 cánceres. son necesarios para dilucidar el mecanismo exacto de una anormalidad en el metabolismo de un carbono que lleva a la metilación aberrante de islas CpG estudios adicionales.
Reconocimientos
Nos gustaría dar las gracias a Caroline Niu de soporte de programación, y la participantes del Estudio de Salud de Enfermeras, por su cooperación y participación.