Extracto
Orientación de anticuerpos fluorescentes de cáncer metastásico ha sido demostrada por nuestro laboratorio para permitir la visualización del tumor y la cirugía guiada por fluorescencia eficaz. El objetivo del presente estudio fue determinar si la insulina-como factor de crecimiento-1 del receptor (IGF-1R), anticuerpos conjugados con fluoróforos brillantes, podrían permitir la visualización de cáncer de colon metastásico en modelos de ratones desnudos ortotópico. anticuerpo IGF-1R (clon 24-31) se conjugó con 550 nm, 650 nm o pegilado 650 nm fluoróforos. Subcutáneas, ortotópico, y metástasis hepática modelos de cáncer de colon en ratones desnudos fueron atacados con los anticuerpos IGF-1R fluorescentes. transferencia Western confirmó la expresión de IGF-1R en HT-29 y HCT 116 líneas celulares de cáncer de colon humano, tanto que expresa la proteína verde fluorescente (GFP). El marcaje con anticuerpo de IGF-1R fluoróforo conjugado demostró focos fluorescente en la membrana de células de cáncer de colon. tumores 116-GFP Subcutaneously- y ortotópica trasplantados-HT-29-GFP y HCT brillantes fluoresced en las longitudes de onda más largas después de la administración intravenosa de anticuerpos fluorescentes de IGF-1R. HCT tumores 116-GFP trasplantados ortotópicamente-fueron brillantes etiquetados por anticuerpos de IGF-1R fluorescente tal que podían obtenerse imágenes de forma no invasiva en las longitudes de onda más largas. En un modelo de metástasis hepática experimental, los anticuerpos IGF-1R conjugados con PEGilado 650 nm fluoróforos destacó selectivamente las metástasis hepáticas, lo que podría obtenerse imágenes de forma no invasiva. Las metástasis hepáticas IGF-1R-anticuerpo marcado fluorescente eran muy brillantes en comparación con el hígado normal y el anticuerpo fluorescente etiqueta co-situado con la expresión de la proteína fluorescente verde (GFP) de las células de cáncer de colon. Así pues, el presente estudio demuestra que los anticuerpos IGF-1R fluoróforo conjugado visualizar selectivamente el cáncer de colon metastásico y tener potencial clínico para mejorar el diagnóstico y la cirugía guiada por fluorescencia
Visto:. Parque JY, Murakami T, Lee JY, Zhang Y , Hoffman RM, M Bouvet (2016) del anticuerpo fluorescente Targeting of Insulin-Like Growth Factor-1 receptor visualiza metastásica del cáncer de colon humano en modelos de ratón ortotópico. PLoS ONE 11 (1): e0146504. doi: 10.1371 /journal.pone.0146504
Editor: Surinder K. Batra, Universidad de Nebraska Medical Center, Estados Unidos |
Recibido: 26 de mayo de 2015; Aceptado: 17 de diciembre de 2015; Publicado: 5 Enero 2016
Derechos de Autor © 2016 Park et al. Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos de la licencia Creative Commons Attribution License, que permite el uso ilimitado, distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que el autor original y la fuente se acreditan
Disponibilidad de datos: Todos los datos relevantes están dentro del papel
Financiación:. Este estudio fue apoyado por subvenciones del Instituto Nacional del cáncer CA142669 y CA132971, a MB y anticancerígenas, Inc., y una beca de la Fundación de investigación de Corea del marco del fondo de promoción de la investigación básica del Ministerio de Educación y Desarrollo de Recursos de Salud de Corea 2010-0022990 a JYP. El Instituto Nacional del Cáncer prestado apoyo en forma de salarios de autor MB, pero no tuvo ningún papel adicional en el diseño del estudio, la recogida y análisis de datos, decisión a publicar, o la preparación del manuscrito. Las funciones específicas de este autor se articula en la sección 'autor' contribuciones
Conflicto de intereses:. JYP, TM, y RMH son afiliados no asalariados de anticancerígenos, Inc. YZ es un empleado de anticancerígenos, Inc. contra el cáncer, Inc., comercializa modelos animales de cáncer. No hay otros intereses en competencia. No hay patentes, productos en desarrollo o los productos comercializados para declarar. Esto no altera la adhesión de los autores a todas las políticas de PLoS ONE sobre los datos y compartir materiales.
Introducción
El cáncer colorrectal es la segunda causa principal de muertes relacionadas con cáncer en los países occidentales [1 ]. Desarrollo de la colonoscopia permite la detección temprana y la extirpación de los pólipos adenomatosos precancerosas [2,3]. La resección quirúrgica completa puede curar bien seleccionados los pacientes con metástasis hepáticas [4,5]. Mejora de la formación de imágenes de cáncer de colon metastásico debe aumentar la supervivencia al hacer la colonoscopia y la cirugía más eficaz. Hemos demostrado anteriormente que la orientación del cáncer ortotópico de colon metastásico, incluyendo xenoinjertos ortotópico derivados del paciente (PDOX) modelos, con anticuerpos fluorescentes antígeno anti-carcinoembyronic (CEA) permitieron la visualización tumor mejorada y la cirugía guiada por fluorescencia eficaz (FGS) [6]. Orientación del receptor del factor de crecimiento epidérmico con anticuerpos fluorescentes mejoradas colonoscopia [7].
receptor de tipo I del factor de crecimiento similar a la insulina (IGF-1R) es un receptor transmembrana tirosina quinasa que comprende dos α y dos cadenas beta y es el principal receptor de IGF-I e IGF-II. IGF-1R se expresa en el 51 ~ 100% de los cánceres de colon, según el estudio [8-10]. La elevada frecuencia de expresión en el cáncer de colon y la membrana localización subcelular hacer IGF-1R un objetivo potencial para anticuerpos fluorescentes para permitir la visualización del cáncer, el diagnóstico y FGS [11]. El uso de IGF-1R también tiene potencial clínico adicional, ya que la sobreexpresión de IGF-1R se correlaciona con una supervivencia media más corta de pacientes con cáncer de colon que se someten a cirugía y quimioterapia adyuvante [10].
En el presente informe demuestra la viabilidad de IGF 1R anticuerpos dirigidos fluoróforo conjugado para visualizar el cáncer de colon metastásico en modelos apropiados de ratón.
Materiales y Métodos
líneas celulares de cáncer de colon
La líneas celulares de cáncer de colon humano HT-29 [12] y HCT 116 [13] se mantuvieron en RPMI 1640 suplementado con 10% de suero bovino fetal (Hyclone, Logan, UT), penicilina /estreptomicina (Gibco-BRL, Carlsbad, CA), piruvato de sodio (Gibco-BRL) , bicarbonato de sodio (Cellgro, Manassas, VA), L-glutamina (Gibco-BRL), y aminoácidos no esenciales medio esencial mínimo (Gibco-BRL). Todas las células se cultivaron a 37 ° C en un 5% de CO
2 incubadora.
Construcción de GFP-expresando línea celular de cáncer de colon
La construcción de la proteína fluorescente verde (GFP) que expresa HCT 116 se describe anteriormente [14 a 16]. Para la transducción de genes GFP, 20% confluentes HCT 116 células [17] se incubaron con una mezcla 1: 1 de los sobrenadantes retrovirales de las células de empaquetamiento PT67 y RPMI 1640 (Gibco-BRL, Life Technologies, Inc.) durante 72 h. Las células se recogieron con tripsina /EDTA 72 h después de la incubación con sobrenadantes retrovirales GFP y se subcultivaron en una relación de uno y quince en medio selectivo que contenía 200 g /ml G418. El nivel de G418 se aumentó a 800 mg /ml por etapas. Los clones que expresan GFP fueron aisladas con cilindros de clonación (Bel-Art Products, Pequannock, NJ) por tripsina /EDTA y se amplificaron y se transfieren mediante métodos de cultivo convencionales. Alta GFP clones de expresión se aislaron en ausencia de G418 para & gt; 10 pases para seleccionar para la expresión estable de GFP [14-16].
Ratones
atímicos nu /nu ratones desnudos (AntiCancer Inc., San Diego, CA), 4-6 semanas de edad , se utilizaron en este estudio. Los ratones se mantuvieron en una instalación aislada en virtud de filtración HEPA. Los ratones fueron alimentados con una dieta de roedores autoclave de laboratorio. Todos los procedimientos quirúrgicos de ratón y de formación de imágenes se llevaron a cabo con los animales anestesiados por inyección intramuscular de 50% de ketamina, xilazina 38%, y 12% de maleato de acepromazina (0,02 ml). Los animales recibieron la buprenorfina (0,10 mg /kg ip) inmediatamente antes de la cirugía y una vez al día durante los próximos 3 días para mejorar el dolor. El estado de los animales se controló cada día. Los tumores se midieron con calibres cada dos días. Cuando los tumores se hicieron más de 2 cm o se formó una úlcera profunda, se realizó la eutanasia. Los animales se sacrificaron todos 2-3 semanas después de la cirugía. CO
2 inhalación se utilizó para la eutanasia. Para asegurarse de la muerte después de CO
2 asfixia, se realizó la dislocación cervical. Todos los estudios con animales fueron aprobados por el cáncer, Institucional Cuidado de Animales Inc. y el empleo Comisión (IACUC) de conformidad con los principios y procedimientos descritos en el Instituto Nacional de Salud de Guía para el Cuidado y Uso de Animales con el número de Aseguramiento A3873-1.
conjugación de tinta-anticuerpo
Mouse anticuerpos monoclonales para el IGF-1R (clon 24-31; Thermo Scientific, Rockford, IL, EE.UU.) se conjugaron con DyLight 650, 550 DyLight, o pegilado DyLight 650 colorantes (Thermo Scientific, Rockford, IL, EE.UU.) según las especificaciones del fabricante, asegurando un mínimo de al menos 4: 1 de colorante: proteína [18]. Proteína: concentraciones de colorante se confirmaron utilizando un NanoDrop espectrofotómetro (Thermo Fisher Scientific, Waltham, Massachusetts) [18]
Western blotting
Los lisados celulares se extrajeron en tampón de lisis que contiene 70 mM β-glicerofosfato. , ortovanadato de sodio 0,6 mM, MgCl 2 mM
2, ácido etileno glicol 1 mM, DTT 1 mM (Invitrogen, Grand Island, NY, EE.UU.), 0,5% de Triton-X100, 0,2 mM de fluoruro de fenilmetilsulfonilo, y el 1% de la proteasa cóctel de inhibidores (Sigma-Aldrich, St Louis, MO, EE.UU.). Los lisados se separaron por electroforesis en gel de dodecilsulfato de sodio-poliacrilamida (SDS-PAGE) y se transfirieron a membranas de fluoruro de polivinilideno (Millipore, Billerica, MA, EE.UU.). Las membranas fueron bloqueadas en el 5% (w /v) de leche en polvo desnatada y se sondearon con anticuerpos anti-IGF-1Rα (SC-712, Santa Cruz, Dallas, TX, EE.UU.). Las proteínas inmunorreactivas se visualizaron utilizando el SuperSignal West Pico Substrato quimioluminiscente (Thermo Scientific, Rockford, IL, EE.UU.).
Etiquetado de células vivas in vitro usando anticuerpos fluorescentes de IGF-1R
HT-29 y las células HCT 116 (2 x 10
5) fueron cultivadas durante la noche. anticuerpo IGF-1R (clon 24 a 31) conjugado con DyLight 550 colorante se diluyó a 4 mg /ml en solución salina tamponada con fosfato (PBS, Corning Cellgro, Manassas, VA). El medio de cultivo se aspiró de las células y se añadió el anticuerpo diluido a las células vivas. Las células se incubaron con el anticuerpo durante 1 hora a temperatura ambiente. Las células se lavaron suavemente 2 veces con PBS después de que el anticuerpo se aspiró. Se observaron las células bajo un microscopio confocal FV1000 (Olympus, Tokio, Japón) con luz blanca y 559 nm láser [19].
La inmunohistoquímica
Anti-IGF-1R (clon 24-31 ) conjugado con DyLight 650 se utilizó para la tinción de secciones de tumores en las diapositivas. Los portaobjetos se incubaron con suero normal de burro al 10% durante 1 hora a temperatura ambiente, y se incubaron con el anticuerpo conjugado a temperatura ambiente durante 1 hora en una dilución de 1: 100. Los tejidos se secaron y se observaron con un IV-100 microscopio láser de barrido (Olympus, Tokio, Japón) con un láser de 633 nm [20]. diapositivas suplentes de la misma tejido tumoral congeladas se tiñeron con hematoxilina y eosina y examinados al microscopio óptico.
modelos de ratón ortotópico tumor subcutáneo y
HT-29-GFP y HCT 116-GFP de colon humano las células cancerosas (2 × 10
6) se inyectaron por vía subcutánea en los flancos de ratones desnudos. Cuando los tumores subcutáneos crecieron entre 10 y 20 mm de diámetro, que se recogieron y se fragmentaron en pequeños fragmentos. Los fragmentos de tumor se implantaron de forma ortotópica en el colon de ratones desnudos, como [6,21,22] descrito anteriormente. En pocas palabras, un solo fragmento de 3-mm
3 tumor, que era adecuado para la sutura y también dio como resultado el crecimiento del tumor reproducible, se adjunta a la frontera mesentérica de la pared cecal usando suturas quirúrgicas 8-0 de nylon (Ethilon ™; Ethicon Inc ., Somerville, NJ). Al finalizar, el ciego se devolvió al abdomen y la incisión se cerró en una capa de nylon 6-0 usando suturas quirúrgicas (Ethilon).
modelo de metástasis de hígado
HCT116-GFP cáncer de colon las células (2 x 10
6), con matrigel, se inyectaron en el bazo de ratones desnudos tal como se describe anteriormente [17]. Las metástasis hepáticas aparecieron durante un período de 2-3 semanas.
Imaging
En ambos modelos de tumores subcutáneos y ortotópicos, los ratones fueron inyectados con el anticuerpo de IGF-1R, conjugado con fluoróforo en la cola vena, y luego todo el cuerpo de imagen no invasiva se realizó utilizando el Sistema OV100 de Pequeños Animales de imagen (Olympus, Tokio, Japón) como se describe anteriormente [23]. La dosis óptima de anticuerpo IGF-1R fluoróforo conjugado se determinó mediante la dosis que produce imágenes con la mejor relación tumor a fondo en el modelo de tumor subcutáneo como directamente visualizado con el OV100. Después de todo el cuerpo de formación de imágenes no invasiva en el modelo de tumor ortotópico, ex vivo de formación de imágenes del tumor con la OV-100 se realizó al final del experimento. En el modelo ortotópico-trasplante de hígado, después de asegurar la presencia de metástasis hepáticas mediante formación de imágenes de todo el cuerpo no invasiva con el OV100, los ratones fueron inyectados con anti-IGF-1R (clon 24 a 31) conjugado con PEGilado DyLight 650. Los ratones fueron sacrificados 24 horas después de la inyección y una incisión vertical ventral desde el esternón hasta la parte inferior del abdomen se hizo y luego el hígado fue fotografiada utilizando el OV-100. El hígado entero con metástasis se sacó y se repitió ex vivo de formación de imágenes con el OV-100. La señal de fondo en el hígado nativo se redujo por la elección de filtros de excitación. GFP se excita por un filtro de 460 a 490 nm y la inmunofluorescencia fue excitado con un filtro de 595 a 635 nm.
Análisis de imágenes
El procesamiento de imágenes se realizó con Adobe Photoshop CS3 (Adobe Systems Inc ., San José, California).
resultados
La expresión de IGF-1R en células de cáncer de colon in vitro
Tanto HT-29-GFP y de colon HCT 116-GFP líneas celulares de cáncer expresan pro-IGF-1R y de IGF-1R, tal como se determina con transferencia Western. HT-29-GFP expresa IGF-1R con más fuerza que HCT-116-GFP (Fig 1A). El Western Blot se repitió tres veces, y se observó el mismo resultado cada vez. Después de la incubación con el anticuerpo conjugado fluorescente IGF-1R, sin permeación, múltiples focos fluorescentes se visualizaron en las células HT-29 y HCT 116 en cultivo en monocapa, tal como se observa bajo microscopio de fluorescencia (Figura 1B). Diferencial microscopía de contraste de interferencia confirmó que el anticuerpo conjugado se hace reaccionar con IGF-1R en la superficie de las células cancerosas (Fig 1B)
.
(A) análisis de transferencia Western muestra la expresión de pro-IGF-1R y IGF-1Rα en 200 y 130 kDa en líneas celulares de cáncer de colon, respectivamente (HT-29 y HCT 116). (B) Marcaje de HCT en vivo 116 y las células HT-29 con anticuerpos fluoróforo conjugado 550 nm muestra múltiples focos fluorescentes en la superficie. imágenes de fluorescencia representativas se fusionaron con los correspondientes DIC (contraste diferencial de interferencia) imágenes (x60 objetivo de inmersión en agua con el FV1000, usando el láser de 559 nm).
Orientación de los tumores de colon subcutáneos en ratones desnudos con fluorescente de IGF-1R anticuerpos
Cuando los tumores subcutáneos HT-29-GFP o HCT 116-GFP alcanzaron aproximadamente 10 mm de diámetro, los animales recibieron cada uno un único 10, 30, y 50 g de dosis DyLight 650-conjugado anti-IGF -1R (clon 24-31) en 150 l de PBS a través de la vena de la cola. formación de imágenes del tumor subcutáneo se realiza cuando el diámetro del tumor era de aproximadamente 10 mm. Los ratones fueron imágenes por tanto-campo claro y fluorescencia de iluminación mediante el OV100 después de 48 horas. Con 30 dosis g de conjugado anti-IGF-1R, que produjo las mejores imágenes contrastadas, ambos HT-29 y HCT 116 tumores subcutáneos tenían fluorescencia fuerte en comparación con el fondo (Fig 2A). inmunotinción de fluorescencia se realizó en muestras congeladas de tumores de HCT 116 tumores y se confirmó la presencia de IGF-1R en las membranas celulares de cáncer (Figura 2B).
(A) El ratón que es imaginada tanto bajo luz blanca y fluorescencia iluminación. La intensidad de fluorescencia de los tumores subcutáneos HCT 116 y HT-29 es mucho mayor que el fondo. (B) hematoxilina & amp; eosina (x200, izquierda). Fluorescencia inmunotinción para IGF-1R (x20 objetivo regular, IV-100 microscopio láser de barrido (Olympus) con un láser de 633 nm, a la derecha) de las muestras tumorales HCT 116 congelados muestra la fluorescencia en la membrana de las células cancerosas.
Orientación de los tumores de colon ortotópico en ratones desnudos con anticuerpos IGF-1R fluorescentes
los ratones con tumores implantados ortotópicamente-en el ciego de ratón se inyecta con DyLight 650-conjugado anti-IGF-1R (clon 24 a 31) anticuerpo con una sola dosis de 30 mg a través de la vena de la cola 14 días después de la implantación del tumor. Imaging se realizó antes y después de abrir el abdomen de los ratones. El tamaño del tumor fue de aproximadamente 10 mm. El OV100 detectó fluorescencia tumor de forma no invasiva, por formación de imágenes abierta intravital, así como ex-vivo (Fig 3). La fluorescencia se observó en la piel, la vejiga y los contenidos intestinales, pero a baja intensidad. Se detectó
fluorescencia de los tumores de colon ortotópicamente trasplantados en el ciego antes y después de la laparotomía abdominal. Además, se detectó la fluorescencia del tumor resecado. fluorescencia débil también se detectó a partir de la piel y, la vejiga y los contenidos intestinales, pero a una intensidad mucho menor que el tumor. Las flechas blancas indican tumor de colon.
Orientación de metástasis hepáticas de cáncer de colon en ratones desnudos con anticuerpo de IGF-1R fluorescente
Tres semanas después de la inyección de las células HCT 116-GFP inyectadas en el ratón bazo, la presencia de metástasis en el hígado se observó mediante formación de imágenes de todo el cuerpo no invasiva. Los ratones se trataron luego con PEGilado DyLight 650-conjugado anti-IGF-1R (clon 24 a 31) con una sola dosis de 90 mg a través de la vena de la cola y se sacrificaron 24 horas después de la inyección de anticuerpos. Hicimos formación de imágenes dentro de las 24 horas en el modelo de metástasis de hígado porque nuestra experiencia anterior mostró que el anticuerpo conjugado separado del tumor más rápidamente en el modelo de metástasis de hígado en comparación con los modelos de tumores subcutáneos y ortotópicos [24]. laparotomía abdominal ventral de los ratones demostró múltiples tumores metastásicos en el hígado. GFP y 650 nm de la fluorescencia se originaron de los tumores metastásicos, con el hígado normal sólo muestra una señal muy débil (Fig 4A). Aunque no fue posible contar todos los tumores muy pequeños, de formación de imágenes ex vivo también mostró que la señal de 650 nm co-localizada con GFP y demarcada la extensión del tumor con mayor exactitud en comparación con la imagen de luz brillante. Hematoxilina & amp; eosina de muestras de tejido que expresan de fluorescencia confirmó la presencia de tumores metastásicos en el hígado de ratón (Fig 4B).
Anti-IGF-1R conjugado con PEGilado 650 nm de tinte etiquetado selectivamente el HCT 116-GFP tumores metastásicos. Tanto in vivo (A) y ex espectáculo vivo de imágenes (B) que los anticuerpos IGF-1R fluoróforo conjugado 650 nm co-localizada con fluorescencia HCT 116-GFP y con mayor precisión demarcada del tumor en comparación con la imagen de luz brillante (puntas de flecha blancas). H & amp; E tinción de muestras de tejido (x200) que expresa la fluorescencia confirma la presencia de tumor metastásico en el hígado del ratón.
Discusión
Orientación de IGF-1R en el sarcoma con el anticuerpo radiomarcado y cáncer de mama con anticuerpo conjugado con fluoróforo se ha comunicado [11,25]. En el presente estudio, se utilizó anticuerpo dirigidas a la subunidad alfa del IGF-1R. In vitro de formación de imágenes confirmó que el anticuerpo conjugado unido a IGF-1R en la membrana externa de las células de cáncer de colon. anticuerpos anti-IGF-1R con fluorescencia conjugados hicieron el tumor más fluorescente de fondo, fácilmente distinguir tumor de los órganos circundantes normales. El presente informe sugiere que las imágenes por fluorescencia con anticuerpos IGF-1R fluoróforo conjugado podría combinarse con endoscopia y FGS para un mejor diagnóstico y tratamiento del cáncer de colon.
De imágenes
IGF-1R selectivas podrían ser capaces de detectar los pólipos de alto riesgo según lo sugerido por nuestros resultados y los informes previos de que la expresión de IGF-1R se detectó en adenomas de colon y se hizo más fuerte como el grado de la carcinogénesis progresó. pólipos hiperplásicos no neoplásicas no expresan IGF-1R [26]. La predicción del riesgo cancerígeno de los pólipos premalignos con anticuerpos fluorescentes de IGF-1R puede permitir un tratamiento individualizado para los pólipos de colon, incluso sin tomar muestras de tejido y puede ayudar a evitar procedimientos invasivos innecesarios o tratamiento repetido.
IGF-1R dirigida se está desarrollando la terapia y probado en ensayos clínicos [27]. La determinación de la expresión de IGF-1R en los tumores con imágenes de fluorescencia tratamiento previo o durante podría ser capaz de guiar el tratamiento o predecir la respuesta al tratamiento. imágenes de fluorescencia tiene ventajas ya que no requiere una muestra del tumor invasivo y se puede repetir fácilmente [28].
Hemos demostrado anteriormente FGS eficaces de cáncer de colon en modelos de ratón utilizando anticuerpos fluorescentes anti-CEA [6,29, 30]. imágenes de fluorescencia se ha demostrado para detectar metástasis en el hígado pequeñas y eliminarlos después por la cirugía en pacientes [31]. Especialmente con el cáncer de colon, la detección de metástasis hepáticas con imágenes de fluorescencia es importante, ya que puede aumentar la resección completa. Nuestros resultados mostraron que con anticuerpo de IGF-1R conjugado con un fluoróforo PEGilado, las metástasis se hicieron mucho más fluorescente en comparación con la normal del fondo de hígado, y se hicieron más precisión detectaron [24]. Anteriormente puso de manifiesto que los colorantes PEGilados conjugarse con anticuerpos específicos de tumores reducción de la absorción no específica de hígado normal [24]. El objetivo del presente trabajo fue demostrar que un anticuerpo fluorescente para IGF-1R podría identificar la extensión de la metástasis hepática en modelos ortotópico de cáncer de colon mejor que la visualización estándar de luz brillante, y logramos este objetivo. imágenes de fluorescencia utilizando anticuerpos IGF-1R fluoróforo conjugado de metástasis de hígado debe ser eficaz para FGS.
En conclusión, hemos demostrado que el anticuerpo de IGF-1R fluoróforo conjugado es muy eficaz en el cáncer de colon etiquetado en modelos de ratón. Se necesitan análisis bio-formales de distribución y otros estudios con modelos PDOX cáncer de colon para confirmar que la imagen específica de IGF-1R se puede utilizar en entornos clínicos. Nuestros estudios previos utilizando anticuerpos conjugados con fluoróforos CEA, CA 19-9, Kit, y MUC-1 han demostrado su capacidad de tumores gastrointestinales etiquetado brillantemente en vivo [6,24,30,32-40]. biomarcadores capaces de formar imágenes tendrán potencial clínico importante para el diagnóstico y terapias como FGS.