Extracto
asociados a metástasis en el cáncer de colon 1 (MACC1) recientemente ha sido identificada como una novedoso indicador pronóstico independiente para la aparición de metástasis, la supervivencia global y la supervivencia libre de cáncer para los pacientes con cáncer de colon y otros tumores sólidos. En este estudio, se investigó el papel de MACC1 en el desarrollo y progresión del carcinoma de pelvis renal, una forma de tracto superior carcinomas uroteliales. proteína MACC1 se ha encontrado en el citoplasma así como en el núcleo de las células epiteliales de transición de la pelvis renal normal en ensayos de inmunohistoquímica (IHC). exámenes IHC cuantitativo reveló que MACC1 abundancia anormal en los tejidos cancerosos podría representar un indicador biológico clínicamente sugerente de malignidad del tumor en la pelvis renal. Además, la investigación de la asociación de los niveles de proteína MACC1 con clinicopathological parámetros de este estudio ha sugerido una correlación de la expresión MACC1 con el estadio del tumor-nódulo-metástasis y el grado histopatológico de los pacientes con pelvis carcinoma renal, con niveles elevados de proteínas MACC1 frecuentemente asociadas con una mayor agresividad de la enfermedad. Por otra parte, tanto la supervivencia libre de enfermedad y la supervivencia global de los pacientes en el grupo de alta expresión MACC1 fueron significativamente más bajos que los del grupo de baja expresión. El análisis multivariado con un modelo de riesgos proporcionales de Cox sugirió que MACC1 es de hecho un indicador pronóstico independiente de la supervivencia global y la supervivencia libre de cáncer para los pacientes con carcinoma de pelvis renal. Por lo tanto, MACC1 puede representar un candidato prometedor biomarcador pronóstico, así como una posible diana terapéutica para esta enfermedad
Visto:. Hu H, Tian D, Chen T, Han R, Sun Y, Wu C (2014) asociados a metástasis en el cáncer de colon 1 es un nuevo biomarcador Supervivencia relacionado para pacientes humanos con carcinoma de pelvis renal. PLoS ONE 9 (6): e100161. doi: 10.1371 /journal.pone.0100161
Editor: William B. Coleman, Universidad de Carolina del Norte Facultad de Medicina, Estados Unidos de América
Recibido: 4 Febrero 2014; Aceptado: 22 de mayo de 2014; Publicado: 20 Junio 2014
Derechos de Autor © 2014 Hu et al. Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos de la licencia Creative Commons Attribution License, que permite el uso ilimitado, distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que el autor original y la fuente se acreditan
Financiación:. Este trabajo fue apoyado por una beca de la Fundación Nacional de Ciencias Naturales de China (Grant número: 30700834), y otra subvención de la Fundación de Ciencias Naturales de Tianjin (número de concesión: 12ZCDZSY16600). Los donantes no tenía papel en el diseño del estudio, la recogida y análisis de datos, decisión a publicar, o la preparación del manuscrito
Conflicto de intereses:.. Los autores han declarado que no existen intereses en competencia
Introducción
Como un tumor maligno que surge de la epitelio de transición (un tejido epitelial altamente elástico que consta de varias capas de células epiteliales que recubren la superficie interna de los órganos urinarios), carcinoma de células de transición renal, o carcinoma urotelial renal (UC ) representa el cuarto cáncer más común en el mundo [1]. Que ocurre en la pelvis renal y el uréter, carcinoma urotelial del tracto superior (UTUC) es una enfermedad que afecta principalmente a personas entre las edades de 50 y 75. punto de vista patológico, UTUC suele ser más invasivo que la vejiga de la UC (60% vs. 15%) y es con frecuencia asociado con una mayor malignidad [2], [3], [4]. UTUC en la pelvis renal, o carcinoma de la pelvis renal (RPC) representa aproximadamente el 5% a 6% de todos los UCs renales y son más difíciles de diagnosticar que la vejiga UC. De hecho, la tasa de supervivencia a los 5 años de los pacientes RPC es menor que la encontrada en la vejiga UC como cuentas de metástasis de aproximadamente el 70% de mortalidad específica por cáncer en RPC [5]. Notoriamente difícil para el diagnóstico clínico, UTUC representa un enorme desafío para la caracterización de las imágenes radiológicas, así como para la visualización endoscópica y la biopsia. Actualmente, hay cinco factores que son las variables evaluadas con mayor frecuencia para la estratificación del riesgo de carcinoma urotelial antes de la terapia definitiva: la edad, la arquitectura del tumor, citología, el grado del tumor biopsia, y la presencia de hydronephrosisand. Sin embargo, aunque los factores predictivos patológicos tales como el estadio del tumor, grado, carcinoma in situ, la invasión linfovascular, y la invasión ganglionar puede ser más preciso que los otros factores clínicos para predecir la recurrencia de la enfermedad y la supervivencia de los pacientes [6], dicha información es por lo general no disponible antes de que el paciente ha sufrido una pérdida significativa de la reserva renal y es menos probable que sea capaz de someterse a tratamientos agresivos.
En los últimos 5 años, los investigadores han ganado una gran comprensión de la biología y el comportamiento clínico de UTUC. Se ha logrado un progreso considerable en la identificación de indicadores de pronóstico moleculares para los pacientes con carcinoma urotelial y puede aumentar la precisión de la predicción del riesgo. moléculas de señalización que están relacionadas con procesos celulares, tales como la angiogénesis, la muerte celular, la adhesión celular, y la proliferación celular se han investigado extensamente como los potenciales indicadores de pronóstico en el desarrollo y progresión de la enfermedad, tales como p53, EGFR, survivin, Bcl-2 , Ki-67, e-cadherina, factor inducible por hipoxia 1 bis (HIF1A), el componente mRNA telomerasa, metaloproteinasas de la matriz (MMP-2, MMP-9, TIMP1 y TIMP-2), y más (revisado en [7], [ ,,,0],8]). Identificados en un análisis de todo el genoma como un gen expresado diferencialmente en los tejidos de cáncer de colon humano y metástasis, metástasis asociada en el cáncer de colon 1 (MACC1) ha sido sugerido como un indicador pronóstico independiente de la formación de metástasis y la supervivencia libre de metástasis para los pacientes de carcinoma de colon [9]. Detectado en una variedad de tejidos normales, tales como el intestino, el estómago, glándula pituitaria, riñón, tráquea, páncreas, glándula mamaria, la médula ósea, ovario, pulmón, corazón, hígado, y B-linfoblastos, MACC1 es más abundante en los tejidos derivados a partir del endodermo (por ejemplo, el intestino y el estómago) que se originaron los tejidos del mesodermo (por ejemplo, riñón, corazón) o ectodermo (por ejemplo, la pituitaria y la glándula mamaria). Posiblemente, MACC1 podría desempeñar un papel en la organogénesis endodermo derivado durante el desarrollo embrionario. Originalmente descubierto en el cáncer de colon, la sobreexpresión MACC1 se ha demostrado que la promoción de la proliferación tumoral, invasión y metástasis en un amplio espectro de tumores sólidos, incluyendo cáncer gastrointestinal (por ejemplo, cáncer de colon [9], [10], carcinoma gástrico [11]), hepatocelular carcinoma [12], [13], osteosarcoma [14], glioma [15], [16], de pulmón [17], [18], [19], de esófago [20], de páncreas [21], de ovario [22] , cáncer cervical y de mama [23] (revisado en [24]). Además, el examen de los niveles de expresión MACC1 en los tejidos tumorales de diferentes etapas clínicas ha revelado que el nivel de expresión MACC1 más alta se ha observado con más frecuencia en los tejidos tumorales malignas de pacientes, que con frecuencia demuestran características clinicopatológicas más desfavorables incluyendo metástasis de ganglios linfáticos mejorada y metástasis a distancia metacrónicamente desarrollados . En otros casos, como en el glioma humano rara vez metastásica, la expresión génica MACC1 es más dramáticamente hasta reguladas en los tejidos de mayor malignidad, lo que refleja el deterioro sintomático de la enfermedad [15]. expresión MACC1 elevada por lo tanto se ha sugerido para servir como un indicador pronóstico independiente para la recurrencia del cáncer, exacerbación potencial de benigna en tumores malignos, o bajo ciertas circunstancias, la aparición de metástasis. Además, MACC1 también ha surgido como un indicador predictivo para la supervivencia libre de recurrencia y la supervivencia global (OS) de los pacientes con cáncer en varios estudios cuantitativos realizados en diversos tumores sólidos (revisado en [24]). Establecido como un indicador pronóstico novedoso para la metástasis en una amplia gama de tumores sólidos, MACC1 También se ha propuesto para ser un candidato objetivo para el desarrollo de estrategias terapéuticas para la intervención con la progresión tumoral y la metástasis.
En nuestro presente estudio, se investigó el papel de MACC1 en el desarrollo y progresión de la pelvis renal carcinoma humano. Hemos demostrado en ensayos inmunohistoquímicos el patrón de expresión de la proteína en muestras de tejido MACC1 pelvis de carcinoma renal humanos, así como en la pelvis renal normal. Además, se analizó la correlación entre la sobreexpresión MACC1 y parámetros clínico (incluyendo la edad, el género, tumor-nódulo-metástasis) etapa (TNM y grado patológico), así como la supervivencia libre de enfermedad (DFS) y supervivencia global (SG) en los pacientes con carcinoma de pelvis renal. Por último, también se examinó mediante análisis univariados y multivariados la elegibilidad de MACC1 como un nuevo indicador pronóstico independiente para el carcinoma de pelvis renal.
Materiales y Métodos
Declaración de Ética, los pacientes y muestras de tejido
Un total de 73 pacientes RPC fueron reclutados para este estudio durante enero de 2002 y enero de 2005. El RPC pacientes participaron en este estudio incluyó a 52 hombres y 21 mujeres. La edad media fue de 61,2 años con un rango de 48-79 años. Los pacientes fueron sometidos a nefroureterectomía radical con registros de historia clínica completa en el Departamento de Cirugía Urológica, el Segundo Hospital de la Universidad Médica de Tianjin. Los pacientes que habían desarrollado metástasis y recibido quimioterapia post-operatoria o radioterapia fueron excluidos de este estudio. secciones de tejido normal en este estudio se obtuvieron a partir de 32 pelvis renal no tumorales adyacentes tejidos epiteliales (ANRPETs, al menos 2 cm de distancia desde el borde del tumor) y 34 de la pelvis renal normal tejidos epiteliales (NRPETs, tejidos uroteliales de pacientes con cáncer renal, que son menos de 3 cm de diámetro con la polaridad celular tejido intacto y se considera que son los tejidos epiteliales normales).
Todos los diagnósticos de RPC fueron confirmados y más clasificados por examen histopatológico postoperatorio después de los criterios de clasificación de la Organización Mundial de la Salud 2004. Tumor grados de diferenciación celular se clasificaron de acuerdo con los criterios de clasificación de la Organización 1997 Mundial de la Salud. estadio clínico del tumor se determinó según la séptima edición de la Clasificación TNM del American Joint Committee on Cancer. Cada muestra se había fijado en formalina, procesadas rutinariamente, e incluidos en parafina. Los datos de seguimiento postoperatorio se obtuvieron de todos los pacientes, con una mediana de seguimiento de 41,5 meses (rango de 8 a 54 meses). Este estudio fue aprobado por el Comité de Ética del Segundo Hospital de la Universidad Médica de Tianjin, y el consentimiento informado por escrito para el uso de las muestras de cada paciente incluido se obtuvo en consecuencia.
Datos clínicos colección
Todo datos clínicos fueron recogidos de forma prospectiva, manipulados y almacenados de acuerdo a los criterios /regulaciones descritas anteriormente. Las variables clínicas registradas fueron el sexo, la edad, el tipo histológico, el estadio TNM y grado nuclear (Tabla 1). Los datos de seguimiento se recogieron en los exámenes físicos provisionales de los pacientes. Para cada paciente, la supervivencia libre de enfermedad (DFS) en este estudio se define como el intervalo de tiempo entre la fecha del diagnóstico hasta la primera recurrencia (incluyendo la recurrencia local o regional y metástasis sistémica). La supervivencia global (OS) se define como el intervalo entre la fecha de la cirugía y la fecha de la muerte. Los pacientes, que estaban vivos en el último seguimiento fueron censurados en la fecha de su última visita a la clínica, y los pacientes, que murieron por causas distintas de la RPC fueron censurados en el momento de su muerte.
la inmunohistoquímica (IHC)
la selección de los bloques de parafina representativos que muestran los tejidos tumorales RPC típicos, y los tejidos normales incluyendo ANRPETs y NRPETs para la tinción inmunohistoquímica después se examinaron cuidadosamente los portaobjetos de tinción hematoxilina-eosina de todos los especímenes quirúrgicos. Se realizó la tinción IHC para MACC1 por un método de polímero conjugado con peroxidasa de dos pasos usando el kit de detección de ChemMate Envision. Brevemente, las secciones se de-encerado con xileno y se rehidratan a través de una serie graduada de etanol. Los portaobjetos se sometieron a continuación a recuperación del epítopo inducida por calor utilizando horno de microondas en tampón de citrato 0,01 M (pH 6,0) durante 18 min y se enfriaron durante 30 min a temperatura ambiente. Los portaobjetos se incubaron en peróxido de hidrógeno al 3% durante 10 min para inactivar la peroxidasa endógena. Las secciones fueron incubadas con anticuerpo anti-MACC1 (policlonal de ratón, Ig G, ab106579; 1:50 diluida, Abcam, Cambridge, Reino Unido) como anticuerpos primarios durante la noche a 4 ° C en una cámara humidificada. Después de lavado en PBS, las secciones se incubaron con inmunoglobulina de conejo biotinilado anti-ratón (Dakopatts, Glostrup, Dinamarca) diluido en 1:200 durante 30 minutos seguido de otros 30 minutos de incubación con estreptavidina conjugada con peroxidasa (Dakopatts) diluido en 1: 300. Posteriormente, las secciones se sometieron a contratinción diaminobencidina y luego por hematoxilina. Secciones de tejidos de cáncer de colon humano se incluyeron como controles positivos en cada ejecución. Los controles positivos mostraron tinción positiva clara y la intensidad fue muy similar entre las diferentes carreras. El control negativo se realizó con albúmina de suero bovino no inmune como un reemplazo del anticuerpo primario a la misma concentración en cada ciclo de tinción. Las secciones se lavaron tres veces con PBS entre cada etapa.
Evaluación cuantitativa de tinción inmunohistoquímica
La tinción inmunohistoquímica de MACC1 se analizó cuantitativamente por evaluación visual y Image Pro-Plus en este estudio. puntuación visual evaluación de los niveles de expresión MACC1 fue realizada por un patólogo seguido de reexamen /reconfirmación de otro patólogo. La proporción de células tumorales se obtuvo como sigue: 0 (no hay células tumorales positivas), 1 (& lt; 10% de células tumorales positivas), 2 (células tumorales positivas 10-50%), y 3 (& gt; células tumorales positivas 50% ). La intensidad de la tinción fue clasificado de acuerdo a los siguientes criterios: 0 (sin manchas), 1 (= tinción débil luz amarilla), 2 (tinción moderada = amarillo marrón), y 3 (= fuerte tinción marrón). El índice de tinción se calcula multiplicando la puntuación de intensidad de la tinción y el porcentaje de células tumorales positivas. El uso de este método de evaluación, se evaluaron los niveles de expresión de proteínas MACC1 en benigna pelvis renal epitelio y lesiones malignas mediante la determinación del índice de tinción, lo que resulta en las puntuaciones como 0, 1, 2, 3, 4, 6 o 9. A efectos estadísticos, resultados de IHC se agruparon en dos grupos, grupo de baja expresión (≤4) y el grupo de alta expresión (≥6).
en cuanto al sistema de puntuación Image Pro-Plus, la expresión MACC1 se evaluó cuantitativamente utilizando la imagen Pro Plus 6.0 de análisis sistema (Media Cybernetics, Silver Spring, MD) presentado por Xavier y los resultados fueron reexaminados por otros dos patólogos de forma independiente después de la primera ronda de análisis. En pocas palabras, 10 imágenes digitales a 1360 × 1024 píxeles de resolución y 400 × magnificación fueron capturados por la cámara CCD DP 70 (Olympus, Japón) acoplado a una Olympus AX-70 microscopio (Olympus). La cuantificación de área manchada y se determinó la densidad óptica integrada (IOD) de MACC1 en cada imagen después y se somete para su posterior análisis. Se utilizó la densidad óptica media (AOD = IOD /Área) en este estudio para el análisis estadístico.
Para facilitar el análisis estadístico de los datos de supervivencia, toda la cohorte de pacientes se dividieron en dos grupos, el grupo de alta expresión MACC1 (60,6 %) y el grupo de baja expresión MACC1 (39,4%), respectivamente.
El análisis estadístico
Los resultados se expresaron como media ± desviación estándar. La comparación entre dos grupos se llevó a cabo utilizando una muestra independiente
t
prueba o no paramétrico de 2 colas
t
de ensayo (prueba de Mann-Whitney). ANOVA de una vía (prueba F) se realizó para comparar los parámetros para varios grupos. Correlación entre los niveles de expresión de MACC1 (medidos cuantitativamente de acuerdo con MACC1 fuerza tinción inmunohistoquímica) y las características clínico-patológicas en pacientes RPC se evaluó mediante la prueba de coeficiente de correlación de Pearson. Todos los análisis estadísticos se realizaron utilizando el paquete estadístico SPSS (versión 17.0, SPSS, Inc., Chicago, IL). se aprobó la prueba de 2 caras en este estudio, y
p Hotel & lt; 0,05 se considera estadísticamente significativo. La tasa de supervivencia se estimó mediante el método de Kaplan-Meier. Los análisis univariados y multivariados se realizaron con modelos de riesgos proporcionales de regresión de Cox.
Resultados
El examen de la expresión de proteínas en el tejido MACC1 pelvis renal carcinoma (RPC), pelvis renal no tumorales adyacentes tejido epitelial (ANRPET ) y la pelvis renal normal tejido epitelial (NRPET) especímenes
inmunohistoquímica (IHC) el examen de la expresión de proteínas MACC1 se llevó a cabo en muestras de tejido 73 RPC, 32 ANRPET (al menos ~ 2 cm de distancia del borde del tumor) y 41 NRPET (tejidos uroteliales de pacientes con cáncer renal, que son de menos de 3 cm de diámetro con la polaridad celular tejido intacto y se consideran tejidos epiteliales normales). Según lo revelado en secciones de tejido normal, no neoplásicas pelvis renal derivadas de pacientes con carcinoma de células renales, MACC1 se tiñó en el citoplasma así como en el núcleo en las células epiteliales que residen en el epitelio estratificado y de transición (Fig 1B & amp.; SEGUNDO'). Por el contrario, la tinción MACC1 se redujo significativamente en el tejido estromal. Imágenes en Fig. 1A & amp; A 'son de control negativo tinciones IHC para MACC1
(A) tinción de control negtive.; (B) MACC1 tinción positiva; (C-E) imágenes representativas de la expresión negtive, bajo, alto MACC1 en los tejidos RPC, respectivamente. (A'-E ') un mayor aumento de la zona seleccionada en (A-E), respectivamente. Magnificación: x 100 en (A-E); × 200 en (A'-E ').
No se detectaron señales MACC1 positivos en 66 de las muestras de cáncer de lesión 73 RPC (~90.4%), así como en 24 de los 32 ANRPET ( ~75.0%) y 29 de las muestras 41 NRPET (~70.7%) hemos examinado en este estudio. Imágenes en Fig. 1C-E, 1C'-E 'son las imágenes de tinción MACC1 IHC representativos en los tejidos RPC con MACC1 detectados en negativo (Figura 1C y amp;. C'), baja (figura 1D & Amp;. D '). Y alto (Fig 1E & amp; E ') los niveles de expresión, respectivamente. Aunque la expresión MACC1 está presente principalmente en el citoplasma en las secciones de tejido RPC, la localización nuclear de MACC1 es fácilmente discernible como se muestra en la Fig. 1. Curiosamente, a pesar de la tinción citoplásmica preferente en la mayoría de las células epiteliales en las secciones de tejido canceroso RPC, hay de hecho son pequeñas poblaciones de células que presentan considerablemente más fuerte tinción nuclear de tinción citoplásmica. En NRPETs, MACC1 fue distribuido más o menos uniformemente en el citoplasma y núcleo de las células epiteliales (Fig 1B y amp;. B '). En esta etapa, no estamos claros acerca de las consecuencias biológicas de la tinción nuclear débil de MACC1 en comparación con la tinción citoplasmática exhibido en los tejidos malignos RPC.
A continuación, la fuerza tinción inmunohistoquímica de MACC1 se midió cuantitativamente por Imagen Pro Plus evaluación. La cuantificación de la zona manchada, la densidad óptica integrada (IOD) y la densidad óptica media (AOD = IOD /Area) de MACC1 en cada imagen se llevó a cabo y se somete para su posterior análisis. Como se muestra en la Tabla 1, la lectura de AOD MACC1 se muestra como 0,0648 ± 0,0312 en los tejidos RPC, 0,0218 ± 0,0144 en ANRPETs, y 0,0210 ± 0,0151 en NRPETs, respectivamente. Dado que no había ninguna diferencia sustancial entre ANRPETs y NRPETs (
p Hotel & gt; 0,05), estos dos grupos se combinaron en un solo grupo, 'epitelio normal', como se muestra en el posterior análisis estadístico hemos abordado a continuación. Como resultado, la puntuación de AOD del epitelio normal fue de 0,0213 ± 0,0147. En conjunto, en comparación con los tejidos de RPC, la puntuación de AOD de los tejidos epiteliales normales con tinción inmunohistoquímica fue significativamente menor, aproximando un tercio de la fuerza de tinción identificado en RPC (
p
& lt; 0,05) (Tabla 1). Estos resultados sugieren que MACC1 abundancia anormal podría representar un indicador biológico clínicamente sugerente de malignidad del tumor en los tejidos pelvis renal.
La correlación entre los niveles de expresión de proteínas MACC1 y factores de pronóstico en pacientes con carcinoma de pelvis renal
para determinar la importancia clínica de la sobreexpresión MACC1 en el desarrollo y progresión de la RPC, la correlación entre los niveles de expresión de proteínas MACC1 y los factores pronósticos (incluyendo edad, sexo, estadio TNM y grado nuclear) en los pacientes RPC se investigó más (Tabla 2) . Se realizó un análisis cuantitativo de tinción IHC por Image Pro Plus análisis. Como se muestra en la Tabla 2, los niveles de proteína MACC1 elevadas parecen estar asociados con una mayor agresividad de la RPC, con la puntuación de AOD de MACC1 en el estadio TNM Ta, I, II, y III-IV revela como 0,0355 ± 0,0247, 0,0563 ± 0,0281, 0,0752 ± 0,0264, y 0,0965 ± 0,0185, respectivamente. Notablemente, MACC1 demostró una mayor abundancia en los tejidos tumorales finales de etapa como TNM estadios III-IV, en comparación con la de la primera etapa y la diferencia fue estadísticamente significativa (
p Hotel & lt; 0,05). Además, la puntuación de AOD MACC1 en la etapa RPC Ta también fue sustancialmente mayor que la medida en el epitelio normal (0,0213 ± 0,0147) (
p
& lt; 0,05). Como lo que se refiere al grado nuclear del tumor, también hubo una diferencia estadísticamente significativa entre las puntuaciones de AOD de MACC1 medidos en el bajo grado (G1, G2: 0,0509 ± 0,0281) y los resultados medidos en los tejidos RPC de alto grado (G3: 0,0729 ± 0,0304) (
p Hotel & lt; 0,05). De hecho, hubo ~43.2% de incremento detectado en los tejidos tumorales de grado 3 en comparación con los de grado 1 o 2, lo que sugiere que la abundancia de proteínas MACC1 puede estar fuertemente correlacionado con el desarrollo y la progresión de la RPC.
por el contrario, aunque MACC1 exhibieron un nivel de proteína aumentó en el grupo de pacientes de edad avanzada (& gt; 61 años) con la puntuación AOD medido como 0,0654 ± 0,0298 en comparación con el grupo de pacientes más jóvenes (& lt; 61 años) (puntuación AOD: 0,0628 ± 0,0343), no se observaron diferencias estadísticamente significativas entre estos dos grupos (
p Hotel & gt; 0,05). Del mismo modo, no se observaron diferencias estadísticamente significativas entre el grupo masculino (puntuación AOD: 0,0662 ± 0,0305) y el grupo femenino (puntuación AOD: 0,0612 ± 0,0335) (
p Hotel & gt; 0,05) (Tabla 2). Por otra parte, la correlación estadísticamente significativa se reveló entre la expresión de la proteína MACC1 y citología de la orina o de la conducta de fumar (datos no mostrados).
La asociación entre los niveles de proteína MACC1 de expresión y la supervivencia global (OS), la supervivencia libre de enfermedad (SLE ) en pacientes con carcinoma de pelvis renal
para facilitar el análisis estadístico, los pacientes RPC se dividieron en tres grupos de acuerdo con la evaluación visual de la intensidad de tinción inmunohistoquímica en secciones de tejido se examinaron (grupo MACC1 expresión negativa baja y alta grupo expresión MACC1, respectivamente). La puntuación de AOD MACC1 obtenido a partir de análisis Image Pro Plus se aumentó evidentemente en el grupo expresión MACC1 bajo en comparación con el grupo negativo, y fue aún más elevada en el grupo de alta expresión de MACC1 (
p
& lt; 0,001, Fig. 2A). Por otra parte, en Spearman análisis de coeficiente de correlación mide la fuerza de la relación lineal entre las puntuaciones MACC1 AOD de Imagen Pro análisis Plus y las puntuaciones de evaluación visual, se observó una relación lineal positiva estadísticamente significativa entre estos dos conjuntos de puntuaciones en los pacientes con RPC (
r = 0,669
,
p Hotel & lt; 0,001) (figura 2B).. Por lo tanto, concluimos el patrón de expresión MACC1 deduce de la evaluación visual de hecho se asemeja a la fidelidad extrae del análisis utilizando el sistema de puntuación Pro Plus AOD Imagen.
(A), pacientes con RPC se dividieron de forma manual en tres grupos de acuerdo con sus puntuaciones de la evaluación visual en IHC tiñeron secciones de tejido (grupo expresión negativa, baja MACC1, y el grupo de alta expresión MACC1, respectivamente). El valor de AOD MACC1 obtenido de Image Pro Plus análisis se aumentó evidentemente en el grupo expresión MACC1 bajo en comparación con el grupo negativo, y fue aún más elevada en el grupo de alta expresión de MACC1 (
p
& lt; 0,001). AOD = la densidad óptica integrada (IOD) /Área de tinción positiva MACC1 cada imagen tinción IHC en; B, el coeficiente de correlación de Spearman análisis de la medición de la fuerza de la relación lineal entre MACC1 AOD Image decenas y decenas de evaluación visual Pro Plus. Se observó una relación lineal positiva estadísticamente significativa entre estos dos conjuntos de puntuaciones en RPC (
r = 0,669
,
p Hotel & lt; 0,001).
A continuación, examinamos el significado pronóstico de la sobreexpresión MACC1 en la supervivencia global (SG) y la supervivencia (DFS) entre los pacientes RPC libre de enfermedad. 28 pacientes murieron en el 5-años de seguimiento, y entre los 28 fallecidos, 18 murieron con la metástasis del cáncer o la recidiva local. Como se muestra en la Fig. 3A & amp; B, los pacientes con alto nivel de expresión MACC1 determinados por sistema de puntuación de la evaluación visual mostraron una OS significativamente más corto (
p
& lt; 0,001) y DFS (
p
& lt; 0,001) que el grupo de pacientes con el nivel de expresión MACC1 baja. Como se ilustra en la Fig. 3A, en el grupo de alta expresión MACC1, la tasa media de SG fue de 29,9 meses, con la tasa de SG a 5 años se aproxima al 70%. Para los pacientes en el grupo de la expresión MACC1 baja, la tasa media de SG fue de 45,6 meses, ~ 50% más altos que el grupo de alto MACC1. Además, la tasa de SSE fue de $ ~ $ 22 meses según lo revelado en el grupo de alto MACC1, mientras que la tasa casi se duplicó en el grupo MACC1 baja (~42 meses) (Fig. 3B). Del mismo modo, la tasa de SSE a 5 años en el grupo de bajo MACC1 era evidentemente superior a la tasa en el grupo de alto MACC1 (57,5% frente a 42,3%). En conclusión, la expresión de alto nivel MACC1 se correlaciona significativamente con la disminución de la supervivencia global y la supervivencia libre de enfermedad en pacientes RPC tal como se revela en el análisis inmunohistoquímico cuantitativo.
Las curvas de supervivencia de Kaplan-Meier revelaron que los pacientes en el grupo de alta expresión MACC1 demostrado la supervivencia global significativamente más corto (OS) (
p Hotel & lt; 0,001) (a) y la supervivencia (DFS) libre de enfermedad (
p Hotel & lt; 0,001) que las tasas de (B) el grupo expresión MACC1 baja.
MACC1 análisis univariados y multivariados establecieron como un nuevo indicador pronóstico independiente para RPC
En este estudio, se realizaron análisis univariados y multivariados para la evaluación de la poder pronóstico de la sobreexpresión MACC1 (Tablas 3 & amp; 4). Como se muestra en la Tabla 4, el análisis de regresión de Cox multivariado demostró que los niveles de expresión MACC1 y grado nuclear son indicadores pronósticos de hecho independientes para la supervivencia global de los pacientes con RPC después del ajuste por edad, sexo y estadio TNM (Grado,
p
= 0,001, cociente de riesgos instantáneos: 0,086; IC del 95%: 0,019 a 0,387; MACC1,
p = 0,024
, cociente de riesgos instantáneos: 0,282, IC del 95%: 0,094-,844 Tabla 4).. Además, los niveles de expresión MACC1 y grado nuclear también se identificaron como factores pronósticos independientes para la supervivencia libre de cáncer en pacientes con RPC (Grado,
p = 0,001
, Cociente de riesgos instantáneos: 5.444, IC del 95%: 1,964 a 15,093 ; MACC1,
p = 0,002
, cociente de riesgos instantáneos:.. 4.207, IC del 95%: 1,668 a 10,613 Tabla 4)
Discusión
Aunque pelvis carcinoma renal es relativamente menos común, es más difícil de diagnosticar que el carcinoma urotelial de vejiga y representa una enfermedad agresiva con altas tasas de recurrencia y progresión. Además de fumar tabaco, el examen de otros factores de riesgo ambiental se ha sugerido que la exposición ocupacional a sustancias químicas industriales también podría contribuir al desarrollo del carcinoma urotelial, por ejemplo, la quimioterapia (en particular, ciclofosfamida) y la radioterapia, la irritación crónica de la vejiga y las infecciones, así como la exposición al arsénico [25]. China tiene la mayor población del mundo fumar - ~ 350 millones, aproximadamente un cuarto a un tercio de la población mundial de los fumadores. Además, como resultado del rápido crecimiento industrial, sin precedentes, la contaminación química industrial se ha convertido también en una forma alarmante amenaza creciente para la salud de muchas personas en China en los últimos 2-3 años. Los productos químicos que se han sugerido para promover carcinoma del tracto uretral superior incluyen aminas aromáticas, tales como bencidina (impresoras), 2-naftilamina (caucheros y colorantes), 4-amino-bifenilo (peluquerías), hidrocarburos aromáticos policíclicos, tales como el benzo (a) pireno (trabajadores del aluminio) y los gases de diesel [26]. Por otra parte, con una mayor precisión de detección de cáncer en China en los últimos años, el dramático aumento en la prevalencia del cáncer en la población ha representado un enorme desafío en los últimos 5-10 años. De hecho, una mayor frecuencia de carcinoma de la pelvis renal se ha identificado en los últimos 2-3 décadas en China. Por tanto, es importante desarrollar indicadores pronósticos más eficaces, e identificar los pacientes de alto riesgo para la intervención adecuada y oportuna.
Al surgir como una medida potencialmente menos invasivo, se sugiere la evaluación del estado de los biomarcadores específicos de tejido para tener la capacidad para mejorar la precisión diagnóstica y pronóstica en el proceso de toma de decisiones cuando se integren en los modelos pronósticos. En los últimos años, los biomarcadores asociados con el pronóstico de los pacientes con carcinoma urotelial del tracto superior han sido ampliamente explorada. De hecho, se ha informado y se evaluaron para su potencial aplicación como carcinomas uroteliales indicadores de pronóstico, tales como moléculas que regulan el ciclo celular (por ejemplo, p53, p21, pRb, p27, ciclina D1 y ciclina E1), la apoptosis de una amplia gama de biomarcadores a base de tejido (por ejemplo, survivin, Bcl-2, osteopontina, bax, caspasa-3), el crecimiento celular y la transducción de señales (por ejemplo, HER-2, NF-kB, EGFR, beta-catenina, galectina-3, RAS-MAPK), la migración celular y invasión (por ejemplo, MMPs), y la angiogénesis (por ejemplo vasohibin-1, VEGF, TSP-1) (revisado en [7], [8]). Como se muestra en este estudio, hemos demostrado por primera vez que un nivel anormalmente alto de expresión MACC1 se asocia con un mal pronóstico de la pelvis renal y carcinoma es de hecho un indicador pronóstico independiente de supervivencia libre de enfermedad y la supervivencia global de los pacientes. Dado que en esta etapa no tenemos un tratamiento eficaz para los pacientes con metástasis pelvis renal carcinoma, la detección de altos niveles de MACC1 podría ayudar a predecir la progresión y el pronóstico de la enfermedad. Notablemente, en los tejidos de tumores sólidos metastásicos según se revela en estudios previos, además de aumento de la intensidad de la tinción MACC1 en el citoplasma, la tinción nuclear adicional también se ha reconocido que sugiere una mayor translocación nuclear y la posterior elevación de las actividades transcripcionales MACC1 [15], [27 ], [28].