Extracto
Objetivo
Para evaluar los cambios del factor nuclear kappa B (NF-kB) durante la terapia con yodo radiactivo 131 (
131I) y si la inhibición de NF-kB podría mejorar
apoptosis inducida por 131I en células de cáncer diferenciado de tiroides (CDT) de una manera sinérgica.
Métodos
se utilizaron tres líneas celulares humanas DTC. la inhibición de NF-kB se logró mediante el uso de un inhibidor de NF-kappa B (Bay 11-7082) o por p65 transfección siRNA. ensayo de metil-tiazolil-tetrazolio se realizó para la evaluación de la viabilidad celular. ensayo de unión a ADN, ensayo indicador de luciferasa, y Western blot fueron adoptados para determinar la función y los cambios de expresión de NF-kB. factores anti-apoptóticos continuación, NF-kB regula se midieron XIAP, cIAP1, y Bcl-XL. La apoptosis se analizó mediante Western blot para la caspasa 3 y PARP, y por citometría de flujo también. Un ensayo de captación de yoduro se realizó para determinar si la inhibición de NF-kB podría influir en la captación de yodo radiactivo.
Resultados
El ensayo metil-tiazolilo-tetrazolio mostró disminución significativa de células viables mediante terapia de combinación que por mono-terapias. El ensayo y ensayo de indicador de luciferasa de unión al ADN mostró actividades mejoradas NF-kB y la función del gen reportero debido a
131I, sin embargo, una supresión significativa se consiguió mediante la inhibición de NF-kB. Western blot demostrado
131I podría aumentar la concentración de NF-kappa B nuclear, mientras que la inhibición de NF-kB reduce la concentración de NF-kB. Western blot demostró también importantes sobre regulación de XIAP, cIAP1, y Bcl-XL después de
terapia 131I. Y la inhibición de NF-kB podría regular a la baja de manera significativa estos factores. Por último, la sinergia inducida por la terapia combinada se muestra por las mejoras significativas de la caspasa 3 escindida y la PARP de Western blot, y de Anexina V con tinción positiva de citometría de flujo. El ensayo de absorción de yodo no mostró cambios significativos cuando NF-kB se inhibió.
Conclusión
Hemos demostrado que
131I podría inducir la activación de NF-kB, lo que atenuaría
131I eficacia en las células de DTC. la inhibición de NF-kB por Bay 11-7082 o por p65 siRNA transfección fue eficaz en la supresión de NF-kB cambios regulado anti-apoptóticos y en la apoptosis régimen combinado se logró de forma sinérgica
Visto:. Meng Z, Lou S, Tan J, K Xu, Jia Q, W Zheng (2012) del factor nuclear kappa B-inhibición puede potenciar la apoptosis de células diferenciadas del cáncer de tiroides inducido por
131I. PLoS ONE 7 (3): e33597. doi: 10.1371 /journal.pone.0033597
Editor: Antimo Migliaccio, II Università di Napoli, Italia