Extracto
miRNAs se predicen para controlar la actividad de aproximadamente el 60% de todos los genes que codifican proteínas que participan en la regulación de varios procesos celulares y enfermedades, incluyendo el cáncer. Recientemente, hemos demostrado que el miR-187 está regulado por disminución significativa en el cáncer de próstata (CaP) y aquí se propone un enfoque proteómico para identificar sus objetivos potenciales. Para este propósito, las células PC-3 fueron transfectadas transitoriamente con miR-187 precursor y control negativo imitador miRNA. Las proteínas se analizaron mediante una electroforesis en gel de diferencia de dos dimensiones (2D-DIGE) y se definen como diferencialmente regulado si el pliegue del cambio observado fue de ± 1,06. A continuación, se realizó el análisis de MALDI-TOF MS después de la digestión de proteínas y las proteínas de baja abundancia se identificaron por LC-MS /MS. Los péptidos se identificaron mediante búsquedas en la base de datos SWISS PROT Expasy y validación de dianas se llevó a cabo tanto in vitro por Western blot y QRT-PCR y en muestras clínicas por QRT-PCR, inmunohistoquímica y ELISA. El análisis mostró DIGE 9 puntos expresados diferencialmente (p & lt; 0,05) y 7 mostraron una expresión de las reguladas en el miR-187 reintroducción. Entre estos objetivos se identificaron aldehído deshidrogenasa 1A3 (ALDH1A3). ALDH1A3 expresión se downregulated significativamente en PC3, LNCaP y DU-145 células después de miR-187 reintroducción. Apoyando a estos datos, la expresión de ALDH1A3 se encontró significativamente (p & lt; 0,0001) hasta reguladas en las muestras de CaP e inversamente correlacionados (p & lt; 0,0001) con el miR-187 expresión, su expresión está directamente asociada con la puntuación de Gleason (p = 0,05). La expresión de ALDH1A3 se midió en muestras de orina para evaluar la capacidad de predicción de este marcador biológico para la presencia de CaP y, a un nivel de significación del 10%, PSA y también ALDH1A3 se asociaron significativamente con una biopsia positiva del CaP. En conclusión, nuestros datos muestran por primera vez el papel de ALDH1A3 como un objetivo de miR-187 en el CaP y proporcionan una visión en la utilidad del uso de esta proteína como un nuevo biomarcador para el CaP
Visto:. Casanova-Salas yo, Masiá E, A Armiñán, Calatrava A, C Mancarella, Rubio Briones-J, et al. (2015) miR-187 Objetivos del gen regulado por andrógenos-
ALDH1A3 Hoteles en cáncer de próstata. PLoS ONE 10 (5): e0125576. doi: 10.1371 /journal.pone.0125576
Editor Académico: Zoran Culig, Universidad Médica de Innsbruck, Austria