Extracto
Objetivos /hipótesis
En diferentes tipos de cáncer, composición isoforma del receptor de insulina o el sustrato del receptor de insulina (IRS) isoformas son diferentes al tejido sano. Este puede ser un enlace molecular a un aumento de riesgo de cáncer en la diabetes y la obesidad. Dado que este es todavía poco claro para el cáncer de próstata, investigamos composición isoforma IR y el equilibrio IRS en el cáncer de próstata en comparación con el tejido prostático benigno adyacente y benigno tumor y trajeron esto en relación con la proliferación celular.
Métodos
Se estudiaron 23 muestras benignas de la próstata de la cistectomía radical o cirugía hiperplasia benigna de próstata, 30 muestras de tejido benigno directamente adyacente a focos de cáncer de próstata y 35 muestras de cáncer de diferentes pacientes. los niveles de expresión de ARN para las isoformas del receptor de insulina A y B, IRS-1, IRS-2, y el receptor de IGF-1 se evaluaron por cuantitativa en tiempo real RT-PCR. Además, la expresión de ARN y la proteína p27 del regulador del ciclo celular
Kip1 se cuantificó en tiempo real de RT-PCR e inmunohistoquímica.
Resultados
receptor de la insulina isoforma A a la relación B fue significativamente mayor en el cáncer así como en el tejido prostático benigno adyacente tumor en comparación con próstatas puramente benignos (p & lt; 0,05). IRS-1 a IRS-2 ratios fueron más bajos en maligno que en el tejido prostático benigno (p & lt; 0,05). Estas proporciones alteradas tanto en el cáncer y el tejido adyacente se asociaron significativamente con p27 reducida
contenido Kip1 (p & lt; 0,02). Curiosamente, el IGF-1 los niveles de receptores fueron significativamente inferiores en los pacientes con diabetes tipo 2 (p = 0,0019).
Conclusiones /Interpretación
Se encontraron diferencias significativas en la cascada de la insulina entre tejido benigno de la próstata de señalización y el cáncer de próstata. tejido benigno histológico adyacente al cáncer mostraron patrones de expresión similares a los tumores malignos. Nuestros resultados sugieren un papel de la vía de señalización en cáncer de próstata y el tejido circundante a la insulina y por lo tanto pueden ser relevantes para los dos enfoques de diagnóstico y terapéuticos novedosos de esta malignidad
Visto:. Heni M, Hennenlotter J, Scharpf M, Lutz SZ, Schwentner C, Todenhöfer T, et al. (2012) receptor de insulina isoformas A y B, así como de los receptores de insulina Sustratos-1 y -2 se expresan diferencialmente en el cáncer de próstata. PLoS ONE 7 (12): e50953. doi: 10.1371 /journal.pone.0050953
Editor: Giorgio Sesti, Universita Magna-Grecia di Catanzaro, Italia |
Recibido: 14 Junio, 2012; Aceptado: 29 de octubre de 2012; Publicado: December 10, 2012
Derechos de Autor © 2012 Heni et al. Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos de la licencia Creative Commons Attribution License, que permite el uso ilimitado, distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que el autor original y la fuente se acreditan
Financiación:. El estudio fue apoyado por una beca (01GI0925) del Ministerio Federal alemán de Educación e Investigación (BMBF) para el Centro alemán de Investigación de la Diabetes (DZD eV). Los donantes no tenía papel en el diseño del estudio, la recogida y análisis de datos, decisión a publicar, o la preparación del manuscrito
Conflicto de intereses:.. Los autores han declarado que no existen intereses en competencia
Introducción
la diabetes de tipo 2 (DM2) se asocia con un mayor riesgo de varios tipos de cáncer [1] - [3]. El riesgo para el cáncer más frecuente en hombres, cáncer de próstata, parece estar alterada por diabetes [4], pero esto se piensa que es debido a los menores niveles de testosterona en DM2 [3], [5], [6]. Por otra parte, el tiempo de supervivencia después del diagnóstico de cáncer de próstata es más corto en los hombres con diabetes tipo 2 en comparación con los hombres sin [7].
Para muchos tipos de cáncer, se han reportado alteraciones en la cascada de señalización de la insulina. Esto comienza en el nivel del receptor de insulina (IR). Este receptor se produce en dos isoformas, la isoforma A que se expresa predominantemente prenatalmente y isoforma B que se expresa en el tejido diferenciado adulto [8]. Mientras que la isoforma IR B tiene una alta afinidad para la insulina y es responsable de la mayoría de los efectos metabólicos de esta hormona, isoforma A tiene, además, una alta afinidad para el factor de crecimiento similar a la insulina II (IGF) y contribuye a la proliferación celular. IR isoforma A se expresa de forma aberrante en muchas células cancerosas [8]. Mientras que la sobreexpresión de la RI en el cáncer de próstata y la mayor actividad de la cadena de señalización de abajo se ha informado [9] - [11]., Configuración isoforma en este tipo de cáncer no se ha estudiado aún
Las proteínas de ensamblaje de aguas abajo de IR y otros receptores de tirosina quinasas (por ejemplo, receptor de IGF-1), el sustrato del receptor de insulina (IRS) -1 y el IRS-2 son cruciales para comunicar más señales de estos receptores [12], [13]. A pesar de IRS-1 de alta homología y de IRS-2, que tienen funciones no redundantes en el control metabólico y la proliferación celular [14]. Estas proteínas de acoplamiento han sido bien caracterizados con respecto a metabolismo y diabetes pero sólo unos pocos estudios investigaron su papel en tumores malignos [15]. El papel de estas proteínas en cáncer de próstata todavía no está claro.
Estudios recientes describen alteraciones moleculares de tejido en histológicamente benigna de cáncer de próstata que lleva glándulas [9], [16]. Aparte de interés científico en la biología del tumor, el conocimiento de estas alteraciones es de gran importancia para su uso clínico, por ejemplo, la hora de establecer el diagnóstico en material de biopsia o para determinar los márgenes quirúrgicos.
objetivos de este estudio fueron investigar
(i)
IR composición isoforma y la expresión del receptor de IGF-1 y
(ii) equilibrio
IRS en el cáncer de próstata en comparación con tejido benigno, así como a tumor tejido benigno adyacente; y
(iii)
a traer estos resultados en relación con p27
Kip1, un inhibidor del ciclo celular, así se describe en el cáncer de próstata [17].
Métodos
muestras estudiadas a partir de 65 pacientes sometidos a prostatectomía radical por cáncer de próstata (edad 50-76 [65] mediana de años). tejido prostático de pacientes que fueron sometidos a cistoprostatectomía radical por cáncer de vejiga (n = 13, edad media 67 años) o transvesical /transuretral de la próstata, adenoma-enucleación debido a la hiperplasia (n = 10, edad media 70 años) y no hay indicios de cáncer de próstata se incluyeron. Características clínicas se dan en la Tabla 1. Para todos los pacientes con cáncer de próstata, los niveles de PSA pre-operativas, así como TNM-puesta en escena y la puntuación de Gleason estaban disponibles. Para el análisis de la puntuación de Gleason, se compararon muestras del grupo "cáncer de próstata" con una puntuación de Gleason hasta 3 + 4 (= 7a; N = 11), con tal que tenga una puntuación de Gleason de 4 + 3 = 7b y superior (N = 24).
el estudio fue aprobado por el comité de ética local (Universidad de Tubinga) y todos los pacientes participantes dieron su consentimiento informado por escrito.
Para asegurar una calidad óptima del tejido de la próstata y para evitar la congelación retardada del tejido fresco, se realizó un procedimiento realice inmediatamente la congelación. El tejido de próstatas normales se congelaron en nitrógeno líquido inmediatamente después de la resección de la pieza quirúrgica (grupo 'benigna'; N = 23). Las muestras fueron incluidos en el estudio, si: a) histopatológico de trabajo de toda la pieza quirúrgica reveló ningún signo de cáncer de próstata y b) una diapositiva representativa de la muestra de tejido mostró histología de la próstata no maligno.
Los tejidos de los radicales pieza de prostatectomía (dando como resultado la 'tumorales tejidos de la próstata adyacentes "y los" tejidos de cáncer de próstata') se tomaron muestras de la siguiente manera: inmediatamente después de la resección del espécimen era digital palpado y se cortaron por la localización de la zona del tumor supuesta (el área de la dureza periférica ). A continuación, una muestra periférica de tamaño de aproximadamente 5 x 5 x 3 mm se cortó y se divide longitudinalmente en láminas 3, de los cuales los dos exteriores (I y III) fueron broche de congelados en nitrógeno líquido. La lámina media (II) fue fijado con formalina, embebido en parafina y se procesan a una diapositiva histológica. Estudio diagnóstico de la corredera secundaria por un uropathologist experimentado decidió la afiliación a un grupo de tejido congelado en paralelo: si no había ninguna señal de cáncer de próstata en la diapositiva, el tejido respectivo fue llevado a la 'tissue' grupo de próstata benigna adyacente tumoral (N = 30). Si la diapositiva reveló tejido tumoral por debajo de 60% de la superficie, el tejido respectivo fue excluido del estudio debido a sus caracteres de tejidos mixtos. Si la proporción tumor estaba por encima de 60% de la corredera, se incluyó el tejido paralelo en el análisis como "tejido de la próstata cáncer '(N = 35).
Debido a este enfoque, cada muestra analizada se derivó de una diferente paciente.
las muestras de tejido congelado se utilizaron para el aislamiento de ARN, los correspondientes tejidos en parafina para inmunohistoquímica. Las muestras congeladas fueron lisadas en RLT usando Tissue Lyser kit (Qiagen). Se extrajo el ARN por RNeasy Mini Kit (Qiagen). PCR (en duplicados) se realizaron en un LightCycler 480 (Roche Diagnostics) utilizando sondas Maestro y sondas fluorescentes de la biblioteca de sondas universal (Roche Diagnostics). Se usó el siguiente protocolo de PCR en tiempo real [18]:
programa de desnaturalización (95 ° C durante 5 minutos), un programa de amplificación y cuantificación repitió 45 veces (95 ° C durante 10 segundos, 60 ° C para 30 segundos, 72 ° C durante 1 segundo [adquisición de fluorescencia]), y finalmente un programa de enfriamiento a 4 ° C. Los cebadores fueron diseñados utilizando el software de Roche Sonda Diseño 2 (Roche Diagnositcs) y adquiridos de TIB MOLBIOL (Berlín, Alemania) |
isoforma del receptor de insulina A se amplificó utilizando los cebadores siguientes:. Adelante CAT TTT TCG TCC CCA GGC, revertir CCACCGTCACATTCCCAAC. La insulina isoforma del receptor B se amplificó usando los cebadores: Delantero TTT CGT CCC AAA CAG CAA CTC T, revertir CCA CCG TCA CAT TCC CAA C. Ambas reacciones se utilizan 5 '6-FAM-fosforamidita TCG AGG CCA GAC CTG CGT T-barbacoa (4, 4-Bis- [2-butyloctyloxy] -p-cuaterfenilo) como sonda. Como control interno, se utilizaron estos PCRs para calcular la contribución de receptor de insulina isoforma A con el contenido del receptor de insulina total de tres tejidos humanos: En las células de hepatoma HepG2, 69% del receptor de insulina fue isoforma A, mientras que en los adipocitos humanos diferenciados y en el músculo esquelético, sólo el 30% era isoforma A. estos valores son comparables a los valores reportados para estos tejidos en la literatura [8]. p27
Kip1 (CDKN1B) se amplificó con los cebadores: GAG hacia adelante AGC CAG GAT GTC AGC G, revertir TTG TTT TGA GTA GAA GAA TCG TCG GT. Para esta reacción, 5 '6-FAM fosforamidito-CCT TTA ATT GGG GCT CCG GCT AAC T-BBQ se utilizó como sonda. Las otras reacciones utilizadas sondas Roche estándar y los siguientes cebadores: adelante IGF-1 receptor TCA GCG CTG CTG ATG TGT, revertir GGC TCA TGG TGA TCT TCT CC; sustrato del receptor de insulina (IRS) -1 reenviar GCC GCC TAT AGC ATC AGT TT, revertir TTG CTG AGG AGG TCA TTT TCT TC; IRS-2 hacia adelante CTT CTT TGA GTC CCA CCA CTT, revertir CAT CCT GGT GAT AAA GCC AGA.
Para la inmunohistoquímica, las diapositivas se deparaffinized, rehidratada y se sumerge en una solución de peróxido de hidrógeno al 3%. La recuperación del antígeno se realizó mediante diapositivas hirviendo en buffer.p27 citrato
Kip1 proteína se detectó utilizando Vectastain Elite ABC kit (Vector Laboratories, Burlingame, CA, USA). Después de bloquear endógeno de avidina /biotina por el vector de bloqueo kit (Vector) y la tinción no específica mediante incubación con suero normal (caballo, kit ABC) un clon de ratón monoclonal SX53G8 anticuerpo (Dako, (Santa Barbara, CA, EE.UU.) se utilizó en una dilución de 1:150 a 4 ° C durante la noche de incubación. el anticuerpo secundario se utilizó de acuerdo con las recomendaciones del fabricante y DAB (Vector) se usó para la visualización. Todos los portaobjetos se contratiñeron con hematoxilina de Mayer. tejido de las amígdalas sirvió como control positivo. la tinción se cuantificó de acuerdo con la escala de referencia inmunohistoquímica semicuantitativa que van desde 0-300 como se describe en [19].
para el análisis estadístico, se utilizó JMP 9.0 (SAS Institute, Cary, NC, EE.UU.). No datos distribuidos normalmente se transformaron logarítmicamente antes del análisis estadístico. Las diferencias entre los dos grupos fueron evaluados mediante la prueba t de Student. Las diferencias entre los múltiples grupos fueron probados por ANOVA seguido de pruebas post-hoc de Tukey Kramer. Las correlaciones se analizaron mediante análisis de regresión lineal. Los resultados con p & lt; 0,05 se consideraron estadísticamente significativos
Resultados
Para evaluar las proporciones niveles relativos de expresión, se calculó entre las dos isoformas de infrarrojos, entre cada isoforma IR y el receptor de IGF-1 también. como entre IRS 1 y 2. la comparación de tejido benigno con el cáncer de próstata, IR isoforma a a la proporción de B fue significativamente diferente en favor de la isoforma a de cáncer en comparación con tejido benigno (Figura 1 a). IRS-1 a la proporción de IRS-2 fue alterado con relativamente mayor IRS-2 expresión (Figura 1 B). Para ambas relaciones, tejido benigno adyacente histológico con el cáncer fue significativamente diferente para el tejido benigno, pero no para el cáncer de próstata (Figuras 1 A y B). Si bien no hubo diferencias entre los grupos en la isoforma A IR a-IGF 1 relación de receptor (Figura 1 C), IR isoforma B a la proporción de receptor de IGF-1 fue significativamente menor en el cáncer y el tejido adyacente en comparación con la próstata benigna (Figura 1 D) . Cuando repetición de los análisis en el subgrupo de todos los pacientes sin diabetes, todas las diferencias reportadas para todo el grupo siguieron siendo significativas (todos p & lt post-hoc; 0,05, datos no mostrados). Además, en este subgrupo la isoforma A IR a la proporción de receptor de IGF-1 fue significativamente menor en el tejido benigno histológico adyacente al cáncer en comparación con los otros dos tipos de tejidos (ANOVA p = 0,0099, post-hoc p & lt; 0,05).
Las barras representan medias ± SEM., N = 88. Los datos fueron log
e
, transformado antes del análisis estadístico. Cuando la comparación entre los grupos por ANOVA resultó en diferencias estadísticamente significativas, se realizó la prueba post-hoc de Tukey Kramer. Resultados estadísticamente significativos de este ensayo se dan en las figuras. relación isoforma B receptor A /insulina isoforma (A) del receptor de insulina. ANOVA p = 0,0002. (B) Relación de IRS-1 /IRS-2. ANOVA p = 0,0426. isoforma A /relación de receptor (C) del receptor de la insulina IGF 1. ANOVA p = 0,2. /Relación del receptor (D) del receptor de la insulina IGF isoforma B 1. ANOVA p = 0,0016. ANOVA - análisis de la varianza; IGF - factor de crecimiento similar a la insulina; IR - receptor de la insulina; IRS - sustrato receptor de insulina; ARN - ácido ribonucleico; SEM -. Error estándar de la media
En la inmunohistoquímica, la expresión de p27
Kip1 se distribuye homogéneamente a lo largo de los anillos glandulares (Figura 2 A y B). En la mayoría de muestras de una tinción nuclear estaba presente, mientras que sólo en caso de fuerte tinción se detectó una fracción citoplásmica adicional. Las células inflamatorias y los vasos se tiñeron positivo, pero no fueron considerados para la evaluación cuantitativa. Las muestras estaban disponibles para inmunohistoquímica y tinción fue exitosa en 68 muestras. Hubo una correlación negativa significativa de p27
Kip1 con IR isoforma A a la relación B (Figura 2 C). Para el IRS-1 a la proporción de IRS-2, se detectó una correlación positiva significativa con pf27
Kip1 (Figura 2 D). Mientras p27
Kip1 se correlacionó positivamente con IR isoforma B de IGF-1 relación de receptor (Figura 2 F), no hay correlación con IR isoforma A a la proporción de receptor de IGF-1 se encontró (Figura 2 E).
(a) y (B): tinción Representante de p27
Kip1, a: una muestra de cáncer de próstata con una fuerte tinción. B: una muestra de cáncer de próstata con la tinción débil. Bar = 100 micras. (C) - (F): coeficientes de la expresión de genes se borró contra la cuantificación de p27
tinción Kip1. Las líneas representan línea de ajuste ± intervalo de confianza, N = relación 69. (C) receptor de la insulina isoforma A /B de la insulina isoforma del receptor. relación (D) del IRS-1 /IRS-2. isoforma A /relación de receptor (E) receptor de la insulina IGF 1. /Relación del receptor (F) del receptor de la insulina IGF isoforma B 1. Los datos fueron log
e
, transformado antes del análisis estadístico. Las correlaciones fueron analizados por análisis de regresión lineal. IRS - sustrato del receptor de insulina; IGF -. El factor de crecimiento similar a la insulina
En 55 muestras, también se cuantificó la expresión de p27
Kip1 (CDKN1B) en el nivel de ARN y se detectó una correlación positiva con los datos de expresión de proteínas de inmunohistoquímica ( p = 0,0306). Al igual que con los datos de proteínas, p27
Kip1 ARN fue significativamente correlacionado negativamente con la isoforma A IR a la proporción de B (p = 0,0069). Para p27
Kip1 ARN, había una tendencia hacia la correlación positiva de IRS-1 a la proporción de IRS-2 (p = 0,0675), así como una tendencia hacia una correlación positiva con la isoforma A IR a IGF-1 relación de receptor (p = 0,0862). No se encontró correlación con IR isoforma B de la relación del receptor de IGF-1 (p = 0,7).
En las muestras de cáncer de próstata, ninguno de los coeficientes de la expresión de mRNA analizados se asoció con una puntuación de Gleason, los niveles de PSA preoperatorios o la OMS t o N-etapa (todo p≥0.2).
Cuando se compararon las muestras de los pacientes que sufren de diabetes tipo 2 con tal de pacientes sin, no se encontraron diferencias en el IR isoforma a a la relación B o la relación en IRS 1 /IRS 2 (p = 1,0 y 0,7, respectivamente). IGF-1 los niveles de receptores fueron, sin embargo, significativamente menor en los pacientes con diabetes tipo 2 (p = 0,0019).
Discusión
Hemos investigado la composición de las moléculas importantes para la transducción de señales de insulina en el cáncer de próstata en comparación con tejido benigno de la próstata. tejido benigno se deriva o bien de una próstata completamente benigna o era histológicamente tejido benigno adyacente al cáncer de próstata. Curiosamente, no hubo diferencias significativas entre la próstata malignos y benignos, pero no entre el tumor y el tejido adyacente. En tanto, la relación entre IR isoformas A y B fue diferente en favor de la isoforma A y el IRS-1 a la proporción de IRS-2 difería en favor de IRS-2. Mientras que la isoforma A IR A a B, así como el IRS-1 de IRS-2 ratios no fueron diferentes en los pacientes con diabetes tipo 2, encontramos receptor de IGF-1 que se reduce en este grupo de pacientes.
en muchos otros tipos de cáncer [8], encontramos una expresión más alta de IR isoforma a en comparación con la isoforma B. de acuerdo con ello, hemos encontrado niveles reducidos de la p27 inhibidor del ciclo celular
Kip1 en las muestras con mayor isoforma IR A. Tanto la insulina y IGF II puede activar esta isoforma; sin embargo, hay diferencias en la señalización aguas abajo [20]. Además, IGF-II se une al receptor de IGF-1 y de este receptor también se impuso la isoforma IR metabólicamente activo B en las muestras de cáncer de próstata. Esto se asoció de nuevo con p27 alterada niveles
Kip1. Por lo tanto, todos nuestros resultados predicen aumentaron efectos proliferativos de la insulina y el IGF-II en el cáncer de próstata. De interés, anticuerpos específicos para la isoforma A IR están en desarrollo para el tratamiento del cáncer [8]. En base a los resultados, estos fármacos también pueden ofrecer opciones terapéuticas en el cáncer de próstata.
Hemos encontrado el cáncer de próstata sobreexpresan IRS-2 sobre el IRS-1. Curiosamente, IRS-2 fue identificado como un regulador positivo de la metástasis en el cáncer de mama, mientras que el IRS-1 puede ser un supresor de la metástasis [21], [22]. Este papel de IRS-2 en la patogénesis de la metástasis parece ser un principio general que se aplica para otros tumores malignos así como [15], [21]. Dado que el IRS-2 está aguas abajo del IR para que el ligando, la insulina, está marcadamente elevada en la diabetes tipo 2, nuestros hallazgos de mayor IRS-2 en el cáncer de próstata sugiere un aumento de riesgo de metástasis en los hombres con diabetes. De acuerdo con esta hipótesis, la supervivencia después del diagnóstico de cáncer de próstata es significativamente menor en los pacientes con DM2 en comparación con tal sin [7].
La expresión del receptor de IGF-1 significativamente menor en muestras de pacientes con diabetes tipo 2 es tanto inesperada para nosotros. No tenemos conocimiento de ningún informe sobre tal fenómeno en la próstata o cualquier otro tejido. Sin embargo, con base en el número relativamente pequeño de pacientes con diabetes en nuestro estudio, no pudimos analizar este hallazgo por separado en el cáncer de próstata en comparación con la próstata sana. Por supuesto, esto debe ser investigado en estudios futuros, ya que la reducción de IGF-1 la disponibilidad del receptor en el cáncer de próstata en pacientes con diabetes tipo 2 podría hacerlos más propensos a responder a cierta radio- o quimioterapia [23], [24], pero podría hacerlos resistentes a los tratamientos que se dirigen directamente al receptor de IGF-1 [24].
Uno más sorprendente hallazgo de nuestro estudio es histológicamente las características del tejido benigno adyacente al cáncer de próstata. Incluso si este tejido aparece como histológicamente normales tejido de la próstata, su composición de las moléculas de señalización de la insulina es más similar a cáncer que al tejido sano. Observaciones comparables se han hecho en los estudios anteriores, así [9], [10]. Al menos dos explicaciones diferentes son concebibles: La cascada de señalización de la insulina en toda la próstata se podría alterar mucho antes de que el cáncer se desarrolla con un segundo golpe que sea necesaria para desencadenar el cáncer emergente. Otra posible explicación es que el cáncer se modifica su tejido circundante e induce un gradiente de tejido de la expresión de subtipo IR /IRS. A pesar de ser histológicamente benigno, el tejido adyacente podría por lo tanto ya ser alterado por el tumor y, finalmente, puede albergar potencial tumorigénico. Este fenómeno está presente en otros tumores malignos, por ejemplo, cambios epigenéticos están presentes en lo que 4 cm de distancia de cáncer de mama [25]. Si la segunda hipótesis resulta cierto en otros estudios, podría tener grandes implicaciones para el diagnóstico de cáncer de próstata: incluso si el foco del cáncer se perdería en una biopsia de próstata, alterado la composición IR /IRS en la muestra indicaría cáncer en el órgano y nuevas medidas inmediatas.
Una limitación de nuestro estudio es que no se midió la insulina en ayunas y los niveles de glucosa en ayunas en los pacientes de los cuales se derivan las muestras investigadas. Los principales determinantes de estos parámetros, a saber, la edad y el índice de masa corporal (IMC), así como la prevalencia de la diabetes tipo 2 y el uso de medicamentos para la diabetes, no difirieron entre los grupos de pacientes en nuestro estudio. Sin embargo, la insulina y la glucosa se demostraron para regular la composición isoforma IR [8], [26], [27], y, por tanto, más estudios deben abordar estos parámetros.
Además, sería muy interesante comparar IR /composición IRS en el nivel de proteínas, además de el ARNm. La cantidad de tejido disponible en nuestro estudio no fue suficiente para que suficientes transferencias Western. Por otra parte, hemos tenido acceso a una sola muestra de cada uno de próstata. El estudio de muestras múltiples de un solo órgano con diferente proximidad al sitio de cáncer podría permitir estudios detallados sobre los posibles gradientes de composición isoforma IR y IRS desde el cáncer a los tejidos circundantes. Estos análisis podrían desentrañar el motivo de nuestra observación de similitudes entre el cáncer de próstata y el tejido adyacente.
En conjunto, encontramos diferencias significativas en la cascada entre tejido benigno de la próstata y el cáncer de señalización de infrarrojos. tejido benigno histológico adyacente al cáncer de próstata mostró patrones de expresión similares a los tumores malignos. Nuestros hallazgos sugieren un papel de la vía de señalización de la insulina en el cáncer de próstata y por lo tanto pueden ser relevantes para ambos enfoques diagnósticos así como terapéuticos en esta patología.
Reconocimientos
Agradecemos la excelente técnica la asistencia de C. Haas y L. Nono (Universidad de Tübingen, Tübingen, Alemania).