Extracto

gástrico y colorrectal (CRC GC y) tienen mal pronóstico y son resistentes a quimio y /o radioterapia. En el presente estudio, los efectos profilácticos de células de vacunación dendríticas (DC) son evaluados sobre la progresión de la enfermedad y los beneficios clínicos en un grupo de 54 GC y pacientes con CCR tratados con DC inmunoterapia combinada con el asesino de citoquinas inducida por células (CIK) después de la cirugía con o sin quimio-radioterapia. DC se preparó a partir de las células mononucleares aisladas de pacientes utilizando IL-2 /GM-CSF y se carga con antígenos tumorales; células CIK se prepararon mediante la incubación de linfocitos de sangre periférica con anticuerpos CD3 IL-2, IFN-γ, y. La terapia de DC /CIK iniciado hace 3 días después de la quimioterapia de dosis baja y se repitió 3-5 veces en 2 semanas como un ciclo con un total de 188,3 ± 79,8 × 10
6 DC y 58,8 ± 22,3 × 10
8 células CIK. Los niveles de citoquinas en el suero de los pacientes antes y después de los tratamientos se midieron y el seguimiento se llevó a cabo durante 98 meses para determinar la supervivencia libre de enfermedad (DFS) y supervivencia global (OS). Los resultados demuestran que todas las citocinas ensayadas fueron elevados con niveles significativamente más altos de IFN-γ y IL-12 tanto en GC y las cohortes de CRC de DC /CIK pacientes tratados. Mediante análisis de regresión de Cox, la terapia de DC /CIK redujo el riesgo de progresión de la enfermedad después de la operación (p & lt; 0,01) con un aumento de OS (& lt; 0,01). Estos resultados demuestran que, además de quimioterapia y /o radioterapia, DC /CIK inmunoterapia es un enfoque potencial efectivo en el control del crecimiento del tumor de GC después de la operación y los pacientes de CRC

Visto:. Gao D, Li C, Xie X, Zhao P, Wei X, Sun W, et al. (2014) tumorales autólogas pulsadas con lisado dendríticas inmunoterapia celular con células asesinas inducidas por citoquinas mejora la supervivencia en gástrico y colorrectal pacientes. PLoS ONE 9 (4): e93886. doi: 10.1371 /journal.pone.0093886

Editor: Michael Lim, Johns Hopkins Hospital, Estados Unidos de América

Recibido: August 1, 2013; Aceptado: March 10, 2014; Publicado: 3 Abril 2014

Derechos de Autor © 2014 Gao et al. Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos de la licencia Creative Commons Attribution License, que permite el uso ilimitado, distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que el autor original y la fuente se acreditan

Financiación:. Los autores no tienen el apoyo o la financiación para reportar

Conflicto de intereses:.. autor correspondiente Jian Jian Li es un miembro del Consejo Editorial PLOS, y esto no altera nuestra adhesión a PLoS ONE políticas y criterios editoriales

Introducción

El cáncer gástrico (CG) y el cáncer colorrectal (CCR) son las principales enfermedades malignas del tracto alimentario. Mientras GC es el cáncer más común en la región de Asia y el Pacífico, el CRC se sitúa como la cuarta neoplasia más frecuente en todo el mundo, con alrededor de 1,2 millones de nuevos casos y 609,051 muertes al año [1]. La resección quirúrgica con o sin quimioterapia adyuvante y /o terapia de radiación sigue siendo la modalidad clave para GC y CRC, pero desafortunadamente muestra beneficios clínicos limitados debido a la alta tasa de metástasis tumoral. Aunque quimio-radioterapia adyuvante actual se ha demostrado prolongar la supervivencia del paciente en la presencia de lesiones recurrentes [2], [3], los efectos secundarios graves generalmente limitan la eficacia de esta modalidad anti-cáncer [2] - [4]. Para mejorar aún más la supervivencia global de GC y pacientes con CRC, es crítico para explorar nuevos enfoques para controlar la metástasis del tumor con o sin el uso de la quimioterapia tradicional y /o radioterapia.

Las células dendríticas (DC) juegan un papel crucial en la inducción de respuestas de células T específicas de antígeno para proporcionar inmunoterapia activa [5] - [7]. Los estudios clínicos con vacunas de células cancerosas específicas DC-diseñadas específicamente demostraron diferentes beneficios clínicos. Los pacientes con linfoma [8], [9], melanoma metastásico [10], [11], cáncer de colon, y cáncer no microcítico de pulmón de células [12] mostró que la vacunación con DCs antígeno pulsado tumorales, ya sea aislado directamente de la sangre o generada
ex vivo
a partir de precursores sanguíneos, suscitó antígeno reacción inmune específica y, en algunos casos, las respuestas tumorales significativas. De hecho, la aplicación de un régimen de inmunoterapia activa, Sipuleucel-T (APC8015) utilizado por la activación de las células mononucleares de sangre periférica (PBMCs) con una fosfatasa ácida prostática (PAP), una proteína de fusión de antígeno de cáncer de próstata, con GM-CSF, dio lugar a aproximadamente de 4 meses de supervivencia media prolongada en pacientes con cáncer de próstata [13] - [15], y fue aprobada por la FDA para el tratamiento de los cánceres de próstata metastásico [14], [16], [17]. células CIK son un subconjunto de linfocitos T asesinas naturales (NKT) que son predominantemente CD3
+ CD56
+ tipo II de las células NKT [18], y estas células se puede generar
ex vivo
incubando linfocitos de sangre periférica con un anticuerpo monoclonal agonista anti-CD3, la interleucina (IL) -2, IL1-β y el interferón -γ (IFN). células CIK, apoyados por los resultados alentadores de ensayos clínicos en ambos contextos autólogos y alogénicos, son conocidos para eliminar cytolytically células tumorales [19]. En contraste con killer activadas por linfoquinas actividad de las células (LAK), que son las células T efectoras citotóxicas estimuladas predominantemente en respuesta a la alta concentración de la interleucina-2 (IL-2), las células CIK presentan una mayor tumor lítica de células [20], [21 ], una mayor tasa de proliferación [22], y relativamente baja toxicidad [23]. Aunque la inmunoterapia pasiva por la transferencia adoptiva de células T se cree que es eficaz en el control de los tumores primarios, no está claro si la inmunoterapia pasiva es eficaz en el control a largo plazo de la recaída del tumor [24]. Por otra parte, la inmunoterapia activa con vacunas específicas de tumores, como la vacuna DC, tiene el beneficio potencial de mejorar significativamente las células efectoras y de memoria T específicas de tumor. Las respuestas anti-tumorales provocadas por la terapia de DC /CIK han sido reportados en un número de
ex vivo
[25] - [29] y
in vivo
[30] estudios, así como en ensayos clínicos preliminares en pacientes con linfoma de Hodgkin no Hodgkin y [31], [32] y el cáncer de pulmón de células no pequeñas con pocos efectos secundarios [33]. En el presente estudio, los beneficios clínicos se evaluaron en un grupo de 54 pacientes con cáncer gástrico y CRC tratados con DC inmunoterapia combinada con células asesinas inducida por citoquinas (CIK) después de la cirugía con o sin quimio-radioterapia. Los resultados demuestran tasas de SLE y la SG mejoraron con niveles elevados de IFN-γ y cohortes de IL-12 tanto en GC y CRC de DC /CIK los pacientes tratados.

Pacientes y métodos

Diseño del estudio , el reclutamiento de pacientes, y la recopilación de datos

Hemos llevado a cabo el estudio con pacientes tratados en el Departamento de Cirugía y el Centro de Terapia Biológica, hospital central de Qingdao, Qingdao, china 2005-2010 (Tabla 1). Los pacientes fueron reclutados con los siguientes criterios: GC 1) mayores de 18 años, 2) patológicamente confirmado o CRC, 3) fueron sometidos a resección quirúrgica de tumores primarios, 4) sin evidencia de metástasis tumoral o recurrencia antes de recibir la inmunoterapia basada en células, 5) de haber completado la quimioterapia y /o radioterapia durante al menos 1 mes y 6) la firma del formulario de consentimiento. Los pacientes en el grupo de control fueron reclutados con características patológicas clínicas y demográficas. Un total de 27 pacientes fueron asignados al azar a la inmunoterapia basada en células y 27 pacientes se incluyeron en el grupo de control. Los tumores se clasifican de acuerdo a la clasificación de la Unión Internacional Contra el Cáncer (UICC), basado en subconjuntos pTNM. consentimientos informados de todos los pacientes se obtuvieron y los procedimientos del estudio fueron revisados ​​y aprobados por el Comité de Ética del Hospital Central de Qingdao. Después de la inmunoterapia basada en células, todos los pacientes obtienen un seguimiento por las visitas al hospital y /o entrevistas telefónicas en por lo menos cada 6 meses. recurrencia local del tumor y la metástasis a distancia fueron examinados por imágenes de los análisis. DFS (supervivencia libre de enfermedad, el intervalo de tiempo entre la cirugía y la recurrencia del tumor) y OS (supervivencia global, el tiempo entre la cirugía y el último seguimiento) han sido recogidos en la base de datos de investigación del proyecto. las tasas de SLE y la SG se calcularon en ambos grupos de tratamiento y control de las fechas de la cirugía y los seguimientos se realizaron en todos los pacientes antes de agosto de 2011, incluyendo los pacientes con 12 mes o más tiempo después de la inmunoterapia.

DC vacuna y la terapia celular CIK

Una dosis de 1 × 10
6 unidades de IL-2 (Quangang Pharma Co. de Shandong, china) en 250 ml de solución salina fisiológica fue preparado y administrado por vía intravenosa a los pacientes en el grupo de tratamiento, una vez al día durante 5 días consecutivos. Tres a seis días después de la IL-2 de inyección, las células mononucleares (4-6 × 10
9) se obtuvieron de un total de 6-9 litros de sangre que circula por el Sistema de COBE Spectra Aféresis (Gambro BCT, Inc., Colorado, EE.UU. ) y se almacena en 120 a 150 ml de plasma. Si las células mononucleares fueron menos de 4 × 10
8 /litro, GM-CSF (150 mg) se aplicaron por vía subcutánea a los pacientes-una vez al día durante 1-3 días antes de una nueva colección de células mononucleares se procesó.

antígeno preparación
antígeno tumoral
se preparó siguiendo el protocolo establecido [34], [35] a partir de células de cáncer gástrico AGS humana o de cáncer de colon LS-174T. Las células tumorales se cultivaron durante 2-3 pasajes (1-2 x 10
8), y se recogió y se lavó con solución salina normal por 3 veces, y se lisaron mediante congelación-descongelación tres veces, y se analizaron con ruptura celular por ultrasonidos. Los lisados ​​de células tumorales A continuación se fraccionaron por centrifugación (1.200 rpm x 5 min), y se recogió y se filtró con un filtro de 0,22 (Carrighwohill, Co. Cork, Irlanda), y la concentración de proteína en el sobrenadante se midió antes de su almacenamiento en el sobrenadante - 80 ° C.

Preparación de DC y células CIK

las células mononucleares se aislaron de las células recogidas de sangre periférica de pacientes de CRC GC y siguiendo un método establecido [36], [37] utilizando Ficoll (GE Healthcare Life Science, Shanghai, china). Las células aisladas se suspendieron en medio RPMI 1640 a una concentración de 1 × 10
7 ml
-1 y se cultivaron en 175 cm
2 frascos de cultivo celular a 37 ° C, 5% de CO
2 para 2 hrs. Las células adherentes se cultivaron en medio de cultivo libre de suero DC (CellGenix, Freiburg, Alemania) que contiene 20 ng /ml de interleucina 4 (IL-4) y 50 ng /ml de GM-CSF a 37 ° C, 5% de CO
2 para 6 días. a continuación, se añadió medio de cultivo que contiene antígeno tumoral DC preparada en células cultivadas a una concentración final de 50 mg /ml, y se cultivaron durante otros 2 días. Países en desarrollo madurado fueron examinados por citometría de flujo para DC marcadores CD83 y HLA-DR. Las preparaciones se ensayaron como bacterias y libre de pirógenos. Una porción del preparado DC se infundió en los pacientes y los DC restantes se almacenaron a -80 ° C. Las células en suspensión se cultivaron en medio RPMI 1640 (2 × 10
6 /ml) que contiene 10% BFS, 100 U /ml de IL-2, 300 U /ml de IFN-γ, 20 ng /anticuerpo monoclonal ml CD3 (R & amp; D Systems, Minneapolis, MN, EE.UU.), y 40 U /ml de gentamicina. En el día 8, una porción de las células se examinaron por citometría de flujo para marcadores de células CIK con anticuerpos contra CD3, CD8, y CD56. Las células fueron mantenidas en solución salina normal con 1% de albúmina, y el resto de las células suspensiones se mantuvieron en cultivo durante otros 7 días.

vacuna DC y CIK administración de células

Los pacientes en el grupo de tratamiento recibieron un ciclo de baja dosis inicial de quimioterapia en el día después de la recogida de células mononucleares con Carmofure (100 mg, po., bid) para 5~6 días. La infusión de células CD y CIK se inició el día 2 ó 3 días después de la quimioterapia. células DC preparadas se dividen en dos partes: una parte se mezcló con células CIK en 250 ml de solución salina normal que contiene 1500 U /ml de IL-2 y 1% de albúmina, y se infunden en los pacientes por vía intravenosa. La otra parte se suspendió en 1,5 ml de solución salina normal y se inyecta por vía subcutánea en el área de ganglios linfáticos de drenaje adyacentes a los sitios tumorales. El tratamiento se repitió 3-5 veces en 2 semanas como un ciclo. Los pacientes con enfermedades avanzadas de la etapa recibieron 2 ciclos de tratamiento, mientras que los pacientes en fase inicial fueron tratados con un ciclo. Las respuestas inmunes de pacientes se controlaron antes y después del tratamiento mediante la medición de los niveles séricos de IFN-γ, IL-2, IL-6, IL-10 e IL-12 determinados por ELISA (R & amp; D Systems, Minneapolis, MN, ESTADOS UNIDOS). Los horarios de tiempo de preparación y la infusión de CC y CIK se muestran en la Figura 1.

Los pronósticos de los pacientes se registraron hasta 98 ​​meses después de la fecha de la cirugía en ambos grupos de tratamiento y control.

El análisis estadístico

Los datos se presentan como porcentajes, medias con desviación estándar (media ± dE), o la mediana con los intervalos de confianza del 95% (IC del 95%). Prueba de chi cuadrado, t de Student o la prueba de Mann-Whitney, pruebas de rangos de Spearman lineal de Pearson o se utilizaron para el análisis según el caso. El resultado del tratamiento fue analizada mediante curvas de supervivencia de Kaplan-Meier con la prueba de log rank, y multivariante de Cox de riesgos proporcionales de pruebas de regresión. La significación estadística se estableció en p & lt; 0,05. Todos los análisis estadísticos se realizaron con el programa SPSS 16.0 para Windows (SPSS, Chicago, IL, EE.UU.).

Resultados

La información de base

Un total de 54 pacientes con histológico confirmó gástrica o adenocarcinoma colorrectal fueron reclutados al azar en este estudio que consiste en 27 pacientes en cada grupo. Los datos patológicos demográficas y clínicas de los pacientes en los grupos de tratamiento y de control se presentan en la Tabla 1. La mitad de los pacientes en el grupo de tratamiento y todos los pacientes del grupo de control habían recibido al menos un ciclo de quimio-radioterapia antes de la inscripción. La inmunoterapia se inició al menos un mes después de la terminación de la quimioterapia y /o radioterapia y el tiempo de seguimiento fue de 98 meses para todos los pacientes en los grupos de tratamiento y control.

Características de las células DC /CIK para la infusión de células

El número medio de células infundidas en los pacientes en un solo ciclo fue de 188,3 ± 79 × 10
6 para los países en desarrollo y de 58,8 ± 22,3 × 10
8 para las células CIK. Se analizaron las células que expresan DR /CD11C y CD83 (marcadores DC) o CD3 /CD8 y CD3 /CD56 (marcadores CIK). DCs preparadas a partir de pacientes de GC fueron 88% -81% positivo para DR /CD11C y 85% -71% positivas para CD83 (Fig. 2A, B). células CIK preparados a partir de pacientes GC mostró 73% -46% positivas para CD3 /CD8 y 42% -16% positivas para CD3 /CD56 (Fig. 2C, D). Además, DC preparó a partir de pacientes con CRC eran 87% -80% positivas para DR /CD11C y 84% -71% positivas para CD83 (Fig. 3A, B), y células CIK de pacientes con CRC eran 75% -48% positivo para CD3 /CD8 y 41% -11% positivas para CD3 /CD56, respectivamente (Fig. 3C, D). La eficacia citolítica de las células CIK general de todos los pacientes se mejoró ~ 2,5 veces. Estos resultados indican que la mayoría de los países en desarrollo y las células CIK preparado a partir de los pacientes estaban maduras y funcionales.


los niveles de citoquinas en suero después de la terapia DC /CIK

Hemos examinado los niveles séricos de un grupo de citoquina para cada paciente antes y después de DC /tratamientos CIK (Figura 4 para GC (a) y CRC (B)). Los niveles de IL-2, IL-6 e IL-10 ligeramente mejorado, sin significación estadística en el suero de pacientes con CRC y GC (Fig. 4A, B). Sin embargo, IL-12 e IFN-gamma niveles séricos aumentaron significativamente tanto en GC y pacientes con CRC, lo que indica que la terapia de DC /CIK puede promover específicamente una respuesta inmune Th1 para mediar tumor efecto de la terapia DC /CIK matar.


supervivencia libre de enfermedad (DFS) y supervivencia global (SG) de los pacientes después de la inmunoterapia basada en células

Como se muestra en las figuras 5 y 6, SLE y la SG fueron significativamente prolongada tanto en pacientes en DC /grupos de tratamiento CIK (GC: 5 años de tasa de SSE: 66%, tasa de SG: 66%; CRC: tasa de SSE a 5 años: 66%, tasa de SG: 75%) en comparación con los pacientes en los grupos de control (GC: 5- año tasa de SSE: 34%, tasa de SG: 34%; CRC: tasa de SSE a 5 años: 8%, tasa de SG: 15%; p & lt; 0,01). Para examinar la respuesta diferencial de GC y el CRC, se analizaron dos cohortes (GC: P & lt; 0,05; CRC: p & lt; 0,01) y se encontró que el CRC son más sensibles a la terapia DC /CIK de GC. Además, el análisis de regresión proporcional de Cox multivariable confirmó que la terapia DC /CIK significativa e independiente reduce el riesgo de progresión de la enfermedad post-operatorio (odd ratio: 0,09, 95% CI: 0.02-0.42; p & lt; 0,01) o pacientes decesos (Odd ratio: 0,05; IC del 95%:. 0,01-0,37; p & lt; 0,01) después de ajustar por edad, sexo, grado tumoral, estadios TNM, y quimioterapia previa y /o tratamientos de radiación

(a) El general tasa de supervivencia de los pacientes con cáncer gástrico. Las tasas de supervivencia a 1, 3 y 5 años en el grupo de tratamiento fue de 93%, 82% y 66%, en comparación con el control del 79%, 42% y 34%, respectivamente. B) Enfermedad tasa de supervivencia libre de los pacientes con cáncer gástrico. Las tasas de supervivencia a 1, 3 y 5 años en los grupos de tratamiento (cuadro rojo marcado) fueron 86%, 73% y 66%, en comparación con el control del 79%, 42% y 34%, respectivamente. Las curvas de supervivencia acumulada en A y B se analizaron por el método de Kaplan-Meier.

(A) La tasa de supervivencia global de los pacientes con cáncer colorrectal. Las tasas de supervivencia a 1, 3 y 5 años en el grupo de tratamiento fue del 100%, 77% y 75%, en comparación con el control del 85%, 23% y 15%, respectivamente. (B) supervivencia libre de enfermedad de los pacientes con cáncer gástrico. Las tasas de supervivencia a 1, 3 y 5 años en el grupo de tratamiento fue del 100%, 69% y 66%, en comparación con el control del 69%, 15% y 8%, respectivamente. Las curvas de supervivencia acumulada en A y B se analizaron por el método de Kaplan-Meier.

efectos adversos potenciales de la inmunoterapia basada en células

El efecto adverso más común observado en todos los pacientes que reciben la terapia DC /CIK fue la fiebre, que ocurrió en 9 de 27 pacientes tratados (33%) en el intervalo de 37,5-40 ° C. Todos los pacientes se recuperaron espontáneamente o después del tratamiento con la medicina antipirético no esteroideo. No se observaron otras complicaciones significativas que acompañan a la inmunoterapia basada en células.

Discusión

La inmunoterapia del cáncer había mostrado una eficacia potencial en el control del crecimiento del tumor y la supervivencia de los pacientes [14], [38], [39] como las noticias en libertad que "en lugar de utilizar la cirugía, la quimioterapia o la radioterapia, los investigadores de los Institutos nacionales de Salud están encontrando limitado tan lejos, pero que inspira el éxito en un nuevo enfoque para combatir el cáncer, utilizando el sistema inmunológico para atacar los tumores de la forma sería un resfriado o la gripe. -CNN.com (Agosto de 2006) ". Aunque ampliamente estudiado en células y modelos animales, los datos clínicos en relación con el beneficio exacto de la inmunoterapia en la supervivencia del paciente y la progresión de la enfermedad aún no se han investigado más a fondo [17], [40]. A pesar del tamaño limitado de cohortes, este estudio demuestra una notable mejora en el control post-quirúrgico de las tasas de recurrencia y la supervivencia del tumor en pacientes con CRC GC y tratados con terapia DC /CIK combinado. Ha sido bien establecido que las células T ingenuas principales DCS y DC vacuna combinada con la terapia de células CIK ha logrado promesa alentadora como un nuevo enfoque terapéutico para el control de enfermedades en determinados tipos de cáncer [41]. Los países en desarrollo [6], [7], [42] tiene la capacidad de presentar antígenos tumorales a los linfocitos T e inducir las células T citotóxicas específicas contra antígenos tumorales [43]. Sipuleucel-T, la primera vacuna DC, fue aprobado para uso clínico por la FDA en EE.UU. para tratar el cáncer de próstata metastásico resistente a la castración asintomática, la mejora del sistema operativo de los pacientes en fase III de ensayo [14]. prometedores resultados adicionales fueron reportados en los últimos ensayos de fase III con una vacuna tumoral para el tratamiento de varios tipos de cáncer en etapa avanzada [44], incluyendo melanoma, linfoma folicular, el CRC y el NSCLC. Los estudios realizados en las clínicas han establecido que los antígenos asociados a tumores de captura y de proceso DCS y secretar citoquinas para iniciar una respuesta inmune [45].

Además de vacuna DC, CIKS son inducidos por citoquinas y poseen citotoxicidad no específica contra los tumores [24]. células CIK pueden matar directamente las células tumorales, pero tienen una eficacia contra el cáncer de manera significativa a corto plazo y son menos propensos a controlar excrecencia tumoral en el largo plazo [24]. Por el contrario, se muestra vacuna DC para inducir efectoras y de memoria de células T específicas de tumor [24]. Por lo tanto, la combinación de vacuna de DC con el tratamiento CIK puede tener un mayor potencial de la actividad citotóxica y la especificidad en las células T efectoras, que muestra tanto la eficacia anti-tumor a corto y largo plazo. De acuerdo con los beneficios clínicos observados en otros ensayos clínicos [44], nuestro estudio sugiere que el tratamiento con DC /CIK puede mejorar significativamente la supervivencia del paciente, lo que provocó su investigación clínica futuro.

A pesar de una serie de citoquinas pro-inflamatorias eran elevado en el DC /CIK pacientes tratados, sólo dos citoquinas Th1, IL-12 e IFN-γ, mostraron un aumento significativo en los sueros de los pacientes en nuestro estudio. Los estudios han demostrado que el IFN-gamma e IL-12 juegan un papel crítico en la inmunoterapia utilizando CC y CIK [28], [33]. Las células tumorales son muy heterogéneas [46] y un tumor específico pueden contener células con poblaciones tanto altos como bajos de MHC-I [47], [48]. Curiosamente, MHC-I expresión muestra heterogénea entre las células tumorales y la radiación promueve el reconocimiento inmunológico de las células tumorales por las células inmunes a través de MHC-I [49]. Sin embargo, probablemente debido a la heterogeneidad en un tumor dado, un solo tipo de terapia inmune puede solamente ser eficaz en una subpoblación de pacientes con cáncer. Del mismo modo, las células tumorales con mayor expresión de MHC-I pueden ser más sensibles a la terapia de vacuna de DC mientras que las células con menor expresión de MHC-I se pueden matar por CIK. Nuestros resultados apoyan que la terapia combinada DC /CIK puede promover la citotoxicidad de las células tumorales por la orientación diferentes poblaciones de células tumorales, tales como los que tienen varios niveles de MHC-I.

Las dosis de DC y CIK a los pacientes en este estudio se determina en base a la dosis previa prueba de escalada, y se encontró que ser seguro en todos los pacientes. Cabe señalar que en el estudio actual, los datos se obtuvieron a partir de pacientes tratados con un régimen modificado, es decir, antes de la recogida de linfocitos por vía intravenosa de administración de IL-2 para mejorar la función y el número de linfocitos, lo que puede contribuir un papel significativo en DC /La terapia CIK. Además, los pacientes también recibieron 1 ciclo de quimioterapia de dosis baja antes de la infusión DC y CIK, que también puede afectar a la eficacia global de la terapia de DC /CIK. La hipótesis de que un hueco de 3 días es crítica para la suficiente "lavado" del agente quimioterapéutico, con el fin de no afectar a la eficacia de la infusión DC y CIK. Los pacientes en el grupo de control habían sido tratados previamente con al menos 1 ciclo de quimioterapia, comparable a los pacientes incluidos en el grupo de inmunoterapia (Tabla 1 y las Figuras 5, 6). Los efectos potenciales de la quimioterapia de dosis baja antes de la infusión de células [28] también pueden inducir la muerte celular del tumor, hasta de regular la expresión de antígeno tumoral y contribuir a la composición de las células inmunes del huésped. Por lo tanto, se llevarán a cabo más estudios con grandes cohortes de pacientes. En conclusión, este estudio clínico indica que la combinación de la vacuna y la terapia DC CIK puede mejorar significativamente la supervivencia libre de enfermedad en pacientes con cáncer gástrico y colorrectal.

Reconocimientos

Agradecemos al Dr. William Murphy y el Dr. Cheikh Menaa en el centro de cáncer integral diseñado por el NCI, de la Universidad de California en Davis útil para los debates y el apoyo prodigioso de los médicos y enfermeras en el centro de la bioterapia, hospital central de Qingdao.