Extracto
Antecedentes
Los microARN (miRNA) son una clase de pequeña no codificante ARN para regular la diferenciación celular, la proliferación, el desarrollo y la apoptosis. El polimorfismo de un solo nucleótido (SNP) rs895819 se encuentra en el bucle terminal del
pre-miR-27a
. En este caso, el objetivo fue investigar si rs895819 SNP se asoció con el desarrollo de cáncer de células renales (CCR) en una población china.
Métodos
En este estudio de caso-control se incluyeron 594 RCC pacientes y 600 controles sin cáncer con emparejados por edad y sexo. Estamos genotipo este polimorfismo utilizando el ensayo TaqMan y se evaluó el efecto de este polimorfismo en la supervivencia RCC. modelo de regresión logística se utilizó para evaluar los efectos genéticos sobre el desarrollo de CCR y las interacciones entre rs895819 polimorfismo y factores de riesgo.
Resultados
En comparación con los homocigotos AA, los individuos portadores de genotipos AG /GG tenían una estadísticamente significativa susceptibilidad reducida al RCC (OR ajustada = 0,71; IC del 95%: 0,56 a 0,90 =). Por otra parte, los genotipos AG /GG se asociaron con una reducción de la susceptibilidad CCR en estadio clínico localizado (OR ajustada = 0,71; IC del 95% = 0,55-0,91), y no se observaron efectos similares en bien diferenciados y pobremente diferenciado RCC (OR ajustada = 0,71, 95 CI = 0,55-0,93% para bien diferenciado, OR ajustada = 0,51; IC del 95% = 0,28-0,93 para pobremente diferenciado). También hemos observado que rs895819 tenía interacciones multiplicativas con la edad y la hipertensión. Sin embargo, el polimorfismo no influyó en la supervivencia de RCC.
Conclusión
Nuestros resultados sugieren que el
pre-miR-27a
rs895819 polimorfismo puede predecir el riesgo de CCR en un chino población. Los estudios prospectivos más amplios basados en la población deben ser utilizados para validar nuestros resultados
Visto:. Shi D, Li P, Ma L, Zhong D, H Chu, Yan F, et al. (2012) una variante genética en
pre-miR-27a
se asocia con un riesgo de cáncer de células renales reduce en una población china. PLoS ONE 7 (10): e46566. doi: 10.1371 /journal.pone.0046566
Editor: Rui Medeiros, IPO, Inst Puerto Oncología, Portugal
Recibido: 19 Junio, 2012; Aceptado: August 31, 2012; Publicado: 30 Octubre 2012
Derechos de Autor © 2012 Shi et al. Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos de la licencia Creative Commons Attribution License, que permite el uso ilimitado, distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que el autor original y la fuente se acreditan
Financiación:. Este estudio fue apoyado en parte por la Fundación Nacional de Ciencias Naturales de China (81230068, 30972444, 81102089 y 81201571), el Programa llave de la Fundación de Ciencias Naturales de la provincia de Jiangsu (BK2010080), y la Fundación Nacional de Ciencia de la provincia de Jiangsu (BK2011773 y BK2011775), los Qin Lan Proyecto de Jiangsu Provincial del Departamento de Educación, y la prioridad para el Desarrollo Programa Académico de instituciones de educación superior de Jiangsu (Salud Pública y Medicina Preventiva). Los donantes no tenía papel en el diseño del estudio, la recogida y análisis de datos, decisión a publicar, o la preparación del manuscrito
Conflicto de intereses:.. Los autores han declarado que no existen intereses en competencia
Introducción
el cáncer de células renales (CCR) representa más del 90% de los carcinomas renales y carcinoma renal de células claras es el tipo más común en RCC [1], [2]. La incidencia de CCR varían considerablemente en todo el mundo, con tasas más altas de Europa y América del Norte y tasas más bajas de Asia y América del Sur [1]. Los índices entre las hembras son generalmente alrededor de la mitad de las personas entre los hombres [1]. Aunque se establecen unos factores de riesgo de RCC, hay una serie de condiciones predisponentes que son conocidos por estar relacionados con el desarrollo de RCC, tales como fumar cigarrillos, obesidad, hipertensión, diabetes, historia familiar de cáncer, y otros [3], [4], [5]. Sin embargo, sólo una parte de los individuos expuestos a estos factores de riesgo se desarrollará CCR en su tiempo de vida, lo que sugiere que las diferencias individuales que incluyen factores de susceptibilidad genética puede ser uno de los agentes más importantes en la carcinogénesis de células renales.
Los microARN ( miRNAs) son una clase de endógeno, pequeñas y no codificantes de ARN ($ ~ $ 22 nt), que se transcribe inicialmente a partir de ADN genómico de transcritos primarios largas (pri-miRNAs) y luego se escinde por Drosha nuclear en 60-70 nt hairpin- en forma de ARN precursor (pre-miRNAs) [6], [7]. Pre-miRNAs se exportan al citoplasma por Exportin-5 y se procesan más en madurar $ ~ $ 22 nt miARN dúplex por la escisión de Dicer [8], [9]. En asociación con ARN inducida por silenciar complejo (RISC), miRNAs pueden inducir la degradación del ARNm o la represión de traducción mediante la unión a la región 3 'no traducida de sus genes diana a nivel postranscripcional [10]. Hasta la fecha, se ha estimado que miRNAs modular la expresión de aproximadamente 30% de los genes humanos [11]. MiRNAs están involucrados en una amplia gama de procesos biológicos incluyendo la regulación del ciclo celular, la apoptosis y el vástago de mantenimiento celular, el desarrollo, el metabolismo y el envejecimiento [11]. Se ha demostrado que miRNAs participan en la carcinogénesis humana, ya sea como supresores de tumores u oncogenes [12], [13]. Los estudios acumulativos han sugerido que los polimorfismos de nucleótido único (SNPs) o mutaciones podrían hacer una contribución significativa a la susceptibilidad a la enfermedad y el resultado. Las variantes genéticas o mutaciones en miRNAs o pre-miRNAs pueden alterar la expresión y /o la maduración [14] miARN, [15].
En un estudio se ha identificado de manera sistemática 323 SNP en 227 miRNAs humanos conocidos, y 12 SNPs se encuentran dentro de los precursores miARN [14]. El SNP rs895819 se encuentra en el bucle de
pre-miR-27a
e implica un A & gt; G transición de nucleótidos. Sun
et al.
[16] informó el polimorfismo podría conducir a la variación del proceso, una mayor expresión de miR-27a y, finalmente, la predisposición de cáncer gástrico [16]. Mientras que Yang
et al.
[17] encontró que el alelo G de rs895819 podría poner en peligro la maduración del miR-27a, por lo tanto, se asoció con un menor riesgo de cáncer de mama familiar. Por otra parte, Mertens-Talcott
et al.
Informó que en las células de cáncer de mama, la transfección de plomo antisentido miR-27a a una mayor expresión de dedo de zinc y CEL dominio que contiene 10 (ZBTB10) (un putativo represor Sp) y éstos respuestas fueron acompañados por disminución de la expresión de la supervivencia Sp-dependiente y genes angiogénicos, incluyendo
survivin
, factor de crecimiento endotelial vascular (
VEGF
), y VEGF receptor 1 (
VEGFR1
) [18]. Sin embargo, se observó frecuentemente sobre-expresión de survivina en diferentes tipos de cáncer, incluyendo RCC [19]. Hasta la fecha, no existe ningún estudio sobre la relación entre la
pre-miR-27a
polimorfismo y la susceptibilidad RCC.
Sobre la base de nuestros conocimientos sobre el nuevo polimorfismo y la función biológica de
miR 27a
, la hipótesis de que el
pre-miR-27a
polimorfismo se asoció con susceptibilidad RCC. Para probar esta hipótesis, genotipo SNP rs895819 este particular y se evaluó la asociación con el riesgo de CCR en nuestro estudio de casos y controles en curso en una población china.
Materiales y Métodos
Este estudio comprendió 594 pacientes y 600 controles sin cáncer. Todos los sujetos de nuestro estudio son de la etnia han china sin relación genética. Todos los pacientes fueron diagnosticados recientemente con el estudio histopatológico confirmó incidente RCC. Aquellos casos que recibieron la quimioterapia o la radioterapia antes de la cirugía o tenían otro tipo de cáncer fueron excluidos del presente estudio. RCC pacientes consecutivos fueron reclutados entre mayo de 2004 y agosto de 2010 en el Primer Hospital Afiliado de la Universidad Médica de Nanjing, Nanjing, China. La enfermedad se clasifica de acuerdo a criterios de la Organización Mundial de la Salud y por etapas de acuerdo con el American Joint Committee on clasificación TNM del cáncer. Se utilizó la escala de Fuhrman para evaluar el grado tumoral nuclear [20]. Los controles fueron reclutados de los que estaban buscando la atención de salud en los departamentos de consulta externa en el mismo hospital. Los controles sin cáncer fueron emparejados por sexo y edad (± 5 años) para los casos sin antecedentes personales de cáncer y su familia no relacionada con los casos. Un cuestionario guiado sobre los factores demográficos y de estilo de vida se administró a través de entrevistas cara a cara por entrevistadores entrenados. Cada paciente donó 5 ml de sangre para la extracción de ADN genómico después de un consentimiento informado por escrito para obtener de todas las materias. Este estudio fue aprobado por la junta de revisión institucional de la Universidad de Medicina de Nanjing
.
Para el análisis de supervivencia, se utilizaron 296 casos de CCR inscritos en nuestro estudio de cohortes en curso entre mayo de 2004 octubre de 2009. Los pacientes fueron seguidos prospectivamente cada 6 meses a partir de la fecha que reciben un diagnóstico confirmado hasta la muerte o el último momento del seguimiento. El tiempo máximo de seguimiento fue de 72 meses (la última de seguimiento en agosto de 2010) y el tiempo medio de seguimiento fue de 19,3 meses.
Genotipado
ADN genómico se aisló a partir de leucocitos de venosa sangre por digestión con proteinasa K y extracción con fenol /cloroformo. La genotipificación se realizó con el SNP genotipificación Ensayo TaqMan usando el 384 pocillos tiempo real 7900HT Sistema de PCR y el software SDS 2.3 para la discriminación alélica (Applied Biosystems, Foster City, CA). La secuencia de los cebadores y sondas se resumen en la Tabla S1. Se utilizó el ADN genómico de 50 ng y 0,5 × mezcla (Takara Bio, JPN) para cada reacción y la amplificación se realizó bajo las siguientes condiciones: 50 ° C durante 2 min, 95 ° C durante 10 min seguido de 45 ciclos de 95 ° C durante 15 s, y 60 ° C durante 1 min. El análisis de polimorfismo fue realizado por dos personas independientemente en una forma ciega. Aproximadamente el 10% de las muestras fueron seleccionados al azar para el genotipado repetido para la validación, y los resultados fueron 100% concordantes. Se seleccionaron los productos de PCR del SNP con diferentes genotipos y verificados por secuenciación directa (Figura 1)
.
(A) dobles picos marcados con una flecha representan el TC genotipo heterocigoto (AG). (B) solo pico marcado con una flecha representada el genotipo homocigoto TT (AA). (C) solo pico marcado con una flecha representa la CC genotipo homocigótico (GG).
Análisis de la expresión de HSA-miR-27a
A fin de evaluar la correlación entre hsa-miR expresión 27a y rs895819 polimorfismos
in vivo
, se recogieron 25 muestras de tejido renal normal extirpados quirúrgicamente que contienen 100% de células normales adyacentes a los tumores de pacientes de diferentes genotipos. ARN total fue extraído a partir de estas muestras utilizando el reactivo Trizol (Invitrogen, Carlsbad, CA, EE.UU.) de acuerdo con el protocolo del fabricante. Applied Biosystems 7900HT real PCR System Time se utilizó para realizar la cuantificación en tiempo real PCR (Foster City, CA, EE.UU.), basado en el método SYBR-Green (Takara Bio, JPN). Los cebadores utilizados para la amplificación del ARNm hsa-miR-27a eran 5'ACACTCCAGCTGGGTTCACAGTGGCTAAG-3 '(hacia delante) y 5'-TGGTGTCGTGGAGTCG-3' (hacia atrás), y los cebadores para U6 fueron 5'CTCGCTTCGGCAGCACA-3 '(hacia adelante ) y 5'-AACGCTTCACGAATTTGCGT-3 '(hacia atrás). Todas las reacciones se llevaron a cabo por triplicado. Pliegan los cambios se normalizaron a los niveles de expresión de U6.
El análisis estadístico
Las diferencias en las distribuciones de las variables y las frecuencias de los genotipos entre los casos y los controles demográficos seleccionados fueron evaluados mediante el uso de Student
t-test
(para las variables continuas) o de Pearson χ
2-test (para las variables categóricas). Hardy-Weinberg (HWE) de las frecuencias genotípicas de los diversos controles se evaluó mediante una χ
2 prueba de bondad de ajuste. La asociación entre el polimorfismo rs895819 SNP y el riesgo de CCR se estimó mediante el cálculo de la odds ratio (OR) y sus intervalos de confianza del 95% (IC) a partir de análisis de regresión logística incondicional con el ajuste por factores de confusión posibles. El método de Kaplan-Meier, log-rank test, los análisis de regresión de Cox univariante y multivariante se utilizaron para evaluar los efectos de los
pre-miR-27a
genotipos sobre la supervivencia global de los pacientes con CCR.
P Hotel & lt; 0,05 fue considerado estadísticamente significativo. Todos los análisis estadísticos se realizaron con el software Sistema de Análisis Estadístico (9.1.3; SAS Institute, Cary, NC, EE.UU.) con dos caras
P
valores. La potencia estadística se calculó utilizando el software PS (http://biostat.mc.vanderbilt.edu/twiki/bin/view/Main/PowerSampleSize).
Results
Characteristics de la población de estudio
La frecuencia de distribución de determinadas características demográficas de los casos y los controles se muestran en la Tabla 1. No se encontraron diferencias entre los pacientes y los controles de edad (
P = 0,642
) , índice de masa corporal (IMC) (
P = 0,074
), el sexo (
P = 0,222
), el tabaquismo (
P = 0,127
), pack-años de fumar (
P = 0,251
) y beber de estado (
P = 0,714
). Sin embargo, hubo más pacientes con hipertensión (36,4%), y los diabéticos (13,5%) entre los casos que entre los controles (todos los
P Hotel & lt; 0,05). La mayoría de los pacientes (84,0%) tenían carcinoma de células claras convencional. Otros pacientes que tenían carcinoma papilar, carcinoma cromófobo y no clasificados se contaron noventa y cinco (16%). Aproximadamente el 63,5% de los pacientes se encontraban en estadio I, el 18,4%, 6,7%, y se encontró que el 11,4% para estar en el estadio II, III, y IV, respectivamente. Además, las frecuencias de los grados nucleares de I a IV fueron 18,2%, 48,0%, 24,7% y 9,1%, respectivamente.
Asociación entre la
pre-miR-27a
polimorfismo y el riesgo de CCR
las frecuencias de alelos y genotipo distribuciones de
pre-miR-27a
rs895819 polimorfismo en pacientes y controles se muestran en la Tabla 2. las frecuencias genotípicas observadas en los controles fueron consistentes con que prevé que a partir del modelo HWE (χ
2 = 0,795,
P = 0,373
). La distribución de frecuencias de alelo G diferenciarse significativamente de un alelo entre los casos y controles (
P = 0,019
). Después de ajustar por posibles factores de confusión (edad, sexo, tabaquismo, estado bebiendo, hipertensión y diabetes), el análisis de regresión logística reveló que cuando se comparan con los homocigotos AA, AG heterocigoto se asoció con un riesgo RCC reducido significativamente (OR ajustada = 0,68; IC del 95% = 0,53-0,87) y de los individuos con el genotipo AG /GG también tenían una susceptibilidad reducida al RCC (OR ajustada = 0,71; IC del 95% = 0,56-0,90).
además, en el análisis estratificado por edad, índice de masa corporal, el sexo, el tabaquismo, el consumo de estado, la hipertensión y la diabetes, se encontró que la reducción del riesgo fue más pronunciado en sujetos jóvenes (OR ajustada = 0,56; IC del 95% = 0,40-0,78), sujetos con BMI≤ (IC OR ajustada = 0,67, 95% = 0,48-0,93) 24, varones (OR ajustada = 0,66, 95% CI = 0,49-0,88), los no fumadores (OR ajustada = 0,71, 95% CI = 0.53-0.95), no bebedores (OR ajustada = 0,72; IC del 95% = desde 0,55 hasta 0,95), los sujetos sin hipertensión (OR ajustada = 0,61; IC del 95% = 0,46 hasta 0,81) y los sujetos sin diabetes (OR ajustada = 0,69; IC del 95% = 0,54 -0.88) (Tabla 3).
Asociación entre
pre-miR-27a
polimorfismo y características clínicas de RCC
Además, la asociación entre el
pre-miR-27a
rs895819 polimorfismo y también se examinaron las características clínicas de RCC. Los resultados mostraron que el genotipo AG /GG se asoció con susceptibilidad reducida en estadio clínico localizado (OR ajustada = 0,71, IC del 95% = 0,55 a 0,91) y efectos similares se observaron en bien diferenciados y pobremente diferenciado RCC (OR ajustada = 0,71, 95% IC = 0,55 a 0,93 para el bien diferenciados, OR ajustada = 0,51, 95% CI = 0,28-,93 para pobremente diferenciado) (Tabla 4).
analiza la interacción del polimorfismo rs895819 y factores de riesgo
Hemos evaluado si hay existencia de interacciones entre el polimorfismo rs895819 y la edad, índice de masa corporal, el sexo, el tabaquismo, estado bebiendo, la hipertensión y la diabetes. Como se muestra en la Tabla S2, en comparación con los individuos que eran ambos ≤57 años y portadores de AA, se observó un riesgo significativamente reducido en aquellos que eran ≤57 años con genotipo AG /GG (OR ajustada = 0,57; IC del 95% = 0,41 hasta 0,79) y los que eran & gt; 57 con los dos genotipos AA y AG /GG (OR ajustada = 0,64; IC del 95% = 0,46-0,89 para AA, OR ajustada = 0,60; IC del 95% = 0,42-0,85 para AG /GG). No se encontraron efectos similares en los portadores AG /GG que eran y lt; 24 kg /m
2, los hombres, los no fumadores, los no bebedores, los sujetos sin hipertensión y los sujetos sin diabetes en comparación con los portadores de AA. Nosotros, rs895819 observados tenían más interacciones multiplicativas con la edad y la hipertensión (
P
interacción = 0,035 para la edad y
P
interacción = 0,030 para la hipertensión).
Además, se utilizaron las curvas de Kaplan-Meier y log-rank pruebas para evaluar la asociación entre los genotipos y la supervivencia del CCR. Sin embargo, no encontramos los genotipos rs895819 estar asociados con la supervivencia global de los pacientes. En la regresión de Cox por etapas, los resultados sugieren que el estadio clínico fue el mejor factor pronóstico de supervivencia RCC seguido por el grado del tumor (datos no mostrados).
Asociación del polimorfismo rs895819 con los niveles de expresión de HSA-miR-27a
Hemos recogido 25 muestras normales extirpados quirúrgicamente renales tejidos adyacentes a los tumores con diferentes genotipos de rs895819, y la distribución de frecuencias de la AA, AG, genotipos GG fue del 13, 10 y 2, respectivamente. Se evaluó además la asociación entre los niveles de polimorfismo y la expresión de HSA-miR-27a utilizando cuantitativa en tiempo real RT-PCR. Las muestras con genotipo GG se añadió a las muestras de genotipo AG para su análisis. Sin embargo, debido a las pequeñas muestras de genotipos GG, no encontramos ninguna asociación entre rs895819 y la expresión de HSA-miR-27a (
P
= 0,08) (datos no mostrados). Los estudios funcionales adicionales se justifican cuando se recogieron muestras de gran tamaño.
Discusión
En el presente estudio, se investigó la asociación entre el
pre-miR-27a
rs895819 polimorfismo y RCC riesgo. Teniendo en cuenta las frecuencias relativamente escasos de genotipo GG, y las escalas similares de las RUP para heterocigoto (AG) y homocigotos (GG) la igualdad de los niveles analizados para observar una significativa
P-valor de 0,568
lo que sugiere un modelo dominante, nos combinado AG y GG genotipos como modelo genético dominante en el siguiente análisis de asociación. Hemos encontrado que los individuos con los genotipos AG /GG se asociaron con un riesgo significativamente reducido RCC, en comparación con los que llevan el genotipo AA. Además, el efecto fue aún más fuerte en los no fumadores, los sujetos jóvenes, varones y personas sin hipertensión o la diabetes. Además, los sujetos portadores del alelo G también tenían una susceptibilidad reducida al estadio clínico localizado, bien diferenciados y pobremente diferenciado RCC. Para nuestro conocimiento, este es el primer estudio para investigar el papel de la
pre-miR-27a
rs895819 polimorfismo en el riesgo de CCR.
Hoy en día, los estudios han sugerido que el aumento de miRNAs, que jugar un papel importante en el progreso del cáncer como oncogenes tumorales o supresores de tumores están involucrados en los procesos biológicos fundamentales, incluyendo el desarrollo, la diferenciación, la apoptosis y la proliferación [12], [21]. se ha informado de variaciones genéticas en miRNAs estar relacionado con muchos tumores, como el cáncer de mama [22], cáncer gástrico [23], el cáncer colorrectal [24] y el cáncer de pulmón [15]. A pesar de SNPs en miRNAs han sido ampliamente estudiados, la asociación entre los SNPs en miRNAs y el riesgo de cáncer de células renales permanece aún desconocido. Horikawa
et al.
Definido 7 SNPs en 7 pre-miRNAs, y 10 SNPs en 8 pri-miRNAs, pero ninguno de ellos tenía una influencia significativa en el riesgo de CCR [25]. Sin embargo, Horikawa
et al.
Sugirió que los polimorfismos genéticos de los genes miARN-máquinas podrían afectar RCC susceptibilidad individual y conjuntamente.
Rs895819
SNP se encuentran en las regiones pre-miARN de HSA-miR 27a, que estaba en el cromosoma 19, y se encuentra en la posición 40 con relación a la primera de nucleótidos. Se ha informado de que una variación causar el cambio estructural en la región crucial de miARN podría afectar a la maduración y el proceso de miARN [26], [27]. Se utilizó el programa ARN veces para predecir la más estable estructural secundario del
pre-miR-27a
con dos secuencias diferentes, pero la variación de G rs895819 no afectó ni la conformación ni la energía libre de
pre -miR-27a
(datos no mostrados). En una palabra, el procesamiento y maduración de miRNA era más complejo y sutil de lo previsto. Zeng
et al.
Observó que Drosha escinde selectivamente ARN horquillas que lleva un terminal de bucle grande. Cuando el bucle se acorta por mutación o deleciones, el proceso de maduración se verá perjudicada [28]. De acuerdo con la estructura prevista de
pre-miR-27a
, rs895819 se encuentra en el centro del bucle terminal, el rs895819 A & gt; G de transición puede reducir el tamaño del bucle. Por consiguiente, la escisión por Drosha sería bloqueado, y el proceso de maduración con ello se inhibe. En conclusión, rs895819 podría desempeñar un papel importante en la maduración de miR-27a. Sin embargo, debido a que sólo tenía 2 individuos con genotipos GG, no se encontró ninguna asociación entre rs895819 y la expresión de HSA-miR-27a, estos resultados deben ser confirmados por otros estudios.
Para nuestro conocimiento , muchas transcripciones miARN humanos tienen secuencias diana en la 3'-UTR a la que se unen los miRNAs y ejercen la represión postranscripcional. Liu
et al. Hoteles encontrados
miR-27a
funciona como un oncogén en el adenocarcinoma gástrico por la orientación prohibitina [29] y Chintharlapalli
et al.
Sugirió que oncogénico
miR-27a
era un objetivo para el agente contra el cáncer en células de cáncer de colon [30]. Nuestros resultados mostraron que el genotipo AA salvaje de
pre CD -
miR-27a
tuvo una mayor frecuencia en los casos que en los controles, mientras que los individuos portadores de la variante G alelo tenían un riesgo reducido de RCC, lo que indica que
miR-27a
era más probable que sea un oncogén, que era consistente con estudios anteriores [29], [30]. Mertens-Talcott
et al.
Informó que en las células de cáncer de mama, la transfección de plomo antisentido miR-27a a una mayor expresión ZBTB10 y estas respuestas se acompaña de una disminución de expresión de
survivina
, Además, la survivina es un miembro estructuralmente única del inhibidor de la familia de proteínas de apoptosis que suprime la apoptosis y regula la división celular. A pesar de la redundancia de las vías de muerte celular, la survivina parece ser necesario para la viabilidad de células de cáncer, y la interferencia con la expresión /función de survivina se ha asociado con defectos catastróficos de transición mitótica y la inducción de la muerte celular mitocondrial inducida por [31]. La sobreexpresión de ARNm de survivina y la proteína se detectaron en líneas celulares de RCC, pero no en la línea celular epitelial de riñón humano normal [19]. elevada expresión de survivina también se observó en los tejidos de RCC en comparación con los tejidos normales adyacentes [19], [32]. RCC pacientes con niveles elevados de survivina tenían un tiempo de supervivencia global significativamente más corto que aquellos con niveles bajos [33], [34]. En otras palabras, disminución de los niveles miR-27a podría reducir la incidencia de RCC a través de la supresión de la expresión de survivn indirectamente. Por eso nos centramos en el
pre-miR-27a
polimorfismo en pacientes con CCR.
En este estudio, hubo más pacientes con hipertensión y diabetes entre los casos que entre los controles, lo que indica que que había potencial asociación entre los dos factores y RCC. También se encontró que tenía rs895819 interacciones multiplicativas con hipertensión. Se ha informado de que ciertos tipos de tumores renales y tratamiento del cáncer podrían causar hipertensión [35], [36] y una historia de la diabetes se ha relacionado con el riesgo de cáncer de células renales en varios estudios de cohortes [37], pero su papel independiente de los de la obesidad y la hipertensión no se ha demostrado de manera concluyente. Además, nuestros resultados indican que los individuos con el alelo G tienen un riesgo reducido RCC en los no fumadores. El tabaquismo es el factor de riesgo causal más establecido de manera consistente para el CCR, que representa aproximadamente el 20% de los casos de CCR [38]. En comparación con no fumadores, el riesgo aumentó alrededor del 50% en varones y del 20% en las mujeres fumadoras [39]. Por otra parte, después de la estratificación por etapa clínica RCC, parecía que el genotipo GG rs895819 tuvo una disminución del riesgo de CCR en estadio clínico localizado. Por lo tanto, era plausible que la variación participó en las CCR en etapas menores. Sin embargo, esta hipótesis debe ser confirmada en estudios adicionales
.
En cuanto a la asociación entre los genotipos y la supervivencia global de RCC, no había ningún resultado significativo. La razón de esta discrepancia puede ser que la tasa de mortalidad de nuestro análisis de supervivencia es baja debido a nuestro tiempo de seguimiento a corto y los mecanismos biológicos que subyacen a la incidencia de CCR puede ser diferente de las pronóstico subyacente, e incluso si el
miR-27a
polimorfismo está implicado en la etiología de la RCC, eso no significa necesariamente que afecta el resultado.
en la interpretación de nuestros resultados, varias limitaciones deben preocuparse. En primer lugar, nuestro estudio de casos y controles fue un estudio basado en el hospital y no podía proporcionar una buena representación de las poblaciones generales. Sin embargo, la frecuencia del alelo G en nuestros controles fue similar a la de la base de datos HapMap. Además, las distribuciones genotípicas del polimorfismo en nuestros controles se ajustaban a HWE. Por lo tanto, el sesgo de selección era poco probable que sea sustancial. En segundo lugar, nuestro tamaño de la muestra era relativamente pequeña. Sin embargo, tuvimos 83% de potencia para detectar un mínimo o de 0,68 con una frecuencia de exposición de 30% bajo tamaño de la muestra actual. En tercer lugar, no se realizó el análisis de la interacción gen-ambiente, debido a la falta de la información detallada de los factores de entorno, como las exposiciones ocupacionales, la dieta y la actividad física. Sin embargo, nuestro estudio también tenía varios puntos fuertes. En primer lugar, fue el primer estudio para investigar la asociación entre el
pre-miR-27a
rs895819 polimorfismo y la susceptibilidad a la RCC. En segundo lugar, casos y testigos pareados por edad y sexo, y se obtuvieron los resultados mediante el ajuste de la edad, el sexo, el tabaquismo, el consumo de estado, la hipertensión y la diabetes, lo que podría reducir la influencia de los factores de confusión.
conclusión, nuestros resultados proporcionan una primera visión de la contribución de los
pre-miR-27a
rs895819 polimorfismo con el riesgo de CCR en población china. Aunque la asociación parecía ser estadísticamente significativa en nuestra población, estos resultados deben ser validados por estudios más amplios, preferentemente prospectivos. Para polimorfismos menudo varían en los diferentes grupos étnicos, también se necesitan estudios adicionales para aclarar la asociación de este polimorfismo con el riesgo de CCR en diversas poblaciones étnicas.
Apoyo a la Información sobre Table S1.
Las secuencias de los cebadores y la sonda usados para determinar el genotipo del polimorfismo rs895819.
doi: 10.1371 /journal.pone.0046566.s001 gratis (DOC) sobre Table S2.
Interacción análisis del polimorfismo rs895819 y factores de riesgo.
doi: 10.1371 /journal.pone.0046566.s002 gratis (DOC)