Extracto
Antecedentes
El objetivo de este estudio fue determinar la incidencia y el significado clínico-patológica de la ganancia de
c-myc gen
número de copias (GCN) en pacientes con cáncer colorrectal primario (CRC).
Métodos
El
c-myc
GCN se investigó en 367 pacientes con CRC consecutivos (cohorte 1) mediante el uso de la plata de dos colores
In situ
hibridación. Además, para evaluar la heterogeneidad regional, se analizó el tejido CRC de 3 sitios, incluyendo el cáncer primario, metástasis a distancia, y la metástasis de los ganglios linfáticos en 152 pacientes con CCR avanzado (cohorte 2).
KRAS
los exones 2 y 3 se investigaron en busca de mutaciones.
Resultados
En la cohorte 1,
c-MYC
amplificación de genes, que se define por un
c-MYC
: centrómero del cromosoma 8 relación ≥ 2,0, se detectó en 31 (8,4%) de 367 pacientes. Un
c-MYC
ganancia de GCN, definido por ≥ 4,0
c-MYC
copias /núcleo, se encontró en 63 (17,2%) pacientes y se asoció con un mal pronóstico (
P
= 0,015). Análisis multivariado de regresión de Cox mostró que la tasa de riesgo de
c-MYC
ganancia GCN fue 2,35 (intervalo de confianza del 95%, 1,453-3,802;
P Hotel & lt; 0,001). En un subgrupo de pacientes en estadio II-III del CRC,
c-MYC
GCN ganancia se asoció significativamente con un mal pronóstico por univariado (
P = 0,034
) y multivariado (
P
= 0,040) analiza.
c-MYC
sobreexpresión de la proteína se observó en 201 (54,8%) de los 367 pacientes y débilmente correlacionado con
c-MYC
ganancia GCN (ρ, 0.211). En la cohorte 2, el
c-MYC
estado genético fue heterogénea en pacientes con CCR avanzado. La discordancia entre el aumento de GCN en el tumor primario y la metástasis a distancia, ya sea o ganglios linfáticos fue del 25,7% y 30,4%, respectivamente. Una frecuencia similar para
c-MYC
ganancia de GCN y se observó amplificación en pacientes con CRC, tanto de tipo salvaje y mutado
KRAS
.
Conclusiones
c-MYC
ganancia GCN fue un factor independiente de mal pronóstico en pacientes con CRC consecutivos y en el subgrupo II-III etapa. Nuestros hallazgos indican que el estado de
c-MYC
puede ser útil para predecir el resultado de los pacientes y para el manejo de pacientes con CRC
Visto:. Lee KS, Kwak Y, KH Nam, Kim DW , Kang SB, Choe G, et al. (2015)
c-MYC-
Copia número de ganancia es un factor independiente de pronóstico en pacientes con cáncer colorrectal. PLoS ONE 10 (10): e0139727. doi: 10.1371 /journal.pone.0139727
Editor: Andreas Krieg, Heinrich-Heine-Universidad y Hospital Universitario de Düsseldorf, Alemania |
Recibido: 24 de mayo de 2015; Aceptado: September 15, 2015; Publicado: 1 de octubre 2015
Copyright: © 2015 Lee et al. Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos de la licencia Creative Commons Attribution License, que permite el uso ilimitado, distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que el autor original y la fuente se acreditan
Disponibilidad de datos: Todos los datos relevantes están dentro del sus archivos de soporte de información en papel y
Financiación: Esta investigación fue apoyada por una beca de la Tecnología de Corea R & amp Salud; D Proyecto a través del Instituto Coreano de la Industria de la Salud para el Desarrollo (KHIDI), financiado por el Ministerio de. salud & amp; El bienestar, la República de Corea (número de concesión: HI14C1813, https://www.khidi.or.kr/eps). Los donantes no tenía papel en el diseño del estudio, la recogida y análisis de datos, decisión a publicar, o la preparación del manuscrito
Conflicto de intereses:.. Los autores han declarado que no existen intereses en competencia
Introducción
La
c-MYC
proto-oncogén codifica un factor de transcripción que juega un papel central en la proliferación celular, la diferenciación, la apoptosis, el metabolismo, y la supervivencia [1, 2]. Puede promover la tumorigénesis en una variedad de tumores malignos humanos [3, 4].
c-MYC
alteración se produce a través de diversos mecanismos, entre ellos la translocación cromosómica, la amplificación de genes, y la perturbación de las vías de señalización aguas arriba [5, 6]. el número de copias (GCN) de ganancia de amplificación génica o es la más común
c-MYC
alteración en los tumores sólidos [7].
Sin embargo, pocos estudios han examinado las implicaciones clínico-patológicas de
c-MYC
estado en el cáncer colorrectal (CCR). Los informes anteriores han demostrado que
c-MYC
ganancia de GCN en el CCR se encuentra en aproximadamente el 10% de los pacientes [8]. Un estudio reciente informó que varias amplificaciones importantes se centraron en el cromosoma 8, que incluye la región 8q24, que contiene
c-MYC
, y sugirió que
c-MYC
fue un nuevo marcador de enfermedad agresiva CRC [9]. Sin embargo, más recientemente, Christopher
et al
. los datos reportados obtenidos por inmunohistoquímica (IHC), lo que indica que el c-MYC sobreexpresión de la proteína se asoció significativamente con un mejor pronóstico en pacientes con CRC [10]. En consecuencia, el valor pronóstico de
c-MYC
alteraciones en el CCR es objeto de controversia.
Recientemente, la gama de opciones para la quimioterapia sistémica se ha expandido y la terapia dirigida se ha utilizado en pacientes con CCR avanzado, aumentando supervivencia de los pacientes [11]. Sin embargo, algunos pacientes con CCR no responden bien a la terapia dirigida a pesar de mostrar resultados positivos en estudios de mutación específica en terapias dirigidas [12]. la heterogeneidad del tumor es una posible causa de fracaso de la terapia dirigida y varios estudios han informado de que el CRC posee un genotipo heterogéneo que incluye
KRAS
,
p53
, y
BRAF
[13- 15]. Por lo tanto, la variación genética entre el tumor primario y los correspondientes sitios de metástasis necesita ser aclarado para mejorar el manejo de los pacientes con CCR con enfermedad metastásica.
La heterogeneidad de los
c-myc y sus implicaciones pronósticas tienen no se ha estudiado sistemáticamente en pacientes con CRC primarias. El objetivo de este estudio fue evaluar
c-MYC
estado del gen y su importancia clínica en el CCR. También se analizó la heterogeneidad de los
c-MYC
en el tumor primario y la metástasis a distancia.
Materiales y Métodos
Pacientes y muestras
Un total de 519 pacientes con CCR tratados con cirugía radical en el hospital Bundang Universidad Nacional de Seúl se inscribieron en este estudio retrospectivo. En primer lugar, para evaluar el significado clínico patológica de
c-MYC
estado del gen, 367 pacientes con CRC consecutivos tratados entre enero de 2005 y diciembre de 2006 se inscribieron (cohorte 1). En segundo lugar, para investigar la discordancia entre los tumores primarios y metastásicos, 152 pacientes CCR avanzado con metástasis sincrónicas y metacrónicas que habían sido sometidos a resección quirúrgica de CRC primaria entre mayo de 2003 y diciembre de 2009, se inscribieron (cohorte 2). Todos los casos fueron revisados por dos patólogos (K. S. L. y H. S. L.). Las características clínico-patológicas se obtuvieron de los registros médicos de los pacientes y los informes de patología. Se recogió información de seguimiento que incluye los resultados del paciente y el intervalo entre la fecha de la resección quirúrgica y la muerte. Los datos de los pacientes perdidos durante el seguimiento o los que habían muerto por causas distintas al CRC fueron censurados.
declaración ética
Todas las muestras se obtuvieron de tumores resecados quirúrgicamente examinados patológicamente en el Departamento de Patología , Seúl Bundang hospital Nacional de la Universidad. Todas las muestras y los datos de historias clínicas fueron anónimos antes de su uso en este estudio y los participantes no dieron su consentimiento informado por escrito. El uso de datos de registros médicos y muestras de tejidos para este estudio fue aprobado por el Comité de Ética del Hospital Bundang Universidad Nacional de Seúl. (Referencia: B-1210 /174-301)
Tejido método de arreglos
resecado quirúrgicamente muestras de CRC primarias fueron fijados con formalina y embebidos en parafina (FFPE). Para cada caso, se obtuvieron áreas representativas de los bloques donantes y se han reorganizado en nuevos bloques receptores (Superbiochips laboratorios, Seúl, Corea del Sur) [16]. Un solo núcleo fue de 2 mm de diámetro y los que contienen & gt; 20% las células tumorales se consideraron válidos los núcleos.
dual-color de plata
hibridación in situ
El
c-MYC
gen se visualizó mediante el uso de una sistema de manchas azules (plata ultraView
In situ
hibridación [SISH] dinitrofenol [DNP] kit de detección y la sonda c-MYC DNP, Ventana Medical Systems, Tucson, AZ, EE.UU.). El centrómero del cromosoma 8 (CEP8) se visualizó mediante el uso de un sistema de red-tinción (ultraView ISH rojo digoxigenina kit de detección [DIG] y el cromosoma 8 sonda DIG, Ventana Medical Systems). Las señales positivas se visualizaron en 60 × magnificación y se contaron en 50 núcleos que no se solapan de células tumorales para cada caso (Fig 1) [17]. racimos pequeños y grandes se anotó como señales 6 y 12, respectivamente
(A)
c-MYC
aumento de número de copias de genes (60 aumentos).; (B)
disomía gen (60 aumentos). C-MYC
La inmunohistoquímica
IHC análisis de c-MYC se llevó a cabo utilizando un conejo disponible en el mercado anti-c-myc (Y69 clon, catálogo ab32072, Abcam, Burlingame, CA, EE.UU.). Los procedimientos de tinción se llevaron a cabo utilizando el kit de ultraView universal DAB (Ventana Medical Systems) y una tinción automatizado (BenchMark®XT, Ventana Medical Systems), de acuerdo con las instrucciones del fabricante. inmunotinción nuclear de c-myc fue negativo en la mucosa normal. Para el análisis estadístico, c-MYC tinción nuclear de cualquier intensidad en más del 10% de las células neoplásicas se puntuó como positivo (S2 Fig) [10].
inestabilidad de microsatélites
inestabilidad de microsatélites (MSI ) se evaluó en los casos de CCR con tejido disponible. resultados MSI se generaron mediante la comparación de los perfiles alélicos de 5 marcadores de microsatélites (BAT-26, BAT-25, D5S346, D17S250, y S2S123) en el tumor y las muestras normales correspondientes. reacción en cadena de la polimerasa (PCR) los productos procedentes de los tejidos FFPE fueron analizados utilizando un secuenciador automático de ADN (ABI 3731 Genetic Analyzer, Applied Bio, Foster City, CA, EE.UU.) de acuerdo con el protocolo descrito anteriormente [18].
análisis de la mutación KRAS
KRAS
detección de mutaciones se logró mediante la fusión de análisis de la curva utilizando el sistema cobas 4800 (Roche, Branchburg, NJ, EE.UU.) con el software de interpretación de los resultados automatizado . Se trata de un ensayo de PCR en tiempo real basado en TaqMelt diseñado para detectar la presencia de 21
KRAS
mutaciones en los codones 12, 13 y 61. El proceso de flujo de trabajo y las pruebas se han descrito anteriormente [19].
los análisis estadísticos
la asociación entre las características clínico-patológicos y
c-MYC
estado se analizó utilizando el chi-cuadrado o la prueba exacta de Fisher, según corresponda. La correlación entre los métodos de detección se examinó utilizando el coeficiente de correlación de Pearson. la supervivencia de los pacientes se analizó mediante el método de Kaplan-Meier y se utilizó la prueba de log-rank para determinar si existían diferencias significativas entre las curvas de supervivencia. El análisis de regresión univariante y multivariante se realizó mediante el modelo de riesgos proporcionales de Cox para determinar la razón de riesgo y los intervalos de confianza del 95% para cada factor. Un
P-
valor & lt; 0,05 fue aceptado como estadísticamente significativo. Todos los análisis estadísticos se realizaron utilizando el software SPSS estadísticas 21 (IBM, Armonk, Nueva York, EE.UU.).
Resultados
c-MYC
estado del gen y las implicaciones clínicas para consecutiva CRC primarias pacientes
En los casos de CCR primarios consecutivos (cohorte 1), la mediana
c-MYC
: CEP8 relación fue de 1,29 (rango, 0,58-5,17).
c-MYC
amplificación de genes, que se define por un
c-MYC
: CEP8 relación de ≥ 2,0 y similar a la establecida para los
HER2
[20], se detectó en el 31 (8.4%) de 367 pacientes. La media
c-MYC
GCN fue 2,88 (intervalo, 1,22-13,12). En el presente estudio, se definió la ganancia GCN como ≥ 4,0
c-MYC
copias /núcleo [21], y esto se detectó en 63 (17,2%) de 367 pacientes con CCR. Todos los
c-MYC
amplificación se incluyó en
c-MYC
GCN ganancia. A
c-MYC
GCN obtener ≥ 4 tenían el más bajo
P
-valor (
P
= 0,015) y por lo tanto, se observó que era el más predictivo de corte punto para el pronóstico del paciente (figura 2); ≥ 5,0
c-MYC
copias /núcleo también influyó en el pronóstico del paciente (
P = 0,026
). No se encontró asociación significativa entre el pronóstico del paciente y, o bien
c-MYC
amplificación (
P = 0,149
) o & gt; 2, ≥ 3, y ≥ 6
c-MYC
copias /núcleo (
P = 0,752
,
P = 0,175
, y
P =
0,122, respectivamente)
(A)
c-MYC
número de copias de genes (GCN) ganar.; (B)
c-MYC
ganancia de GCN en el estadio II-III subgrupo; (C)
c-MYC
amplificación.
La Tabla 1 muestra las relaciones entre los
c-MYC
de estado y los parámetros clínico-patológicos en los CRC primarios consecutivos (cohorte 1 ). La amplificación de
c-MYC
correlacionada con la enfermedad en estadio temprano (
P = 0,039
).
c-MYC
ganancia de GCN se observa con frecuencia en los tumores de colon y recto sigmoides (
P = 0,034
), tumores pequeños (
P = 0,041
), y los clasificados como microsatélites estables o MSI-bajo (
P = 0,029
).
significado pronóstico de
c-MYC
estado del gen en pacientes CRC
todos los pacientes con CCR fueron seguidos con éxito para su inclusión en el análisis de supervivencia (figura 2). En la cohorte 1, el período medio de seguimiento fue de 55 meses (rango, 1-85 meses) y 101 (27,5%) pacientes murieron durante el período de seguimiento. De Kaplan-Meier análisis mostró que
c-MYC
ganancia de GCN se asoció significativamente con un mal supervivencia en pacientes con CCR (
P = 0,015
), pero
c-MYC
La amplificación se no (
P = 0,149
). En el subgrupo II-III etapa,
c-MYC
-GCN ganancia también predijo mal pronóstico (
P = 0,034
). El análisis multivariado de
c-MYC
estado se resume en la Tabla 2, y demostraron que
c-MYC
-GCN ganar mal pronóstico predice de forma independiente en la cohorte consecutiva (
P
. & lt; 0,001) y en el subgrupo de pacientes con estadio II-III CRC (
P = 0,040
) guía empresas
Correlación entre el
c-MYC
GCN la ganancia y la sobreexpresión de la proteína
la sobreexpresión de la proteína c-myc se detectó en 201 (54,8%) de 367 pacientes con CCR (cohorte 1) y se asoció con el estadio pT temprana (
P Hotel & lt; 0,001 ), bajo grado de diferenciación histológica (
P
= 0,007), ausencia de invasión perineural (
P
= 0,025) y el tamaño más pequeño (
P Hotel & lt; 0,001) ( Tabla 1). La sobreexpresión de la proteína c-myc se asoció con el aumento de GCN (ρ, 0,211;
P Hotel & lt; 0,001), que se clasifica como débilmente correlación de acuerdo con Dancey y de categorización Reidy (2004) [22]. Además, sólo 46 (22,9%) de los 201 pacientes con sobreexpresión de c-myc mostró una ganancia de GCN.
c-MYC
estado y la heterogeneidad de acuerdo con la localización del tumor en pacientes con CCR avanzado
para evaluar la heterogeneidad regional de
c-MYC
estado, hemos examinado el tejido en 3 sitios, incluyendo el cáncer primario, metástasis a distancia, y la metástasis de los ganglios linfáticos para cada paciente con CCR avanzado (cohorte 2). En los tumores primarios de la cohorte 2, la mediana
c-MYC
: CEP8 relación era de 1,14 (rango, 0,57-2,97).
c-MYC
amplificación del gen se detectó en 8 (5,3%) de 152 pacientes. La media
c-MYC
GCN 2,97 (rango, 1,40-9,94).
c-MYC
ganancia de GCN se detectó en 48 (31,6%) de 152 pacientes con CCR. Además,
c-MYC
ganancia de GCN se encontró en 33 (21,7%) pacientes con tumores metastásicos distantes. metástasis en nódulos linfáticos se observó en 79 de 152 pacientes avanzados CRC y
c-MYC
ganancia de GCN se observó en 18 (22,8%) de estos casos. La heterogeneidad de los
c-MYC
ganancia de GCN de acuerdo a la ubicación del tumor se muestra en la Tabla 3. De los 152 casos, discordancia entre
c-MYC
ganancia de GCN en el tumor primario y la metástasis a distancia se observó en 39 (25,7%) casos. Discordancia entre
c-MYC
ganancia de GCN en el primario y la metástasis tumoral de los ganglios linfáticos se detectó en 24/79 (30,4%) casos. Por lo tanto, la heterogeneidad regional de los
c-MYC
ganancia GCN era bastante común en CCR avanzado.
c-MYC
GCN heterogeneidad no se correlacionó con factores clínico-patológicos y pronóstico (
P Hotel & gt; 0,05; datos no mostrados) guía empresas
No hubo estadísticamente significativa. correlación entre los factores clínico-patológicos y
c-MYC
ganancia de GCN en metastásico primario, distante, y los tumores metastásicos de los ganglios linfáticos de la cohorte 2 pacientes con CRC (
P Hotel & gt; 0,05; datos no mostrados) . El tiempo medio de seguimiento fue de 42 meses (rango, 1-105 meses) y 67 pacientes (44,1%) murieron de cáncer durante el período de seguimiento. El análisis de Kaplan-Meier mostró que los pacientes con
c-MYC
ganancia de GCN en el tumor primario tuvo un mal resultado que los que no, pero este resultado no fue estadísticamente significativa (
P = 0,499
). Sin embargo, ≥ 3,0
c-MYC
copias /núcleo en el tumor primario se asoció significativamente con un mal pronóstico (
P = 0,044
; S1 figura). No hubo correlación significativa entre el pronóstico de los pacientes y
c-MYC
ganancia de GCN en metástasis a distancia o de ganglios linfáticos (
P = 0,981
y
P = 0,417
, respectivamente; datos no mostrados)
KRAS
mutaciones en CCR avanzado
El cobas
se realizó KRAS
prueba en 152 tumores primarios de los casos de CCR avanzado. (cohorte 2).
se observaron mutaciones en el gen KRAS
en 84 (55,3%) casos y se asociaron con tumores localizados en el colon derecho (
P = 0,019
), pero no se correlacionaron con otros factores clínico-patológicos (
P
& gt; 0,05; datos no mostrados). Además, no hubo diferencia estadística entre la supervivencia de los pacientes con CCR con el tipo salvaje o mutado
KRAS gratis (
P = 0,688
; datos no mostrados). De los 68 casos de tipo salvaje
KRAS
,
c-MYC
amplificación se observó en 4 (5,9%) y un
c-MYC
ganancia de GCN en 28 (41,2 %). De 84 casos con mutado
KRAS
, 4 mostraron
c-MYC
amplificación (4,8%) y 20 (23,8%) reveló un
c-MYC
ganancia de GCN.
c-MYC
alteraciones GCN se produjeron en pacientes con ambos de tipo salvaje y mutada del gen KRAS. Por lo tanto,
c-MYC
alteraciones GCN y
KRAS
mutaciones no eran mutuamente excluyentes.
Discusión
Aunque ha habido varios informes sobre
c-MYC
estado en los cánceres humanos, no existen criterios establecidos para el aumento de GCN. Los cánceres con un
c-MYC
ganancia de GCN se asocia a menudo con un mal pronóstico. Un estudio previo de carcinoma gástrico mucinoso mostró que
c-MYC
de amplificación, que se define como un
c-MYC
: relación CEP8 & gt; 2.0, fue fuertemente correlacionada con las etapas avanzadas del cáncer [23]. Otro informe encontró una asociación entre el
c-MYC
amplificación (& gt; 4 copias /célula en un mínimo del 10% de las células tumorales) y los estadios avanzados de cáncer de ovario [21]. En un estudio de cáncer de próstata, el
c-MYC
ganancia GCN incluido el criterio de un
c-MYC /& gt relación
CEP8; 1.5, y un mal pronóstico para los pacientes se observó en esta categoría [24]. En investigaciones recientes sobre el adenocarcinoma de pulmón, los pacientes con & gt; 2
c-MYC
copias /núcleo fueron clasificados como teniendo un mayor
c-MYC
GCN, que resultó ser un factor de mal pronóstico independiente [25]. En pacientes con CRC, se informó de que
c-MYC
de amplificación, que se define como un /proporción & gt
c-MYC
CEP8; 2, se detectó a menudo usando fluorescente
In situ
hibridación (9,0-14,2%), pero no tenía relación con los resultados clínicos y patológicos de datos [26]. Por lo tanto, hemos aplicado diversos criterios para determinar
c-MYC
ganancia de amplificación o GCN en este estudio, y han definido el
c-MYC
ganancia GCN como ≥ 4 copias /núcleo, porque la más baja
P
-valor para el pronóstico de la enfermedad (figura 2). En la cohorte 1, la gran cohorte consecutiva, los pacientes con CCR con un
c-MYC
ganancia GCN tenía una pobre supervivencia que los que no (
P = 0,015
). Por otra parte, en el análisis multivariante,
c-MYC
ganancia GCN fue un factor pronóstico significativo CRC, tanto en la cohorte consecutiva y para aquellos con enfermedad en estadio II-III. El valor predictivo de la
c-MYC
GCN se encontró que era independiente de los factores pronósticos conocidos. El
c-MYC
criterios de ganancia GCN utilizados en el presente estudio, junto con el método SISH, pueden ser útiles en la evaluación de pacientes con CRC, ya que los pacientes identificados claramente espera que tenga una baja supervivencia, independientemente de la
c myc
:. CEP8 relación
En la cohorte 2, se demostró que no había
c-MYC
GCN heterogeneidad regional entre el sitio primario y sus metástasis relacionados. Un
c-MYC
ganancia GCN (c-MYC GCN ≥ 4,0) en el cáncer primario no se asoció significativamente con la supervivencia de los pobres (
P = 0,499
; S1 figura), lo que podría deberse a que todos cohorte 2 consistió en pacientes avanzados con metástasis CRC y la cohorte sincrónica y metacrónico 2 se compone en gran parte de la etapa IV CRC (98 casos; 64,5%). Recibieron una variedad de tratamiento personalizado, respectivamente, y estos podrían reflejar la insignificancia estadística. Curiosamente, hemos aplicado criterios ligeramente no restrictivas de la ganancia de GCN (
c-MYC
GCN ≥ 3,0) y su pronóstico se cambió a estadísticamente significativa (
P = 0,044
; S1 figura). En un sentido amplio, c-
MYC
ganancia de GCN de cáncer primario tiende a correlacionado con una pobre supervivencia en CCR avanzado. Por otro lado,
c-MYC
estado por lesión metastásica distante y de los ganglios linfáticos no fue relacionado con el pronóstico del paciente a pesar de que intentamos cada posibles criterios de GCN. A pesar de que,
c-MYC
heterogeneidad se observó con frecuencia en CCR avanzado, un
c-MYC
ganancia de GCN en el cáncer primario menudo se asoció con una baja supervivencia. En consecuencia, el
c-MYC
GCN en la lesión no metastásico se debe utilizar en la evaluación de pronóstico.
En un estudio previo, la sobreexpresión de
c-myc mRNA en
CRC se encontró que se asocia con un mejor pronóstico [27], pero este resultado se contradice con otro estudio [28]. Christopher
et al
. ha demostrado recientemente que la sobreexpresión de c-myc determinado por IHC solo, se asoció significativamente con una mejor supervivencia en pacientes con CCR cuando se evaluó mediante el análisis univariado, pero no por el análisis multivariante [10]. Curiosamente, hemos encontrado resultados contradictorios en un estudio sobreexpresión de c-myc anterior; presumiblemente, debido a la expresión de c-MYC es controlado por un vía de reglamentación complejo que implica múltiples interacciones con otras moléculas, en lugar de una simple ganancia GCN [29]. Además, se encontró una débil correlación entre c-myc sobreexpresión de la proteína y el aumento de GCN en pacientes con CCR.
c-MYC
ganancia GCN no se observó en la mayoría de los casos sobreexpresión de la proteína c-myc. A diferencia de la
c-MYC
ganancia de GCN, la sobreexpresión de la proteína c-myc se correlacionó con características menos agresivas (Tabla 1). Estos resultados sugieren que
c-MYC
ganancia de GCN es, probablemente, sólo en parte responsable de la sobreexpresión de la proteína. A medida que la sobreexpresión de c-myc no es lo mismo que un
c-MYC
ganancia de GCN, se necesita más investigación para explicar la diferencia de c-myc y el aumento de GCN en el CCR tumorigénesis.
Las mutaciones en
KRAS
son evidentes en el 30-40% de los tumores de colon [30-32]. De hecho, estudios previos habían mostrado que a
KRAS
mutación se asoció con resistencia a la anti-receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGFR), la terapia monoclonal y una mala supervivencia [33-35]. En nuestro estudio,
KRAS
mutaciones estaban presentes en el 55,3% de los pacientes con CCR avanzado (cohorte 2) y no se asociaron con el pronóstico. Puede ser porque se investigó
KRAS
estado de la mutación en pacientes con CCR avanzado. Phipps et al. También informó de que
KRAS
estado -mutation no se asoció con la supervivencia específica de la enfermedad de pobres en los casos que se presentaron con la lejana etapa CRC [33].
se observó c-MYC
amplificación en el 5,9% de tipo salvaje
KRAS
y el 4,8% de mutados
KRAS
CRC. Un
c-MYC
ganancia de GCN se observó en el 41,2% de los de tipo salvaje
KRAS
y el 23,8% de mutados
KRAS
CRC. Es de destacar que estos 2 eventos genéticos no eran mutuamente excluyentes. Se requieren más estudios para investigar la posibilidad de utilizar
c-MYC
alteraciones genéticas como dianas terapéuticas en pacientes con CCR avanzado con resistencia primaria y secundaria a las terapias anti-EGFR.
En resumen, hemos integral analizado la
c-MYC
estado del gen de pacientes con CRC utilizando SISH.
c-MYC
se observó aumento de GCN y la amplificación en el 17,2% y el 8,4% de los pacientes con CRC consecutivos, respectivamente. El
c-MYC
ganancia GCN fue un factor de mal pronóstico independiente, tanto en la cohorte consecutiva y en el subgrupo de pacientes con enfermedad en estadio II-III. Estos hallazgos muestran que
c-MYC
de estado puede usarse para predecir el pronóstico de los pacientes con CRC, y puede informar a los futuros estudios sobre la patogénesis y los mecanismos implicados en la progresión del CRC.
Información de Apoyo
S1 Fig. las curvas de supervivencia de Kaplan-Meier que ilustran el efecto pronóstico de
c-MYC
estado por lesiones primarias de cáncer colorrectal (cohorte 2).
(A)
c-MYC
número de copias de genes ( GCN) ≥ 3,0; (B)
c-MYC
GCN ≥ 4.0
doi:. 10.1371 /journal.pone.0139727.s001 gratis (TIF)
S2 Fig. figuras representativas de la sobreexpresión de c-myc mediante técnicas de inmunohistoquímica (A y B) en pacientes con cáncer colorrectal gratis (A) c-myc (40 aumentos.); (B) No expresión de c-myc (40 aumentos);
doi: 10.1371 /journal.pone.0139727.s002 gratis (TIF)
Reconocimientos
Los autores agradecen Superbiochips Laboratorios para su excelente asistencia técnica.