En una sola prueba para el carcinoma hepatocelular, los pacientes que adquirieron sorafenib y doxorrubicina en conjunto tenían tiempos algo más largas medias de supervivencia libre de progresión y la supervivencia global de los pacientes que recibieron doxorrubicina sola. Sin embargo, otro inhibidor de molécula pequeña quinasa con una gran afinidad de unión para ZAK es nilotinib, que también se detiene breakpoint cluster región Abelson y pasa a ser de uso clínico para el tratamiento de la leucemia mielógena crónica.
A pesar de que las afinidades de unión de sorafenib y nilotinib para ZAK se ha informado, ningún agente ha sido probado por su capacidad para restringir la actividad ZAK. Estos agentes se administraron por nosotros a las células HaCaT 30 min antes del tratamiento con doxorrubicina durante 24 h, para averiguar si sorafenib o nilotinib podrían restringir las acciones de aguas abajo de ZAK. La clara presencia de cualquiera de estas sustancias altamente doxorrubicina suprimió estimula la fosforilación de p38 MAPK y JNK. Al igual que en las células HaCaT expuestos a ZAK siRNA, la cobertura de estas células para sorafenib o nilotinib reduce la fosforilación basal de p38 MAPK. fabricante romidepsin
El sorafenib y nilotinib también redujo la escisión de la caspasa 3 y PARP, lo que indica que la apoptosis mediada por la doxorrubicina también fue suprimida. ZAK inhibidores bloquean la daunorrubicina inducida servicio K MAPA y la apoptosis en células HaCaT. La daunorrubicina puede ser una antraciclina que se considera a trabajar por mecanismos similares como la doxorrubicina, pero muestra actividad antitumoral menos potente. Para determinar si la inhibición de ZAK resultados daunorrubicina inducida por la apoptosis y la activación de MAPK, pretratados células HaCaT con sorafenib o nilotinib seguido de cerca por la daunorubicina durante 24 h.
Al igual que en los hallazgos con doxorrubicina, la clara presencia de cualquiera de estas sustancias daunorrubicina fuertemente reprimida estimuló la fosforilación de JNK y p38 MAPK. Sorafenib y nilotinib también pagaron fuera de la escisión de la caspasa 3 y PARP, lo que indica que la apoptosis mediada daunorrubicina también fue suprimida. apoptosis Doxorubicininduced está parcialmente bloqueado por los inhibidores de JNK o p38 en las células HaCaT. ZAK es sólo un MAP3K que se ha demostrado que causa la fosforilación de p38 MAPK y JNK.
Para determinar si la retirada de JNK o p38 MAPK podría dificultar doxorrubicina apoptosis activada, se utilizó SB 203580, SP 600 125, o ambas en combinación con las células HaCaT 30 min antes del tratamiento con 25 M doxorrubicina durante 24 h. La presencia de cualquiera de inhibidor o tal vez una mezcla de ambos resultó en la escisión de la caspasa 3 y PARP, lo que indica que p38 MAPK y JNK participó en una medida en la doxorubicina mediada por apoptosis. En presencia de la sustancia química pancaspase, zVAD fmk, apoptosis doxorubicininduced era totalmente inhibido. inhibidores de ZAK ZAK siRNA y no previenen la apoptosis en las células HeLa doxorubicininduced. Para probar si los inhibidores de ZAK reducirían la muerte celular en una línea celular cancerosa pretratados células HeLa con sorafenib o nilotinib, seguido de doxorrubicina durante 24 h.
A diferencia de su capacidad para frenar la PARP y caspasa 3 división en células HaCaT, nilotinib y sorafenib hizo PARP no inferior o caspasa 3 división en células HeLa. En las células HeLa, doxorrubicina no aumentó la fosforilación de JNK y p38 MAPK, probablemente debido a los niveles basales de estas SAPK fosforilados ya estaban elevados en ausencia de un inductor. Sin embargo, la fosforilación de SAPK fue suprimida por sorafenib y nilotinib, lo que indica que los inhibidores son eficaces en el control de ZAK en estas células. Estos datos sugieren que el ejercicio endógena elevada de ZAK en células HeLa podría ser responsable de la fosforilación basal de aumento de la JNK y p38 MAPK.